饲料 分析蛋白测定幻灯片.ppt

饲料饲料 分析蛋白测定分析蛋白测定第1页，共13页，编辑于2022年，星期三ContentsContents1.适用范围2.测定意义3.测定原理4.仪器设备及试剂5.测定步骤第2页，共13页，编辑于2022年，星期三适用范围适用范围饲料中含氮物质包括真蛋白质和氨化物（非蛋白氮），两者总称为粗蛋白质。本方法适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料等粗蛋白质含量的测定。第3页，共13页，编辑于2022年，星期三适用范围适用范围蛋白氮蛋白氮（真蛋白质提供氮源）非蛋白氮（氨基酸、酰胺、铵盐非蛋白氮（氨基酸、酰胺、铵盐）粗蛋白质第4页，共13页，编辑于2022年，星期三测定意义测定意义蛋白质是生命的基础，是细胞组成、酶、激素免疫抗体等的主要成分，是组织更新、修补的原料。饲料中蛋白质的质和量直接关系到动物生命生长、发育、繁殖和生产，因此，测定饲料中粗蛋白质含量对动物生活和生产有重要作用。测定饲料原料和成品料中粗蛋白质含量的，为科学配置饲料提供可靠依据。第5页，共13页，编辑于2022年，星期三测定原理测定原理 凯氏法测定试样中含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，在用标准浓度的酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白质含量。第6页，共13页，编辑于2022年，星期三仪器设备及试剂仪器设备及试剂样品粉碎机40目分析筛分析天平消化炉消化管凯氏蒸馏装置滴定管98%浓硫酸硫酸钾硫酸铜硼酸溶液标准盐酸溶液混合指示剂蔗糖第7页，共13页，编辑于2022年，星期三 试样选取试样选取四分法四分法样品第8页，共13页，编辑于2022年，星期三测定步骤测定步骤1.试样的消化称取0.51g试样，准确至0.0001g，无损地放入消化管中，加入硫酸铜0.4g，硫酸钾6g，与试样混合均匀，再加浓硫酸10ml，将消化管放置在消化炉上加热（此装置需安装在通风橱内），待样品焦化，泡沫消失，加大火力至410，直至溶液呈透明的蓝绿色。将试样消化液冷却，无损失地转移至100ml容量瓶中，冷却后用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，则为试样分解液。第9页，共13页，编辑于2022年，星期三测定步骤测定步骤v2.试样的蒸馏v取2%硼酸溶液20ml至锥形瓶中作为反应吸收液，并加混合指示剂2滴，将半微量蒸馏装置的冷凝管末端浸入该液面下。准确移取试样分解液10ml注入蒸馏装置的反应腔中，用少量蒸馏水冲洗进样入口，塞好玻璃塞，并在入口处加水密封好。再在碱液入口缓慢加入1020ml 40%氢氧化钠溶液，亦使之流入反应腔中，并把碱液入口封存好。进行蒸馏。以锥形瓶中溶液变蓝绿色开始计时3min，然后将冷凝管末端离开锥形瓶液面，再蒸馏1min，用少量蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液亦流入吸收液中。第10页，共13页，编辑于2022年，星期三测定步骤测定步骤3.滴定用硼酸吸收氨后，立即用0.05mol/L的HCl标准溶液进行滴定，溶液由蓝绿色变为灰红色为终点。4.空白测定称取蔗糖0.01g，以代替试样，按上述测定步骤进行空白测定，消耗0.05mol/L盐酸标准溶液的体积应不得超过0.3ml。5.计算粗蛋白质（%）=第11页，共13页，编辑于2022年，星期三注意事项注意事项每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值作为结果。本方法不能区别蛋白氮和非蛋白氮。每次蒸馏结束后，应用蒸汽将蒸馏装置反应腔中残液洗净。第12页，共13页，编辑于2022年，星期三第13页，共13页，编辑于2022年，星期三