常用溶液的配制方法(8页).doc

-常用溶液的配制方法-第 8 页常用溶剂的配制方法1.磷酸缓冲液：0.15M，pH=7.4磷酸缓冲液：KH2PO4：2.041g+100ml水 K2HPO4·3H2O：10.3g+300mL水两液混合即成400mL，0.15M，pH=7.4的磷酸缓冲液0.2mol/L 不同pH的磷酸缓冲液：先配制0.2 mol/L的磷酸二氢钾溶液和0.2 mol/L的磷酸二氢钾溶液，然后按下表配制：pHKH2PO4（mL）K2HPO4·3H2O（mL）pHKH2PO4（mL）K2HPO4·3H2O（mL）5.793.56.56.945.055.05.892.58.07.039.061.05.990.010.07.133.067.06.087.712.37.228.072.06.185.015.07.323.077.06.281.018.57.419.081.06.377.522.57.516.084.06.473.526.57.613.087.06.568.531.57.710.590.06.662.537.57.88.591.56.756.543.57.97.093.06.851.049.08.05.394.72.硼酸缓冲液0.15M，pH=8.2硼酸缓冲液：四硼酸钠溶液：2g+35 mL水 硼酸溶液：3.246g硼酸+350 mL水两液混合即成700 mL，0.15M，pH=8.2的硼酸缓冲液0.2 mol/L（硼酸根），不同pH的硼酸缓冲液：先配制0.2 mol/L的硼酸溶液和0.05 mol/L的四硼酸钠溶液，然后按下表配制：pH四硼酸钠mL硼酸mLpH四硼酸钠mL硼酸mL7.41.09.08.23.56.57.61.58.58.44.55.57.82.08.08.76.04.08.03.07.09.08.02.03.甘氨酸-盐酸缓冲液：0.2 mol/L0.2 mol/L甘氨酸溶液（15.01g/L）pH0.2 mol/L甘氨酸mL0.2 mol/L盐酸mLpH0.2 mol/L甘氨酸mL0.2 mol/L盐酸mL2.05044.43.05011.42.45032.43.2508.22.65024.23.4506.42.85016.83.6505.04.柠檬酸缓冲液：0.1mol/LC6H8O7·H2O:0.1mol/L 溶液为21.01g/LNa3C6H5O7·2H2O：0.1mol/L溶液为29.41g/LpH0.1mol/L柠檬酸mL0.1mol/L柠檬酸钠mLpH0.1mol/L柠檬酸mL0.1mol/L柠檬酸钠mL3.018.61.45.08.211.83.217.22.85.27.312.73.416.04.05.46.413.63.614.95.15.65.514.53.814.06.05.84.715.34.013.16.96.03.816.24.212.37.76.22.817.24.411.48.66.42.018.04.610.39.76.61.418.44.89.210.80.1M pH=4柠檬酸缓冲液222mLV1：柠檬酸 V2：柠檬酸钠V1=131mL0.1*0.131*210.14=2.75g V2=91mL0.1*0.091*294.10=2.68g0.1M pH=2.3柠檬酸缓冲液412mLV1：柠檬酸 V2：柠檬酸钠V1=400mL0.1*0.4*210.14=8.40g V2=12mL0.1*0.012*294.10=0.353g1M pH=10碳酸缓冲液211mLV1：碳酸钠 V2：碳酸氢钠V1=150mL1*0.15*106=15.9g V2=61mL1*0.061*84=5.12g原来1M pH=7.4磷酸缓冲液203mLV1：K2HPO4·3H2O V2：KH2PO4V1=150mL0.15*1*228.22=34.23g V2=53mL0.053*1*136.08=7.21g现在1M pH=7.4磷酸缓冲液134mLV1：K2HPO4·3H2O V2：KH2PO4V1=100mL0.1*1*228.22=22.82g V2=34mL0.034*1*136.09=4.3g0.1M pH=8磷酸缓冲液20.15mLV1：K2HPO4·3H2O V2：KH2PO4V1=20mL0.1*0.02*228.22=0.46g V2=0.15mL0.1*0.15*10-3*136.08=0.002g0.5M pH=8Tris-HCl缓冲液165mLV1：Tris V2：HClV1=105mL 0.5*0.105*12.1.=6.36g V2=60mL（0.5M HCl）0.2M pH=4.3柠檬酸缓冲液372mLV1：柠檬酸V2：柠檬酸钠V1=300mL0.3*0.2*210.14=12.61g V2=72mL0.2*0.072*294.10=4.24g0.2M pH=4柠檬酸缓冲液340mL V1：柠檬酸V2：柠檬酸钠V1=200mL0.1*0.2*210.14=8.41g V2=140mL0.2*0.14*294.10=8.23g5.Tris-HCl缓冲液：0.1mol/L100mL0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与一定量的0.1mol/L盐酸混匀，可得0.1mol/L，不同pH的缓冲液。pH0.1mol/L盐酸（mL）pH0.1mol/L盐酸（mL）pH0.1mol/L盐酸（mL）7.289.47.869.08.434.47.386.87.964.08.529.47.484.08.058.48.624.87.580.68.152.48.720.67.677.08.245.88.817.07.773.28.339.88.914.0200mL 0.1M Tris（2.42g）加入0.1M HCl 24mLpH=9，0.1M Tris-HCl buffer6.醋酸缓冲液：0.2mol/L0.2mol/L醋酸钠：27.22g三水醋酸钠（无水的为16.4g）+1L水0.2mol/L醋酸：11.55mL冰醋酸+1L水pH醋酸钠mL醋酸mLpH醋酸钠mL醋酸mL3.60.759.254.85.904.103.81.208.805.07.003.004.01.808.205.27.902.104.22.657.355.48.601.404.43.706.305.69.100.904.64.905.105.89.400.607.碳酸缓冲液：0.1 mol/L（Ca2+、Mg2+存在时不得使用）pH0.1 mol/L碳酸钠（mL）0.1 mol/L碳酸氢钾（mL）20379.168.77199.409.12289.519.40379.789.50469.909.725510.149.906410.2810.087310.5310.288210.8310.57910.1 mol/L MES缓冲液：1.921gMES+100mL水，pH=4.098.电泳溶液：电泳缓冲液：3gTris碱、14.4g甘氨酸和1gSDS溶于水中，调pH至8.3左右，加水定容至1L。丙烯酰胺溶液（49.5%T，3%C）：48g丙烯酰胺和1.5gbis溶于100 mL重蒸水中。分离胶缓冲液（4×）：75ml2 mol/L Tris-HCl缓冲液（pH=8.8）+4ml 0.1 mol/L SDS+46mL重蒸水。浓缩胶缓冲液（4×）：50ml 2mol/L Tris-HCl缓冲液（pH6.8）+4ml 0.1mol/L SDS+46mL重蒸水2%茚三酮溶液：50mL 95%乙醇+1g茚三酮（避光，4保存）2%乙醇胺溶液：2mL乙醇胺+98mL硼酸缓冲液（0.15M，pH=8.2），调pH=8.22M醋酸溶液：114.4mL冰醋酸+去离子水定容至1L0.5mol/LEDTA：配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L考马斯亮蓝溶液：考马斯亮蓝G-250 100mg溶于50ml 95%乙醇中，充分搅拌溶解，加入100mL85%磷酸，用蒸馏水1000mL容量瓶定容，真空抽滤。最终试剂中含有0.01%（w/v）考马斯亮蓝G-250，4.7%（w/v）乙醇，8.5%（w/v）磷酸。10%SDS（十二烷基硫酸钠）：称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至1L。