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胚胎分割胚胎干细胞本讲稿第一页，共二十八页二、胚胎分割二、胚胎分割 阅读课本，思考以下问题：阅读课本，思考以下问题：（1）胚胎分割的概念）胚胎分割的概念（2）胚胎分割特点）胚胎分割特点（3）胚胎分割的理论基础）胚胎分割的理论基础（4）胚胎分割操作过程）胚胎分割操作过程本讲稿第三页，共二十八页优势优势:成倍增加胚胎数量，可快速繁殖良种畜。成倍增加胚胎数量，可快速繁殖良种畜。(一一)概念概念:采用采用机械方法机械方法将早期胚胎切割成将早期胚胎切割成2等份，等份，4等份或等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。本讲稿第四页，共二十八页 阅读课本阅读课本78页胚胎分割的发展简史想页胚胎分割的发展简史想一想早期胚胎能不能无限分割？一想早期胚胎能不能无限分割？不能，实践证明，采用胚胎分不能，实践证明，采用胚胎分割技术产生同卵多胚的可能性有限，割技术产生同卵多胚的可能性有限，目前以二分胚胎的移植效率最高。目前以二分胚胎的移植效率最高。本讲稿第五页，共二十八页（二）特点：（二）特点：后代具有相同的遗传物质，后代具有相同的遗传物质，因此胚胎分割可以看做动物无因此胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。性繁殖或克隆的方法之一。（三）理论基础（三）理论基础 动物胚胎细胞的全能性。动物胚胎细胞的全能性。本讲稿第六页，共二十八页问题探讨问题探讨用什么来分割?分割什么时期的胚胎?分割的具体操作?本讲稿第七页，共二十八页使用的仪器：使用的仪器：实体显微镜、显微操作仪实体显微镜、显微操作仪 分割刀、分割针分割刀、分割针选择胚胎：选择胚胎：发育良好的，形态正常的桑椹胚或囊胚发育良好的，形态正常的桑椹胚或囊胚注意注意:将内细胞团均等分裂将内细胞团均等分裂本讲稿第八页，共二十八页（四）胚胎分割的基本操作（四）胚胎分割的基本操作 选择良好的选择良好的桑椹胚桑椹胚或囊胚或囊胚移入培养皿中，移入培养皿中，用用分割针或分割刀片分割针或分割刀片将将其切开，吸出其中的半其切开，吸出其中的半个胚胎注入个胚胎注入空透明带中空透明带中或直接移植给受体。或直接移植给受体。本讲稿第九页，共二十八页 对囊胚阶段的胚胎进行对囊胚阶段的胚胎进行分割时，为什么要将内分割时，为什么要将内细胞团均等分割细胞团均等分割?影响分割后胚胎的恢复和进一影响分割后胚胎的恢复和进一步发育步发育（若分割时不能将内细胞若分割时不能将内细胞团均等分割，会出现含内细胞团团均等分割，会出现含内细胞团多的部分正常发育的能力强，少多的部分正常发育的能力强，少的部分发育受阻或发育不良，甚的部分发育受阻或发育不良，甚至不能发育等问题。至不能发育等问题。）本讲稿第十页，共二十八页.半裸胚直接移植,均等,为什么只能2份.还存在什么问题在显微镜下切割胚胎在显微镜下切割胚胎本讲稿第十一页，共二十八页（五）胚胎分割的基本过程（五）胚胎分割的基本过程胚胎移入培养液胚胎移入培养液分割胚胎（机械法、酶处理）分割胚胎（机械法、酶处理）移植胚胎给受体移植胚胎给受体着床产仔着床产仔本讲稿第十二页，共二十八页胚胎分割技术的缺陷胚胎分割技术的缺陷（1）刚出生动物的体重偏低，毛色和斑纹还）刚出生动物的体重偏低，毛色和斑纹还存在差异；存在差异；（2）采用胚胎分割技术产生同卵多胎的）采用胚胎分割技术产生同卵多胎的可能性是有限的。可能性是有限的。胚胎分割技术的应用胚胎分割技术的应用:为转基因技术、性别控制技术提供活胚为转基因技术、性别控制技术提供活胚材料。