体外分析应用讲稿.ppt

体外分析应用体外分析应用第一页，讲稿共九十四页哦2 待测物质浓度与检测手段待测物质浓度与检测手段 临床化学分析临床化学分析10-1210-910-610-310-0pg/mLng/mL g/mLmg/mLg/L免疫分析免疫分析Therapeutic DrugsThyroid HormoneFertility HormoneAllergyCancer MarkersInfectious DiseaseVitaminsSerum Proteins常量常量微量微量超微量超微量第二页，讲稿共九十四页哦3体外分析技术体外放射分析体外放射分析体外非放射分析体外非放射分析放射性竞争结放射性竞争结合分析合分析放射性非竞放射性非竞争结合分析争结合分析放射免疫分析放射免疫分析放射免疫分析放射免疫分析 (radioimmunoassay,RIA)RIA)免疫放射分析免疫放射分析免疫放射分析免疫放射分析酶免疫分析酶免疫分析酶免疫分析酶免疫分析化学发光免疫分析化学发光免疫分析化学发光免疫分析化学发光免疫分析荧光免疫分析荧光免疫分析荧光免疫分析荧光免疫分析(immunoradiometric assay,IRMA)IRMA)(EIA)(EIA)(CLIA)(CLIA)(FIA)(FIA)（一）分类:第三页，讲稿共九十四页哦1 1、放射免疫分析技术、放射免疫分析技术 放射免疫技术是利用放射性核素可探测的灵敏性、精确性与抗原抗体反应的特异性相结合的一类免疫测定技术。放射免疫分析（radioimmunoassay，RIA）以标记抗原与反应系统中未标记抗原竞争结合特异性抗体来测定待检样品中抗原量。免疫放射分析（immunoradiometric assay，IRMA）以过量标记抗体与抗原非竞争结合，采用固相免疫吸附载体分离游离和结合标记抗体。第四页，讲稿共九十四页哦1 1、放射免疫分析技术、放射免疫分析技术n优点：超微量分析技术，具有很高的精密度、灵敏度和准确度n缺点：反应条件要求一般，但该技术所用标记物有放射性，对人体有一定的危害，实验人员应加强防护。同时试剂半衰期较短，试剂必须在半衰期内用完，否则试剂会作废，这需要科学地做好试剂计划。另外反应过程中抗原的含量低到一定程度时会出现不确定因素，使灵敏度受到限制。第五页，讲稿共九十四页哦2 2、酶标记免疫分析技术、酶标记免疫分析技术 是用酶分子代替放射性核素标记抗原或抗体分子，进行竞争性或非竞争性免疫分析的技术，酶联免疫吸附分析法（ELISA）现在被广泛应用于实验诊断中。原理原理：在抗体上连接酶分子，进行夹心法免疫反应，反应结束后，将结合的复合物和游离抗体分开，取结合部分，利用酶的催化活性，由结合部分上的酶将特定的底物转化为特定的颜色，利用分光光度计测定，颜色的深浅与酶的量呈正比，而酶的量又和复合物的量呈正比，由此得到待测物的量。常用的酶是辣根过氧化物酶常用的底物是四甲基联苯胺第六页，讲稿共九十四页哦2 2、酶标记免疫分析技术、酶标记免疫分析技术n优点：普通的分光光度计就可以工作，仪器的灵敏度较放免仪有所降低，但酶分子可形成大量有色产物，会对灵敏度有所补偿。因此ELISA 法也具有很高的灵敏度。同时本方法没有应用放射线，避免了放射线对人员的危害。n缺点：可能会出现“倒钩”现象，使实验出现假阴性或抗原、抗体的实际含量减低。另外，ELISA 法实验是一次性的，显色反应往往需要在一定时间内读数，无法重复测量。第七页，讲稿共九十四页哦3 3、时间分辨荧光免疫分析技术、时间分辨荧光免疫分析技术原理：原理：待测物通过免疫反应形成的复合物上带有镧系元素（常用铕元素）。