第七章芳胺类药物分析优秀课件.ppt

第七章芳胺类药物分析第1页，本讲稿共70页基本要求基本要求一、掌握芳胺类药物的鉴别试验方法和含量测定一、掌握芳胺类药物的鉴别试验方法和含量测定 的亚硝酸钠滴定法。的亚硝酸钠滴定法。二、熟悉芳胺类药物的特殊杂质检查和含量测定二、熟悉芳胺类药物的特殊杂质检查和含量测定 的非水滴定法和分光光度法；的非水滴定法和分光光度法；熟悉苯乙胺类药物的鉴别、检查和含量测定熟悉苯乙胺类药物的鉴别、检查和含量测定 方法；方法；三、了解本类药物的结构和性质。三、了解本类药物的结构和性质。第2页，本讲稿共70页R1HNCOOR2对氨基苯甲酸酯结构通式对氨基苯甲酸酯结构通式第一节 芳胺类药物的分析一、对氨基苯甲酸酯类药物的基 本结构与主要性质第3页，本讲稿共70页H2NCOOC2H5苯佐卡因苯佐卡因H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因HClCH3(CH2)2NHCOOCH2CH2N(C2H5)2HCl盐酸丁卡因盐酸丁卡因第4页，本讲稿共70页结构与分析方法结构与分析方法n n芳伯氨基，显芳伯氨基特性。n n脂烃胺侧链，游离碱多为碱性油状液体或固体，与生物碱沉淀剂反应。n n有酯键（或酰氨键），易水解，尤其受碱或光、热的影响能促进水解。水解产物限量控制。第5页，本讲稿共70页酰胺类药物结构通式酰胺类药物结构通式R1R3R4NHCOR2二、酰胺类药物的基本结构与主要性质第6页，本讲稿共70页HONHCOCH3对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚CH3COHNSOONHCOCH3醋氨苯砜醋氨苯砜H3CCH3NHCOCH2N(C2H5)2HClH2ONHCONCH3CH3C4H9HCl盐酸利多卡因盐酸利多卡因盐酸布比卡因盐酸布比卡因第7页，本讲稿共70页结构与分析方法1)1)酰氨结构，可水解为芳伯氨基，重氮化偶合。空间位阻影响水解。2)2)有酚羟基或水解产生酚羟基，可与三氯化铁显色。3)3)脂烃胺侧链，显弱碱性，与生物碱沉淀剂或重金属离子反应。第8页，本讲稿共70页三、鉴别试验n n（一）重氮化（一）重氮化（一）重氮化（一）重氮化-偶合反应偶合反应偶合反应偶合反应 分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物，均可发生此反应。氨基的药物，均可发生此反应。Ar-NH2HClNaNO2重氮盐重氮盐OH-萘酚萘酚橙黄橙黄猩红色猩红色第9页，本讲稿共70页 直接反应：直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普盐酸普 鲁卡因胺鲁卡因胺 间接反应：间接反应：对乙酰氨基酚、醋氨苯砜对乙酰氨基酚、醋氨苯砜 利多卡因和布比卡因由于空间位阻很难发生利多卡因和布比卡因由于空间位阻很难发生此反应。此反应。第10页，本讲稿共70页 丁卡因虽无芳伯氨基，但可与丁卡因虽无芳伯氨基，但可与NaNONaNO2 2反应生反应生成成N N亚硝基化合物的乳白色沉淀。亚硝基化合物的乳白色沉淀。（可与具有芳伯氨基的同类药物区别）第11页，本讲稿共70页第12页，本讲稿共70页n n盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 ChP（2005）鉴别鉴别（4）本品显芳香第一胺类的鉴别反）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录应（附录）取供试品约取供试品约50mg，加稀盐酸，加稀盐酸1mL，必要，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性-萘酚试液数萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。淀。第13页，本讲稿共70页（二）与三氯化铁反应（二）与三氯化铁反应（二）与三氯化铁反应（二）与三氯化铁反应对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 +FeCl+FeCl3 3蓝紫色化合物蓝紫色化合物第14页，本讲稿共70页对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 ChP ChP（20052005）鉴别鉴别鉴别鉴别 （2 2）取本品约）取本品约）取本品约）取本品约0.1g0.1g，加稀盐酸，加稀盐酸，加稀盐酸，加稀盐酸5m15m1，置水浴中加，置水浴中加，置水浴中加，置水浴中加热热热热4040分钟，放冷；取分钟，放冷；取分钟，放冷；取分钟，放冷；取0.5m10.5m1，滴加亚硝酸钠试液，滴加亚硝酸钠试液，滴加亚硝酸钠试液，滴加亚硝酸钠试液5 5滴，摇滴，摇滴，摇滴，摇匀，用水匀，用水匀，用水匀，用水3ml3ml稀释后，加碱性稀释后，加碱性稀释后，加碱性稀释后，加碱性-萘酚试液萘酚试液萘酚试液萘酚试液2m12m1，振摇，振摇，振摇，振摇，即显红色。