动物实验与血清学试验讲稿.ppt

关于动物实验与血清学试验第一页，讲稿共三十四页哦主要内容12345第二页，讲稿共三十四页哦1.实验动物作为人类的替难者进行各种生物医学研究。试验中要实验动物作为人类的替难者进行各种生物医学研究。试验中要从动物福利和动物实验伦理学考虑，减少一些不必要的动物实从动物福利和动物实验伦理学考虑，减少一些不必要的动物实验，如若不得不做的动物实验，要尽可能将动物的痛苦、压迫验，如若不得不做的动物实验，要尽可能将动物的痛苦、压迫和不适降到最低。和不适降到最低。2.动物实验的实践性非常强，不能仅靠书本理论知识，需要通动物实验的实践性非常强，不能仅靠书本理论知识，需要通过反复实践加以掌握，以保证实验的顺利进行和减少动物承过反复实践加以掌握，以保证实验的顺利进行和减少动物承受的痛苦受的痛苦第三页，讲稿共三十四页哦国际上对动物实验伦理有如下五项要求国际上对动物实验伦理有如下五项要求:动物居住空间应符合标准动物居住空间应符合标准,注意日常的饲育管理注意日常的饲育管理,不使动物饥饿、缺水和患病。不使动物饥饿、缺水和患病。尽可能地采用代替法最少地使用和牺牲动物。尽可能地采用代替法最少地使用和牺牲动物。使用犬、猫和猴时，实验前应进行训练，尽可能地减少动物的恐惧和不安。使用犬、猫和猴时，实验前应进行训练，尽可能地减少动物的恐惧和不安。实验结束和动物不可能恢复时，应采取安乐死。实验结束和动物不可能恢复时，应采取安乐死。要爱护试验动物和对由于实验死亡的动物应持有怜悯和感谢之情。要爱护试验动物和对由于实验死亡的动物应持有怜悯和感谢之情。第四页，讲稿共三十四页哦第五页，讲稿共三十四页哦 小白鼠的捉持小白鼠的捉持 捉拿时可先用右手抓住并提起鼠尾，置于实验台或鼠笼上，并稍向后拉；用捉拿时可先用右手抓住并提起鼠尾，置于实验台或鼠笼上，并稍向后拉；用左手的拇指和食指抓住小鼠两耳后颈背部的皮肤，将鼠置于左手心中，拉直左手的拇指和食指抓住小鼠两耳后颈背部的皮肤，将鼠置于左手心中，拉直后肢，以无名指及小指按住鼠尾或小鼠的左后肢即可。后肢，以无名指及小指按住鼠尾或小鼠的左后肢即可。小鼠抓取方法第六页，讲稿共三十四页哦 大白鼠的捉持大白鼠的捉持 大白鼠的捉拿时，可戴上手套。实验者可用右手捉住鼠尾，放在实验大白鼠的捉拿时，可戴上手套。实验者可用右手捉住鼠尾，放在实验台或鼠笼上，并稍向后拉；左手掌面向鼠背，食指和中指压住鼠的头台或鼠笼上，并稍向后拉；左手掌面向鼠背，食指和中指压住鼠的头顶，拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入，将鼠的两前肢卡住；或拽顶，拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入，将鼠的两前肢卡住；或拽紧鼠后颈及后背皮肤即可。紧鼠后颈及后背皮肤即可。大鼠抓取方法第七页，讲稿共三十四页哦豚鼠的捉拿、固定豚鼠的捉拿、固定 豚鼠胆小易惊，抓取时必须稳、准、迅速。豚鼠胆小易惊，抓取时必须稳、准、迅速。先用手掌扣住鼠背，抓住其肩胛上方，将手张开，用手指环握颈部，另一只手托先用手掌扣住鼠背，抓住其肩胛上方，将手张开，用手指环握颈部，另一只手托住其臀部，即可轻轻提起、固定。住其臀部，即可轻轻提起、固定。豚鼠抓取方法第八页，讲稿共三十四页哦家兔的捉持家兔的捉持 用一手抓住家兔颈背部皮肤，将兔提起，用一手抓住家兔颈背部皮肤，将兔提起，另一手托其臀部，使兔呈坐位姿势。另一手托其臀部，使兔呈坐位姿势。犬抓取注意点犬抓取注意点 不要轻易使用长柄铁钳，钳伤造成的伤不要轻易使用长柄铁钳，钳伤造成的伤害会使它对你更加恐惧，影响以后实害会使它对你更加恐惧，影响以后实验的进行。验的进行。抓取后用绳子将嘴绑住。抓取后用绳子将嘴绑住。狗嘴的捆绑方法家兔的抓取 第九页，讲稿共三十四页哦第十页，讲稿共三十四页哦对实验动物进行麻醉的目的是：消除实验过程中引起的痛苦和不适，确对实验动物进行麻醉的目的是：消除实验过程中引起的痛苦和不适，确保实验动物的安全和动物实验的顺利进行，是动物实验伦理的一个重要保实验动物的安全和动物实验的顺利进行，是动物实验伦理的一个重要方面。