铕元素经紫外线激发后会发出长波荧光。在免疫反应结束后需向反应体系中加入一个“荧光增强剂”，提高荧光强度。上述激发可以反复激发，这就大大增强信号强度。反应过程直到荧光衰减到很低水平，停止记录。荧光强度与待测物的浓度相关，通过计算机数据处理系统可以给出待测物的浓度。标记物：由镧系元素通过一定的连接剂与抗体蛋白相连而组成。第八页，讲稿共九十四页哦3 3、时间分辨荧光免疫分析技术、时间分辨荧光免疫分析技术n优点：信号强，测量时间短，具有较高灵敏度。n缺点：标记物和荧光增强剂制备难度大，且荧光增强剂含一定有毒物质，废物应该严格处理。第九页，讲稿共九十四页哦4 4、化学发光免疫分析技术、化学发光免疫分析技术n免疫化学发光分析技术（chemiluminescence immunoassay，CLIA）n化学发光酶免疫分析技术（chemiluminescence enzyme immunoassay，CLEIA）n电化学发光免疫分析技术（electrochemiluminescence immunoassay，ECLIA）第十页，讲稿共九十四页哦4 4、化学发光免疫分析技术、化学发光免疫分析技术免疫化学发光分析技术免疫化学发光分析技术 用吖啶酯直接标记抗体(抗原)，与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-吖啶酯标记抗体复合物，这时只需加入氧化剂和pH纠正液成为碱性环境，吖啶酯即可在不需要催化剂的情况下分解、发光。由集光器和光电倍增管接收、记录单位时间内所产生的光子能，这部分光的积分与待测抗原的量成正比，可从标准曲线上计算出待测抗原的含量。第十一页，讲稿共九十四页哦4 4、化学发光免疫分析技术、化学发光免疫分析技术发光发光Y Y Y YY Y Y YY Y Y Y磁微粒磁微粒被测抗原被测抗原+抗体抗体+带丫啶酯标带丫啶酯标记物抗体记物抗体Y Y Y YY Y Y YY Y Y YY Y Y YY Y Y YY Y Y YY Y Y YY Y Y YY Y Y YY Y Y Y冲洗后冲洗后（1 1）加入加入H H2 2O O2 2（pH10）第十二页，讲稿共九十四页哦4 4、化学发光免疫分析技术、化学发光免疫分析技术 化学发光酶免疫分析技术化学发光酶免疫分析技术 用参与催化某一化学发光反应的酶来标记抗原或抗体，在与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物，经洗涤后，加入底物(发光剂)，酶催化和分解底物发光，由光量子阅读系统接收，光电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大，再把它们传送至计算机数据处理系统，计算出测定物的浓度。标记物标记物 发光剂发光剂辣根过氧化物酶（HRP）鲁米诺 碱性磷酸酶 AMPPD第十三页，讲稿共九十四页哦辣根过氧化物酶标记化学发光免疫分析示意图辣根过氧化物酶标记化学发光免疫分析示意图 第十四页，讲稿共九十四页哦碱性磷酸酶标记化学发光免疫分析示意图碱性磷酸酶标记化学发光免疫分析示意图 第十五页，讲稿共九十四页哦4 4、化学发光免疫分析技术、化学发光免疫分析技术电化学发光免疫分析技术 以电化学发光剂三联吡啶钌标记抗体(抗原)，以三丙胺(TPA)为电子供体，在电场中因电子转移而发生特异性化学发光反应，它包括电化学和化学发光两个过程。