唾液淀粉酶的影响因素课件.ppt
关于唾液淀粉酶的影响因素现在学习的是第1页,共12页背景酶具有催化效率高,专一性强,作用条件温和等特点,酶具有催化效率高,专一性强,作用条件温和等特点,目前在科研、食品加工、饲料生产、医疗等方面具有广目前在科研、食品加工、饲料生产、医疗等方面具有广泛的应用。唾液淀粉酶存在于唾液中,是一种有催化活泛的应用。唾液淀粉酶存在于唾液中,是一种有催化活性的蛋白质,可将淀粉水解为麦芽糖。影响其活性的因性的蛋白质,可将淀粉水解为麦芽糖。影响其活性的因素有很多,除了本身结构特点和结构功能特点影响之外,素有很多,除了本身结构特点和结构功能特点影响之外,还主要包括还主要包括PHPH值、温度、重金属离子、抑制剂、激活剂及值、温度、重金属离子、抑制剂、激活剂及酶浓度等。酶浓度等。(唾液淀粉酶:(唾液淀粉酶:ptyalin;salivary amylaseptyalin;salivary amylase)实验背景现在学习的是第2页,共12页实验原理麦芽糖、葡萄糖遇碘不麦芽糖、葡萄糖遇碘不麦芽糖、葡萄糖遇碘不麦芽糖、葡萄糖遇碘不显显显显色色色色淀粉水解淀粉水解产产物与碘液反物与碘液反应应生成不同的生成不同的颜颜色反色反应应淀粉淀粉+碘生成碘生成蓝蓝色色糊精糊精+碘根据水解程度,由紫色到橙色,水解越碘根据水解程度,由紫色到橙色,水解越彻彻底,底,颜颜色越浅,直到生成无色糊精(碘不色越浅,直到生成无色糊精(碘不显显色)色)现在学习的是第3页,共12页实验材料实验仪器实验仪器:控温水浴锅、制冰机、电磁灶:控温水浴锅、制冰机、电磁灶、不锈钢锅不锈钢锅 白瓷板白瓷板、试管、滴管、移液管(试管、滴管、移液管(1-2ml)实验试剂实验试剂:蒸馏水蒸馏水、1%淀粉液淀粉液、1%蔗糖、蔗糖、0.1%尿素液尿素液 大豆尿素酶溶液大豆尿素酶溶液、0.1%CuSO4、0.1%HgCl2 0.1%NaCl、1M NaOH、0.5M H2SO4、碘液碘液 各种各种pH缓冲液:缓冲液:5.0;6.8;8.0现在学习的是第4页,共12页实验步骤现在学习的是第5页,共12页 一 温度对唾液淀粉酶的影响1.1.稀释唾液的准备。稀释唾液的准备。2.2.准备好准备好3737水浴、冰水浴及沸水浴,点滴板加碘液水浴、冰水浴及沸水浴,点滴板加碘液 各各1 1滴,备用。滴,备用。3.3.取小试管取小试管4 4支,编号,各加支,编号,各加1%1%淀粉溶液淀粉溶液3030滴,滴,pHpH 6.86.8缓冲液缓冲液1010滴。滴。1 1号管作对照,号管作对照,2 2号管放号管放3737水浴水浴,3 3号管放冰水浴,号管放冰水浴,4 4号管放沸水浴中,各预温号管放沸水浴中,各预温10min10min。4.4.向向1 1号管加蒸馏水号管加蒸馏水1010滴,向滴,向2 2,3 3和和4 4号管各加稀释唾号管各加稀释唾 液液1010滴,混匀放原水浴中。滴,混匀放原水浴中。现在学习的是第6页,共12页5.5min5.5min后由后由2 2号管每隔一定时间(号管每隔一定时间(1min1min或或2min2min),取),取 液液1 1滴于白瓷凹板上做碘反应,观察并记录颜色变滴于白瓷凹板上做碘反应,观察并记录颜色变 化情况,到碘反应接近浅红色时,取出各管,包括化情况,到碘反应接近浅红色时,取出各管,包括 1 1号管,分别各取号管,分别各取1 1滴做碘反应,观察对比结果。滴做碘反应,观察对比结果。6.6.把把4 4支试管放入支试管放入3737水浴下,水浴下,510min510min后取出,向各后取出,向各 管内加碘液管内加碘液2 2滴,混匀,观察结果。综合分析所测滴,混匀,观察结果。综合分析所测 三种温度下的酶活性情况,并以三种温度下的酶活性情况,并以1 1号管为对照说明号管为对照说明 冰水浴及沸水浴两温度对酶活性影响的异同。冰水浴及沸水浴两温度对酶活性影响的异同。试管号试管号1234第一次碘反应第一次碘反应第二次碘反应第二次碘反应现在学习的是第7页,共12页 二 pH对唾液淀粉酶的影响现在学习的是第8页,共12页4.54.5号管加稀释唾液号管加稀释唾液1010滴,放滴,放3737水浴中,记录时间,每隔水浴中,记录时间,每隔1min1min或或2min2min,由第,由第5 5号试管中取出号试管中取出1 1滴溶液做碘反应,待碘反应呈浅滴溶液做碘反应,待碘反应呈浅红色或橙黄色时,取出试管记录保温时间。红色或橙黄色时,取出试管记录保温时间。5.145.14号试管放入号试管放入3737水浴中,向水浴中,向1 1号管加号管加1010滴蒸馏水。以滴蒸馏水。以1min1min间隔,并记录时间,依次向间隔,并记录时间,依次向2424号试管中加入稀释唾液号试管中加入稀释唾液1010滴,滴,摇匀,按照摇匀,按照5 5号管的保温时间,以号管的保温时间,以1min1min间隔,依次取出各管,并间隔,依次取出各管,并立即加碘液立即加碘液2 2滴,混匀。向滴,混匀。向1 1号管加号管加2 2滴碘液。观察各管颜色,滴碘液。观察各管颜色,判断在同判断在同pHpH条件下淀粉被水解的程度,分析条件下淀粉被水解的程度,分析pHpH对淀粉酶活性对淀粉酶活性的影响,确定其最适的影响,确定其最适pHpH。时间时间(min)试管号试管号12341234现在学习的是第9页,共12页 三 抑制剂对唾液淀粉酶的影响试剂(滴)试剂(滴)管管号号12341%1%淀粉淀粉30303030pH=6.8pH=6.8缓冲液缓冲液101010100.1%CuSO0.1%CuSO4 4100.1%NaCl0.1%NaCl10蒸馏水蒸馏水100.1%HgCl0.1%HgCl2 210稀释唾液的准备稀释唾液的准备取点滴板取点滴板1 1个,向白瓷凹板内各加碘液个,向白瓷凹板内各加碘液1 1滴,准备好滴,准备好3737水浴水浴取小试管取小试管3 3支,如下表加入试剂支,如下表加入试剂现在学习的是第10页,共12页5min5min后由后由2 2号试管每隔号试管每隔1min,1min,取液滴取液滴于白瓷凹板上做碘反应,观察记录于白瓷凹板上做碘反应,观察记录颜色变化情况,至反应为浅颜色变化情况,至反应为浅 色时,色时,取出各试管,分别取取出各试管,分别取1 1滴做碘反应,滴做碘反应,对比结果。对比结果。实验记录实验记录试管号试管号1234反应颜色反应颜色时间(时间(min)56789反应颜色反应颜色2号试管号试管现在学习的是第11页,共12页感谢大家观看现在学习的是第12页,共12页