第六章芳酸类非甾体抗炎药物的分析课件.ppt

第六章芳酸类非甾体抗炎药物的分析第1页，此课件共64页哦主要内容：主要内容：1 1 典型药物分类与理化性质典型药物分类与理化性质2 2 鉴别试验鉴别试验3 3 特殊特殊杂质检查杂质检查4 4 含量测定含量测定5 5 体内药物分析体内药物分析第2页，此课件共64页哦OHR OH醇羟基醇羟基酚羟基酚羟基醇醇酚酚第3页，此课件共64页哦R COOH羧酸羧酸COOH芳酸芳酸OROCR酯酯游离羧基游离羧基游离羧基游离羧基第4页，此课件共64页哦按结构分类按结构分类水杨酸类水杨酸类邻氨基邻氨基苯甲酸类苯甲酸类芳酸类非甾体药物：分子结构中含芳酸类非甾体药物：分子结构中含有有取代苯基取代苯基的一类羧酸化合物。的一类羧酸化合物。邻氨基苯乙酸类邻氨基苯乙酸类芳基丙芳基丙酸类酸类吲哚乙酸类吲哚乙酸类苯并噻嗪甲酸类苯并噻嗪甲酸类其他非甾体抗炎药其他非甾体抗炎药第5页，此课件共64页哦1 典型药物分类与理化性质典型药物分类与理化性质一、水杨酸类一、水杨酸类 典型药物典型药物 水杨酸水杨酸(salicylic acid)游离羧基游离羧基酚羟基，发酚羟基，发生三氯化铁生三氯化铁反应反应苯环苯环第6页，此课件共64页哦COOHOCOCH3游离羧基游离羧基阿司匹林阿司匹林(aspirin)酯键酯键苯环苯环pKa=3.49直接中和法直接中和法两步滴定法两步滴定法水解后生成水解后生成水杨酸杂质水杨酸杂质水解后才发水解后才发生三氯化铁生三氯化铁反应反应第7页，此课件共64页哦双水杨酯双水杨酯OHOOOOH第8页，此课件共64页哦甲芬那酸甲芬那酸二、二、邻氨基邻氨基苯甲酸类苯甲酸类有强烈绿色荧光有强烈绿色荧光第9页，此课件共64页哦三、邻氨基苯乙酸类三、邻氨基苯乙酸类双氯芬酸钠双氯芬酸钠ClClONaONH有刺鼻感有刺鼻感第10页，此课件共64页哦CH2CHCH3CH3COOHCH3CH布洛芬布洛芬ibuprofen四四、芳基丙芳基丙酸类酸类第11页，此课件共64页哦五、吲哚乙酸类五、吲哚乙酸类NOOHOOCl吲哚美辛吲哚美辛第12页，此课件共64页哦六、苯并噻嗪甲酸类六、苯并噻嗪甲酸类SNOHOONHONCH3吡罗昔康吡罗昔康第13页，此课件共64页哦其他非甾体抗炎药其他非甾体抗炎药对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚OHNHCH3O第14页，此课件共64页哦结构分析结构分析n 包括：芳酸、芳酸酯、芳酸盐包括：芳酸、芳酸酯、芳酸盐n共同点：共同点：苯环、羧基苯环、羧基n不同点：不同的取代基（如酚羟基不同点：不同的取代基（如酚羟基、芳、芳伯氨基、卤原子、杂环等）伯氨基、卤原子、杂环等）第15页，此课件共64页哦主要主要理化性质理化性质1.性状：固体，有一定的熔点性状：固体，有一定的熔点。2.溶解性：几乎不溶于水，易溶于有机溶溶解性：几乎不溶于水，易溶于有机溶剂剂。碱金属盐易溶于水碱金属盐易溶于水，难溶于有机溶剂。，难溶于有机溶剂。第16页，此课件共64页哦3.酸性：酸性：n芳酸具游离羧基，呈酸性，其芳酸具游离羧基，呈酸性，其pKa在在36之间，属中等强度的酸或弱酸；之间，属中等强度的酸或弱酸；nX、NO2、OH等吸电子取代基存等吸电子取代基存在使酸性增强在使酸性增强。水杨酸水杨酸阿司匹林阿司匹林苯甲酸苯甲酸；nCH3、NH2等斥电子取代基存在使酸等斥电子取代基存在使酸性减弱性减弱。第17页，此课件共64页哦n邻位取代邻位取代间位、对位取代，尤其是邻位间位、对位取代，尤其是邻位取代酚羟基，由于形成分子内氢健，酸取代酚羟基，由于形成分子内氢健，酸性大为增强。性大为增强。n芳环取代的芳环取代的脂肪酸脂肪酸类，酸性较弱。如双氯类，酸性较弱。如双氯芬酸、布洛芬等。芬酸、布洛芬等。第18页，此课件共64页哦4.4.