血红蛋白的提取和分离 (4)课件.ppt

关于血红蛋白的提取和分离(4)现在学习的是第1页，共38页思考思考1 分离生物大分子的基本思路是什么？分离生物大分子的基本思路是什么？选用一定的物理或化学的方法分离具有不选用一定的物理或化学的方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。同物理或化学性质的生物大分子。思考思考2 蛋白质的分离和提取的原理是什么？蛋白质的分离和提取的原理是什么？根据蛋白质各种特性的差异，如分子的根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度和吸附的性质和对其他分子的亲溶解度和吸附的性质和对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同蛋白质。和力等等，可以用来分离不同蛋白质。现在学习的是第2页，共38页一、基础知识：一、基础知识：凝胶色谱法（分配色谱法）：1、凝胶：、凝胶：一些微小多孔的球体（内含许多贯穿的通道，一些微小多孔的球体（内含许多贯穿的通道，由多糖类构成如葡聚糖、琼脂糖，具多孔的由多糖类构成如葡聚糖、琼脂糖，具多孔的凝胶就叫分子筛）凝胶就叫分子筛）2、概念：、概念：根据被根据被分离物质的蛋白质相对分分离物质的蛋白质相对分子质量的大小子质量的大小，利用具有网状结构的凝胶的分，利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，来进行分离。子筛作用，来进行分离。现在学习的是第3页，共38页3、原理、原理现在学习的是第4页，共38页用凝胶色谱法分离蛋白质时，分子量大用凝胶色谱法分离蛋白质时，分子量大的蛋白质的蛋白质A A路程较长，移动速度较慢路程较长，移动速度较慢 B B路程较长，移动速度较快路程较长，移动速度较快C C路程较短，移动速度较慢路程较短，移动速度较慢 D D路程较短，移动速度较快路程较短，移动速度较快D现在学习的是第5页，共38页4 4、具体过程、具体过程现在学习的是第6页，共38页相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的进行过程可表示为图中哪一个的进行过程可表示为图中哪一个B现在学习的是第7页，共38页1 1、概念：、概念：在一定的范围内，能对抗外来少量在一定的范围内，能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液PHPH发生明显发生明显变化的作用叫做缓冲作用，具有缓冲作用的变化的作用叫做缓冲作用，具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。溶液叫做缓冲溶液。缓冲溶液：2 2、作用：、作用：能够抵制（能够抵制（）对溶液（）对溶液（）的影响，维持）的影响，维持PHPH基本不变。基本不变。外界的酸或碱外界的酸或碱pHpH值值现在学习的是第8页，共38页3 3、缓冲溶液的配制、缓冲溶液的配制通常由（通常由（）种缓冲剂溶解于水中配制）种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的（而成。调节缓冲剂的（）就可以）就可以制得（制得（）使用的缓）使用的缓冲液。冲液。1 12 2使用比例使用比例在不同在不同PHPH范围内范围内思考：说出人体血液中缓冲液。思考：说出人体血液中缓冲液。NaH2PO4/Na2HPO4 H2CO3/NaHCO3磷酸缓冲液，磷酸缓冲液，保证血红蛋白的正常结构和功能，保证血红蛋白的正常结构和功能，便于观察便于观察(红色红色)和科学研究其和科学研究其(活性活性)4、在本课题中使用的缓冲液？、在本课题中使用的缓冲液？现在学习的是第9页，共38页（三）（三）电泳：电泳：1.1.概念：概念：带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。2.2.原理：原理：许多重要的生物大分子，如多肽、许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的核酸等都具有可解离的基团，在一定的PHPH下，这些基下，这些基团会带上正电或负电。团会带上正电或负电。在电场的作用下，这些在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小，形状的不同，使带电差异以及分子本身的大小，形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。分子的分离。3.3.