材料。本讲稿第十三页，共二十八页提醒提醒 试管婴儿试管婴儿(动物动物)技术为技术为有性生殖，有性生殖，胚胎分割移植为胚胎分割移植为无性生殖无性生殖。胚胎移植是有性生殖还是无性生殖胚胎移植是有性生殖还是无性生殖取决于胚胎是由受精卵形成的还是取决于胚胎是由受精卵形成的还是核移植技术形成重组细胞发育而成的。核移植技术形成重组细胞发育而成的。本讲稿第十四页，共二十八页三三.胚胎干细胞胚胎干细胞阅读课本，思考以下问题：阅读课本，思考以下问题：（1）什么是胚胎干细胞？）什么是胚胎干细胞？胚胎干细胞的来源。胚胎干细胞的来源。（2）胚胎干细胞的特性。）胚胎干细胞的特性。（3）胚胎干细胞的应用。）胚胎干细胞的应用。本讲稿第十五页，共二十八页（一）干细胞（一）干细胞 1.1.概念：概念：干细胞是一种具有多干细胞是一种具有多项分化潜能和自我复制、项分化潜能和自我复制、更新能力的更新能力的原始未分化原始未分化细胞，细胞，是形成哺乳类各是形成哺乳类各种组织器官的祖宗细胞。种组织器官的祖宗细胞。本讲稿第十六页，共二十八页多能、专能.全能细胞全能细胞2.2.分类：分类：（1 1）.根据来源和个体发育过程中先后次序不同，根据来源和个体发育过程中先后次序不同，干细胞可分为：干细胞可分为：胚胎干细胞胚胎干细胞和和成体干细胞组织干细胞成体干细胞组织干细胞 本讲稿第十七页，共二十八页分类全能干细胞全能干细胞（胚胎干细胞）（胚胎干细胞）桑椹胚及以前（如受精卵）桑椹胚及以前（如受精卵）由内细胞团细胞、原始性腺细胞分离出来由内细胞团细胞、原始性腺细胞分离出来能发育成完整个体能发育成完整个体多能干细胞多能干细胞(成体干细胞成体干细胞)能分化出动物体内的多种组织（造血干细胞）能分化出动物体内的多种组织（造血干细胞）专能干细胞专能干细胞如成肌细胞、皮肤生发层细胞等如成肌细胞、皮肤生发层细胞等能分化出特定的（一种或两种）组织能分化出特定的（一种或两种）组织.分别指什么,分化程度,潜能；核全能性；目前初始化.应用（2 2）.按照分化潜能大小来分类按照分化潜能大小来分类本讲稿第十八页，共二十八页3.3.干细胞可以通过以下四个途径获得：干细胞可以通过以下四个途径获得：(1)(1)从体外培养的胚胎获得；从体外培养的胚胎获得；(2)(2)从早期流产的胎儿中获得；从早期流产的胎儿中获得；(3)(3)从克隆的胚胎中获得；从克隆的胚胎中获得；(4)(4)从成体中获得。从成体中获得。本讲稿第十九页，共二十八页.特点1 1、概念：由、概念：由 或或 _ _ 中分离出中分离出来的一类细胞。简称来的一类细胞。简称ESES或或EKEK细胞。细胞。早期胚胎早期胚胎原始性腺原始性腺（二）胚胎干细胞（二）胚胎干细胞本讲稿第二十页，共二十八页2 2、特点：、特点：形态：形态：体积小、细胞核大、核仁明显体积小、细胞核大、核仁明显功能：功能：具有具有发育的全能性发育的全能性，可以分化成任何一种组，可以分化成任何一种组织。织。另外另外 体外培养，体外培养，可以增殖而不发生分化可以增殖而不发生分化。可冷冻保。可冷冻保存，存，进行遗传改造进行遗传改造.全能细胞本讲稿第二十一页，共二十八页3 3、主要用途、主要用途（利用（利用ESES细胞可以被诱导形成新的组织细胞，细胞可以被诱导形成新的组织细胞，移植移植ES细细胞胞可以使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常）可以使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常）（1 1）.ES.ES细胞可用于治疗人类的某些顽症细胞可用于治疗人类的某些顽症（2 2）.