免疫技术应用文献PPT讲稿.ppt
免疫技术应用文献第1页，共18页，编辑于2022年，星期五文献2.Magnetic Nanoparticle-Enhanced Biosensor Based on GratingCoupled Surface Plasmon Resonance Yi Wang,Jakub Dostalek,Wolfgang Knoll Anal.Chem.2011,83,620262073.Long-Range Surface Plasmon-Enhanced Fluorescence SpectroscopyBiosensor for Ultrasensitive Detection of E.coli O157:H7Chun-Jen Huang,Jakub Dostalek；Anal.Chem.2011,83,6746771.Simultaneous Bioluminescent Immunoassay of Serum Total and IgG-Bound Prolactins Alexander N.Kudryavtsev,Vasilisa V.Krasitskaya,Alexei I.Petunin,Andrey Y.Burakov,and Ludmila A.Frank Anal.Chem.2012,84,31193124第2页，共18页，编辑于2022年，星期五Simultaneous Bioluminescent Immunoassay of Serum Total and IgG-Bound Prolactins采用一种新颖的单孔双分析生物发光免疫技术用于对血浆中的凝血酶总量和lgG-凝血酶进行测量。Bioluminescent Reporters:不同颜色的obelin突变子。第3页，共18页，编辑于2022年，星期五总凝血酶含量：紫色igG-凝血酶含量：绿色利用两种不同突变子发光的衰变频率不同，采用不同的光学检测器，将二者检测出来。红框：单体PRL的标准品；绿框：没有lgG-PRL的血清样品蓝框：含有IgG-PRL 的血清样品第4页，共18页，编辑于2022年，星期五紫光的标准曲线与及其RIA对比第5页，共18页，编辑于2022年，星期五制作绿光的标准曲线第6页，共18页，编辑于2022年，星期五基于光栅耦合表面等离子共振的磁性纳米颗粒增强生物传感器该研究介绍一种将该研究介绍一种将SPR与与MNP（磁性（磁性纳米颗粒）相结合，采用光栅耦合表纳米颗粒）相结合，采用光栅耦合表面等离子共振，采用面等离子共振，采用Immunoassay-based detection of human chorionic gonadotropin(hCG人绒人绒毛膜促性腺激素毛膜促性腺激素)来评价该方法的灵敏来评价该方法的灵敏度。度。优点：优点：通过实验发现灵敏度比常规通过实验发现灵敏度比常规SPR的灵的灵敏度敏度提高了提高了4个数量级个数量级，LOD可以达可以达到到pM。MNP的作用：的作用：将待分析物迅速运输到传感器表面将待分析物迅速运输到传感器表面作为增加测量与靶分子结合有关的折射率作为增加测量与靶分子结合有关的折射率变化的标记。变化的标记。第7页，共18页，编辑于2022年，星期五光学表面等离子共振光学表面等离子共振SPRSPRSPR技术原理技术原理光学表面等离子共振（Surface Plasmon Resonance,SPR）是一种光学物理现象。当一束P偏振光在一定的角度范围内入射到棱镜端面，在棱镜与金属薄膜（Au或Ag）的界面将产生表面等离子波。当入射光波的传播常数与表面等离子波的传播常数相匹配时，引起金属膜内自由电子产生共振，即表面等离子共振。分析时，先在传感芯片表面固定一层生物分子识别膜，然后将待测样品流过芯片表面，若样品中有能够与芯片表面的生物分子识别膜相互作用的分子，会引起金膜表面折射率变化，最终导致SPR角变化，通过检测SPR角度变化，获得被分析物的浓度、亲和力、动力学常数和特异性等信息。第8页，共18页，编辑于2022年，星期五光栅型SPR第9页，共18页，编辑于2022年，星期五磁纳米颗粒第10页，共18页，编辑于2022年，星期五基于光栅耦合表面共振离子的磁性纳米颗粒增强生物传感器(a):direct detection(b):sandwich assays with amplification by detection antibody(c):MNPdAb without applied magnetic field(d):MNPdAb with applied magnetic field.(e).Detection format consisting of preincubating MNP-dAb with hCG followed by sandwich assay upon applied magnetic field gradient 第11页，共18页，编辑于2022年，星期五最终可检测到PM级别的hCG（high sensitivity）第12页，共18页，编辑于2022年，星期五远程表面等离子体加强荧光光谱（LRSP-FS）生物传感器用于大肠杆菌超灵敏检测研究将SPR于荧光相结合，用于超灵敏的检测细菌。原理：根据SPFS方法，在金属传感器表面被捕获的荧光标记（d-lgG）的分子被增强灵敏度的SPs电磁场活化，产生荧光。目标物的结合发出的强荧光，用荧光镜检测。通过在探测传感器表面使用远程表面等离子体（LRSPS）来优化SPFS。这些表面等离子体模式沿金属薄膜传播，嵌入具有相似折射率的电解质里，损失较少。因此，这种模式下共振激发提供的电场强度较高。此外，由于其传感器表面的消逝场有数微米的深度，能探索细菌病原体的整个体积第13页，共18页，编辑于2022年，星期五第14页，共18页，编辑于2022年，星期五右：不同浓度的病原体的荧光强度与入射角的关系。左：不同浓度下，入射角与反射角的关系（基本一致：重合），因此可以检测痕量的病原体。由图可知，在入射光发生衰减最强时，表面共振离子激发的荧光强度达到峰值。第15页，共18页，编辑于2022年，星期五不同时间流过不同浓度样品（黑）以及对照品（红）的荧光强度图。F是结合在大肠杆菌上的抗体产生的荧光（稳定后）。第16页，共18页，编辑于2022年，星期五 做出荧光强度做出荧光强度F与浓度的标准曲线与浓度的标准曲线定量定量第17页，共18页，编辑于2022年，星期五 谢谢谢谢第18页，共18页，编辑于2022年，星期五