第十六页，讲稿共九十四页哦电化学发光免疫分析示意图电化学发光免疫分析示意图第十七页，讲稿共九十四页哦4 4、化学发光免疫分析技术、化学发光免疫分析技术相比于其他标记免疫技术的优势：1.1.灵敏度高，特异性强：灵敏度高，特异性强：可实现ng甚至pg级微量待检物质的定量检测，单克隆技术的完善为检测的特异性提供了良好的保证。2.2.线性范围宽：线性范围宽：可满足103106数量级内的绝对定量检测需要，保证了临床应用中的简便性，避免了实验中的稀释误差。3.3.标记物稳定，试剂有效期长：标记物稳定，试剂有效期长：商业化的化学发光免疫中的标记物稳定，试剂一般均可达1年以上的有效期。4.4.自动化程度高，检测菜单齐全：自动化程度高，检测菜单齐全：方便临床应用，大大提高了临床检测的稳定性。第十八页，讲稿共九十四页哦几种标记几种标记/检测技术灵敏度的比较检测技术灵敏度的比较酶标酶标荧光荧光放免放免发光发光灵敏度灵敏度(mol/L)10-1810-1510-1210-9第十九页，讲稿共九十四页哦几种标记几种标记/检测技术线性范围的比较检测技术线性范围的比较酶标酶标荧光荧光放免放免发光发光线性范围线性范围105104103102第二十页，讲稿共九十四页哦几种标记几种标记/检测试剂的有效期比较检测试剂的有效期比较酶标酶标荧光荧光放免放免发光发光有效期（月）有效期（月）有效期（月）有效期（月）1818181815151515121212129 9 9 96 6 6 63 3 3 30 0 0 0第二十一页，讲稿共九十四页哦试剂盒试剂盒仪器仪器特殊防护特殊防护治理污染治理污染三种免疫测定技术的成本及费用三种免疫测定技术的成本及费用三种免疫测定技术的成本及费用三种免疫测定技术的成本及费用放免放免酶标酶标发光发光第二十二页，讲稿共九十四页哦n统计方法分析放射免疫分析与化学发光技术各自优劣？如四格表卡方检验分析灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值？思考？第二十三页，讲稿共九十四页哦（二）肿瘤标志物及其临床意义（二）肿瘤标志物及其临床意义 目前尚未发现目前尚未发现100%特异性和特异性和100%灵敏度的肿瘤标灵敏度的肿瘤标 志物，志物，肿瘤与肿瘤标志物之间不是一一对应关系，它们只是相关性。肿瘤与肿瘤标志物之间不是一一对应关系，它们只是相关性。第二十四页，讲稿共九十四页哦理想的肿瘤标志物理想的肿瘤标志物n特异性100%n灵敏度100%n器官特异性n与肿瘤大小或分期有关n能进行疗效观察n与预后有关n可靠的预测价值第二十五页，讲稿共九十四页哦肿瘤的发生发展肿瘤的发生发展 正常组织细胞-间变-恶性变（肿瘤细胞）-不可见前期（3mm,肿瘤标志物异常）-可见前期（3mm，影像学异常）第二十六页，讲稿共九十四页哦肿瘤的发展及诊断期第二十七页，讲稿共九十四页哦肿瘤标志物在全球的应用情况肿瘤标志物在全球的应用情况第二十八页，讲稿共九十四页哦肿瘤标志物的分类（化学特性）癌胚抗原类标志物癌胚抗原类标志物 糖类抗原标记物糖类抗原标记物酶类标志物酶类标志物激素类标志物激素类标志物癌基因癌基因其他其他第二十九页，讲稿共九十四页哦肿瘤与肿瘤标记物肿瘤与肿瘤标记物n相同的肿瘤可能检测出多种不同的肿瘤标记物n相同的肿瘤标记物可能出现在不同的粘蛋白上nCA19-9和CA50已经在不同的粘蛋白核心上得到鉴定:nMUC-1,MUC-3。（Baeckstrom et al,1992和1995）n涎腺蛋白。