2021届高三生物第一轮细致复习典型题（基础回顾+网络构建+走进高考题组）微生物的培养与应用试题（含解析）.doc

1微生物的培养与应用微生物的培养与应用一、微生物的实验室培养(填空)1培养基。_培养基按物理性质分类_培养基选择培养基按用途鉴别培养基营养一般都含有水、_、氮源和_等构成还需奥满足不同微生物对 pH、_及_的要求答案：1液体固体碳源无机盐特殊营养物质O22无菌技术。概念：使用较温和的物理或化学方法仅杀死物消毒体表面或内部的一部分对_的微生物常用方法：煮沸消毒法、_、化学药剂消毒法概念：指使用强烈的理化因素杀死舞台内外_，灭菌包括_常用方法：_灭菌、敢惹灭菌、_灭菌答案：2人体有害巴氏消毒法所有微生物芽孢和孢子灼烧高压蒸汽3基本操作技术。(1)配制培养基：计算称量_。(2)接种：2平板划线法：通过在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种到培养基的表面稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的，再将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，从而形成(3)培养：接种后的培养皿放入_中培养。答案：3(1)溶化灭菌倒平板(2)接种环逐步稀释分散梯度稀释单个的菌落(3)恒温箱4菌种保藏。(1)对于频繁使用的菌种我们可以采用_的方法，但这种方法保存的时间不长，菌种易被污染或产生变异。(2)需长期保存的菌种可采用_法。答案：4(1)临时保藏(2)甘油管藏二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(填空)1菌种筛选。(1)选择培养基，允许_的微生物生长，同时_其他种类微生物生长的培养基。(2)分离土壤中分解尿素的细菌，所选用的选择培养基中含有的氮源是_。答案：1(1)特定种类抑制或阻止(2)尿素2统计菌落数目。(1)稀释涂布平板法：原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个，来源于样品稀释液中的一个要求：一般选取菌落数在的平板计数计算公式：每克样品中的菌样数(2)_直接计数法：取样后在显微镜下直接观察计数。3答案：2(1)菌落活菌30300CVM(2)显微镜3设置对照。为了证实培养基是否被杂菌污染，设置的对照组应是将_的培养基置于恒温箱中培养。答案：3不接种微生物4分离菌种的鉴定。(1)方法：通过检测培养基 pH 的变化来判断。(2)原理：在细菌分解尿素的化学反应中，细菌分泌的_将尿素分解成了氨，氨使培养基中碱性增高，pH 升高。答案：4(2)脲酶三、分解纤维素的微生物的分离(判断正误)1纤维素酶是一种酶。()2筛选纤维素分解菌可采用刚果红染色法，刚果红染色后的培养基透明圈越大，说明纤维素分解菌越多。()3分离纤维素分解菌的流程是：土壤取样选择培养涂布到鉴别培养基上培养挑选产生透明圈的菌落。()答案：1.2.3.1(2013江苏卷，18)某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是()A培养基分装到培养皿后进行灭菌B转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D培养过程中每隔一周观察一次解析：在配制培养基的过程中要先灭菌后倒平板，A 错误；转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌再进行划线，B 正确；接种后放置在恒温培养箱中进行培养，C 错误；培养过4程中一般要隔天观察一次，D 错误。答案：B2(2013新课标全国卷，39)临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：(1)为 了 从 样 本 中 获 取 致 病 菌 单 菌 落，可 用 _ 法 或_法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。(2)取该单菌落适当稀释，用_法接种于固体培养基表面，在 37培养箱中培养 24h，使其均匀生长，布满平板。(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有 A、B、C、D 四种抗生素的滤纸片均匀至于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含 A 的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素 A_；含 B 的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素 B_；含 C 的滤纸片周围的透明圈比含 A 的小，说明_；含 D 的滤纸片周围的透明圈也比含 A 的小，且透明圈中出现 了 一 个 菌 落，在 排 除 杂 菌 污 染 的 情 况 下，此 菌 落 很 可 能 是 抗 生 素 D 的_。(4)根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素_。解析：(1)在微生物的培养过程中，常用来分离微生物方法是稀释涂布发或平板划线法。(2)为了使微生物在培养基上能够均匀的分布，一般用涂布法来将微生物接种在培养基上。(3)在抗药 性检验过程中，如果在菌落周围出现透明的圆圈，说明此种抗生素可抑制该细菌；透明圈的大小表示着此种抗生素抗菌的强弱。据此可判断抗菌强弱依次是 A、C、B；D 的透明圈中出现了一个菌落，说明该菌落对此种抗生素具有耐药性。答案：(1)划线稀释涂布(或涂布)(2)涂布(3)敏感不敏感该致病菌对 C 的敏感性比对 A 的弱耐药菌(4)A3(2013四川卷，10)由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示)。(1)图甲中，过程需要的酶有_。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以_作为唯一碳源。、过程需要重复5几次，目的是_。(2)某同学尝试过程的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_；推测该同学接种时可能的操作失误是_。(3)以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种_菌的发酵罐需要先排气，其原因是_。(4)用凝胶色谱法分离一淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较_。解析：(1)步骤为将目的基因与运载体连接，需要先用同一种限制性核酸内切酶分别切割质粒和目的基因，露出相同的黏性末端，然后再用 DNA 连接酶连接为重组质粒；而在以淀粉为唯一碳源的培养基中，其他微生物难以利用淀粉而被抑制，从而筛选高效利用淀粉的工程酵母菌；重复筛选多次可以提高目的菌的纯度。(2)图中平板培养后的结果，形成了多个菌落，因此为稀释涂布平板法，但是菌落分布不均匀，集中分布在一定区域，说明涂布不均匀。(3)由于工程酵母菌能够更高效的利用淀粉，因此在以淀粉为原料的培养条件下，可以更快的进行增殖和发酵，酒精发酵产生的二氧化碳较多，所以需要先排气。(4)凝胶色谱法分离的原理是相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部，只能分布在颗粒之间，通过的路程较短，移动速度较快；相对分子质量较小的蛋白质分子比较容易进入凝胶内的通道，通过的路程较长，移动速度较慢。因此，移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较小。答案：(1)限制性核酸内切酶、DNA 连接酶淀粉进一步筛选纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌(2)稀释涂布平板法涂布不均匀(3)工程酵母工程菌分解淀粉产生葡萄糖的能力强，导致酒精发酵产生 CO2的速率更快(4)小4(2013山东卷，34)胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流程如下：(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌菌 R 时，可选用_或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环，其目的是_。(2)培养酵母菌 R 时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌 R 的生长提供_和_。(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和_以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用_方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是_。(4)纸层析法可用于鉴定所提取胡萝卜素，鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为_。解析：(1)接种微生物的方法主要是稀释涂布平板法和平板划线法，接种过程为了避免其它杂菌的污染，要做无菌操作，所以接种前需对接种环灭菌操作。(2)蔗糖主要提供碳源，当然也可以作为能源物质，硝酸盐含氮元素，可提供氮源(3)温度过高、干燥时间过长会导致胡萝卜素分解；由于萃取剂往往有挥发性，直接加热时挥发出来的有机溶剂遇明火易爆炸；萃取后需将原料中不溶于萃取剂的成分滤去。(4)提取出来的胡萝卜素往往不是纯的，用标6准样品主要起一个对照的作用。答案：(1)稀释涂布平板法灭菌(防止杂菌污染)(2)碳源氮源(3)时间水浴滤去不溶物(4)(实验)对照