类型类型:琼脂糖凝胶电泳、聚丙稀酰胺凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳、聚丙稀酰胺凝胶电泳现在学习的是第10页，共38页在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动带电荷相反的电极移动琼脂糖凝胶电泳示意图琼脂糖凝胶电泳示意图现在学习的是第11页，共38页 4 4、聚丙稀酰胺凝胶电泳聚丙稀酰胺凝胶电泳（1 1）聚丙稀酰胺凝胶：）聚丙稀酰胺凝胶：是由单体丙烯酰胺和交是由单体丙烯酰胺和交联剂联剂N,NN,N，亚甲基双丙烯酰胺在引发剂和催化剂亚甲基双丙烯酰胺在引发剂和催化剂的作用下聚合交联成的具有三维网状结构的凝的作用下聚合交联成的具有三维网状结构的凝胶。胶。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率迁移率取决取决于它所带于它所带净电荷净电荷的多少以及的多少以及分子的大小分子的大小等因等因素。素。为了消除为了消除净电荷对迁移率的影响，净电荷对迁移率的影响，可以在凝可以在凝胶中加入胶中加入SDSSDS。（2 2）原理：）原理：现在学习的是第12页，共38页 SDSSDS能使蛋白质发生完全变性。能使蛋白质发生完全变性。由几条肽链由几条肽链组成的蛋白质复合体在组成的蛋白质复合体在SDSSDS的作用下会的作用下会解聚成解聚成单条肽链单条肽链，因此测定的结果只是，因此测定的结果只是单条肽链的单条肽链的分子量分子量。SDSSDS能与各种蛋白质形成能与各种蛋白质形成蛋白质蛋白质SDSSDS复合物复合物，SDSSDS所带负电荷的量大大超过了所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子蛋白质分子原有电荷量原有电荷量。因而掩盖了因而掩盖了不同种不同种蛋白质间的电荷差别蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移率完全，使电泳迁移率完全取取决于分子的大小。决于分子的大小。（3 3）SDS-SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳聚丙稀酰胺凝胶电泳作用机理作用机理:现在学习的是第13页，共38页使用使用SDS-SDS-聚丙烯酰胺电泳过程中，不同蛋白聚丙烯酰胺电泳过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于质的电泳迁移率完全取决于A A 电荷的多少电荷的多少 B B 分子的大小分子的大小C C 肽链的多少肽链的多少 D D 分子形状的差异分子形状的差异现在学习的是第14页，共38页 二、实验操作：样品处理粗分离纯化纯度鉴定现在学习的是第15页，共38页蛋白质的提取和分离一般分为四步：蛋白质的提取和分离一般分为四步：（1）样品处理）样品处理：包括洗涤红细胞；血红：包括洗涤红细胞；血红蛋白稀释；离心等操作收集到的血红蛋蛋白稀释；离心等操作收集到的血红蛋白溶液。白溶液。（2）粗分离）粗分离：透析除去分子较小的杂质。：透析除去分子较小的杂质。（3）纯化）纯化：通过凝胶色谱法将分子量较：通过凝胶色谱法将分子量较大的杂质蛋白质除去。大的杂质蛋白质除去。（4）纯度鉴定）纯度鉴定：通过聚丙烯酰胺凝胶电：通过聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。泳鉴定。二、实验操作：现在学习的是第16页，共38页血血液液血浆血浆水水 分分其他物质：其他物质：血浆蛋白、血浆蛋白、血浆蛋白、血浆蛋白、无机盐、磷脂、葡萄糖等无机盐、磷脂、葡萄糖等无机盐、磷脂、葡萄糖等无机盐、磷脂、葡萄糖等血细血细 胞胞白细胞白细胞血小板血小板红细胞红细胞（最多）（最多）（最多）（最多）血红蛋白血红蛋白（90909090）两个两个肽链肽链两个两个一肽链一肽链四个亚铁红素基团四个亚铁红素基团1.血液有哪些成分？血液有哪些成分？2.2.你认为鸟类血液和哺乳动物血液中，最好你认为鸟类血液和哺乳动物血液中，最好哪种血液来提取血红蛋白？为什么？哪种血液来提取血红蛋白？为什么？现在学习的是第17页，共38页（一）样品处理（一）样品处理1 1、红细胞的洗涤：、红细胞的洗涤：2 2、血红蛋白的释放：、血红蛋白的释放：3 3、分离血红蛋白溶液：、分离血红蛋白溶液：4 4、透析、透析：如何除无机盐离子和小分子有机物质呢？如何除无机盐离子和小分子有机物质呢？血液柠檬酸钠血液柠檬酸钠低速短时离心低速短时离心吸出上层血浆吸出上层血浆红细胞红细胞5倍体倍体积生理盐水积生理盐水 缓慢搅拌缓慢搅拌10min低速短时离心低速短时离心吸出上清液吸出上清液反复反复洗涤直至上清液无黄色洗涤直至上清液无黄色在蒸馏水和甲苯（？）作用下，红细胞破裂释放在蒸馏水和甲苯（？）作用下，红细胞破裂释放红细胞破碎混合液红细胞破碎混合液中速长时离心（中速长时离心（2000c/min10min）滤纸过滤纸过滤除去脂质滤除去脂质分液漏斗分离出血红蛋白，分液漏斗分离出血红蛋白，得到红色透明液体。