方面。应结合实验目的、实验动物种类、日龄及健康状况等因素进行综应结合实验目的、实验动物种类、日龄及健康状况等因素进行综合考虑，决定选用的麻醉剂和麻醉方法。合考虑，决定选用的麻醉剂和麻醉方法。麻醉方法有全身麻醉和局部麻醉两种。在实验动物的麻醉中绝麻醉方法有全身麻醉和局部麻醉两种。在实验动物的麻醉中绝大多数采用全身麻醉。大多数采用全身麻醉。第十一页，讲稿共三十四页哦吸入麻醉法：用挥发吸入麻醉法：用挥发性麻醉药。性麻醉药。常用麻醉药：常用麻醉药：乙醚乙醚 氯仿氯仿全身麻醉全身麻醉注射麻醉法：用非挥注射麻醉法：用非挥发性麻醉药。发性麻醉药。常用麻醉药：常用麻醉药：戊巴比妥钠戊巴比妥钠 硫喷妥钠硫喷妥钠 氯氨酮氯氨酮 乌拉坦乌拉坦第十二页，讲稿共三十四页哦常用非挥发性麻醉药的剂量 药物及常药物及常用的溶液用的溶液浓度浓度 剂量（剂量（mg/kg)麻醉持续时麻醉持续时间与特点间与特点 小鼠小鼠大鼠大鼠 豚鼠豚鼠家兔家兔乌拉坦 （2025%）10001500（ip）10001500（ip）10001500（ip）10001200（iv）24小时。对呼吸和神经影响小，但可降低血压 10001500（ip）戊巴比妥钠 （14）4550（ip）4050（ip）4050（ip）3040（ip）24小时。注射后作用迅速，一般最常用，肌松不够完全。2025（iv）硫喷妥钠 （24）3040（iv）约半小时。第十三页，讲稿共三十四页哦实验动物麻醉应注意的事项麻醉之前应禁食，准确称量动物体重，作为计算麻醉剂用量的依麻醉之前应禁食，准确称量动物体重，作为计算麻醉剂用量的依据。据。应注意不同麻醉药对动物的作用是不同的，如戊巴比妥钠、硫贲妥应注意不同麻醉药对动物的作用是不同的，如戊巴比妥钠、硫贲妥钠等能抑制心肌收缩力，使肌肉松弛，而氯胺酮则相反。钠等能抑制心肌收缩力，使肌肉松弛，而氯胺酮则相反。大动物犬、猴、羊等麻醉前半小时应注射麻醉前给药如阿托品和苯大动物犬、猴、羊等麻醉前半小时应注射麻醉前给药如阿托品和苯巴比妥钠。巴比妥钠。静脉注射麻醉药是必须缓慢，边注射边观察动物。静脉注射麻醉药是必须缓慢，边注射边观察动物。1.在麻醉过程中密切观察动物的反应，在麻醉过程中密切观察动物的反应，动物在麻醉期间体温下降，动物在麻醉期间体温下降，应注意保温。应注意保温。第十四页，讲稿共三十四页哦第十五页，讲稿共三十四页哦1、大鼠、小鼠的采血方法、大鼠、小鼠的采血方法 尾部采血尾部采血眼眶后静脉丛采血眼眶后静脉丛采血 颈颈(股股)静脉或颈静脉或颈(股股)动脉动脉采血采血 摘眼球采血摘眼球采血 断头采血断头采血 心脏采血心脏采血尾部采血尾部采血心脏采血心脏采血第十六页，讲稿共三十四页哦采血方法采血方法采血量（采血量（mlml）应应 用用小鼠小鼠大鼠大鼠断头采血法断头采血法0.2-1.01.5-5.0大批动物集中处死采血，速度快摘眼球采血法摘眼球采血法0.2-1.51.0-8.0大批动物集中采血，若一次少量采,可反复几次尾静脉切割采血法尾静脉切割采血法0.01-0.050.1-0.5用于用血量少的检验，如血常规，能长时期反复多次采血眼眶后静脉采血法眼眶后静脉采血法0.02-0.10.2-1.0能反复多次采血腋窝动静脉采血法腋窝动静脉采血法0.5-1.51.0-5.0需处死动物，麻醉后采血心脏采血法心脏采血法-0.2-1.0腹主动脉采血法腹主动脉采血法-5.0-10.0需处死动物，麻醉后采血第十七页，讲稿共三十四页哦2 2、豚鼠采血方法、豚鼠采血方法耳缘切口采血耳缘切口采血背中足静脉采血背中足静脉采血 心脏采血心脏采血 3 3、兔的采血方法、兔的采血方法耳缘静脉采血耳缘静脉采血 耳中央动脉采血耳中央动脉采血 颈静脉采血颈静脉采血 颈动脉采血颈动脉采血心脏采血心脏采血第十八页，讲稿共三十四页哦4 4、犬的采血方法、犬的采血方法 后肢外侧小隐静脉采血后肢外侧小隐静脉采血 前肢背侧皮下头静脉采血前肢背侧皮下头静脉采血 颈静脉采血颈静脉采血 股动脉采血股动脉采血前肢静脉采血前肢静脉采血后肢小隐静脉采血后肢小隐静脉采血第十九页，讲稿共三十四页哦动物种类动物种类最大安全采血量最大安全采血量（mlml）最小致死采血量最小致死采血量（mlml）小鼠小鼠0.30.30.50.5大鼠大鼠2 25 5豚鼠豚鼠5 51010兔兔10104040犬犬5050300300猴猴15156060第二十页，讲稿共三十四页哦四、动物各种体液的采集方法四、动物各种体液的采集方法第二十一页，讲稿共三十四页哦动物各种体液的采集方法1、尿液的采集方法、尿液的采集方法 常用的采集方法较多，一般在实验前需给动物灌服一定量的水。