易水解易水解具有具有酯键和酰胺键酯键和酰胺键的药物均可发生水解。的药物均可发生水解。可用剩余碱量法测定含量，如美洛昔康。可用剩余碱量法测定含量，如美洛昔康。5.5.紫外、红外紫外、红外特征吸收光谱特征吸收光谱分子中具有苯环和分子中具有苯环和特征官能团，特征官能团，具有紫外和具有紫外和红外特征吸收红外特征吸收。6.6.基团或元素特性基团或元素特性酚羟基、酚羟基、芳伯氨基芳伯氨基、卤素、硫元素等。、卤素、硫元素等。第19页，此课件共64页哦 2 鉴别试验鉴别试验一、与一、与三氯化三氯化铁的反应铁的反应 1.水杨酸水杨酸反应反应紫堇色紫堇色OHOHOFeCl3OOOFeOH+3HClH2Oa.反应极为灵敏。反应极为灵敏。b.反应适宜的反应适宜的pH值为值为46，在强酸性下配合，在强酸性下配合 物分解。物分解。第20页，此课件共64页哦阿司匹林阿司匹林OCOCH3COOHH2OCOOHOHCH3COOH+Fecl3紫堇色紫堇色配位化合物配位化合物水解后鉴别水解后鉴别第21页，此课件共64页哦OHNHCOCH3FeCl3ONHCOCH3+3HCl33Fe+对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 蓝紫色蓝紫色 2.酚羟基反应酚羟基反应第22页，此课件共64页哦二、缩合反应二、缩合反应OCH3HOOCNHNH2NO2NO2NNHO2NNO2+硫酸二硝基苯肼二硝基苯肼酮洛芬酮洛芬腙腙橙色橙色第23页，此课件共64页哦三三、重氮化偶合反应、重氮化偶合反应芳香第一氨芳香第一氨的反应的反应NaNO2NaOH-萘酚萘酚 Ar-N2+Cl-Ar-N=N-ArHClAr-NH2 重氮盐重氮盐偶合偶合红色红色对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚贝诺酯贝诺酯第24页，此课件共64页哦贝诺酯贝诺酯水解水解重氮化重氮化偶合偶合第25页，此课件共64页哦紫色吲哚美辛硫酸重铬酸钾黄色绿色盐酸亚硝酸钠四四、氧化反应、氧化反应甲芬那酸 黄色(绿色荧光)(JP13)K2Cr2O7 深蓝色棕绿色 H2SO4 第26页，此课件共64页哦五、水解反应五、水解反应1.阿司匹林阿司匹林酯结构水解酯结构水解第27页，此课件共64页哦2.双水杨酯双水杨酯双水杨酯双水杨酯NaOH煮沸水杨酸钠水杨酸钠稀HCl水杨酸水杨酸（白色）（白色）沉淀在醋酸铵沉淀在醋酸铵试液中可溶解试液中可溶解第28页，此课件共64页哦六、特征元素的分析六、特征元素的分析1.氯元素氯元素双氯芬酸钠双氯芬酸钠+碳酸钠碳酸钠 炽灼灰化炽灼灰化 加水煮沸加水煮沸过滤过滤 滤液显氯化物鉴别反应滤液显氯化物鉴别反应2.硫元素硫元素美洛昔康于试管中炽灼，产生的气体能使湿美洛昔康于试管中炽灼，产生的气体能使湿润的醋酸铅试纸显黑色。润的醋酸铅试纸显黑色。第29页，此课件共64页哦1.紫外分光光度法紫外分光光度法最大吸收波长（和最大吸收波长（和/或最小吸收波长）或最小吸收波长）吸光度吸光度法法吸光度比值吸光度比值法法七七、光谱法光谱法第30页，此课件共64页哦对照图谱对照对照图谱对照药品红外光谱集药品红外光谱集水杨酸的红外吸收光谱图水杨酸的红外吸收光谱图2.红外分光光度法红外分光光度法第31页，此课件共64页哦八、薄层色谱法八、薄层色谱法比较供试品溶液与对照品溶液的比移值比较供试品溶液与对照品溶液的比移值九、九、HPLC比较供试品溶液与对照品溶液的保留时间比较供试品溶液与对照品溶液的保留时间第32页，此课件共64页哦 3 特殊杂质检查特殊杂质检查阿司匹林中阿司匹林中游离水杨酸及有关物质的游离水杨酸及有关物质的检查检查1.阿司匹林中游离阿司匹林中游离水杨酸水杨酸的检查的检查来源：生产过程中乙酰化不完全来源：生产过程中乙酰化不完全，或贮藏过程中或贮藏过程中 水解产生水解产生。