即显红色。即显红色。即显红色。第15页，本讲稿共70页 1.与铜和钴离子反应：与铜和钴离子反应：利多卡因与硫酸铜生成利多卡因与硫酸铜生成蓝紫色蓝紫色配位化合物；配位化合物；与氯化钴生成与氯化钴生成亮绿色亮绿色沉淀。沉淀。（三）与金属离子反应（三）与金属离子反应第16页，本讲稿共70页第17页，本讲稿共70页2.2.羟肟酸铁盐反应羟肟酸铁盐反应（基于普鲁卡因胺分子中的芳酰胺结构基于普鲁卡因胺分子中的芳酰胺结构基于普鲁卡因胺分子中的芳酰胺结构基于普鲁卡因胺分子中的芳酰胺结构）第18页，本讲稿共70页3.3.3.3.与汞离子反应与汞离子反应与汞离子反应与汞离子反应盐酸利多卡因盐酸利多卡因 +H+H2 2NONO3 3+Hg(NO+Hg(NO3 3)2 2黄色黄色对氨基苯甲酸酯对氨基苯甲酸酯 H H2 2NONO3 3+Hg(NO+Hg(NO3 3)2 2红色红色或或橙黄色橙黄色第19页，本讲稿共70页1.1.盐酸普鲁卡因的鉴别盐酸普鲁卡因的鉴别 (四四)水解产物反应水解产物反应盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 +NaOH+NaOH普鲁卡因普鲁卡因油状物油状物对氨基苯甲酸钠对氨基苯甲酸钠 +二乙氨基乙醇二乙氨基乙醇（使湿润的红色石蕊试纸变兰色）（使湿润的红色石蕊试纸变兰色）对氨基苯甲酸钠对氨基苯甲酸钠 +HCl+HCl对氨基苯甲酸（白色）对氨基苯甲酸（白色）第20页，本讲稿共70页第21页，本讲稿共70页2.2.苯佐卡因的鉴别苯佐卡因的鉴别 苯佐卡因苯佐卡因 +NaOH+NaOH乙醇乙醇乙醇乙醇 +I+I2 2+NaOH+NaOHCHICHI3 3（碘仿臭气，黄色沉淀）（碘仿臭气，黄色沉淀）第22页，本讲稿共70页(五五)制备衍生物测熔点制备衍生物测熔点1.1.三硝基苯酚衍生物的制备：利多卡因和布比卡因三硝基苯酚衍生物的制备：利多卡因和布比卡因三硝基苯酚衍生物的制备：利多卡因和布比卡因三硝基苯酚衍生物的制备：利多卡因和布比卡因第23页，本讲稿共70页 2.硫氰酸盐衍生物的制备：硫氰酸盐衍生物的制备：盐酸丁卡因盐酸丁卡因 第24页，本讲稿共70页(六六)紫外特征吸收光谱法紫外特征吸收光谱法 1.1.在在在在 max max 处测定供试液的百分吸收系数。处测定供试液的百分吸收系数。处测定供试液的百分吸收系数。处测定供试液的百分吸收系数。例如：对乙酰基酚在例如：对乙酰基酚在例如：对乙酰基酚在例如：对乙酰基酚在0.4%NaOH0.4%NaOH中于中于中于中于 max max=240nm;E=240nm;E1%1%1cm1cm=715=715 在在在在HCl(0.1nol/L)-HCl(0.1nol/L)-甲醇于甲醇于甲醇于甲醇于 max max =249nm;E=249nm;E1%1%1cm1cm=880=8802.在规定的浓度测定在规定的浓度测定max 例如：醋氨苯砜例如：醋氨苯砜5g/ml;max =256nm;284nm 再例如：盐酸普鲁卡因胺再例如：盐酸普鲁卡因胺5g/ml;max=280nm(七七)红外吸收光谱法红外吸收光谱法第25页，本讲稿共70页（一）对乙酰氨基酚中的杂质检查 （化学合成工艺）化学合成工艺）A A、对硝基氯苯、对硝基氯苯水解水解对硝基酚对硝基酚还原还原 对氨对氨基酚基酚乙酰化乙酰化 B B、酚、酚亚硝化、还原亚硝化、还原对氨基酚，乙酰化对氨基酚，乙酰化 1）酸度 来源：生产过程，水解 要求：本品1%溶液pH 应为5.56.5。四、特殊杂质检查第26页，本讲稿共70页2）乙醇溶液的澄清度与颜色本品为白色结晶或洁净性粉末，易溶于乙醇，溶液澄清。来源：中间体对氨基酚氧化产物。要求：不得比棕红色2号更深来源：生产中还原剂（铁粉）。要求：不得比1号浊度标准液更浓。第27页，本讲稿共70页n n检检检检查查查查方方方方法法法法 取取取取本本本本品品品品的的的的细细细细粉粉粉粉1.0g1.0g1.0g1.0g，置置置置具具具具塞塞塞塞离离离离心心心心管管管管或或或或试试试试管管管管中中中中，加加加加乙乙乙乙醚醚醚醚5ml5ml5ml5ml，立立立立即即即即密密密密塞塞塞塞，振振振振摇摇摇摇30303030分分分分钟钟钟钟，离离离离心心心心或或或或放放放放置置置置澄澄澄澄清清清清，取取取取上上上上清清清清液液液液作作作作为为为为供供供供试试试试品品品品溶溶溶溶液液液液；另另另另取取取取每每每每 1ml1ml1ml1ml中中中中含含含含对对对对氯氯氯氯乙乙乙乙酰酰酰酰苯苯苯苯胺胺胺胺1.0mg1.0mg1.0mg1.0mg的的的的乙乙乙乙醇醇醇醇溶溶溶溶液液液液适适适适量量量量，用用用用乙乙乙乙醚醚醚醚稀稀稀稀释释释释成成成成每每每每1ml1ml1ml1ml中中中中含含含含50g50g50g50g的的的的溶溶溶溶液液液液作作作作为为为为对对对对照照照照液液液液。