得到红色透明液体。装入透析袋并置于磷酸缓冲液中（装入透析袋并置于磷酸缓冲液中（PH为为7.0）透析）透析二、实验操作：二、实验操作：现在学习的是第18页，共38页分离血红蛋白溶液有机溶剂有机溶剂 无色透明的甲苯层无色透明的甲苯层脂类物质脂类物质 白色脂溶性物质沉淀层白色脂溶性物质沉淀层血红蛋白溶液血红蛋白溶液 红色透明液体红色透明液体红细胞破碎物沉淀红细胞破碎物沉淀 暗红色沉淀物暗红色沉淀物现在学习的是第19页，共38页透析过程动画演示透析过程动画演示现在学习的是第20页，共38页练习巩固1、随着人类跨入蛋白质组时代，对蛋白质、随着人类跨入蛋白质组时代，对蛋白质的研究和应用越来越深入，首先要做的一步的研究和应用越来越深入，首先要做的一步是是A 弄清各种蛋白质的空间结构弄清各种蛋白质的空间结构B 弄清各种蛋白质的功能弄清各种蛋白质的功能C 弄清各种蛋白质的合成过程弄清各种蛋白质的合成过程D 获得高纯度的蛋白质获得高纯度的蛋白质现在学习的是第21页，共38页2、用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中，关、用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中，关于蛋白质的叙述，正确的是于蛋白质的叙述，正确的是A 相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分子质量较大的蛋白质分子质量较大的蛋白质B 相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对分子质量较大的蛋白质分子质量较大的蛋白质C 相对分子质量较小的蛋白质行程等于相相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分子质量较大的蛋白质对分子质量较大的蛋白质D 二者根本无法比较二者根本无法比较现在学习的是第22页，共38页3、使用、使用SDS-聚丙烯酰胺电泳过程中，不同聚丙烯酰胺电泳过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于蛋白质的电泳迁移率完全取决于A 电荷的多少电荷的多少 B 分子的大小分子的大小C 肽链的多少肽链的多少 D 分子形状的差异分子形状的差异4、在采血容器中加入柠檬酸钠的目的是、在采血容器中加入柠檬酸钠的目的是A 调节调节pH B 维持红细胞的能量供应维持红细胞的能量供应C 防止微生物生长防止微生物生长 D 防止血液凝固防止血液凝固现在学习的是第23页，共38页5、一分子血红蛋白最多可携带的、一分子血红蛋白最多可携带的 O2分子数和分子数和CO2分子数分别是分子数分别是A 4、2 B 4、4 C 2、1 D、1、16、记住样品处理中的血红蛋白溶液离心后分层顺、记住样品处理中的血红蛋白溶液离心后分层顺序序自上而下自上而下是：是：有有机溶剂机溶剂-脂脂类物质类物质-血血红蛋白溶液红蛋白溶液-红红细胞破碎物沉淀细胞破碎物沉淀现在学习的是第24页，共38页（二）凝胶色谱操作（二）凝胶色谱操作-纯化纯化1 1、凝胶色谱柱的制作：、凝胶色谱柱的制作：二、实验操作：二、实验操作：样品处理样品处理粗分离粗分离纯化纯化纯度鉴定纯度鉴定色谱柱的制作过程：准备材料色谱柱的制作过程：准备材料加工橡皮塞加工橡皮塞安装色谱柱安装色谱柱现在学习的是第25页，共38页凝胶色谱柱取长为凝胶色谱柱取长为40 cm，内径为，内径为16 cm，有关说法中，正确的是，有关说法中，正确的是 (多选多选)A一般凝胶色谱柱直径的大小不影响分离一般凝胶色谱柱直径的大小不影响分离的效果的效果B凝胶色谱柱过高超过凝胶色谱柱过高超过1 m，不影响分离，不影响分离的效果的效果C凝胶色谱柱过矮，则影响混合物的分离凝胶色谱柱过矮，则影响混合物的分离度度D凝胶色谱柱直径过大会耗用过多洗脱凝胶色谱柱直径过大会耗用过多洗脱液，样品的稀释度过大液，样品的稀释度过大现在学习的是第26页，共38页2 2、凝胶色谱柱的装填、凝胶色谱柱的装填现在学习的是第27页，共38页装配好的凝胶柱现在学习的是第28页，共38页3 3、样品加入与洗脱、样品加入与洗脱-调节缓冲液面调节缓冲液面调节缓冲液面调节缓冲液面加入蛋白质样品加入蛋白质样品加入蛋白质样品加入蛋白质样品调节缓冲液调节缓冲液调节缓冲液调节缓冲液面面面面洗脱洗脱洗脱洗脱收集分装蛋白质收集分装蛋白质收集分装蛋白质收集分装蛋白质（1 1）调节缓冲液面：）调节缓冲液面：打开下端出口，使柱内缓冲液缓慢下打开下端出口，使柱内缓冲液缓慢下降到与凝胶面平齐，关闭出口。降到与凝胶面平齐，关闭出口。