动物细胞培养和核移植技术用讲稿.ppt

动物细胞培养和核移植技术用第一页，讲稿共二十九页哦植物细胞工程常用的技术手段有哪些？植物细胞工程常用的技术手段有哪些？那么动物细胞常用的技那么动物细胞常用的技术手段呢？术手段呢？植物组织培养植物体细胞杂交问题探讨第二页，讲稿共二十九页哦动物细胞工程的技术手段动物细胞工程的技术手段动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等动物细胞融合、生产单克隆抗体等动物细胞工程技术的基础动物细胞培养第三页，讲稿共二十九页哦 从动物机体中取出相关的组织，将从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些的培养基中，让这些细胞生长和细胞生长和增殖增殖。原理：细胞增殖第四页，讲稿共二十九页哦动物细胞培养的过程（见课本）第五页，讲稿共二十九页哦动物胚胎或幼龄动物的组织、器官（取材）细胞悬液10代细胞50代细胞传代培养无限传代单个细胞加培养液（分解细胞间的蛋白）原代培养胰蛋白酶或胶原蛋白酶剪碎细胞株细胞系动物组织细胞间隙中含有一定量蛋白质遗传物质未改变遗传物质已改变第六页，讲稿共二十九页哦 细胞株和细胞系的区别：1、遗传物质2、培养代数第七页，讲稿共二十九页哦原代培养：原代培养：传代培养：传代培养：原代培养与传代培养的区别分装之前，10代以前分装后继续培养，10代以后第八页，讲稿共二十九页哦1、无菌、无毒的环境、无菌、无毒的环境动物细胞培养的条件添加一定量的抗生素定期更换培养液培养液和培养器具无菌处理第九页，讲稿共二十九页哦第十页，讲稿共二十九页哦动物细胞培养的条件动物细胞培养的条件1、无菌、无毒的环境、无菌、无毒的环境2、营养、营养补充合成培养基中缺乏的物质葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子、动物血清、血浆等培养基的不同是动物细胞培养和植物组织培养最重要的区别第十一页，讲稿共二十九页哦动物细胞培养的条件动物细胞培养的条件1、无菌、无毒的环境、无菌、无毒的环境2、营养、营养3、温度和、温度和PH36.5+0.5度 PH为7.2-7.4第十二页，讲稿共二十九页哦动物细胞培养的条件动物细胞培养的条件1、无菌、无毒的环境、无菌、无毒的环境2、营养、营养3、温度和、温度和PH4、气体环境：、气体环境：O2和CO2（95%空气和5%CO2）第十三页，讲稿共二十九页哦2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？1、较植物组培培养基有何独特之处？独特之处有：1、液体培养基 2、成分中有动物血清等这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强第十四页，讲稿共二十九页哦3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？防止细胞间接触抑制现象，使细胞与培养液更充分接触第十五页，讲稿共二十九页哦4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，而不能发育成个体5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？能第十六页，讲稿共二十九页哦6、动物细胞培养过程中特别要注意什么？注意时间的控制7、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近第十七页，讲稿共二十九页哦动物细胞培养植物组织培养植物细胞的全能性细胞株、细胞系植物体或组织获得细胞或细胞分泌蛋白快速繁殖、培育无病毒植株等葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素液体培养基固体培养基细胞增殖培养结果培养目的培养基特有成分培养基性质原理第十八页，讲稿共二十九页哦（1）生产蛋白质生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。（2）培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植（3）用于检测有毒物质（4）用于生理、病理、药理等方面的研究动物细胞培养的应用 第十九页，讲稿共二十九页哦如何使动物细胞的全能性表达出来如何使动物细胞的全能性表达出来?利用动物细胞核移植技术第二十页，讲稿共二十九页哦 动物核移植：将动物的一个细胞的将动物的一个细胞的细胞核细胞核，移入一个已，移入一个已经去掉细胞核的经去掉细胞核的卵母细胞卵母细胞中，使其重组并中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终最终发育为动物个体发育为动物个体。分为。分为胚胎细胞核移植胚胎细胞核移植和和体细胞核移植体细胞核移植（难度高）（难度高）用核移植的方法得到的动物。克隆动物：第二十一页，讲稿共二十九页哦动物体细胞核移植技术黑面绵羊去核卵母细胞白面绵羊乳腺细胞核重组细胞动物细胞培养（或早期胚胎培养）早期胚胎胚胎移植另一头绵羊的子宫妊娠、出生克隆羊多利细胞核移植第二十二页，讲稿共二十九页哦1、卵母细胞为减数第二次分裂中期的次级卵母细胞2、原因？细胞比较大，易操作细胞质中含有使体细胞核全能性表达出来的物质3、克隆过程运用的技术手段？动物体细胞核移植、动物细胞培养和胚胎移植4、多利的大部分性状与谁一样？白面绵羊5、结论？高度分化的体细胞核具有全能性第二十三页，讲稿共二十九页哦克隆动物的研究意义1.克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白2.改良动物品种 3.作为异种移植的供体4.保护濒危动物体细胞核移植技术存在的问题1.许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，免疫失调等。2.成功率非常低3、克隆动物食品的安全性问题。第二十四页，讲稿共二十九页哦1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞（）A细胞系 B细胞株 C原代细胞 D传代细胞2、动物细胞工程技术的基础是 A.动物细胞融合 B.单克隆抗体C.胚胎移植 D.动物细胞培养AD3.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于A.培养基不同 B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。A教学反馈第二十五页，讲稿共二十九页哦4、一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件（）无毒的环境 无菌的环境 培养基需要加入血清 温度与动物体温相似 需要O2，不需要CO2 CO2能调节培养液PHA、B、C、D、D第二十六页，讲稿共二十九页哦5、动物细胞培养的特点 （）细胞贴壁 有丝分裂 细胞分化 接触抑制 减数分裂 原代培养一般传110代A、B、C、D、A第二十七页，讲稿共二十九页哦 7.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于-（）A.培养基不同；B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。A第二十八页，讲稿共二十九页哦8.关于动物细胞培养的有关叙述，正确的是()A.细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中 B.动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等 C.动物细胞培养的目的只是获得大量的细胞分泌蛋白 D.动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶处理D第二十九页，讲稿共二十九页哦