洞庭湖区域测土配方施肥中土壤有效磷测定方法研究.docx

洞庭湖区域测土配方施肥中土壤有效磷测定方法研究汤崇俭 肖应该 刘峰郭芬 杨薪羽精密度，平行测定结果的允许误差:测定值(P, mg/kg)允许差(P, mg/kg)<10绝对差值W 0.510-20绝对差值W 1.0>20相对相差& 5%下表：土壤有效磷含量mg/kgW1010-20，20土壤供磷水平低中等高Summary：研究说明，洞庭湖区域测土配方施肥中土壤有效磷含量的测定，宜采 用碳酸氢钠浸提-铝睇抗比色法。用该法测定土壤有效磷含量时，既要规范操作程序，又要注重影响检测结果的几个关键要素：土液比、温度、振荡频率、振3戴斌斌.测土配方施肥中土壤有效磷测定方法研究J.农业与技术，2014(9) ： 4-5.4高玲.土壤中有效磷的测定方法及考前须知J.现代畜牧科技，2011(6) ： 260.-全文完-荡时间、空白样和平行重复样、校准曲线、比色波长设定等，以保证检测数据 的精准性和科学性。Key：弱碱性土壤;有效磷；测定；研究洞庭湖区域土壤肥沃，雨量充分，渔业资源丰富，盛产优质稻米，是全国闻名 的鱼米之乡。土壤成土母质为近代河流冲积物和湖积物，土壤呈弱碱性， pH>7. 000 土壤有效磷也称速效磷，包括水溶性磷和弱酸性磷，其含量是土壤肥 力的重要指标之一，说明土壤的供磷能力，测定土壤的有效磷含量，在测土配 方施肥中，为合理分配和施用磷肥提供理论依据。1土壤样品的采集和处理土爆有效磷检测的目的是利用土壤样品的检测数据，分析在一定范围内土爆有 效磷的性质特征和含量，为农业生产中科学精准施肥提供数据支撑。土：«样品的采集和处理是土壤有效磷检测的一个重要环节，采集的样品必须有 代表性，必须使检测的数据能如实的代表该区域土壤的有效磷指标参数，因此 应选择有代表性的土壤进行采样，并根据土壤中有效磷的分布状况进行采样和 处理样品。根据土壤类型，肥力等级和地形等因素将取样范围分成假设干采样 点，使每个采样单元的土壤尽可能均匀一致。同时要保证有足够多的采样点， 能代表本单元的土壤特性，一般以采10-20个点为宜。1.1 土壤棣品的采集洞庭湖区域的土壤，耕作层差异性大，应按照“随机”“等量”和“多点混 合”的原那么进行采样。“随机”即每一个采样点都是任意决定的。“等量”是 要求每一点采取土样深度一致，采样量一致。“多点混合”是指把一个采样单 元内各点所采的土样均匀混合构成一个混合样品。因此，采样应注意以下几点：（1） 一般采用“S”形布点采样，但在地形变化小、采样单元面积不大的情况 下，也可采用梅花形布点采样。（2）采样点分布要均匀，防止在堆过肥料的地方及田展，沟边等特殊地形采 样。（3）采样点的取土深度及采样量均匀一致，土样上层与下层的比例要相同，采 样器应垂直入土到规定的深度，耕作层一般取样020cm为宜。（4）采样量以一个混合土样1000g左右为宜。（5）采集水稻土或湖沼土等烂泥土样时，可将所采集的样品放入盆中，用塑料 棍将各样点的烂泥搅拌均匀后再取出所需数量的样品。（6）采集的样品放入样品袋，用铅笔写好标签内外各具一张，注明采样地点、 日期、采样深度、土壤名称、编号及采样人等，同时做好采样记录。1.2 土壤样品的处理1. 2. 1样品风干（1）从野外采回的土壤样品要及时放在样品盘上，摊成薄薄的一层，置于干净 整洁的室内通风处自然风干，严禁曝晒，并注意防止酸、碱等气体及灰尘的污 染。风干过程中要经常翻动土样并将大土块捏碎以加速干燥，同时剔除土壤以 外的杂质。（2）风干后的土样按照检测分析要求研磨过筛，充分混匀后，装入样品瓶中备用。瓶内外各放标签一张，写明编号、采样地点、土壤名称、采样深度、样品 粒径、采样日期、采样人及制样时间、制样人等工程。制备好的样品要妥为贮 存，防止日晒、高温、潮湿和酸碱等气体的污染。全部检测分析工作结束，分 析数据核实无误后，试样一般还要保存三个月到半年，以备查询。