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-细胞工程练习题-第 10 页细胞工程限时练习时间 2017-12-51、如图是植物组织培养示意图，据图回答下列问题：（1）该项技术所运用的基本原理是植物细胞具有 （2）细胞全能性的原因： （3）图中A、B分别代表 过程，培养基中常常要添加的植物激素是 （4）若要制备人工种子，需要将 经过人工薄膜包装得到；若该技术用于培育脱毒苗，外植体应该选取 ，原因是 （5）若该技术用于单倍体育种，外植体应该选取 ，且需对幼苗进行_ 处理，实现染色体数目加倍，得到稳定遗传的植株。2、白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18“白菜一甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。如图是“白菜一甘蓝”的杂交过程示意图，回答以下问题：（1）为了得到原生质体需先用_ _ 方法来处理白菜细胞和甘蓝 细胞。（2）诱导原生质体融合的方法有多种，常用的物理方法是_ ，融合完成的标志是 ，由杂种细胞得到白菜一甘蓝还需要经过组织培养技术，其中需要避光培养的步骤是 （3）如图通过植物体细胞杂交技术获得的“白菜一甘蓝”体细胞染色体数为 ；通常情况下，白菜和甘蓝有性杂交是不能成功的，原因是_ ，若对白菜和甘蓝采用杂交育种方法能成功的话，得到的后代应含_ 条染色体。（4）植物体细胞杂交技术得到的杂种植株属于 倍体。3、如图1是“白菜-甘蓝”杂种植株的培育过程（已知两种植物均为二倍体）。请据图回答有关问题：（1）过程所用的化学试剂为 （2）植物体细胞杂交技术的原理是 ，这种育种方法的优点是 （3）某同学提出，用上图所示方法不能获得纯种，若用白菜和甘蓝的花粉细胞代替图 中的体细胞，再采用上图所示的过程即可获得纯种该同学的方案中有缺陷，请对该方案加以完善： （4）在上图1中阶段所用培养基中含有植物激素X和植物激素Y。逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况如下图2所示。据图指出两种激素的不同浓度比与形成芽、根、愈伤组织的关系：当植物激素X与植物激素Y的浓度比等于1时，未分化细胞群经分裂形成 当植物激素X与植物激素Y的浓度比 时，未分化细胞群分化形成芽。当植物激素X与植物激素Y的浓度比 时，未分化细胞群分化形成根。（5）图中将杂种细胞培育成杂种植株用到了植物的组织培养技术，请列举该技术在作物新品种培育方面的另一用途： 4、（2013年天津理综）（15分）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图：据图回答下列问题：（1）过程所需的酶是 _  。（2）过程后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的 _ 存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是 _ 。原生质体经过细胞壁再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。（4）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组 DNA 进行 PCR 扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株 14 进行 PCR 扩增的结果。据图判断，再生植株 14 中一定不是杂种植株的有 _ 。（5）对杂种植株进行 接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株5、科学家利用基因工程和细胞核移植技术培育了绿色荧光蛋白转基因克隆猪。基本流程是：从荧光水母中获取目的基因，与有关载体重组，将其导入猪胎儿的成纤维细胞，经培养后再将成纤维细胞核植入去核的卵母细胞中，最后培养出转基因克隆猪。（1）成纤维细胞贴壁生长分裂到表面相互接触时，就会停止分裂，这种现象叫做细胞的_ 。 若将成纤维细胞进行传代培养，操作时首先用_ 处理成细胞悬液。（2）作为核移植受体细胞的去核卵母细胞一般处在_ 期。供体细胞注入去核的卵母细胞中，常通过_ （物理方法）激活重组细胞，使其完成细胞分裂和发育进程。（3）培养重组细胞时，将细胞所需的营养物质按其种类、数量严格配制而成的培养基称为_ 培养基，但通常在培养基中还需要加入适量的_ 等天然成分。细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行，CO2的主要作用是_ 。为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的 。6、如图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物（二倍体）的流程回答下列问题：（1）图中A表示正常细胞核，染色体数为2n，则其性染色体的组成可为 。 过程表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采用 的方法。代表的过程是 （2）经过多次传代后，供体细胞中 的稳定性会降低，因此，选材时必须关注传代次数，一般选取传代 代以内的细胞。