（Baeckstrom et al,1995）n颌下腺粘蛋白n支气管肺泡粘蛋白第三十页，讲稿共九十四页哦 不同的肿瘤标记物可能出现在相同的粘不同的肿瘤标记物可能出现在相同的粘蛋白上在肿瘤细胞株中蛋白上在肿瘤细胞株中CA199,CA50CA199,CA50和和CA242CA242共同表达于共同表达于MUC-1MUC-1和诞腺蛋白中。和诞腺蛋白中。（Baeckstrom et al,1992Baeckstrom et al,1992）第三十一页，讲稿共九十四页哦n肿瘤标志物基本上不能对肿瘤定位。极少数肿瘤标志物如PSA，PAP（酸性磷酸酶），甲状腺球蛋白具器官特异性，但不具肿瘤特异性。第三十二页，讲稿共九十四页哦n通常不能进行确诊。n因为肿瘤标志物无足够的灵敏度，不能 排除假阴性结果。n本周蛋白(多发性骨髓瘤）、AFP（肝 癌）、-HCG（绒毛膜癌）和降钙素（甲状腺C-细胞癌）等有助确诊。第三十三页，讲稿共九十四页哦癌胚（胎)抗原 胚胎的某一时期表达的膜结合或可溶性成分，不存在于正常成人组织或其含量极微。第三十四页，讲稿共九十四页哦常见的癌胚胎抗原及其与肿瘤的关系常见的癌胚胎抗原及其与肿瘤的关系抗原名称特性相关肿瘤AFP糖蛋白，分子量70kD肝癌，性腺卵黄囊瘤CEA糖蛋白，分子量200-370kD结肠癌等消化道肿瘤、肺癌、乳腺癌胚胎硫糖抗原（FSA）含硫糖蛋白胃癌胰癌胎儿抗原（胰腺胚胎抗原，POA）糖蛋白胰腺癌（孕妇血清中也可出现）2微球蛋白糖蛋白，分子量200kD肝癌、胆管癌、胃癌、白血病及淋巴瘤等时相专一性胚胎抗原（SSEA-1）多种人类肿瘤（正常人除粒细胞和单核细胞外，皆不表达）Tenna Gen 抗原糖蛋白肿瘤患者血清含量增高（正常人5.0g/ml)第三十五页，讲稿共九十四页哦临床常用肿瘤标志物的组合临床常用肿瘤标志物的组合恶性肿瘤主要检测标志物相关标志物前列腺癌PSA,f-PSACEA,TPS,PAP睾丸癌AFPHCG,CEA,Ferritin乳腺癌CA15-3,CEACYFRA21-1,Her2/neu,TPS卵巢癌HE4（人附睾蛋白4）,CA125CA19-9,CEA,MESOMARK,TPS,AFP,HCG子宫颈癌SCCCA125,CEA,CYFRA21-1,TPA子宫内膜癌HE4CA125,CEA,CA19-9第三十六页，讲稿共九十四页哦临床常用肿瘤标志物的组合临床常用肿瘤标志物的组合恶性肿瘤主要检测标志物相关标志物小细胞肺癌NSE（神经元特异性烯醇化酶）,ProGRP（胃泌素释放肽前体)CYFRA21-1,CEA,Ferritin,TPS(组织特异性抗原)非小细胞肺癌CYFRA21-1CEA,SCC,CA125,TPS食管癌SCC,CYFRA21-1CEA结、直肠癌CEA,CA242CA19-9,CA72-4,TPS胰腺癌CA242,CA19-9CA50,CA72-4,CEA,Ferritin,TPA胃癌CEA,CA19-9,CA242,CA72-4TPS,CA50,Ferritin,EGFR,PG原发性肝癌AFPCEA,CA19-9,Ferritin,ATPS第三十七页，讲稿共九十四页哦人附睾上皮分泌蛋白4（HE4）甲胎蛋白是在胎儿血清中发现的一种转移性的甲种球蛋白。AFP主要由胚胎卵黄囊、胚胎肝细胞及其他内胚层分化的胃肠组织合成。n卵巢癌等患者AFP水平升高，68%-92%卵黄囊肿瘤患者也可见血清AFP上升。此外，胃癌、结直肠癌、胰腺癌、肺癌等均可发现AFP水平升高，但是升高水平均不及原发性肝癌患者。第三十八页，讲稿共九十四页哦人附睾上皮分泌蛋白4（HE4）癌胚抗原属于非器官特异性肿瘤相关抗原，首先从胎儿及结肠癌组织中发现。