吸吸吸吸取取取取供供供供试试试试品品品品溶溶溶溶液液液液200l200l200l200l与与与与对对对对照照照照溶溶溶溶液液液液40l40l40l40l，分分分分别别别别点点点点于于于于同同同同一一一一硅硅硅硅胶胶胶胶GFGFGFGF254 254 254 254 薄薄薄薄板板板板上上上上。以以以以氯氯氯氯仿仿仿仿丙丙丙丙酮酮酮酮甲甲甲甲苯苯苯苯（13:5:213:5:213:5:213:5:2）为为为为 展展展展 开开开开 剂剂剂剂，展展展展 开开开开 后后后后，晾晾晾晾 干干干干，置置置置 紫紫紫紫 外外外外 光光光光 灯灯灯灯（254nm254nm254nm254nm）下下下下检检检检视视视视，供供供供试试试试品品品品溶溶溶溶液液液液如如如如显显显显杂杂杂杂质质质质斑斑斑斑点点点点，与与与与对对对对照照照照溶溶溶溶液的主斑点比较，不得更大，更深。液的主斑点比较，不得更大，更深。液的主斑点比较，不得更大，更深。液的主斑点比较，不得更大，更深。3）有关物质 对氯乙酰苯胺 第28页，本讲稿共70页4）对氨基酚检查方法 取本品取本品1.0g1.0g，加甲醇溶液（，加甲醇溶液（1212）20ml20ml溶解后，加碱溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液性亚硝基铁氰化钠试液1ml1ml，摇匀，放置，摇匀，放置30min30min；如显色，；如显色，与对乙酰氨基酚对照品与对乙酰氨基酚对照品1.0g1.0g加对氨基酚加对氨基酚50g50g用同一方法用同一方法制成的对照液（临用配制）比较，不得更深（制成的对照液（临用配制）比较，不得更深（0.0050.005）。）。第29页，本讲稿共70页（二）盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查 检查方法检查方法检查方法检查方法 精密量取本品，加乙醇稀释使成为每精密量取本品，加乙醇稀释使成为每1ml1ml中含盐中含盐酸普鲁卡因酸普鲁卡因2.5mg2.5mg的溶液，作为的溶液，作为供试品溶液供试品溶液。取。取对氨基苯对氨基苯甲酸甲酸对照品对照品,加乙醇制成每加乙醇制成每1ml1ml中含中含30g30g的溶液的溶液,作为作为对照品溶液对照品溶液。取上述两种溶液各。取上述两种溶液各10l10l，分别点于含有分别点于含有羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H H薄层板上薄层板上，用苯冰醋，用苯冰醋酸丙酮甲醇（酸丙酮甲醇（14:1:1:414:1:1:4）为展开剂，展开后，）为展开剂，展开后，取出晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液（取出晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液（2 2对二甲对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液氨基苯甲醛乙醇溶液100ml100ml，加入冰醋酸，加入冰醋酸5ml5ml制成）制成）喷雾显色。供试品溶液如显与对照品溶液相应的杂喷雾显色。供试品溶液如显与对照品溶液相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，不得更质斑点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，不得更深。深。第30页，本讲稿共70页2）对氨基苯甲酸）对氨基苯甲酸第31页，本讲稿共70页n n原理芳芳伯伯氨氨基基药药物物在在酸酸性性溶溶液液中中与与亚亚硝硝酸酸钠钠定定量量反反应应，生生成成重重氮氮盐盐，用用永永停停法法或或外外指指示示剂剂法法指指示示反反应应终终点。点。潜潜在在芳芳伯伯氨氨基基，可可通通过过水水解解或或还还原原得得到到芳芳伯伯氨氨基基。