4223SOHOCOCH乙酰化乙酰化7075COOHOHCOOHOCOCH3第33页，此课件共64页哦ChP2005方法：方法：铁盐铁盐比色法比色法（稀硫酸铁铵（稀硫酸铁铵 ）原理：阿司匹林结构中无酚羟基原理：阿司匹林结构中无酚羟基，不与高铁盐反应不与高铁盐反应;水杨酸有酚羟基水杨酸有酚羟基，则可与高铁反应呈则可与高铁反应呈紫堇色紫堇色。缺点：供试品溶液制备过程中阿司匹林可水解生成缺点：供试品溶液制备过程中阿司匹林可水解生成 新的游离水杨酸。新的游离水杨酸。ChP2010采用采用HPLC检查。检查。原料药和制剂均需检查游离水杨酸，限量各不相同。原料药和制剂均需检查游离水杨酸，限量各不相同。第34页，此课件共64页哦2.阿司匹林中有关物质的检查阿司匹林中有关物质的检查n指除游离水杨酸外的合成原料苯酚及其他指除游离水杨酸外的合成原料苯酚及其他合成副产物。合成副产物。n色谱条件：与检查色谱条件：与检查“游离水杨酸游离水杨酸”的流动相的流动相不同。不同。n要求：除水杨酸峰外，其他各杂质峰面积要求：除水杨酸峰外，其他各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积（的和不得大于对照溶液主峰面积（0.5%）。第35页，此课件共64页哦第36页，此课件共64页哦第37页，此课件共64页哦第38页，此课件共64页哦 杂质对照品法杂质对照品法 方法：方法：供试品供试品供试品溶液供试品溶液 杂质对照品杂质对照品对照品溶液对照品溶液 第39页，此课件共64页哦供供试试品品对对照照品品第40页，此课件共64页哦 判断：供试品中所含杂质斑点不得判断：供试品中所含杂质斑点不得超过相应的杂质对照斑点。超过相应的杂质对照斑点。优点：同一物质，同一优点：同一物质，同一R Rf f值比较，准值比较，准确度高、直观性强。确度高、直观性强。缺点：需要杂质对照品。缺点：需要杂质对照品。第41页，此课件共64页哦 2.2.主成分自身对照法主成分自身对照法（高低浓度对比法）（高低浓度对比法）方法：方法：对照溶液一定量供试品溶液供试品溶液稀释溶剂溶解 S第42页，此课件共64页哦（）第43页，此课件共64页哦 判断：判断：供试品溶液所显杂质斑点不得深于对供试品溶液所显杂质斑点不得深于对照溶液的主斑点（或荧光强度）照溶液的主斑点（或荧光强度）第44页，此课件共64页哦4 含量测定含量测定n本类药物原料药的含量测定：酸碱滴定本类药物原料药的含量测定：酸碱滴定法法n制剂的含量测定：紫外制剂的含量测定：紫外-可见分光光度法可见分光光度法和和HPLC法法第45页，此课件共64页哦 一、酸碱滴定法一、酸碱滴定法 1.直接滴定法阿司匹林直接滴定法阿司匹林原理原理:阿阿司司匹林分子中有匹林分子中有游离羧基游离羧基，具弱酸性，可，具弱酸性，可用标准碱溶液直接滴定。用标准碱溶液直接滴定。第46页，此课件共64页哦方法方法:取本品约取本品约0.4g,精密称定精密称定,加加中性乙醇中性乙醇(对对 酚酞指示液显中性酚酞指示液显中性)20mL溶解后溶解后,加加酚酚 酞酞指示液指示液3滴滴,用用氢氧化钠氢氧化钠滴定滴定(0.1mol/L)滴定。每滴定。每 1ml的氢氧化钠滴定的氢氧化钠滴定(0.1mol/L)相当于相当于18.02mg的的C9H8O4。第47页，此课件共64页哦生成的钠盐是强碱弱酸盐，偏碱性。生成的钠盐是强碱弱酸盐，偏碱性。（2）指示剂为何选用）指示剂为何选用酚酞酚酞？讨论讨论:（1 1）溶剂为何使用）溶剂为何使用中性乙醇中性乙醇？使用乙醇：使用乙醇：a.使供试品易于溶解使供试品易于溶解;b.防止酯水解防止酯水解 使用中性乙醇：乙醇对酚酞显酸性，扣除乙醇的使用中性乙醇：乙醇对酚酞显酸性，扣除乙醇的酸性对测定的影响。酸性对测定的影响。（3）操作）操作事项事项滴定过程中不断振摇滴定过程中不断振摇，防止局部水解防止局部水解。