（3）若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是 （4）图中“代孕个体”为 的雌性动物，移植后的胚胎能在“代孕个体”子宫中存活的生理基础是 （5）与克隆羊“多莉（利）”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了 （6）该“流程”中采用了哪 些生物工程技术： （至少写出三个）7、（2013年海南单科）（15分） 单纯疱疹病毒I型(HSV-I)可引起水泡性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗HSV-1的单克隆抗体可快速检测HSV-1。回答下列问题： (1)在制备抗HSV-I的单克隆抗体的过程中，先给小鼠注射一种纯化的HSV-1蛋白，一段时间后，若小鼠血清中抗_ 的抗体检测呈阳性，说明小鼠体内产生了_ 反应，再从小鼠的_ 中获取B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠的_ _细胞融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是_ 。 (2)若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体，可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的_ 中使其增殖，再从_ 中提取、纯化获得。 (3)通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种HSV-I蛋白，其原因是该抗体具有_ 和 等特性。8、人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断下图是抗HCG单克隆抗体的制备流程示意图，请分析回答：（1）制备单克隆抗体过程中要用到 和 技术（2）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于 ，使小鼠产生分泌相应 的淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的 免疫。（3）融合细胞经HAT培养基培养目的是 ，克隆化培养并进行专一性抗体检验筛选的目的是 。最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是 （4）图中诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的促融剂一般是 （5）培养杂交瘤细胞的条件包括：无菌无毒的环境，营养， ， （6）此过程生产的单克隆抗体可以与 特异性结合，从而诊断早孕。9、（2016年北京理综）（14分）人感染埃博拉病毒（EV）会引起致命的出血热。为了寻找治疗EV病的有效方法，中外科学家进行了系列研究。（1）EV表面的糖蛋白（EV-GP）作为_刺激机体产生_性免疫反应。（2）科学家采集了多年前感染EV并已康复的甲、乙两人的血液，检测抗EV-GP抗体的水平。据图1，应选取_的血液分离记忆B细胞用以制备单克隆抗体（单抗）。（3）将制备的多种单抗分别与病毒混合，然后检测病毒对宿主细胞的感染率。根据图2，抑制效果最好的两种单抗是_。（4）EV-GP具有多个与抗体结合的位点。为了研究上述两种单抗（分别称为A、B）与EV-GP结合的位点是否相同，可按图3所示简要流程进行实验。请将图3中应使用的抗体填入下表i、ii、iii、iv处（填“A”或“B”或“无关抗体”），完成实验方案（一种即可）。抗体组别未标记抗体荧光标记抗体实验组i_ii_对照组1iii_iv_对照组2同ii同ii若A、B与EV-GP结合的位点不同，与对照组1、2分别比较，实验组的荧光值应_（5）中国科学家用分子结构成像技术证实了A、B与EV-GP结合的位点不同。基于上述系列研究，请你为治疗EV病毒提供两种思路_。10、（2014福建理综）（10分）Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：（1）步骤中，在核移植前应去除卵母细胞的 。（2）步骤中，重组胚胎培养到 期时， 可从其内细胞团分离出ES细胞。（3）步骤中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的 设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用Hind和Pst限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有 酶的酶切位点。（4）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的 ，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。11、美国新希望生殖医学中心张进团队于2016年10月19日在美国生殖医学学会会议上正式宣布，世界首个细胞核移植“三父母”男婴已于2016年4月诞生如图是该男婴的培育过程示意图，请据图回答下列问题：（1）由于女性自然周期产生的卵子太少，捐献者在取卵前通常需要注射 激素，促使一次有更多的卵泡发育。