（一）亚硝酸钠滴定法（一）亚硝酸钠滴定法五、含量测定第32页，本讲稿共70页重氮化反应历程：重氮化反应历程：NaNO2+HCl HNO2+NaClHNO2+HCl NOCl+H2OAr-NH2NOCl Ar-NH-NOAr-N=N-OHHNO2+HBr NOBr+H2O快快快快慢慢Ar-N2+Cl-（1）K1（2）K2 K1 300 K2 加入加入KBr，可增大被测溶液中，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重氮化反应速度的浓度，所以能加快重氮化反应速度第33页，本讲稿共70页注意条件：注意条件：1.1.溴化钾的作用：溴化钾的作用：溴化钾的作用：溴化钾的作用：催化剂。与亚硝酸生成催化剂。与亚硝酸生成NOBrNOBr，可，可加大加大NONO+浓度。浓度。2.2.酸的种类及其浓度：酸的种类及其浓度：酸的种类及其浓度：酸的种类及其浓度：重氮化反应速度加快；重氮化反应速度加快；重氮盐在酸性溶液中稳定；重氮盐在酸性溶液中稳定；防止生成偶氮氨基化合物，影响测定结果防止生成偶氮氨基化合物，影响测定结果强酸性下可加速反应，但酸度过高，会使芳伯氨基游离受阻，强酸性下可加速反应，但酸度过高，会使芳伯氨基游离受阻，影响反应速度。太浓亚硝酸分解影响反应速度。太浓亚硝酸分解在不同酸中重氮化反应的速度为：HBrHCl H2SO4 HNO3盐酸盐酸 1:2.56过量盐酸作用第34页，本讲稿共70页3.温度：温度：温度升高，反应速度加快，而生成的重氮盐的分解也加速，亚硝酸钠滴定液也易分解逸失。滴定应在室温条件4.滴定速度：滴定速度：（先快后慢）先快后慢）反应为分子反应，滴定不宜过快，要不断搅拌。将滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定，加入最后一滴滴定液后，搅拌15分钟方能确定终点。5.电极活化：电极活化：用浓硝酸（加12滴三氯化铁试液）温热活化。第35页，本讲稿共70页n n永永永永停停停停滴滴滴滴定定定定法法法法：铂铂铂铂铂铂铂铂电电电电极极极极系系系系统统统统。用用用用亚亚亚亚硝硝硝硝酸酸酸酸钠钠钠钠液液液液滴滴滴滴定定定定，终终终终点点点点前前前前，溶溶溶溶液液液液中中中中无无无无亚亚亚亚硝硝硝硝酸酸酸酸，线线线线路路路路无无无无电电电电流流流流通通通通过过过过，电电电电流流流流计计计计指指指指针针针针指指指指零零零零。终终终终点点点点时时时时溶溶溶溶液液液液中中中中有有有有微微微微量量量量亚亚亚亚硝硝硝硝酸酸酸酸存存存存在在在在，电电电电极极极极即即即即起起起起氧氧氧氧化化化化还还还还原原原原反反反反应应应应，线线线线路路路路中中中中遂遂遂遂有有有有电电电电流流流流通通通通过过过过，此此此此时时时时电电电电流流流流计计计计指针突然偏转，并不再回复，即为终点。指针突然偏转，并不再回复，即为终点。指针突然偏转，并不再回复，即为终点。指针突然偏转，并不再回复，即为终点。终点的指示方法终点的指示方法第36页，本讲稿共70页n n外指示剂法外指示剂法外指示剂法外指示剂法：常用碘化钾淀粉糊剂或指示液，滴定到常用碘化钾淀粉糊剂或指示液，滴定到达终点时，稍过量的亚硝酸钠在酸性溶液中氧化碘化钾，达终点时，稍过量的亚硝酸钠在酸性溶液中氧化碘化钾，析出的碘遇淀粉即显蓝色析出的碘遇淀粉即显蓝色终点的指示方法终点的指示方法KI淀粉糊剂或试纸淀粉糊剂或试纸2NaNO2+2KI+4HCl 2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O 第37页，本讲稿共70页本品在稀碱溶液中，在本品在稀碱溶液中，在257+1nm257+1nm波长处有最大吸收波长处有最大吸收（二）紫外分光光度法（二）紫外分光光度法对乙酰氨基酚 ChP（2005）取本品约40mg，精密称定，置25ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数为715 计算，即得。第38页，本讲稿共70页苯乙胺类药物基本结构苯乙胺类药物基本结构R1C*HOHCHR3NHR2HOHOR1R2R3CH3H肾上腺素肾上腺素H2NClClHCH3盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗第二节 苯乙氨类药物的分析第39页，本讲稿共70页结构与分析方法1)1)酚羟基，易氧化。2)2)脂烃胺侧链，显弱碱性。3)3)芳伯氨基。4)4)手性碳，光学活性。