（4）特点）特点 操作简便，但缺乏专属性，酸性物质有干扰。操作简便，但缺乏专属性，酸性物质有干扰。不适合不适合用于水杨酸含量较高的样品测定。用于水杨酸含量较高的样品测定。（5）滴定度的计算）滴定度的计算第48页，此课件共64页哦mlmg18.02Lg18.02 11molg180.16Lmol0.1CMbaT第49页，此课件共64页哦2.剩余量滴定法剩余量滴定法n美洛昔康有美洛昔康有烯醇式烯醇式结构，显酸性，可用氢结构，显酸性，可用氢氧化钠滴定液滴定，但在一般溶剂中溶解氧化钠滴定液滴定，但在一般溶剂中溶解性差。用定量过量的氢氧化钠滴定液溶解性差。用定量过量的氢氧化钠滴定液溶解后，用盐酸滴定液回滴定剩余的氢氧化钠。后，用盐酸滴定液回滴定剩余的氢氧化钠。第50页，此课件共64页哦美洛昔康美洛昔康n【含量测定】取本品约【含量测定】取本品约0.4g，精密称定，精，精密称定，精密加氢氧化钠滴定液（密加氢氧化钠滴定液（0.lmol/L)25ml，微微温溶解，放冷，加中性乙醇（对溴麝香草温溶解，放冷，加中性乙醇（对溴麝香草酚蓝指示液显中性）酚蓝指示液显中性）100ml，加溴麝香草，加溴麝香草酚酚蓝指示液蓝指示液10滴，用盐酸滴定液（滴，用盐酸滴定液（0.lmol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每每lml氢氧化钠滴定液（氢氧化钠滴定液（0.lmol/L)相当于相当于35.14mg的的 C14H13N3O4S2。第51页，此课件共64页哦3.水解后剩余滴定法阿司匹林水解后剩余滴定法阿司匹林原理原理:阿司匹林酯结构在碱性条件下易于水解阿司匹林酯结构在碱性条件下易于水解,加入加入定量过量定量过量的氢氧化钠滴定液的氢氧化钠滴定液,加热加热 水解水解,剩余的碱用硫酸滴定液回滴定。剩余的碱用硫酸滴定液回滴定。OCOCH3COOH2NaOHH2OOHCOONaCH3COONa2NaOH H2SO4 Na2SO4 2H2O第52页，此课件共64页哦方法：取本品约方法：取本品约1.5g，精密称定，置烧杯中，加氢，精密称定，置烧杯中，加氢氧化钠滴定液氧化钠滴定液(0.5mol/L)50.0ml，混合，缓缓煮沸，混合，缓缓煮沸10min 加加酚酞酚酞指示液，用硫酸滴定液指示液，用硫酸滴定液(0.25mol/L)滴定，并将滴定结果用滴定，并将滴定结果用空白试验空白试验校正。每校正。每lml的氢氧的氢氧化钠滴定液化钠滴定液(0.5mol/L)相当于相当于45.04mg的的C9H8O4。讨论：讨论：（1）为何做）为何做空白试验空白试验？如何操作？如何操作？氢氧化钠在加热时易吸收氢氧化钠在加热时易吸收CO2，生成碳酸盐。，生成碳酸盐。使测定结果偏高使测定结果偏高。不加入样品，其余操作步骤和加样一致。不加入样品，其余操作步骤和加样一致。（2）滴定度如何计算？）滴定度如何计算？第53页，此课件共64页哦%100VV%0WTF）（含量阿司匹林阿司匹林：氢氧化钠氢氧化钠=1:2 T=0.5180.161/2=45.04(mg/ml)F：硫酸滴定液的校正因子：硫酸滴定液的校正因子第54页，此课件共64页哦4.两步滴定法两步滴定法ChP2005 阿司匹林片阿司匹林片和肠溶片和肠溶片原理原理:阿司匹林片中加入少量稳定剂（酒石酸或枸橼阿司匹林片中加入少量稳定剂（酒石酸或枸橼酸）酸）,制剂过程中分解产物（水杨酸、醋酸）均消制剂过程中分解产物（水杨酸、醋酸）均消耗氢氧化钠。因此耗氢氧化钠。因此，不能采用直接滴定法不能采用直接滴定法，采用采用先先“中和中和”再再“水解滴定水解滴定”的两步滴定法。的两步滴定法。