（2 2）滴加透析样品：）滴加透析样品：吸管吸吸管吸1ml1ml样品加到色谱柱的顶端，滴样品加到色谱柱的顶端，滴加样品时，吸管管口贴着管壁环绕移动加样，同时注意不要破坏凝加样品时，吸管管口贴着管壁环绕移动加样，同时注意不要破坏凝胶面。胶面。（3 3）样品渗入凝胶床：）样品渗入凝胶床：加样后打开下端出口，使样品渗入凝加样后打开下端出口，使样品渗入凝胶床内，等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口。胶床内，等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口。（4 4）洗脱：）洗脱：小心加入小心加入pH=7.0 pH=7.0 的的20mmol/l20mmol/l的磷酸缓冲液到适当的磷酸缓冲液到适当高度，连接缓冲液洗脱瓶，打开下端出口进行洗脱高度，连接缓冲液洗脱瓶，打开下端出口进行洗脱。（5 5）收集：）收集：待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每流出液，每5ml5ml收集一试管，连续收集。（在分离过程中，如果红色区收集一试管，连续收集。（在分离过程中，如果红色区带均匀一致的移动，说明色谱柱制作成功）带均匀一致的移动，说明色谱柱制作成功）（6 6）注意：）注意：正确的加样操作：正确的加样操作：1 1、不要触及并破坏凝胶面。、不要触及并破坏凝胶面。2 2、贴壁加样。、贴壁加样。3 3、使吸管管口沿管壁环绕移动。、使吸管管口沿管壁环绕移动。现在学习的是第29页，共38页注意：注意：注意：注意：正确的加样操作是正确的加样操作是（1 1）不要触及并破坏凝胶面。不要触及并破坏凝胶面。（2 2）贴壁加样。）贴壁加样。（3 3）使吸管管口沿管壁环绕移动。）使吸管管口沿管壁环绕移动。3 3、样品加入与洗脱、样品加入与洗脱-调节缓冲液面调节缓冲液面调节缓冲液面调节缓冲液面加入蛋白质样品加入蛋白质样品加入蛋白质样品加入蛋白质样品调节缓调节缓调节缓调节缓冲液面冲液面冲液面冲液面洗脱洗脱洗脱洗脱收集分装蛋白质收集分装蛋白质收集分装蛋白质收集分装蛋白质现在学习的是第30页，共38页思考下面的问题：思考下面的问题：让血红蛋白处在稳定的让血红蛋白处在稳定的pHpH范围内，维持结构和功能。范围内，维持结构和功能。1 1 1 1、在血红蛋白的整个过程中不断用磷酸缓冲液处理的目的是什么？、在血红蛋白的整个过程中不断用磷酸缓冲液处理的目的是什么？、在血红蛋白的整个过程中不断用磷酸缓冲液处理的目的是什么？、在血红蛋白的整个过程中不断用磷酸缓冲液处理的目的是什么？2 2 2 2、与其他真核细胞相比，红细胞有什么特点？这一特点对你进行蛋、与其他真核细胞相比，红细胞有什么特点？这一特点对你进行蛋、与其他真核细胞相比，红细胞有什么特点？这一特点对你进行蛋、与其他真核细胞相比，红细胞有什么特点？这一特点对你进行蛋白质得分离有什么意义？白质得分离有什么意义？白质得分离有什么意义？白质得分离有什么意义？血红蛋白是有色蛋白，因此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来血红蛋白是有色蛋白，因此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液。这使血红蛋白的分离过程非常直观，大大判断什么时候应该收集洗脱液。这使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作。简化了实验操作。3 3 3 3、你能描述血红蛋白分离的完整过程吗？、你能描述血红蛋白分离的完整过程吗？、你能描述血红蛋白分离的完整过程吗？、你能描述血红蛋白分离的完整过程吗？血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步，包括：血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步，包括：样品处理、粗分样品处理、粗分样品处理、粗分样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定离、纯化和纯度鉴定离、纯化和纯度鉴定离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操。首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到作收集到血红蛋白溶液血红蛋白溶液，即，即:样品的处理；再经过透析去除分子量较小样品的处理；再经过透析去除分子量较小的杂质，即样品的粗分离；然后的杂质，即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱法通过凝胶色谱法通过凝胶色谱法通过凝胶色谱法将相对分子质量较大将相对分子质量较大的的杂质蛋白除去杂质蛋白除去，即，即:样品的纯化；最后经样品的纯化；最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳进行进行纯度鉴定。