生物信息学在创新药物研究中的应用.ppt

生物信息学 bioinformatics,生物科学学院生物工程教研室,生物信息学在创新药物研究中的应用 Bioinformatics and the Discovery of Drugs,生物工程教研室,Leading causes of death (U.S., 1999) number of% total Rank Causedeathsdeaths 1heart disease725,19230.3 2malignant neoplasm549,19223.0 3cerebrovascular disease167,3667.0 4chronic lower respiratory124,1815.2 5accidents97,8604.1 6diabetes mellitus68,3992.9 7influenza, pneumonia63,7302.7 8Alzheimers disease44,5361.9 9nephritis 跟药物能有一定的结合位点; 最好结构已经清楚了，尤其是与药物相互作用的位点; 动物敲除（Knockout）这个基因不引起显著的不良后果;当然也要有一定的市场需求和销量。,药物靶标识别的生物信息学方法：,基因组数据库搜索：通过生物信息学方法对人类基因组序列进行挖掘与靶标相似的 潜在靶标。如：通过基因从头预测和序列相似性搜索能够在有效靶标家族中发现新 的成员。 EST数据库搜索：,同源搜索,组织差异表达差异搜寻：具有组织特异性表达的基因有可能成 为特异性的副作用小的靶标。,基因微阵列方法与药物靶标预测：DNA芯片，又称基因芯片或DNA阵列 （DNA array），将大量特定序列的寡聚核苷酸（DNA探针）有序地固化 在硅或玻璃等材料作的承载基片上，使其能与靶基因进行互补杂交形成DNA 探针池。利用DNA芯片可以快速高效地获取空前规模的生物信息，因而可用 于发现疾病的相关基因，可以在基因组水平上来检测基因表达模式特征谱和 鉴定潜在的药物靶标。,蛋白质组学与药物靶标识别： 应用蛋白质组学寻找新的药物靶标有以下几种方法：比较病态与正常 态细胞内蛋白质表达差异；比较给药后病变与正常组织的蛋白质表达差 异；从已知的生物活性寻找新的蛋白作为药物靶点；从蛋白质间的相 互作用寻找和验证新的药物靶点。,SNP研究与药物靶标识别：单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism， SNP),主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性。 可使用生物信息学来决定一个基因的变异是否改变一个氨基酸而带来影响。,不同的个体对药物的敏感性和毒性反应有很大的区别，这主要是由基因决定的,特别是药物靶点基因、药物代谢基因等的单核苷酸多态性，影响了药物作用的强弱和药物代谢的不同。因此对应不同的snp个体应该采用不同个体化治疗,达菲为罗氏制药独家生产的抗流感药物，其通用名称为磷酸奥司他韦（Oseltamivirphosphate）。高致病禽流感曾引起世界范围内的恐慌。美国FAD发现达菲在一定程度上有治疗作用，瞬间成为抢手货，但是，日本报道了数百例儿童服药后导致精神混乱于2007年发布预警提示国民慎用达菲。而Nature杂志的评论员质疑是日本国内利益集团和罗氏制药集团有不恰当利益关系而进行虚假报道。北京大学魏丽萍课题组用生物信息学分析提出了一个假设，用一个亚洲人特异性的单核苷酸多态性位点几乎解释了全部疑点, 药物靶标验证技术,两方面的验证,靶标的有效性，即药物靶标与疾病确实有关,药物靶标的副作用，如果靶标的活性调节不可避免的产生重 大的副作用，将其选为靶标也是不合适的,基因水平上：,DNA芯片技术：可以确定疾病细胞的基因表达模式特征谱和鉴定潜在的药物靶标,基因敲除技术：通过DNA同源重组，使ES细胞（Embryonic Stem cell，ES ）特 定的内源基因被破坏而造成功能丧失，然后再通过ES细胞介导得到该基因丧失的 模式生物模型的过程称为基因敲除(gene knockout)，又称基因打靶技术，通过基 因敲除试验以检测该基因缺失以后是否就丢失了某种功能，从而对该靶点进行确证。,RNAi（RNA interference）：是一种新的基因抑制技术，它通过人为地引入与内源靶基因具有同源序列的双链RNA，从而诱导内源靶基因的mRNA降解，达到阻止基因表达的目的。双链RNA能够高效特异性阻断相应基因的表达，其机理与反义RNA技术相似，,基因表达谱：是通过构建处于某一特定状态下的细胞或组织的非偏性cDNA文库，收集cDNA序列片段、定性、定量分析其mRNA群体组成，从而描绘该特定细胞或组织在特定状态下的基因表达种类和丰度信息，这样编制成的数据表就称为基因表达谱。该表达谱实际上从mRNA水平反映了细胞或组织特异性表型和表达模式。,蛋白质水平的主要技术：酵母双杂交、蛋白质组学, 靶标发现的相关资源介绍,重点数据库及软件介绍： TTD: Therapeutic Target Database 提供了已知或正在探索的可用作治疗的蛋白质靶点和核苷酸靶点的信息，以及与 这些靶点对应的靶疾病，靶通路和相应的药物/配体信息。 