第40页，本讲稿共70页一、与三氯化铁反应一、与三氯化铁反应一、与三氯化铁反应一、与三氯化铁反应药物药物三氯化铁三氯化铁肾上腺素肾上腺素Adrenaline0.1mol/L0.1mol/L盐酸液中显翠绿色，加盐酸液中显翠绿色，加氨试液显紫色，紫红色氨试液显紫色，紫红色重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素Noradrenaline bitartrate翠绿色，加碳酸氢钠试液显蓝色，翠绿色，加碳酸氢钠试液显蓝色，红色红色盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素Phenylephrine hydrochloride紫色紫色盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素Isoprenaline hydrochloride深绿色，滴加新制深绿色，滴加新制5%5%碳酸氢钠液，碳酸氢钠液，显蓝紫色，红色显蓝紫色，红色盐酸多巴胺盐酸多巴胺Dopamine hydrochloride墨绿色，滴加墨绿色，滴加1%1%氨溶液，显紫红氨溶液，显紫红色色第41页，本讲稿共70页二、与甲醛硫酸反应二、与甲醛硫酸反应药物药物甲醛硫酸甲醛硫酸肾上腺素肾上腺素Adrenaline红色红色重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素Noradrenaline bitartrate淡红色淡红色盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素Phenylephrine hydrochloride玫瑰红，橙红，深棕红玫瑰红，橙红，深棕红盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素Isoprenaline hydrochloride棕色，暗紫色棕色，暗紫色盐酸多巴胺盐酸多巴胺Dopamine hydrochloride第42页，本讲稿共70页 苯乙胺类药物多数含有多羟基酚，更苯乙胺类药物多数含有多羟基酚，更易被氧化显不同颜色。易被氧化显不同颜色。肾上腺素 血红色 异丙肾上腺素 橙黄色 重酒石酸去甲肾上腺素 黄色 盐酸去氧肾上腺素 无色 盐酸甲氧明 无色三、还原性（氧化呈色）反应三、还原性（氧化呈色）反应第43页，本讲稿共70页四、四、UVUV吸收光谱特征吸收光谱特征药物药物溶剂溶剂浓度浓度(mg/ml)nm(nm)吸收度吸收度(A)重酒石酸间羟胺重酒石酸间羟胺水水0.10272盐酸异丙肾上腺盐酸异丙肾上腺素素水水0.052800.50盐酸多巴胺盐酸多巴胺0.5%硫酸硫酸0.03280盐酸芬氟拉明盐酸芬氟拉明0.1mol/L盐酸盐酸0.25263,270盐酸苯乙双胍盐酸苯乙双胍水水0.012340.60盐酸克伦特罗盐酸克伦特罗0.1mol/L盐酸盐酸0.03243,296硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇水水0.08274盐酸伪麻黄碱盐酸伪麻黄碱水水0.50251,257,263第44页，本讲稿共70页特殊杂质与检查特殊杂质与检查一、酮体检查生产工艺：酮体氢化还原制得，若氢化不完全则生产工艺：酮体氢化还原制得，若氢化不完全则 引入酮体杂质。引入酮体杂质。降解产物降解产物肾上腺素红多聚体第45页，本讲稿共70页一、酮体检查肾上腺素（肾上腺素（）中肾上腺酮（）中肾上腺酮（）的检查）的检查 260 280 300 320 A第46页，本讲稿共70页 药物药物杂质杂质 溶剂溶剂C(mg/C(mg/ml)ml)(nm)(nm)A A肾上腺素肾上腺素 肾上腺肾上腺酮酮HCl(92HCl(92000)000)2.0 2.0 310 3100.050.05盐酸去氧肾上腺盐酸去氧肾上腺素素 酮体酮体 水水 2.0 2.0 310 3100.200.20重酒石酸去甲肾重酒石酸去甲肾上腺素上腺素去甲肾去甲肾上腺酮上腺酮 水水 2.0 2.0 310 3100.050.05盐酸异丙肾上腺盐酸异丙肾上腺素素 酮体酮体 水水 2.0 2.0 310 3100.150.15盐酸甲氧明盐酸甲氧明 酮胺酮胺 水水 1.5 1.5 347 3470.060.06紫外分光光度法检查酮体的条件及要求紫外分光光度法检查酮体的条件及要求第47页，本讲稿共70页二、有关物质的检查肾上腺素肾上腺素HPLC盐酸苯乙双胍盐酸苯乙双胍纸色谱法纸色谱法盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素TLC第48页，本讲稿共70页含量测定含量测定原料：非水溶液滴定法、溴量法原料：非水溶液滴定法、溴量法制剂：比色法、提取容量法、紫外分光制剂：比色法、提取容量法、紫外分光 光度法、高效液相色谱法光度法、高效液相色谱法第49页，本讲稿共70页一、非水溶液滴定法一、非水溶液滴定法(一一)基本原理基本原理当当HAHA酸性较强时，反应不能定量完酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低成，必须除去或降低HAHA的酸性，使反的酸性，使反应顺利地完成。