纯度鉴定。现在学习的是第31页，共38页收集得到的纯化后的蛋白现在学习的是第32页，共38页在装填凝胶柱时，不能有气泡存在的原因是在装填凝胶柱时，不能有气泡存在的原因是A A、气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次、气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次 序，降低分离效果序，降低分离效果B B、气泡阻碍蛋白质的运动、气泡阻碍蛋白质的运动C C、气泡与蛋白质发生化学反应、气泡与蛋白质发生化学反应D D、气泡在装填凝胶的时候，使凝胶不紧密、气泡在装填凝胶的时候，使凝胶不紧密A现在学习的是第33页，共38页样品的加入和洗脱的操作不正确的是样品的加入和洗脱的操作不正确的是A A 加样前，打开色谱柱下端的流出口，使加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面下面B B加样后，打开下端出口，使样品渗入凝胶加样后，打开下端出口，使样品渗入凝胶床内床内C C等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口D D用吸管小心的将用吸管小心的将1ml1ml透析后的样品加到色透析后的样品加到色谱柱的顶端，不要破坏凝胶面谱柱的顶端，不要破坏凝胶面A现在学习的是第34页，共38页下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作，其中正确的是（作，其中正确的是（）A A可采集猪血作为实验材料可采集猪血作为实验材料 B B用蒸馏水重复洗涤红细胞用蒸馏水重复洗涤红细胞C C血红蛋白释放后应低速短时间离心血红蛋白释放后应低速短时间离心 D D洗脱液接近色谱柱底端时开始收集流出液洗脱液接近色谱柱底端时开始收集流出液 A现在学习的是第35页，共38页三、三、SDSSDS聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白纯度。鉴定血红蛋白纯度。目的：目的：血红蛋白的取和分离凝胶色谱法原理分离过程凝胶电泳法缓冲溶液组成作用蛋白质的提取分离样品处理粗分离纯化纯度鉴定血红蛋白的提取和离蛋白质分子的差异性蛋白质分子的差异性凝胶色谱法原理分离过程凝胶电泳法凝胶色谱法原理分离过程凝胶电泳法缓冲溶液组成作用缓冲溶液组成作用蛋白质的提取分离样品处理粗分离纯化纯度鉴定蛋白质的提取分离样品处理粗分离纯化纯度鉴定现在学习的是第36页，共38页 观察你处理的血液样品离心后观察你处理的血液样品离心后是否分层是否分层（见教科书图（见教科书图5-185-18），），如如果分层不明显，可能是洗涤次数少、未能除去血浆蛋白的原因。果分层不明显，可能是洗涤次数少、未能除去血浆蛋白的原因。此外，离此外，离心速度过高和时间过长，会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀，也得不到纯心速度过高和时间过长，会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀，也得不到纯净的红细胞，影响后续血红蛋白的提取纯度。净的红细胞，影响后续血红蛋白的提取纯度。四、实验结果分析与评价四、实验结果分析与评价 1 1、你是否完成了对血液样品的处理？你能描述处理后、你是否完成了对血液样品的处理？你能描述处理后的样品发生了哪些变化吗？的样品发生了哪些变化吗？2 2、你装填的凝胶色谱柱是否有气泡产生？你的色谱柱、你装填的凝胶色谱柱是否有气泡产生？你的色谱柱装填得成功吗？你是如何判断的？装填得成功吗？你是如何判断的？由于凝胶是一种半透明的介质，因此可以在凝胶柱旁放一支与凝胶柱由于凝胶是一种半透明的介质，因此可以在凝胶柱旁放一支与凝胶柱垂直的日光灯，检查凝胶是否装填得均匀。此外，还可以加入大分子的有垂直的日光灯，检查凝胶是否装填得均匀。此外，还可以加入大分子的有色物质，例如蓝色葡聚糖色物质，例如蓝色葡聚糖20002000或红色葡聚糖或红色葡聚糖，观察色带移动的情况。观察色带移动的情况。如果色带均匀、狭窄、平整，说明凝胶色谱柱的性能良好。如果色带均匀、狭窄、平整，说明凝胶色谱柱的性能良好。如果色谱如果色谱柱出现纹路或是气泡，轻轻敲打柱体以消除气泡，消除不了时要重柱出现纹路或是气泡，轻轻敲打柱体以消除气泡，消除不了时要重新装柱。新装柱。现在学习的是第37页，共38页01.10.2022感感谢谢大大家家观观看看现在学习的是第38页，共38页