常用的采集方法较多，一般在实验前需给动物灌服一定量的水。代谢笼法（代谢笼法（适用于大、小鼠适用于大、小鼠）导尿法（常用于雄性兔、狗导尿法（常用于雄性兔、狗）压迫膀胱法（适用于兔、狗等较大动物）压迫膀胱法（适用于兔、狗等较大动物）输尿管插管法输尿管插管法膀胱插管法膀胱插管法 膀胱穿刺法膀胱穿刺法剖腹采尿法剖腹采尿法反射排尿法反射排尿法 第二十二页，讲稿共三十四页哦2、消化液的采集、消化液的采集 唾液（直接抽取法；制造腮腺瘘法）唾液（直接抽取法；制造腮腺瘘法）胃液（直接收集胃液法；制备胃瘘法）胃液（直接收集胃液法；制备胃瘘法）胰液和胆汁（通过对胰总管和胆总管的插管而获得）胰液和胆汁（通过对胰总管和胆总管的插管而获得）3、脑脊液的采集、脑脊液的采集 狗、兔脑脊液的采集通常采取脊髓穿刺法狗、兔脑脊液的采集通常采取脊髓穿刺法 大鼠脑脊液的采集可采用枕大孔直接穿刺法大鼠脑脊液的采集可采用枕大孔直接穿刺法4、其他体液的采集、其他体液的采集 胸水的采集胸水的采集 腹水的采集腹水的采集 骨髓的采集骨髓的采集 精液的采集精液的采集 阴道内液体的采集阴道内液体的采集 动物各种体液的采集方法第二十三页，讲稿共三十四页哦第二十四页，讲稿共三十四页哦安死术安死术的概念的概念 “安死术安死术”是指以人道的方法处死动物的过程。在处死动物过程是指以人道的方法处死动物的过程。在处死动物过程中减少动物的惊恐或焦虑，安静地、无痛苦地死亡。中减少动物的惊恐或焦虑，安静地、无痛苦地死亡。第二十五页，讲稿共三十四页哦1、大鼠小鼠处死方法、大鼠小鼠处死方法颈椎脱臼法颈椎脱臼法急性失血法急性失血法麻醉致死法麻醉致死法断头法断头法击打法击打法第二十六页，讲稿共三十四页哦2、犬、兔、豚鼠处死方法、犬、兔、豚鼠处死方法空气栓塞法空气栓塞法 优点：方法简单、迅速，优点：方法简单、迅速，缺点：动物死于急性循环衰竭，各脏器凝血十分明显。缺点：动物死于急性循环衰竭，各脏器凝血十分明显。急性失血法急性失血法 先行麻醉，再分离颈动脉或股动脉，将一根较粗的塑料管插入动脉内放血。动物在先行麻醉，再分离颈动脉或股动脉，将一根较粗的塑料管插入动脉内放血。动物在3 35min5min内内即可死亡。即可死亡。优点：动物十分安静，对脏器无损伤，对活杀采集病理切片标本是一种比较好的方优点：动物十分安静，对脏器无损伤，对活杀采集病理切片标本是一种比较好的方法。法。化学药物致死法化学药物致死法 通过注射一定量的化学药物而使动物迅速致死。通过注射一定量的化学药物而使动物迅速致死。例如：例如：1010氯化钾溶液：氯化钾溶液：静脉注射，用量为犬静脉注射，用量为犬202030ml/30ml/只，兔只，兔5 510ml10ml只只第二十七页，讲稿共三十四页哦血清学试验第二十八页，讲稿共三十四页哦本质：抗原抗体在体外出现肉眼可见的特异性反应优点：特异性强、敏感性高、简便、快速血清学试验包括：血清学鉴定和血清学诊断第二十九页，讲稿共三十四页哦血清学鉴定用含已知特异性抗体的免疫血清（诊断血清）与分离培养出的未知纯种细菌或标本中的抗原，进行血清学反应，以确定病原菌的种或型。第三十页，讲稿共三十四页哦直接凝集试验第三十一页，讲稿共三十四页哦荚膜肿胀试验第三十二页，讲稿共三十四页哦血清学诊断已知抗原检测血清中相应抗体取患者急性期和恢复期双份血清，后者的抗体效价比前者升高4倍或4倍以上才有诊断意义。第三十三页，讲稿共三十四页哦感谢大家观看感谢大家观看9/5/2022第三十四页，讲稿共三十四页哦