分泌CEA的肿瘤大多位于空腔脏器，如胃肠道、呼吸道、泌尿道等。正常情况下，CEA经胃肠道代谢，而肿瘤状态时的CEA则进入血清和淋巴循环，引起血清CEA异常增高。癌胚抗原（癌胚抗原（CEA）第三十九页，讲稿共九十四页哦人附睾上皮分泌蛋白4（HE4）C CEAEA的临床应的临床应用用（2）乳腺癌、腺胰癌、胆管癌、胃癌、食道癌、肺癌和泌尿系肿瘤等，阳性率50%-70%。（1）原发性结肠癌患者，CEA升高者占45%-90%。（3）术后CEA持续阳性，说明手术切除不完全或癌肿发生转移，提示病人预后较差或有复发的可能。第四十页，讲稿共九十四页哦人附睾上皮分泌蛋白4（HE4）（5）由于吸烟会影响血清CEA值，应用CEA作为辅助临床诊断时，需根据病人的症状、体征、其他检验结果，做出正确的诊断。（4）良性肿瘤、炎症和退行性疾病，如结肠息肉、溃疡性结肠炎、胰腺炎和酒精性肝硬化病人CEA也有部分升高，但远远低于恶性肿瘤，一般小于20g/L。第四十一页，讲稿共九十四页哦人附睾上皮分泌蛋白4（HE4）CA15-3是一种多形态上皮糖蛋白，为乳腺癌患者术后复发的最佳指标。妊娠三个月的孕妇可见中等程度升高。CA15-3存在于多种腺癌内，如乳腺癌、肺癌、胰腺癌及卵巢癌等。第四十二页，讲稿共九十四页哦人附睾上皮分泌蛋白4（HE4）癌抗原CA125属于一种与上皮性卵巢癌相关的高分子糖蛋白，表达于胚胎体腔上皮组织，存在于上皮性卵巢癌组织和病人的血清中。CA125主要用于辅助诊断恶性浆液性卵巢癌，上皮性卵巢癌，同时也是卵巢癌术后、化疗后疗效观察的指标。应持续动态的观察。第四十三页，讲稿共九十四页哦人附睾上皮分泌蛋白4（HE4）鳞状细胞癌抗原（squamous cell carcinoma antigen，SCCA）是一组属于丝氨酸/半胱氨酸蛋白酶抑制物家族的糖蛋白，分子量约为45KDa。SCCA由两组高度同源而生物学截然不同的基因产物组成-SCCA1和SCCA2。SCC参与正常和恶变时的蛋白分解调控。鳞状细胞癌抗原（鳞状细胞癌抗原（SCCASCCA）第四十四页，讲稿共九十四页哦人附睾上皮分泌蛋白4（HE4）（2）健康人群中的鳞状细胞恶性肿瘤的早期筛查。（1）子宫颈癌、肺癌、食道癌、头颈部肿瘤和外阴部肿瘤的诊断、手术或放化疗前后的疗效观察及复发预测。第四十五页，讲稿共九十四页哦人附睾上皮分泌蛋白4（HE4）CYFRA21-1是细胞角蛋白19（cytokeratins)的可溶性片段，目前主要用做肿瘤标志物，对肺癌的诊断有较大意义，是检测非小细胞肺癌的首选肿瘤标志物。此外，CYFRA21-1的浓度升高也可见于乳腺癌、食管癌和头颈癌等。第四十六页，讲稿共九十四页哦 前列腺特异性抗原（前列腺特异性抗原（PSA）n（prostate specific antigen，PSA）是前列腺的）是前列腺的特异性标记物特异性标记物属于器官特异性抗原，不具备肿瘤特异性属于器官特异性抗原，不具备肿瘤特异性n PSA属于酶类肿瘤标记物，具有糜蛋白酶属于酶类肿瘤标记物，具有糜蛋白酶 样和胰蛋白酶的活性样和胰蛋白酶的活性n PSA在正常男性含量小于在正常男性含量小于4 g/L第四十七页，讲稿共九十四页哦n游离游离f-PSAf-PSA在正常男性含量小于在正常男性含量小于1 1 g/Lg/Ln前列腺癌、前列腺增生、前列腺炎和前列腺损伤前列腺癌、前列腺增生、前列腺炎和前列腺损伤都会导致血清都会导致血清PSAPSA升高升高n血清血清 PSAPSA在男性其他正常组织中和患其他癌在男性其他正常组织中和患其他癌肿时血清肿时血清PSAPSA都不会升高。