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医学硕士论文开题报告范例医学硕士论文开题报告范例医学硕士论文开题报告范例医学硕士论文开题报告应该怎么写?下面是网为大家的医学硕士论文开题报告范例，欢迎参考一、立题依据(科学意义及国内外现状分析及参考文献)恶性黑色素瘤是一种高度恶性且最具侵袭性的癌之一，多发生于皮肤，早期发生血行转移。对放、化疗不敏感，在世界范围内发病率增高，人们一直在期待着可以征服恶性黑素瘤的新的疗法的出现!最近大量的数据说明恶性肿瘤的开展与 T-钙粘蛋白的表达变化相关.T-钙粘蛋白已在乳腺癌、前列腺癌、肝癌、肺癌1-3 、胃癌、胰腺癌、卵巢癌4-9等多种恶性肿瘤中被检测到表达减少.最近的研究说明 T/H钙粘蛋白在乳腺癌中的重新表达能抑制肿瘤细胞的生长,降低体外培养的肿瘤细胞的侵袭潜能1.T/H钙粘蛋白这个新型钙粘蛋白分子在人类许多癌细胞中表达都降低说明它或许在肿瘤细胞的侵袭和转移10及维持正常细胞的表型中起重要作用11.T/H钙粘蛋白与肿瘤的发生、开展有着密切的联系,也许它会为肿瘤的诊断和治疗带来新的契机.T-钙粘蛋白是否对恶性黑色素瘤也有作用，目前还没有相关研究的报道，所以本实验将进展相关方面的探讨性研究!二、研究内容及预期成果(说明详细研究内容、创新点及拟解决的关键问题、预期成果及提供形式)研究内容：第一部分：正常表皮组织、痣细胞及黑色素瘤细胞中T-cadherin 表达情况第二部分 T-cadherin 基因克隆和真核表达载体的构建第三部分：T-cadherin 基因的真核表达及生物活性分析创新点：首次将 T-cadherin 基因转染黑素瘤细胞拟解决的关键问题：通过 RT-PCR 反响扩增出 T-cadherin 的基因全长。预期成果及提供形式：观察 T-钙粘蛋白在正常皮肤组织细胞、痣细胞及黑色素瘤细胞中的表达情况!进一步说明 T-钙粘蛋白作用机制T-钙粘蛋白基因转染入黑色素瘤细胞后观察对其增殖和转移活性的抑制情况，探索临床诊断和治疗黑色素瘤及其它肿瘤的方法!三、研究方案(包括研究方法、技术路线、研究进度安排)研究方法：第一部分：正常表皮组织、痣细胞及黑色素瘤细胞中T-cadherin 表达情况免疫组织化学和免疫细胞化学1.材料：从正常人皮肤切取的痣组织，人黑色素瘤细胞株2.主要试剂和溶液(1)第一抗体：兔抗人 T-cadherin 抗体(2)第二抗体：生物素标记羊抗兔 IgG(3) “三抗” ：链亲和霉素标记 HRP3.设备4.方法(1)冷冻切片的免疫染色程序(2)活细胞的免疫染色程序5.荧光显微镜检注意：为保证结果的可靠性应该同时设有对照阳性对照(正常组织) ;阴性对照(PBS 代替一抗)以证明抗体的特异性。第二部分 T-cadherin 基因克隆和真核表达载体的构建1.材料：(1)组织和细胞(2)菌株与质粒(3)工具酶(4)试剂(5)仪器2.方法(1)引物的设计(2)总 RNA 的提取：异硫氰酸胍-酚-氯仿抽提一步法(3)甲醛变性琼脂糖凝胶电泳分析其质量，观察所提RNA 有无明显降解;(4)逆转录 RT 反响 ：为了证实 RT 反响的成功设管家基因GAPDH 为内对照(5)PCR 扩增 ：利用上下游引物，在 DNA 聚合酶下对目的片段进展扩增，PCR 过程设 -actin 为内对照(6)PCR 产物的回收、纯化(7)PCR 产物的克隆(8)DNA 序列测定(9)真核重组表达质粒的构建(10)阳性重组质粒的鉴定和筛选(11)质粒的大量提取(12)转染黑色素瘤细胞第三部分：T-钙粘蛋白基因的真核表达及生物活性分析1.材料2.方法(1)转染细胞的培养(2) Western 印迹法检测转染后蛋白的表达(3)流式细胞周期分析(4)凋亡的检测技术路线图：研究进度安排：xx.9xx.7 学习学位课程，查阅文献，完成课题设计xx.9xx.9 根本完成实验研究工作xx.10 xx.3 完成实验补遗工作并 进展统计分析，撰写论文xx.4xx.6 论文辩论四、经费预算试剂费用： 15000 元组织及细胞： 1000 元文献资料费： 500 元论文打印费： 1000 元辩论费： 1500 元总计： 19000 元五、课题可行性分析实验在导师的指导下进展，.51lunwen./shuoshikait/导师段昕所教授、主任医师对黑色素瘤的诊断治疗、检测方法和研究进展有深入的了解，对本课题的研究设计及实验有重要的指导意义。已完成黑色素瘤及 T-钙粘蛋白研究最新进展的文献检索和综述报告工作。所有实验均在承德医学院附属医院皮肤病研究室和中心实验室完成。实验室的老师实验技术熟练，在细胞培养、免疫组化及分子生物学等方面都可给予指导;实验所需的科研仪器设备实验室均具备。参考文献:1. Toyooka,KO.,Toyooka S.,Virmani AK.,Sathyanarayana UGet al Cancer Res xx Jun 1;61(11):4556602. Lee,S.W.,1996 Nat.Med,2:7767823. Zhong ,Y.,Y.Delgado.,J.Gomez,S.W.Lee et al xx ClinCancer Res.4. Takeuchi,M.,Misaki,A.,Chen,B.K.,et al(1999)Histopathology,35,8785. Kawakami,M.,Staub,J.,Cliby,W.,et al1999Int.J.Oncol.,15,7157206. Sato,M.,Mori,Y.,Sakurada,A.,etal(1998)Hum.Ge.,43,2852867. Sato,M.,Mori,Y.,Sakurada,A.,et al(1998)Hum.Ge.,103,961018. Mori,Y.,Matsunaga,M.,Abe,T.,et al (1999)BrJ.Cancer,80,5565629. Lee.S.W(1996)Nat.Med.,2,77678210. Hung.Z.Y.,Wu,Y.,Hedric,N&Gutmann,D.H(xx)MolCell.Biol 23,566-57811. Lee SW.,Reimercl.,Campbell DB.,et al1998Jun;19(6):1157-9