Drug ADME Associated Protein Database 此数据库提供了药物吸收、分布、代谢和排泄相关蛋白的信息，目前包括 321 个 蛋白条目。提供了已知的药物 ADME(Absorption，Distribution，Metabolism， Excretion)相关蛋白的功能、相似性、底物/配体、组织分布以及靶点性质等信息。 TRMP: Therapeutically Relevant Multiple Pathway Database 提供了文献中报道的可用于治疗的靶点所参与的 Multiple Pathway 信息，靶疾病 的状况以及靶点对应的药物/配体信息,9.3药物合理设计与筛选,药物合理设计与筛选也称基于结构的药物设计与筛选(structure-based drug design and screening)或称合理发现（rational discovery）。这种筛选的策略是将基于机制（尤其基于大分子三维结构）的筛选与药物合理设计融合为一体。,有人称理性药物发现的时代尚未到来。药物合理设计仍属于辅助手段。但可以预见计算机药物筛选将是未来创新药物开发研究的新方法。,9.4 药物设计的基本方法： 传统的药物研制主要是从大量的天然产物中进行筛选。得到一个可供临床使和的 药物要耗费大量的时间与金钱。近年来由于生物信息学的发展，相当数量的大分 子三维结构已被人们精确测定，使得基于蛋白质和核酸结构的药物设计成为可能。,计算机辅助药物设计所涉及的两类问题：,对接问题,确定药效结构的问题,对接问题:是将小分子配体放置于受体的活性位点处，并寻找合理的取向和构象使得配体与受体的形状和相互作用能够最佳匹配。分子对接有两个核心问题，即如何找到最佳的结合位置以及如何评价对接分子之间的结合强度。 分子对接方法:主要用来从化合物数据库中搜寻与受体生物大分子有较好亲和力的小分子，从而发现全新的先导化合物。 常用软件有：Dock 和 Flex,DOCK由Kuntz小组于 1982 年开发， 最新版本为DOCK 5.0 F1exX是一种快速、精确的柔性对 接算法，在对接时考虑了配体分子 的许多构象。,确定药效结构的问题：通试验发现受体的配体，然后利用配体的几何结构和化学特征，通过计算机的帮助得到受体的信息从而得到该类药物的药效结构。, 间接药物设计方法 早期，人们对于药物作用的靶标分子大多缺乏了解，只能从药物小分子化合物 的结构和活性出发，去归纳和认识药物分子的构效关系，进而设计药物分子， 这种药物设计即为间接药物设计。 定量构效关系(Quantitative Structure-Activity Relationship, QSAR) 是一 种重要的间接药物设计方法。所谓定量构效方法就是通过一些数理统计方法建立 其一系列化合物的生理活性或某种性质与其物理化学性质之间的定量关系，通过 这些定量关系。可以预测化合物的生理活性或某些性质，指导我们设计出具有更 高活性的化合物。一旦确定已知的化合物的生物活性与其结构之间的定量关系， 研究者就可以依据这一关系对化合物结构进行改造，以获得更高的活性,现代药物设计大体分为两类：间接药物设计与直接药物设计, 直接药物设计方法:,如果受体或受体和配体相结合所形成的复合物的三维结构已经知道，就可根据受点的三维要求设计新药的结构。如果受体蛋白仅知其组成的氨基酸顺序而不知其空间排列，则可根据同源蛋白模拟其三级结构,可以分为：全新药物设计和数据库搜寻（或者称分子对接）两大类,全新药物设计：根据受体活性部位的形状和性质要求，让计算机自动构建出形 状、性质互补的新分子，该新分子能与受体活性部位很好地契合，从而有望成 为新的先导化合物。 数据库与虚拟筛选 ：如果已经掌握了足够的有关靶标以及与靶标结合的化合物 的信息，针对大的化合物数据库的虚拟筛选非常具有吸引力，并可作为一种与 高通量筛选互为补充的寻找先导化合物的方法。,9.5 药物设计相关资源介绍,与药物设计相关的研究期刊,与药物设计相关的蛋白结构数据库,与药物设计相关的计算工具,9.6 总结与展望,利用生物信息学进行理性药物发现的时代尚未到来，但是生物信息学在 创新药物研究中不可替代的地位已成为不争的事实，必将对新药的研发产生 深刻的影响。目前看来。 关键是如何将现代生物技术、信息技术、计算机辅助药物设计系统、组 合化学技术等结合起来,提高筛选命中率，减少药物在合成和筛选方面的时间 和投入，最终找到高效、低毒且具有预期药理作用的治疗药物。,思考题：,1、药物靶标 名解 2、先导化合物 名解 3、生物信息学在创新药中研究中发挥作用主要有两个方面 4、主要的药物靶标 5、说出一种分子对接的常用软件,Drug Target Absorption（吸收） Distribution（分布） Metabolism（代谢） Excretion（排泄） Toxic（毒性） G-protein coupled receptor Ion channel Knockout DNA array single nucleotide polymorphism Embryonic Stem cell RNA interference structure-based drug design and screening rational discovery malignant neoplasm,本次课推荐单词,欢迎批评指正,