都不会升高。第四十八页，讲稿共九十四页哦肿瘤标记物的临床意义肿瘤标记物的临床意义n一般人群筛选 有限n在有症状的人群中作辅助诊断 可以n肿瘤分期 有限n预测预后 可以n监测治疗效果 可以n追踪疾病的复发 可以第四十九页，讲稿共九十四页哦（三）性激素相关指标（三）性激素相关指标第五十页，讲稿共九十四页哦激素分类激素分类n蛋白激素蛋白激素n促性腺激素释放激素(GnRH)n促黄体激素(LH)n促卵泡激素(FSH)n人绒毛膜促性腺激素(hCG)n抑制素(Inhibin)n泌乳素(Prolactin)n类固醇激素类固醇激素n雌性激素n雌酮(E1)n雌二醇(E2)n雌三醇(E3)n孕酮n雄性激素n睾酮n双氢睾酮(DHT)n雄烯二酮n雄酮n脱氢表雄酮(DHEA)n硫酸脱氢表雄酮(DHEA-S)第五十一页，讲稿共九十四页哦生殖内分泌激素的检测生殖内分泌激素的检测n内分泌失调疾病的诊断和管理n儿童时期n青春期n成年期n绝经期和更年期n不育和辅助生殖 n胎儿健康第五十二页，讲稿共九十四页哦性激素常用检测菜单性激素常用检测菜单妊娠相关激素人绒毛膜促性腺激素(hCG)内分泌状况评估 性激素六项促黄体激素(LH)促卵泡激素(FSH)泌乳素(Prolactin)孕酮睾酮雌二醇(E2)n唐氏三联筛查甲胎蛋白（AFP）人绒毛膜促性腺激素(hCG)雌三醇(E3)肾上腺皮质功能评估硫酸脱氢表雄酮(DHEA-S)第五十三页，讲稿共九十四页哦人体绒毛膜促性腺激素人体绒毛膜促性腺激素(hCG)n人体绒毛膜促性腺激素(hCG)是一种由胎盘产生的、结构与垂体激素FSH、TSH 和LH 类似的糖蛋白激素。n这些激素都含有相同的亚单位(MW 1500020000 道尔顿)，但亚单位不同，造成各自免疫学和生物学上的特异性第五十四页，讲稿共九十四页哦hCG功能n在怀孕早期维持黄体分泌功能n促使胎儿性腺的发育n促使胎儿胎盘产生类固醇激素第五十五页，讲稿共九十四页哦nhCG是怀孕的一种很好的标志物。健康个体和非孕个体的hCG 水平很低 70岁，只有高峰时的10-20%第七十五页，讲稿共九十四页哦硫酸脱氢表雄酮硫酸脱氢表雄酮(DHEA-S)的临床应用的临床应用n肾上腺皮质功能的指标n区别诊断 n多毛症(不正常毛发生长)n男性化现象(女性男性化)n多囊性卵巢疾病n肾上腺肿瘤n库辛氏综合症第七十六页，讲稿共九十四页哦广泛开展的产前筛查广泛开展的产前筛查孕中期第1522周筛查，组合测试主要包括：组合测试主要包括：nAFP+Total hCGnAFP+Free b-hCGnAFP+Total b-hCG+uE3nAFP+Total b-hCG+uE3+Inhibin-AnAFP+Total b-hCG+uE3+NAPnTotal b-hCG+Free a-hCG+Progesterone 预测风险 ONTD -开放性神经管缺陷Trisomy 21 唐氏综合症Trisomy 18 爱德华氏综合症第七十七页，讲稿共九十四页哦胎儿健康应用法则胎儿健康应用法则血清样品AFP升高hCG 正常uE3正常AFP 下降hCG 升高uE3 下降AFP 下降hCG 下降uE3 下降怀疑ONTD怀疑 Trisomy 21怀疑 Trisomy 18羊水诊断超声波确认孕周错误的孕周确认孕周重新计算或重新抽血重复超声波结合或不结合羊水诊断第七十八页，讲稿共九十四页哦TC-Soft