体外诱导分化，培育成组织器官，用于体外诱导分化，培育成组织器官，用于器官移植器官移植（3 3）.对对ESES细胞的培养和诱导，为揭示细胞的培养和诱导，为揭示细胞分化细胞分化和细胞凋亡和细胞凋亡的机理提供了有效手段的机理提供了有效手段本讲稿第二十二页，共二十八页练习练习1.1.下列有关动物胚胎移植的叙述中，错误下列有关动物胚胎移植的叙述中，错误的是（的是（）A.A.受孕母畜体内的受精卵或胚胎均能移植受孕母畜体内的受精卵或胚胎均能移植B.B.受体母畜必须处于与供体母畜同步发情的受体母畜必须处于与供体母畜同步发情的状态状态C.C.超数排卵技术要使用一定的激素超数排卵技术要使用一定的激素D.D.试管婴儿只是受精及早期卵裂过程在试试管婴儿只是受精及早期卵裂过程在试管中进行管中进行A本讲稿第二十三页，共二十八页2.2.下列对于优良种畜的胚胎移植的说法不正确下列对于优良种畜的胚胎移植的说法不正确的是（的是（）A.A.供体母牛必须是同一物种的良种供体母牛必须是同一物种的良种B.B.受体母牛必须是同一物种的良种受体母牛必须是同一物种的良种C.C.供体公牛必须是同一物种的良种供体公牛必须是同一物种的良种D.D.受体母牛可以是同一物种的一般健康牛受体母牛可以是同一物种的一般健康牛B本讲稿第二十四页，共二十八页3.3.供体的胚胎移植到受体后，游离的胚胎在发供体的胚胎移植到受体后，游离的胚胎在发育过程中形成胎盘与受体相连，并通过胎盘育过程中形成胎盘与受体相连，并通过胎盘与受体的血液进行物质交换。以下说法正确与受体的血液进行物质交换。以下说法正确的是（的是（）A.A.受体是为供体胚胎提供发育的条件受体是为供体胚胎提供发育的条件B.B.受体与胚胎血型应相同，否则会发生免疫排受体与胚胎血型应相同，否则会发生免疫排斥反应斥反应C.C.受体与胚胎血液混融在一起受体与胚胎血液混融在一起D.D.胚胎心肺功能都能正常运行胚胎心肺功能都能正常运行A本讲稿第二十五页，共二十八页 4.4.利用胚胎干细胞治疗肝衰竭，实现此利用胚胎干细胞治疗肝衰竭，实现此过程的重要原因是（过程的重要原因是（）A.A.细胞分裂细胞分裂 B.B.细胞特化细胞特化 C.C.细胞分化细胞分化 D.D.细胞增殖细胞增殖C本讲稿第二十六页，共二十八页对供、受体母畜进对供、受体母畜进行选择，并进行同行选择，并进行同期发情处理期发情处理配种或人工授精配种或人工授精收集胚胎收集胚胎胚胎移植胚胎移植对受体母畜进行对受体母畜进行是否妊娠的检查是否妊娠的检查本讲稿第二十七页，共二十八页（一）思考与探究（一）思考与探究 P81（2）应该怎样选择供体公、母牛和受体母牛？在）应该怎样选择供体公、母牛和受体母牛？在中，中，为什么要用促性腺激素处理供体母牛，在促性腺激素处为什么要用促性腺激素处理供体母牛，在促性腺激素处理供体母牛前，为什么需要对供体和受体母牛进行同期理供体母牛前，为什么需要对供体和受体母牛进行同期发情处理？发情处理？答：答：供体公、母牛应具有人类所需的优良遗传性状供体公、母牛应具有人类所需的优良遗传性状的个体，受体母牛必须具有正常的孕育、生殖后代的能的个体，受体母牛必须具有正常的孕育、生殖后代的能力力；用促性腺激素处理供体母牛是为了引起超数排卵，用促性腺激素处理供体母牛是为了引起超数排卵，可以获得较多的胚胎；可以获得较多的胚胎；进行同期发情处理，才能使它们的生理条件达到同进行同期发情处理，才能使它们的生理条件达到同步或一致，使供体的胚胎移入受体后有相同或相似的生步或一致，使供体的胚胎移入受体后有相同或相似的生存条件。存条件。本讲稿第二十八页，共二十八页