应顺利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游离碱类盐游离碱类盐被置换出的弱酸被置换出的弱酸因此，要根据不同情况采用相应测定条件。因此，要根据不同情况采用相应测定条件。第50页，本讲稿共70页(二二)一般方法一般方法供供试试品品+冰冰醋醋酸酸10ml30ml若供试品为氢卤酸盐再加若供试品为氢卤酸盐再加5%5%醋酸汞的冰醋酸液醋酸汞的冰醋酸液3ml5ml结结果果高氯酸滴定液滴定高氯酸滴定液滴定以空白以空白试验校试验校正正第51页，本讲稿共70页1.1.1.1.适用范围适用范围适用范围适用范围 主要用于主要用于主要用于主要用于K K K Kb b b b10101010-8-8-8-8的有机碱盐的含量测定。对碱的有机碱盐的含量测定。对碱的有机碱盐的含量测定。对碱的有机碱盐的含量测定。对碱 性较弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴性较弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴性较弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴性较弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴 定剂和终点指示的方法，可使定剂和终点指示的方法，可使定剂和终点指示的方法，可使定剂和终点指示的方法，可使pKpKpKpKb b b b为为为为8 8 8 813131313的弱碱的弱碱的弱碱的弱碱 性药物采用本法滴定。性药物采用本法滴定。性药物采用本法滴定。性药物采用本法滴定。一般来说：一般来说：一般来说：一般来说：K K K Kb b b b为为为为10101010-8-8-8-810101010-10-10-10-10时，宜选冰醋酸作为溶剂；时，宜选冰醋酸作为溶剂；时，宜选冰醋酸作为溶剂；时，宜选冰醋酸作为溶剂；(药物药物药物药物)K)K)K)Kb b b b为为为为10101010-10-10-10-1010101010-12-12-12-12时，宜选冰醋酸与醋酐的混时，宜选冰醋酸与醋酐的混时，宜选冰醋酸与醋酐的混时，宜选冰醋酸与醋酐的混 合溶液；合溶液；合溶液；合溶液；K K K Kb b b b10101010-12-12-12-12时，应用醋酐作为溶剂。时，应用醋酐作为溶剂。时，应用醋酐作为溶剂。时，应用醋酐作为溶剂。另外，另外，另外，另外，在冰醋酸中加入不同量的在冰醋酸中加入不同量的在冰醋酸中加入不同量的在冰醋酸中加入不同量的甲酸甲酸甲酸甲酸，也能使滴定突跃，也能使滴定突跃，也能使滴定突跃，也能使滴定突跃 显著增大，使一些碱性极弱的杂环类药物获得满显著增大，使一些碱性极弱的杂环类药物获得满显著增大，使一些碱性极弱的杂环类药物获得满显著增大，使一些碱性极弱的杂环类药物获得满 意测定结果意测定结果意测定结果意测定结果。(三三)问题讨论问题讨论第52页，本讲稿共70页 2.2.酸根的影响：酸根的影响：无机酸类，在醋酸介质中的酸性以下列排序递减：无机酸类，在醋酸介质中的酸性以下列排序递减：高氯酸氢溴酸硫酸盐酸硫酸氢根硝酸磷酸高氯酸氢溴酸硫酸盐酸硫酸氢根硝酸磷酸 消除消除HXHX干扰的方法：干扰的方法：加加Hg(Ac)Hg(Ac)2 2 量不足终点不明显，结果偏低。量不足终点不明显，结果偏低。2B2BHX +Hg(Ac)HX +Hg(Ac)2 2 2B 2BHAc +HgXHAc +HgX2 2 过量过量(1(13 3倍倍)不影响测定结果不影响测定结果(三三)问题讨论问题讨论第53页，本讲稿共70页3.3.3.3.滴定剂的稳定性滴定剂的稳定性滴定剂的稳定性滴定剂的稳定性 非水溶液滴定法所用的溶剂为醋酸，具有非水溶液滴定法所用的溶剂为醋酸，具有非水溶液滴定法所用的溶剂为醋酸，具有非水溶液滴定法所用的溶剂为醋酸，具有挥发性，膨胀系数较大，温度和贮存条件都影响滴定剂的浓度。挥发性，膨胀系数较大，温度和贮存条件都影响滴定剂的浓度。挥发性，膨胀系数较大，温度和贮存条件都影响滴定剂的浓度。挥发性，膨胀系数较大，温度和贮存条件都影响滴定剂的浓度。若滴定样品与标定若滴定样品与标定若滴定样品与标定若滴定样品与标定HClOHClOHClOHClO4 4 4 4溶液时的温度不一致，温差未超过溶液时的温度不一致，温差未超过溶液时的温度不一致，温差未超过溶液时的温度不一致，温差未超过10101010时，应将高氯酸滴定液的浓度用下列公式加以校正：时，应将高氯酸滴定液的浓度用下列公式加以校正：时，应将高氯酸滴定液的浓度用下列公式加以校正：时，应将高氯酸滴定液的浓度用下列公式加以校正：4.4.4.4.