nBCI产前筛查领域战略伙伴n提供孕中期两联、三联、四联临床计算软件来评估胎儿风险，基于n实验室测试（AFP，hCG和雌三醇、Inhibin-A）n母亲年龄n孕周n其它标准，如：胎儿数量，身高体重，糖尿病等n全中文，中国人的数据库n可与Access/LXi/DxI系统相连接n接受国内专业权威指导和评估第七十九页，讲稿共九十四页哦性激素常用检测菜单性激素常用检测菜单妊娠相关激素人绒毛膜促性腺激素(hCG)内分泌状况评估 性激素六项促黄体激素(LH)促卵泡激素(FSH)泌乳素(Prolactin)孕酮睾酮雌二醇(E2)n唐氏三联筛查甲胎蛋白（AFP）人绒毛膜促性腺激素(hCG)雌三醇(E3)肾上腺皮质功能评估硫酸脱氢表雄酮(DHEA-S)第八十页，讲稿共九十四页哦（四）骨质疏松相关指标（四）骨质疏松相关指标第八十一页，讲稿共九十四页哦82骨质疏松症骨质疏松症定义定义n一种全身骨代谢障碍的疾病，其实质为一种全身骨代谢障碍的疾病，其实质为n骨组织显薇结构受损骨组织显薇结构受损n骨矿成分比例减少骨矿成分比例减少n骨质变薄，骨小梁数量减少骨质变薄，骨小梁数量减少n导致导致n骨脆性增加，骨折风险升高骨脆性增加，骨折风险升高n临床表现临床表现n患者臀部、脊柱、腕部易骨折患者臀部、脊柱、腕部易骨折n与年龄相关，女性多发于男性与年龄相关，女性多发于男性第八十二页，讲稿共九十四页哦83102030405060708090年龄年龄生长期生长期缓慢丢失缓慢丢失 持续丢失持续丢失 快速丢失快速丢失 绝经期绝经期绝经期绝经期 骨丢失速率骨丢失速率骨丢失速率骨丢失速率骨密度骨密度骨峰值骨峰值 骨折骨折骨折骨折阈阈值值骨质疏松症骨质疏松症发病率发病率第八十三页，讲稿共九十四页哦84total P1NP总总1型原胶原氨基端型原胶原氨基端延长肽延长肽-Crosslaps-胶原降解产物胶原降解产物N-MID OsteocalcinN-端骨钙素端骨钙素PTH甲状旁腺素甲状旁腺素25-(OH)Vit D3相关激素检测相关激素检测 骨质疏松症实验室检测骨质疏松症实验室检测钙，磷酸盐钙，磷酸盐Bone Marker骨代谢标志物骨代谢标志物第八十四页，讲稿共九十四页哦85n骨形成标志物骨形成标志物nN-MID Osteocalcin（N-端骨钙素）端骨钙素）nP1NP（总（总1型原胶原氨基端延长肽）型原胶原氨基端延长肽）n参与骨形成的标志物参与骨形成的标志物n25-(OH)Vitamin D3（25-羟维生素羟维生素D3）nPTH（甲状旁腺素）（甲状旁腺素）n骨吸收标志物骨吸收标志物n-crosslaps(CTX)-胶原降解产物胶原降解产物n与骨质疏松相关的标志物与骨质疏松相关的标志物n激素激素主要骨标志物介绍主要骨标志物介绍第八十五页，讲稿共九十四页哦86N-MID Osteocalcin（OC）N-端骨钙素端骨钙素n生物学特性生物学特性:n骨合成过程中由成骨细胞产生骨合成过程中由成骨细胞产生nVit K依赖性，依赖性，49个氨基酸组成，分子个氨基酸组成，分子量约为量约为5.8 KDn骨基质中最重要的特异性非胶原钙结骨基质中最重要的特异性非胶原钙结合蛋白合蛋白第八十六页，讲稿共九十四页哦87n临床意义临床意义:n 反映成骨细胞功能的特异标志物反映成骨细胞功能的特异标志物n血清（血浆）含量异常，多见于血清（血浆）含量异常，多见于n骨质疏松骨质疏松n原发原发/继发性甲状旁腺功能亢进继发性甲状旁腺功能亢进nPagets病病nIOF（国际骨质疏松基金会）导则推荐使用（国际骨质疏松基金会）导则推荐使用的骨形成标志物的骨形成标志物n骨钙素骨钙素ntP1NP或碱性磷酸酶或碱性磷酸酶N-MID