检验科实习记录(医学检验)(20页).doc

-检验科的实习记录（医学检验专业）1 免疫室输血前九项Elisa（乙肝两对半+丙肝抗原+丙肝抗体+梅毒抗体+艾滋）乙肝五项化学发光时间分辨定量检测肝炎病原学Elisa（甲+乙+丙+戊）自身抗体全套检测(欧蒙试剂+免疫印迹法)自身免疫性肝病（欧蒙+免疫印迹法：自免肝膜条）抗核抗体抗中性粒细胞胞浆抗体ANCA(欧蒙+膜条)CCP检测Elisa过敏原测定（欧蒙免疫印迹法）食入性+吸入性肥大氏反应（诊断伤寒O，H副伤寒甲乙丙）红细胞冷凝集试验结核抗体检测（金标渗滤法）呼吸道病原学检查全套梅毒 Elisa+ TPPA + TRUSTHBSAG+金标条复查具体操作乙肝两对半Elisa（一步法）（12345，第5项HBCAb需稀释血清50ul+1.5ml生理盐水0.9%NaCl）空白对照阳性（P）阴性（N）样本血清加样50ul阳50ul阴50ul血清加酶505050混匀，37温育25min，洗板5次，最后一次尽量扣干显色液A显色液B 5050505050505050混匀，避光显色15min 加终止液50505050双波长测定注：HBeAb 加样后，需加入中和抗原50ul梅毒螺旋体抗体Elisa空白对照阳性（P）阴性（N）样本血清加酶100ul100ul 100ul 加样202020混匀，37温育30min，洗板5次，最后一次尽量扣干显色液A显色液B 5050505050505050混匀，避光显色15min 加终止液50505050双波长测定丙肝抗体（同戊肝抗体）空白对照阳性（P）阴性（N）样本血清加稀释液 100ul 100ul 100ul加样101010混匀，37温育30min，洗板5次，最后一次尽量扣干加酶100100100混匀，37温育30min，洗板5次，最后一次尽量扣干显色液A显色液B 5050505050505050混匀，避光显色15min 加终止液50505050双波长测定丙肝抗原（没有质控品）空白对照阳性（P）阴性（N）样本血清加稀释液 100ul 100ul 100ul加样100100100混匀，45温育40min，洗板6次，最后一次尽量扣干加酶200200200混匀，37温育30min，洗板6次，最后一次尽量扣干显色液A显色液B 100100100100100100100100混匀，避光显色10min 加终止液50505050双波长测定艾滋（北京万泰）甲肝空白对照阳性（P）阴性（N）样本血清加样50ul阳50ul阴50ul血清3740min，洗板5次，最后一次尽量扣干加酶100100100 3720min，洗板5次，最后一次尽量扣干显色液A显色液B 5050505050505050混匀，避光显色15min 加终止液50505050双波长测定戊肝 TPPA1号标本2号标本3号标本A100ul稀释液(1:5)100ul稀释液100ul稀释液B25ul(1:10)25ul25ulC25(1:20)(1:40)2525D25(1:40)(1:80)2525E25(1:80)(1:160)2525F25(1:160)(1:320)2525G25(1:320)(1:640)2525H25(1:640)(1:1280)2525分别向以上A横排孔加入25ul血清，吸走25ul加入B排,依次作倍比稀释。C排加入25ul未致敏粒子，ABDEFGH加入致敏粒子注:粉红色(最终稀释倍数)混匀，静置两小时后观察结果。TRUST1号2号原倍血清50ul血清+50ul抗原悬液50ul血清+50ul抗原悬液1:2稀释血清+50ul抗原悬液稀释血清+50ul抗原悬液1:4.乙肝五项化学发光时间分辨定量检测IFFA（同个批号，每天只需做两个浓度的校准品，两点定标）HBsAg,HBsAb,HBeAgBD样本血清加样50ulB校准品50ul D校准品50ul血清室温下振荡器上孵育40min，洗板4次，最后一次尽量扣干加铕标记物（稀释后）100100100室温下振荡器上孵育40min，洗板6次，最后一次尽量扣干加增强液100100100测定HBeAb,HBcAb加样后，需加入中和抗原50ulHBcAb血清样品+1ml生理盐水稀释 肥达氏反应4.875ml生理盐水+125ul待测血清（1：40稀释）加入第一竖排，此时试管内还剩2.5ml稀释血清，+2.5ml生理盐水补足5ml（1:80稀释）加入第二竖排，依次稀释下去1:401:801:1601:320对照管（NaCl）甲500ul500ul500ul 500ul 500ul乙500ul500ul 500ul 500ul500ul丙500ul500ul 500ul 500ul500ulO 500ul500ul 500ul 500ul500ulH 500ul500ul 500ul 500ul500ul向以上各管加入500ul相应的菌液。