少数有价值 需要长期保存的样品须保存于广口瓶中，用蜡封好口。风干样品的制作把土样平铺在制样板上，用木棍碾压，并将植物残体、石矿杂质等剔除干净， 压碎的土样要全部通过2mm孔径筛，未过筛的土粒必须重新碾压过筛，直至全 部土样通过2mm孔径筛为止。将过筛的土壤样品用干燥的塑料瓶中保存备用。2原理及方法用pH=8. 5的0. 50mol/L碳酸氢钠（NaHCO）溶液取理土壤样品，由于碳酸根的 同离子效应，提取液中的HCO通过电解作用可与土康溶液中的Ca生存CaCO沉 淀，这样即可提取土壤样品中的水溶性磷，又能抑制Ca的活性，使一定量活性 较大的Ca-P （磷酸钙盐）中的磷被浸出，同时也使一定活性的Fe-P （磷酸铁 盐）和A1-P （磷酸铝盐）中的磷通过水解作用而浸出。由于浸出液中Ca、Fe、 Al浓度较低，不会产生磷的次生沉淀，此外由于碳酸氢钠碱性溶液中存在着 OH, HCO, co等阴离子，有利于吸附态磷的置换。浸提液中的磷与铝睇抗显色 剂反响，生存磷相蓝，其颜色的深浅与磷的含量成正比，通过分光光度法进行 定量测定。土康样品浸出的磷含量与土液比，溶液温度，振荡时间及振荡频率 有关。经屡次实验说明，土液比为1： 20,浸提液温度为25（±1。（2、振荡时间 为30min±lmin,振荡频率为180r/min±20r/min,检测效果最为理想。碳酸氢钠浸提一铝睇抗比色法不仅适用于石灰性土壤，也适用于中性土壤和水稻 土壤中有效磷含量的测定。3主要仪器设备（1）分光光度计或紫外-可见分光光度计。（2）恒温（控温252±1。）往复式或旋转式振荡机，能满足 180r/min±20r/min的振荡频率或到达相同效果。（3）无磷滤纸。（4）带塞塑料瓶（200ml） o（5）三角瓶（50mK 150ml两种型号）。（6）容量瓶（25ml、100ml、1000ml 规格不等）。（7）移液管（10ml） o（8）漏斗。（9）天平（精确到0.001g） o4试剂制备（1）无磷活性炭：活性炭常含磷，应先做空白试验，检测有无磷存在，如所用 活性炭含磷，应先用1： 1盐酸溶液浸泡24h,然后移至平板漏斗抽气过滤，用 蒸储水淋洗到无CL-为止（约45次），再用0.50mol/L碳酸氢钠浸提剂浸泡 24h,在平板漏斗上抽气过滤，用少量蒸用水淋洗屡次，洗尽碳酸氢钠并至无磷 为止，烘干备用。（2）氢氧化钠溶液p （NaoH） =100g/L：称取10g氢氧化钠溶于100ml水中即可。(3)碳酸氢钠浸提剂P (NaHCO) =0. 50mol/L, pH=8. 5)：称取 42.0g 碳酸 氢钠(NaHCO)溶于900ml水中,用100g/L氢氧化钠溶液调节pH至8. 5 (用酸 度汁测定)，用水稀释定容至1L。贮于聚乙烯瓶中或玻璃瓶中，用瓶塞塞好。此溶液贮存期假设超过半个月，使用时需用氢氧化钠溶液重新校正pH值。(4)酒石酸睇钾溶液p ( KSbOCH 0HO) =3g/L：称取0. 3g酒石酸锚钾 溶于水中，稀释至lOOinl。(5)相睇贮备液：称取10. 0g铝酸镀(NH4) M0 4 H0溶于300nli约609水 中，冷却。另取181nli浓硫酸缓缓注入800nli水中，搅匀，冷却。然后将稀硫 酸注入铝酸铁溶液中，搅匀，冷却。再加入100ml 3g/L酒石酸镭钾溶液，最后 用水稀释至2L,盛于棕色瓶中备用.(6)钢睇抗显色剂：称取0.50g抗环血酸(C6H806左旋，旋光度+2122° ) 溶于100nli铝睇贮备液中。此溶液有效期不长，应用时现配，如贮于冰箱中(28),那么有效期为7do(7)磷标准贮备液p (P) =100ng/ml：称取经105下烘干2h的磷酸二氢 钾(优级纯)0. 4390g,用水溶解后，加入5nli浓硫酸，然后加水定容至 1000ml,该溶液放入冰箱可供长期使用。(8)磷标准溶液p (P) =5 ug/ml吸取5. 