Osteocalcin（OC）N-端骨钙素端骨钙素第八十七页，讲稿共九十四页哦88Vitamin D 维生素维生素 n维生素维生素D,又名又名抗佝偻病维生素，钙化醇；人体维生素抗佝偻病维生素，钙化醇；人体维生素D,n主要来源于日照（主要来源于日照（7脱氢胆固醇）脱氢胆固醇）n少量来源于动物性食物（如大马哈鱼，青鱼等）少量来源于动物性食物（如大马哈鱼，青鱼等）n或通过药物来补充或通过药物来补充n维生素维生素D缺乏的原因缺乏的原因n外周循环的维生素外周循环的维生素D水平随着年龄而下降水平随着年龄而下降n日照减少，摄食减少日照减少，摄食减少n肾功能有问题肾功能有问题n胃肠功能紊乱等胃肠功能紊乱等第八十八页，讲稿共九十四页哦89n最终的活性产物最终的活性产物1,25(OH)2 Vitamin D的生理作用：的生理作用：n促进小肠对钙、磷的吸收促进小肠对钙、磷的吸收n促进细胞外钙离子，通过和促进细胞外钙离子，通过和PTH相互作用达到平衡状态相互作用达到平衡状态n促进骨骼钙化促进骨骼钙化nVit D缺乏导致缺钙，临床表现为缺乏导致缺钙，临床表现为:n骨密度下降骨密度下降n高的骨转换高的骨转换n骨折风险增加骨折风险增加n骨软化骨软化n骨骼，肌肉疼痛或骨骼，肌肉疼痛或/无力无力25-(OH)Vitamin D3 25-羟维生素羟维生素 D3 第八十九页，讲稿共九十四页哦90PTH甲状旁腺素甲状旁腺素n生物学特性生物学特性:n甲状旁腺主细胞分泌的甲状旁腺主细胞分泌的84个氨基酸组成的多肽个氨基酸组成的多肽n分子量约为分子量约为9.5 KDn分泌呈现日夜节律波动分泌呈现日夜节律波动(6:00最高，最高，16:00最低最低)n临床意义临床意义:n与降钙素、与降钙素、Vit D协同作用，调节钙、磷水平，协同作用，调节钙、磷水平，升钙降磷升钙降磷n促进小肠粘膜上皮细胞对钙的吸收促进小肠粘膜上皮细胞对钙的吸收n促进骨盐沉积和骨的形成促进骨盐沉积和骨的形成第九十页，讲稿共九十四页哦91激素激素辅助助风险评估估n雌激素雌激素 n提高成骨细胞的活性。提高成骨细胞的活性。n低水平：低水平：10 pg/ml 骨质流失轻度增加骨质流失轻度增加,5 pg/ml 流失严重流失严重n男性：男性：13 pg/ml 骨折风险亦增加骨折风险亦增加n睾酮睾酮n男性性功能减退男性性功能减退(游离睾酮游离睾酮 9 pg/ml)与轻度臀部骨折相关。与轻度臀部骨折相关。n性激素结合球蛋白性激素结合球蛋白(SHBG)n血液中的运输性激素的蛋白质血液中的运输性激素的蛋白质n高浓度的高浓度的SHBGn可降低游离激素的生物活性可降低游离激素的生物活性n增加男性和绝经后女性的骨折风险增加男性和绝经后女性的骨折风险nSHBG与与BMD呈负相关。呈负相关。第九十一页，讲稿共九十四页哦（五）感染相关指标第九十二页，讲稿共九十四页哦风疹病毒风疹病毒Rublla Virus(RV)Cytomegalovirus(CMV)巨细胞病毒巨细胞病毒Herpes Simplex Virus 2(HSV-2)单纯疱疹病毒单纯疱疹病毒2型型Toxoplasma gondii(Toxo)弓形虫弓形虫Herpes Simplex Virus 1(HSV-1)单纯疱疹病毒单纯疱疹病毒1型型TORCH第九十三页，讲稿共九十四页哦目前科室主要检测仪器目前科室主要检测仪器DiaSorinLiaison全自动化学全自动化学发光免疫分发光免疫分析仪析仪第九十四页，讲稿共九十四页哦