实验一微生物细胞的计数幻灯片.ppt

实验一微生物细胞的计数第1页，共13页，编辑于2022年，星期五目的要求目的要求 1.1.了了解解血血球球计计数数板板的的结结构构及及计计数数原原理。理。2 2、掌掌握握使使用用血血球球计计数数板板进进行行微微生生物计数的方法。物计数的方法。第2页，共13页，编辑于2022年，星期五实验原理实验原理测测定定微微生生物物数数量量方方法法很很多多，通通常常采采用用的的有有显显微微镜镜直直接计数法、平板计数法和光电比浊计数法。接计数法、平板计数法和光电比浊计数法。显微镜直接计数法显微镜直接计数法将将小小量量待待测测样样品品的的悬悬浮浮液液置置于于一一种种特特别别的的具具有有确确定定面面积积和和容容积积的的载载玻玻片片上上，又又称称血血球球计计数数板板，于于显显微微镜镜下下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。直接计数的一种简便、快速、直观的方法。第3页，共13页，编辑于2022年，星期五血球计数扳的构造血球计数扳的构造第4页，共13页，编辑于2022年，星期五血球计数扳的构造血球计数扳的构造a.平面图(中间平台分为两半，各刻有一个方格网)b.侧面图(中间平台与盖玻片之间有高度为0.1毫米的间隙)第5页，共13页，编辑于2022年，星期五 血血球球计计数数板板计计数数网网的的分分区区和和分分格格 （16251625）第6页，共13页，编辑于2022年，星期五25 16右右下下、左左下下左上左上计数时计数时右上右上中央格第7页，共13页，编辑于2022年，星期五血球计数板的计算方法血球计数板的计算方法血血球球计计数数板板上上刻刻有有一一长长宽宽各各为为1 1毫毫米米的的方方形形大大格格，其其体体积积为为0.1mm0.1mm3 3。计计数数板板有有两两种种刻刻度度，一一种种是是每每大大格格分分为为1616个个中中格格，而而每每中中格格又又分分2525个个小小格格，每每大大格格为为16251625小小格格=400=400小小格格，而而另另一一种种，则则是是每每大大格格分分为为2525个个中中格格，而而每每中中格格又又分分为为1616个个小小格格，则则每每大大格格为为2516=4002516=400小格（计数板上的标识为小格（计数板上的标识为XBK25XBK25）计计数数时时，如如果果使使用用16格格25格格规规格格的的计计数数室室，要要按按对对角角线线位位，取取左左上上、右右上上、左左下下、右右下下4个个中中格格（即即100个个小小格格）的的酵酵母母菌菌数数。如如果果使使用用25格格16格格规规格格的的计计数数室室除除了了取取其其4个个对对角角方方位位外外，还还需需再再数数中中央央的的一一个个中中格格(即即 80个个小小方方格格)的的 酵酵 母母 菌菌 数数。(6)当当遇遇到到位位于于大大格格线线上上的的酵酵母母菌菌，一一般般只只计计数数大大方方格格的的上上方方和右方线上的酵母细胞和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞或只计数下方和左方线上的酵母细胞)。第8页，共13页，编辑于2022年，星期五计数公式计数公式(1)1625的血球计数板计算公式：酵母细胞数ml=（100小格内酵母细胞个数100）40010000稀释倍数(2)25x16的血球计数板计算公式：酵母细胞数ml=（80小格内酵母细胞个数80）40010000稀释倍数第9页，共13页，编辑于2022年，星期五实验器材实验器材显微镜、血球计数板、酵母菌液、盖玻显微镜、血球计数板、酵母菌液、盖玻片、吸管、吸水纸。片、吸管、吸水纸。第10页，共13页，编辑于2022年，星期五操作步骤操作步骤1.1.镜检计数室镜检计数室 对计数板进行镜检。若有污物，则用自对计数板进行镜检。若有污物，则用自来水冲洗，用电吹风吹干后来水冲洗，用电吹风吹干后 才能才能 进行计数。进行计数。2.2.加样品加样品 在血球计数板上盖上盖玻片在血球计数板上盖上盖玻片,用滴管将摇匀的用滴管将摇匀的酵母菌液由盖玻片边的小槽滴一小滴酵母菌液由盖玻片边的小槽滴一小滴,菌液会自动进入计数室，菌液会自动进入计数室，静置静置5 5分钟。分钟。3.3.计数计数 将血球计数板置于载物台上，先用低倍镜找到计将血球计数板置于载物台上，先用低倍镜找到计数室的位置，再换高倍镜计数。数室的位置，再换高倍镜计数。2525个中格的个中格的取计数板四角和中取计数板四角和中间位置的五个中方格计菌数。重复计间位置的五个中方格计菌数。重复计2-32-3次，取其平均值，按次，取其平均值，按公式计算每毫升酵母菌液中菌体的个数。公式计算每毫升酵母菌液中菌体的个数。4.4.清洗血球计数板清洗血球计数板 计数后将血球计数板用自来水冲洗计数后将血球计数板用自来水冲洗干净，勿用硬物刷，吹干后镜检。若不干净，则必须重复洗干净，勿用硬物刷，吹干后镜检。若不干净，则必须重复洗涤干净为止。涤干净为止。第11页，共13页，编辑于2022年，星期五结果记录 第一个中格第二个中格第三个中格第四个中格第五个中格第一次测 定第二次测 定第三次测 定平 均第12页，共13页，编辑于2022年，星期五思考题思考题1.1.使用血球计数板应注意什么问题使用血球计数板应注意什么问题?2.2.试分析影响本实验结果的误差来源并提试分析影响本实验结果的误差来源并提出改进措施出改进措施第13页，共13页，编辑于2022年，星期五