终点指示方法终点指示方法终点指示方法终点指示方法 常用电位法和指示剂法。常用电位法和指示剂法。常用电位法和指示剂法。常用电位法和指示剂法。Ch.PCh.PCh.PCh.P收载的本类药收载的本类药收载的本类药收载的本类药物大多采用结晶紫指示剂指示终点，少数采用电位法指示终点物大多采用结晶紫指示剂指示终点，少数采用电位法指示终点物大多采用结晶紫指示剂指示终点，少数采用电位法指示终点物大多采用结晶紫指示剂指示终点，少数采用电位法指示终点。(三三)问题讨论问题讨论第54页，本讲稿共70页例：例：重重酒石酸去甲肾上腺素直接滴定酒石酸去甲肾上腺素直接滴定 盐盐酸克伦特罗加醋酸汞消除氢卤酸干扰；由于碱酸克伦特罗加醋酸汞消除氢卤酸干扰；由于碱性较弱，电位法指示终点性较弱，电位法指示终点 硫硫酸沙丁胺醇加入醋酐以增大突跃，结晶紫为指酸沙丁胺醇加入醋酐以增大突跃，结晶紫为指示剂示剂(四四)应用实例应用实例第55页，本讲稿共70页二、溴量法二、溴量法1 1、游离溴及碘极易挥散，操作过程中防逸失、游离溴及碘极易挥散，操作过程中防逸失2 2、不能加入太过量的溴液，以防酚羟基氧化或溴化。一般以过、不能加入太过量的溴液，以防酚羟基氧化或溴化。一般以过量量2 2为宜。为宜。3 3、平行条件作空白，校正操作中溴及碘挥发。、平行条件作空白，校正操作中溴及碘挥发。第56页，本讲稿共70页三、提取酸碱滴定法三、提取酸碱滴定法(溶解性差异溶解性差异)方法：供试品溶于水或矿酸，加入适量碱性试剂使药物游离，用方法：供试品溶于水或矿酸，加入适量碱性试剂使药物游离，用适当的有机溶剂提取，将提取液蒸干，残渣中加中性乙醇溶解，用标适当的有机溶剂提取，将提取液蒸干，残渣中加中性乙醇溶解，用标准酸滴定液直接滴定（或在提取液中加定量过量的标准酸滴定液，蒸准酸滴定液直接滴定（或在提取液中加定量过量的标准酸滴定液，蒸去有机溶剂后，再用标准碱滴定液回滴定）。去有机溶剂后，再用标准碱滴定液回滴定）。硫酸苯丙胺硫酸苯丙胺加水溶解加水溶解加氢氧化钠试液加氢氧化钠试液8ml 8ml 加氯化钠使饱和加氯化钠使饱和乙醚多次提乙醚多次提取取合并乙醚液合并乙醚液精密加硫酸滴定液（精密加硫酸滴定液（0.05mol/L0.05mol/L）25ml25ml振摇振摇低温蒸去乙醚低温蒸去乙醚放放冷至室温冷至室温加甲基红指示液加甲基红指示液2 2滴滴用氢氧化钠（用氢氧化钠（0.1mol/L0.1mol/L）滴定。每）滴定。每1ml1ml硫酸滴定液硫酸滴定液（0.05mol/L0.05mol/L）相当于）相当于18.42mg18.42mg的的C C1818H H2626N N2 2HH2 2SOSO4 4。第57页，本讲稿共70页四、四、UV和比色法和比色法五、五、HPLCHPLC法法六、体内药物分析六、体内药物分析(GC-MS)(GC-MS)第58页，本讲稿共70页n n盐酸克仑特罗的测定盐酸克仑特罗的测定n n取取本本品品约约0.25g0.25g，精精密密称称定定，加加冰冰醋醋酸酸20ml20ml，微微热热使使溶溶解解，放放冷冷，加加醋醋酸酸汞汞试试液液5ml5ml，照照 电电 位位 滴滴 定定 法法，用用 高高 氯氯 酸酸 滴滴 定定 液液（0.1mol/L0.1mol/L）滴滴定定，并并将将滴滴定定结结果果用用空空白白试试 验验 校校 正正。每每 1ml1ml的的 高高 氯氯 酸酸 滴滴 定定 液液(0.1mol/L)(0.1mol/L)相相当当于于31.37mg31.37mg的的C C1212H H1818ClCl2 2N N2 2O OHClHCl。第59页，本讲稿共70页n n硫酸沙丁胺醇的测定硫酸沙丁胺醇的测定 取本品约取本品约0.4g0.4g，精密称定，加冰醋酸，精密称定，加冰醋酸10ml10ml，微热使溶解，微热使溶解，放冷，加醋酐放冷，加醋酐15ml15ml和结晶和结晶紫指示液紫指示液1 1滴用高氯酸滴定液（滴用高氯酸滴定液（0.1mol/L0.1mol/L）滴定，并将滴定结果用空白试验校正。每滴定，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml1ml的高氯酸滴定液的高氯酸滴定液（0.1mol/L0.1mol/L）相当于相当于57.67mg57.67mg的（的（C C1313H H2121NONO3 3）2 2 H H2 2SOSO4 4 第60页，本讲稿共70页n n比色法比色法n n测测定定原原理理加加氯氯仿仿使使栓栓剂剂基基质质溶溶解解后后，用用盐盐酸酸液液（91009100）提提取取盐盐酸酸克克仑仑特特罗罗，加加亚亚硝硝酸酸钠钠试试液液后后，则则分分子子中中的的芳芳伯伯氨氨基基重重氮氮化化，在在酸酸性性溶溶液液中中，与与N N（1 1萘萘基基）乙乙二二胺胺偶偶合合显显色色，在在500nm500nm波波长长处处进进行行比比色测定。