（2）过程中防止多精入卵的屏障有 和卵细胞膜反应。判断卵子受精的重要标志是 （3）上述“三亲婴儿”技术的好处之一是可避免母亲甲 （填“细胞核”或“细胞质”）中的缺陷基因传给下一代过程为 ，过程为_ 技术，对移植前的胚胎采用ARY-PCR的方法进行性别鉴定时，宜取囊胚期的 细胞。（4）PCR技术可用于产前基因诊断，若某双链DNA分子扩增过程中消耗引物分子14个，则DNA扩增了 次。12、根据国际糖尿病联盟报告，在最近的10年中，全世界糖尿病的发生率呈逐年增长的趋势糖尿病是由多种因素引起的代谢紊乱疾病，已成为继肿瘤、心脑血管疾病之后威胁人类健康和生命安全的第三位重大疾病如图是研究人员提出的治疗方法请回答下列问题：（1）核移植的受体细胞一般选用_ 细胞。进行相关显微操作时，一般用微型吸管一并吸出细胞核和_ 。（2）细胞在体外培养时，除培养液提供必需的营养条件、适宜的温度和pH、气体环境外，还需要有无菌、无毒环境，为保证无菌、无毒环境，在培养液中通常要加入_ 。此外，还应定期_ ，以便清除代谢废物。（3）现有一段人工合成的正常胰岛素基因的脱氧核苷酸序列，可利用PCR技术扩增正常胰岛素基因，该技术的原理是 ，将正常胰岛素基因导入胚胎干细胞通常采用_ 法。（4）“定向诱导”的本质是使重组细胞B 13、如图是用两种不同的方法制备单克隆抗体的流程图回答下列问题：（1）甲图中从产生免疫反应的小鼠体内得到了抗_ 的抗体，说明小鼠 体内已形成了相应的B淋巴细胞。设法将B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合，常用的诱导因素有聚乙二醇、_ 、电激等。（2）甲图中经选择性培养的_ 细胞，还需进行 培养和_ 检测，经多次筛选，就可获得足够数量的细胞。（3）乙图中构建基因表达载体的目的是使_ 在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传治下一代将重组DNA导入烟草细胞采用最多的方法是 （4）乙图中将烟草细胞培养成转基因烟草植株涉及的最基本技术是_ ，这项技术依据的原理是 细胞工程限时练习答案1、（1）全能性（2）每个细胞都具有本物种的全套遗传信息（3）脱分化、再分化         生长素和细胞分裂素（4）胚状体、不定芽   茎尖       茎尖的病毒极少，甚至无病毒（5）花药（或花粉）      秋水仙素（或低温诱导）2、（1）酶解法（2）离心、振动、电激      再生出新的细胞壁    脱分化（3）38      存在生殖隔离     19（4）四3、（1）聚乙二醇（PEG）（2）细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 克服了远缘杂交不亲和的障碍（3）应该对得到的白菜-甘蓝幼苗用秋水仙素处理后再筛选（4）愈伤组织   大于1  小于1（5）单倍体育种或突变体的利用（体细胞诱变育种）4、（1）纤维素酶和果胶酶 （2）叶绿体 （3）保持原生质体的完整性 (4）3 (5）黑腐病菌5、（1）接触抑制    胰蛋白酶或胶原蛋白酶（2）M中（减数第二次分裂中）   电脉冲（或电激）（3）合成     血清（或血浆）     调节培养基的pH      抗生素6、（1）XX或XY      显微操作（去核法）      胚胎移植 （2）遗传物质                    10 （3）卵母细胞细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响 （4）同种  受体子宫对外来胚胎不发生免疫排斥反应 （5）已经分化的动物体细胞核具有全能性 （6）核移植  早期胚胎培养（或动物细胞培养）   胚胎移植7、（15分） (1) HSV1蛋白（1分） 体液免疫（1分，其他合理答案也给分）脾脏（1分，其他合理答案也给分） 骨髓瘤（1分）无限增值且产生专一抗体（3分，其他合理答案也给分）(2) 腹腔 腹水（每空2分，共4分）(3) 纯度高（2分） 特异性强（2分，其他合理答案也给分）8、（1）动物细胞培养 动物细胞融合（2）抗原 抗体 体液（3） 获得杂交瘤细胞    获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞能无限增殖并能分泌特异性抗体（4）聚乙二醇（或PEG）（5）温度和PH 气体环境（6）人绒毛膜促性腺激素（或HCG）9、（1）抗原 特异（2）甲（3）和(4）方案一：B, A, 无关抗体，A方案二：A, B, 无关抗体，B (5）思路一：单独或共同使用A、B进行治疗思路二：利用单抗制成靶向药物思路三：针对EV-GP与抗体结合位点的结构研制新型药物10、（1）细胞核（2）囊胚（3）核苷酸序列 Hind 和Pst（4）蛋白质11、（1）促性腺（2）透明带反应     在卵细胞膜和透明带的间隙可观察到两个极体（3）细胞质   早期胚胎培养  胚胎移植   滋养层（4）312、（1）M中期的卵母（减数第二次分裂中期的卵母）    第一极体（2）（一定量的）抗生素     更换培养液（3）DNA双链复制      显微注射（4）发生细胞分化（或基因选择性表达）13、（1）埃博拉病毒   灭活的病毒（2）杂交瘤   克隆化 专一的抗体（3）目的基因   农杆菌转化法（4）植物组织培养  植物细胞的全能性