第55页，此课件共64页哦第一步第一步 中和中和酒石酸酒石酸枸橼酸枸橼酸水杨酸水杨酸醋酸醋酸+NaOH 酒石酸钠酒石酸钠枸橼酸钠枸橼酸钠水杨酸钠水杨酸钠醋酸钠醋酸钠不用于含量计算不用于含量计算COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O第56页，此课件共64页哦第二步第二步 水解后剩余滴定水解后剩余滴定 反应摩尔比为反应摩尔比为1 1+NaOH COONaCH3 定量过量定量过量 OHSONaSOHNaOH224242 剩剩余余OHCOONaOCOCH3COONa第57页，此课件共64页哦方法方法中和中和:取本品取本品10片，精密称定，研细，精密称取片粉适量片，精密称定，研细，精密称取片粉适量(约相当于阿司匹林约相当于阿司匹林0.3 g)，置锥形瓶中，加入置锥形瓶中，加入中性中性乙醇乙醇20ml，振摇使溶解振摇使溶解，加酚酞指示液加酚酞指示液3滴滴，滴加滴加氢氧化钠滴定液氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)至溶液至溶液显粉红色显粉红色。此时此时中和中和了存在的了存在的游离酸游离酸，阿司匹林阿司匹林也同时也同时成为成为钠盐钠盐。第58页，此课件共64页哦 水解和测定水解和测定:在中和后的供试品溶液中在中和后的供试品溶液中，精密加氢氧化精密加氢氧化钠滴定液钠滴定液(0.1mol/L)40ml，置水浴上加热置水浴上加热15min并时时振摇，并时时振摇，迅速放冷置室温迅速放冷置室温，用硫用硫酸滴定液酸滴定液(0.05mol/L)滴定滴定，结果用空白试结果用空白试验校正。每验校正。每 1ml氢氧化钠滴定液氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于相当于18.02 mg的的C9H8O4。第59页，此课件共64页哦 讨论讨论:（1）优点优点 消除了酸性杂质的干扰消除了酸性杂质的干扰（2）反应的摩尔比反应的摩尔比 阿司匹林阿司匹林:氢氧化钠氢氧化钠1:1 T=0.1180.16=18.02mg/ml（3）含量计算含量计算%100W%平均片重标示量含量样空FTVVF：硫酸滴定液的校正因子：硫酸滴定液的校正因子第60页，此课件共64页哦5.非水溶液滴定法非水溶液滴定法n吡罗昔康具有吡啶环，显碱性。吡罗昔康具有吡啶环，显碱性。n【含量测定】取本品约【含量测定】取本品约0.2g，精密称定，加，精密称定，加冰醋酸冰醋酸20ml使溶解，加结晶紫指示液使溶解，加结晶紫指示液1滴，滴，用高氯酸滴定液（用高氯酸滴定液（0.lmol/L)滴定至溶液显滴定至溶液显蓝绿色，并将滴定的结果用空蓝绿色，并将滴定的结果用空白白试验校正。试验校正。每每l ml 高高氯酸滴定液（氯酸滴定液（0.lmol/L)相当于相当于 33.14 mg的的C15H13N3O4S。第61页，此课件共64页哦二二、紫外、紫外-可见可见分光光度法分光光度法1.直接紫外直接紫外-可见可见分光光度法分光光度法原理原理:药物在药物在某一波长某一波长处有最大吸收，采用处有最大吸收，采用 对照品法对照品法或或吸收系数法吸收系数法进行含量测定。进行含量测定。%11CMEAC L第62页，此课件共64页哦USP（29）测定阿司匹林胶囊的含量。可）测定阿司匹林胶囊的含量。可将将阿司匹阿司匹林林与与水杨酸水杨酸和其他中性碱性杂质分离和其他中性碱性杂质分离。2.柱分配色谱紫外分光光度法柱分配色谱紫外分光光度法1.色谱柱的制备：色谱柱的制备：硅藻土硅藻土3g和和新制碳酸氢钠液（新制碳酸氢钠液（112）2ml的混的混合填充剂合填充剂第63页，此课件共64页哦2.对照溶液：用冰醋酸氯仿溶液（对照溶液：用冰醋酸氯仿溶液（1100）供试液：样品的氯仿溶液供试液：样品的氯仿溶液盐酸盐酸-甲醇（甲醇（150 ）3.样品上样、样品上样、氯仿洗氯仿洗涤涤 乙酰水杨酸和水杨酸成钠盐保留于柱上，不乙酰水杨酸和水杨酸成钠盐保留于柱上，不 被氯仿洗脱。氯仿可除去中性或碱性杂质。被氯仿洗脱。氯仿可除去中性或碱性杂质。第64页，此课件共64页哦