最后稀释倍数为;(1:80)(1:160)(1:320) (1:640) 红细胞冷凝集试验（两管血：抗凝全血+血清）将全血洗涤3次，制成洗涤红细胞，取30ul+2970ul生理盐水制成1%红细胞悬液倍比稀释血清12345678910生理盐水 200200200200200200200200200200待测血清2001:22001:42001:82001:162001:322001:642001:1282001:2562001:5122001:1024向以上各管加入已制成的1%红细胞悬液200ul.全自动免疫分析仪 (瑞士TECAN)时间分辨仪洗板机酶标仪超声波清洗仪连续加样枪2 微生物染色革兰染色(真菌，一般检查)龙胆紫1min，水洗，甩干碘液1min，水洗，甩干脱色液（丙酮，乙醇）30s，甩干沙黄溶液复染30s，干燥抗酸染色（结核杆菌检查）石碳酸复红20-25min，水洗，甩干盐酸酒精（1-2次）脱至无色，水洗，甩干亚甲蓝复染5min，水洗，干燥墨汁染色隐孢子球菌 黑色 荚膜被染成 ？KOH 用于检出头发,皮屑等中的真菌?转种1血平板 2麦康凯 3沙保氏（制作该平板时，不需要调节PH，偏酸，倒平板前加入氯霉素抑制细菌，用于分离真菌及对氯霉素耐药且耐酸的细菌）血液培养及鉴定（自动血液培养仪）需氧+血平板，麦康凯。厌氧+两个血平板，一个麦康凯，一血平板放入孵箱中，另一血平板放入烛缸（厌氧环境）中培养（都是三区划线法）若需氧厌氧都长菌，则转种两个血平板(O2,O2)，两个麦康凯(O2,O2)尿液培养及鉴定（1，2）尿液本来是无菌标本，但因为生理环境，采集时极易被污染，临床以有菌标本对待。血平板：棋盘法划线(用接种环取一环,连续作横、竖接种,期间不用灭菌(用于菌落计数，<105/L为污染菌,>105/L认为是感染菌)麦康凯:分区划线痰培养及鉴定（1，2，3）分区划线(直接取标本画)大便培养及鉴定( 2, 3 ) 分区划线（直接画）真菌芽管实验：200ul健康人血清+第一区取菌种约13环鉴别真菌?上鉴定卡全自动血培养仪放瓶 密码1取瓶 positive bottle 密码12345，打开机门后，可以连续取瓶escyes扫条码扫完后escyes退出配制培养基称量：XX*1 XX*0.X溶解：蒸馏水加热：搅拌调节PH：滴加NaOH,慢慢调节分装沙保氏培养基加入氯霉素？不用调PH原因？只有耐酸又对氯霉素耐药的细菌才能生长，抑制细菌生长，选择性生长真菌。 绿脓杆菌（铜绿假单胞菌）特点：全自动微生物鉴定仪GPI (革兰阳性菌鉴定卡) GPS（革兰阳性菌药敏卡）GNI（革兰阴性菌鉴定卡）GNS（革兰阴性菌药敏卡）3 体液室1 尿常规（组合）尿液分析仪H-800质控：编号0500阳性质控分析尿沉渣分析仪i质控（高值和低值）手动分析进样2尿常规（门诊）尿液分析仪BW-500质控3粪便常规（组合）涂片镜检：生理盐水涂片（保护红细胞原有形态）红细胞：皱缩红细胞、膨胀的红细胞（微调感受包膜同心圆感）、正常红细胞（圆圆的双凹圆盘形，吹动能翻转），大多可泛灰红色。白细胞：圆圆的，是红细胞体积的13倍，微调可见泛绿光，颗粒感。真菌（霉菌）：多见芽生孢子1）葵瓜子样，多见有一小点，微调亮亮的，泛绿光2）椭圆形较葵瓜子样大，微调亮亮的，体内多有一小点，常泛绿光（注意与泛黄光的那种鉴别，其内多没有小点）寄生虫：最常见钩虫，蛔虫，鞭虫隐血试验（OB）:原理：胶体金法检测粪便中的血红蛋白蒸馏水溶解（破换红细胞，释放血红蛋白？）4阴道分泌物常规（白带常规）的临界条件：E+,WBC<=15例：E+,WBC<=15,霉菌少量。则为5前列腺液检查乳白稀薄卵磷脂小体80%-90%（圆圆的，像闪光的星星，注意与变形的白细胞相区别）查见颗粒细胞（可能是吞噬了卵磷脂小体的吞噬细胞）查见淀粉样小体（同心圆）白细胞XX-XX/HP红细胞XX-XX/HP精子XX-XX/HP6精液常规检查例 颜色：乳白性状：稀薄量：5ml镜下所见：A级精子20% 。快速直线运动B级精子35% 。缓慢运动C级精子20% 。缓缓运动或原地打转D级精子30% 。不动死精子精子活动率=(A+B+C)%白细胞XX-XX/HP红细胞XX-XX/HP精子计数：XX *109注;精液超过2h不液化，则不用计数。精子计数(稀释20倍)：20ul液化精液+0.38ml精子计数用稀释液，冲池后静置5分钟后计数。例：20*10*106*207胃液检查隐血检查颜色：棕红性状：粘稠量：10ml镜下所见（ 见到什么报告什么）：白细胞、红细胞、真菌、细菌、结晶等8 其他穿刺液检查颜色性状量镜下所见。