00ml磷标准贮备液于100ml容量瓶 中，用水定容。该溶液用时现配。5操作步骤样品前处理 称取通过2mm孔径筛的风干试样2. 50g (精确到0.01g)于干燥的200nli带塞塑 料瓶中。加入约1g无磷活性炭，加入252±11的碳酸氢钠浸提剂50ml,摇 匀，在25±1温度下，于振荡机上用180r/min±20r/min的频率振荡 30min±linin,立即用无磷滤纸过滤于干燥的150ml三角瓶中，弃去最初滤液 810ml,同时做空白试验。5.1 样品测定吸取滤液10.00ml于25ml容量瓶中，缓慢加入显示色剂5. 00ml,慢慢摇动, 排出C0后加水定容至刻度，充分搐匀。在室温高于20处放置30min,用1cm 光径比色皿在波长700nm处比色，测量吸光度。5.2 校准曲线的绘制吸取磷标准溶液p (P) =5ug/ml0.00, 0. 50, 1.00, 1.50, 2.00, 2. 50, 3.00ml于25ml容量瓶中,加入浸提10.00ml,显色剂5. 00ml,慢慢摇动，排 出C0后加水定容至刻度，充分摇匀。此系列溶液中磷的浓度依次为0.00, 0. 10, 0. 20, 0.3, 0. 40, 0.50, 0. 60 n g/ml 0 在室温高于 20处放置 30min 后，按上述样品待测液分析步骤、条件进行比色，用系列溶液的零浓度调节仪 器零点，测量吸光值，绘制校准线或计算回归方程。5.3 结果计算有效磷(P) mg/kg=P. V. D/ml0X1000式中：P一查校准曲线或求回归方程而得测定液中P的质量浓度，ug/ml；V一显色液体积,25ml；D一分取倍数，即试样提取液体积/显色时分取体积，本试验为50/10；10和1000分别将Ug换算成mg和将g换算为kg；M风干试样质量g。平行测定结果以算术平均值表示，保存小数点后一位。精密度，平行测定结果的允许误差：6考前须知6. 1玻璃器皿的洗涤1.1 .1常规洗涤法对于一般的玻璃器皿如烧杯、烧瓶、三角瓶、漏斗、塑料瓶等首先用自来水冲 洗，然后用毛刷蘸洗涤液刷洗，清水冲净洗涤液后，用纯洁水冲洗数次即可。1.2 1.2特殊洗涤法容量瓶、移液管等不宜刷洗的玻璃器皿，用稀盐酸泡23h,自来水洗涤，纯 净水冲洗。比色皿清洗，一般可用温热（4050）的2%的碳酸钠浸泡2h 后，清水洗涤，纯洁水冲洗即可。如采用超声波清洗机清洗，效果更佳。1.3 称量考前须知（1）调整天平水平；（2）预热 30min；（3）校准；（4）根据样品特性，采用差量法称量。1.4 检测数据出错 浸提滤液加入铝睇抗试剂后，产生大量的co气体，由于容器瓶口较小，气体 co不易逸出，易造成试液外喷导致检测数据出错。实际操作过程中一般采用将 lOmlNaHCO浸提滤液，5. 00ml铝镯抗显色剂和10. 00ml蒸储水准确加入50ml三 角瓶中，无需再定容进行显色的方法操作。特别要注意的是，加入铝镯抗显色 剂必须小心慢慢加入，同时充分摇动三角瓶，排尽CO气体，以防止co的存在 比照色结果造成影响。1.5 严格控制浸提温度用NaHCO3溶液浸提有效磷时，温度影响较大，应严格控制浸提温度。7质量保证和质量控制(1)校准曲线的相关系数应大于等于0.999。(2)每批次样品应检测35个平行样，样品数量少于10个时，至少要测定一 个平行样。(3)每批次样品应检测一个标准物质样，其测定值应在保证范围之内。每一批 次的样品均须做标准曲线，以确保数据的准确性，完整性，可比性。(4) 0.5mol/L的NaHCO测出土壤有效磷分级参考下表:Reference1程乐明，陈良，刘建雷，等.碳酸氢钠浸提-用睇抗比色法测定土壤有效磷 的考前须知现代农业科技，2009 (3) ： 143.2孙玉荣，谢春梅.碳酸氢钠提取-铝睇抗比色法测定土壤有效磷应注意的问题J.宁夏农林科技,2010 (5) ： 83.