色测定。N2+Cl-ClClCH(OH)CH2NHC(CH3)3NHCH2CH2NH2第61页，本讲稿共70页n n供供供供试试试试品品品品溶溶溶溶液液液液的的的的制制制制备备备备:取取取取本本本本品品品品20202020粒粒粒粒，精精精精密密密密称称称称定定定定，切切切切成成成成小小小小片片片片，精精精精密密密密称称称称取取取取适适适适量量量量（约约约约相相相相当当当当于于于于盐盐盐盐酸酸酸酸克克克克仑仑仑仑特特特特罗罗罗罗0.36mg0.36mg0.36mg0.36mg），置置置置分分分分液液液液漏漏漏漏 斗斗斗斗 中中中中，加加加加 温温温温 热热热热 的的的的 氯氯氯氯 仿仿仿仿20ml20ml20ml20ml使使使使 溶溶溶溶 解解解解，用用用用 盐盐盐盐 酸酸酸酸 溶溶溶溶 液液液液（9100910091009100）振振振振摇摇摇摇提提提提取取取取3 3 3 3次次次次（20202020、15151515、10ml10ml10ml10ml），分分分分取取取取酸酸酸酸提提提提取取取取液液液液，置置置置50ml50ml50ml50ml量量量量瓶瓶瓶瓶中中中中，用用用用盐盐盐盐酸酸酸酸液液液液（9100910091009100）稀稀稀稀释释释释至至至至刻刻刻刻度度度度，摇摇摇摇匀，滤过，收集续滤液，即得。匀，滤过，收集续滤液，即得。匀，滤过，收集续滤液，即得。匀，滤过，收集续滤液，即得。n n测测测测定定定定方方方方法法法法:精精精精密密密密量量量量取取取取对对对对照照照照品品品品溶溶溶溶液液液液与与与与供供供供试试试试品品品品溶溶溶溶液液液液各各各各15ml15ml15ml15ml，分分分分置置置置25ml 25ml 25ml 25ml 量量量量瓶瓶瓶瓶中中中中，各各各各加加加加盐盐盐盐酸酸酸酸液液液液（9100910091009100）5ml 5ml 5ml 5ml 与与与与0.10.10.10.1亚亚亚亚硝硝硝硝酸酸酸酸钠钠钠钠溶溶溶溶液液液液1ml1ml1ml1ml，摇摇摇摇匀匀匀匀，放放放放置置置置3min3min3min3min，再再再再各各各各加加加加0.10.10.10.1盐盐盐盐酸酸酸酸萘萘萘萘基基基基乙乙乙乙二二二二胺胺胺胺溶溶溶溶液液液液1ml1ml1ml1ml，混混混混匀匀匀匀，放放放放置置置置10min10min10min10min，用用用用盐盐盐盐酸酸酸酸液液液液（9100910091009100）稀稀稀稀释释释释至至至至刻刻刻刻度度度度，摇摇摇摇匀匀匀匀，在在在在500nm500nm500nm500nm波波波波长处分别测定吸收度，计算，即得。长处分别测定吸收度，计算，即得。长处分别测定吸收度，计算，即得。长处分别测定吸收度，计算，即得。第62页，本讲稿共70页练 习 题1盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有A.重氮化偶合反应B.羟肟酸铁盐反应C.氧化反应D.磺化反应E.碘化反应 第63页，本讲稿共70页2采用亚硝酸钠法测定含量的药物有A.苯巴比妥B.盐酸丁卡因C苯佐卡因D.醋氨苯砜E.盐酸去氧肾上腺素 第64页，本讲稿共70页3下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者A.乙酰水杨酸B.对氨基水杨酸钠C.对乙酰氨基酚D.普鲁卡因E.苯佐卡因 第65页，本讲稿共70页4.亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是A.添加BrB.生成NO+Br C生成HBrD.生成Br2 E.抑制反应进行 第66页，本讲稿共70页5.以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸A.盐酸普鲁卡因B.盐酸普鲁卡因胺C.注射用盐酸普鲁卡因D.盐酸普鲁卡因胺片E.盐酸普鲁卡因注射液 第67页，本讲稿共70页6.盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是A.强酸B.加入适量溴化钾C.室温（1030）下滴定D.滴定管尖端深入液面E.永停法指示终点 第68页，本讲稿共70页7.能和重酒石酸去甲肾上腺素发生颜色反应的试液为A.浓硫酸B.甲醛试液C.氨试液D.甲醛硫酸试液E.茚三酮试液 第69页，本讲稿共70页8.盐酸异丙肾上腺素的检查项目是A.有关物质B.二苯酮C.盐酸D.醛E.酮体 第70页，本讲稿共70页