9尿本周氏蛋白定性检查第一步：取小试管加入样本尿液1-2ml,滴加磺基水杨酸1-2滴，若出现白色浑浊或沉淀，则 继续第二步。第二步：取1/3大试管其体积的尿液，加热至沸腾，使蛋白质变性沉淀，过滤取其滤液，冷却后加热滤液，若出现：沉淀澄清沉淀的连续现象，则为尿本周氏蛋白定性阳性。10尿乳糜试验检查4 门诊生化室OlympusAU640试剂舱R1和R2电解质分析测定装置（K、Na、Cl）进样系统比色系统JA0001需要预处理后再上机的标本1糖化血红蛋白测定10ul全血（取之前务必混匀）+400ulHbA1c R3试剂，至少静置5分钟，上机检测。周一和周四做质控（高值和低值），质控时取样10ul需要保证精确。2血清总铁结合率测定1）200ul血清+200ul铁测定标准液，混匀后孵育10分钟2）取一勺约绿豆大小碳酸镁加入，震荡混匀孵育10分钟3）离心5分钟，取上清液上机测定5 八楼生化室Backmancoulter 高速离心机（越高速要求配平越严格）1、AU2700(LJ)内生肌酐清除率（标本要求：一管血，一杯尿液）上架；血清+离心后尿液尿液标本条码号写在相应检验单上，没有单子的，记录下条码号、患者姓名、所做项目在纸上。24小时尿蛋白定量：写上24小时尿量总铁结合率（组合）：血清铁测定（抗凝离心血清）+总铁结合率测定（小杯上写上患者姓名）1、200ul血清+200ul铁标准液2、37孵育10分钟3、加入MgCO3 ，37孵育10分钟4、离心5分钟，吸取上清液上机做总铁结合率2、特定蛋白测定内风湿因子+抗“O”+C反应蛋白若只有C反应蛋白，则上Olympus生化项目3、微量元素测定（铜锌钙镁铁）火焰原子吸收光谱法微量元素测定 BH-5300S博晖全血血清多元素分析仪绿色全血管试剂（子弹壳）处理液+40ul全血，混匀4、蛋白电泳血清蛋白电泳 仪器:SEBIA HYDRASYS 试剂:sebia 1、 琼脂糖凝胶2、 点样架3、 滤纸（用于吸去琼脂糖凝胶表面的水分）4、 固定条（2条）：用于固定琼脂糖凝胶上电泳仪6 二楼血液室迈瑞BC5380血液分析仪试剂耗材：迈瑞原装稀释液、迈瑞溶血剂（四种）800i血液分析仪（适用于末梢血）动脉血气分析仪Backmancoulter access 2 心机标志物分析仪(每日质控+保养)赛科西德 血沉仪7 八楼血液室迈瑞血液分析仪 BC5500ABX-120血液分析仪（含网织红细胞计数）赛科西德 血粘度仪SA-6000Sysmex CA-7000全自动血凝仪BC5500 (JQ)质控 编号 9001（高值） 9002（中值）开放-全血 WBC+DIFFABX-120 （JI）1）质控手动进样仓当上下指示灯都为黄色时进样响声后才能移开标本网织红计数原理（荧光染料染色法）2）WBC无法进行分类时，先在仪器上手工分类方法：escmemory移动上下光标找到所需要分类的标本号如JI20（则仪器读取条码号为0001。r0010）回车F8再按F8在WBC分类散点图上按Tab键使光标移到最上面那根临界线移动上下键直到分出类为止（可以明显看出散点图分为五个区为最佳分类处）。回车（保存）按字母“Y”（密码）esc退出F10选择2 sending回车确认传送数据3) ABX-120上查找数据，传输数据？Escmemory移动上下光标找到所需要传送的标本号回车F10选择2 sending回车确认传送数据4) ABX-120上在原号上复测？Escmemory移动上下光标找到所需要复测的标本号手动进样？自动覆盖？5）ABX-120上手动进样与自动条码识别进样不需用人工模式转换？（迈瑞5380 5500需要转换模式）编号原则：急诊干部病房，血液科的血常规(组合)第一次用0000 JI 110 0001 JI 1120 0002 JI 2130 0009 JI 91100 第二次用0000 JI 101110 0001 JI 111120 0009 JI 191200 第三次用急诊架0009 JI 291300 手动进样急诊编号; JI8001.8011.Sysmex CA-7000全自动血凝仪 (LK)质控 大样品杯+200ul 用M方式做编号：QC 01 (蓝色盖) 质控原液+1ml双蒸水801 （紫色盖）质控原液+1ml双蒸水901 （DD质控）质控配制：用1ml稀释液复溶冻干粉，再稀释10倍Menu worklistnext编号（id entry）例：701点击项目（profile1（1）设置为凝血四项）R（演算fib）或M（微量吸样）方式repeat（一架上重复标本数）enterquit上架(一定要拔去盖子！)PT 凝血酶原时间测定APTT 部分活化凝血活酶时间测定TT 凝血酶时间测定FIB 纤维蛋白原测定-第 20 页-