核磁共振波谱法 (6)讲稿.ppt

关于核磁共振波谱法关于核磁共振波谱法(6)第一页，讲稿共三十七页哦核磁共振波谱法核磁共振波谱法(NMR)n n定义：通过测量原子核对射频辐射的吸收来确定有机物或定义：通过测量原子核对射频辐射的吸收来确定有机物或某些生化物质的结构、构型核进行化学反应的一种极为重某些生化物质的结构、构型核进行化学反应的一种极为重要的方法要的方法n n只有那些磁性核（只有那些磁性核（I0I0）的才能产生吸收）的才能产生吸收n n在外磁场作用下，原本简并的核自旋能级分裂呈（2I2I1 1）个分立的核磁能级，当外来辐射能量与相邻）个分立的核磁能级，当外来辐射能量与相邻磁能级的能量间隔相等时，产生能级跃迁，发生核磁共磁能级的能量间隔相等时，产生能级跃迁，发生核磁共振现象。振现象。第二页，讲稿共三十七页哦发展简史发展简史n n三次诺贝尔奖，说明了核磁共振的重要性。三次诺贝尔奖，说明了核磁共振的重要性。n n开拓在化学领域应用的发现：处于不同化学环境的同种原开拓在化学领域应用的发现：处于不同化学环境的同种原子核具有不同的共振频率（化学位移）；相邻自旋核引起子核具有不同的共振频率（化学位移）；相邻自旋核引起的多重谱线（自旋自旋耦合）的多重谱线（自旋自旋耦合）n n脉冲技术和计算机技术促进了FTFTNMRNMR，使，使13C C在有在有机分子结构确定方面得到机分子结构确定方面得到第三页，讲稿共三十七页哦近年的发展近年的发展n n谱仪磁场发展到高强度（1K MHz）：大大提高了灵敏度和分辨率。n n二维及多维核磁共振谱、多量子跃迁等新测定技术：在归属复杂分子，尤其是溶液中蛋白质三级结构的谱线方面非常有用。n n固体高分辨NMR及核磁共振成像技术。第四页，讲稿共三十七页哦应用应用n n结构分析，动态过程：最有效的结构鉴定方法。n n可获得化学键、热力学参数和反应动力学机理。n n定性、定量分析；产品质量鉴定。定性、定量分析；产品质量鉴定。n n化学家、生物化学家、物理学家以及医学家的重要工具：化学家、生物化学家、物理学家以及医学家的重要工具：有机化学、生物化学、药物化学、物理学、临床医学以有机化学、生物化学、药物化学、物理学、临床医学以及工业部门。及工业部门。第五页，讲稿共三十七页哦8.2 基本原理基本原理 原子核的自旋第六页，讲稿共三十七页哦自旋量子数（I）不为零的核都具有磁矩I与原子的质量数A及原子序数Z有关1）质量数和原子序数均为偶数，I0。2）质量数为奇数，I为半整数倍。3）质量数为偶数，原子序数为奇数，I为整数。从而只有2）、3）两类原子核是核磁共振研究的对象。第七页，讲稿共三十七页哦讨论:(1)1/2的原子核的原子核 1H，13C，19F，31P 原子核可看作核电荷均匀分布的球体，并象陀螺一样自 旋，有磁矩产生，是核磁共振研究的主要对象，C，H也是有机化合物的主要组成元素。(2)I=1 或或 I 0的原子核的原子核 I=1 ：2H，14N I=3/2：11B，35Cl，79Br，81Br I=5/2：17O，127I 这类原子核的核电荷分布可看作一个椭圆体，电荷分布不均匀，共振吸收复杂，研究应用较少；第八页，讲稿共三十七页哦第九页，讲稿共三十七页哦H0m=1/2m=-1/2m=1m=-1m=0m=2m=1m=0m=-1m=-2I=1/2I=1I=2zzz第十页，讲稿共三十七页哦3.核磁共振现象 自旋量子数 I=1/2的原子核（氢核），可当作电荷均匀分布的球体，绕自旋轴转动时，产生磁场，类似一个小磁铁。当置于外磁场H0中时，相对于外磁场，有（2I+1）种取向：氢核（I=1/2），两种取向（两个能级）：(1)与外磁场平行，能量低，磁量子数1/2;(2)与外磁场相反，能量高，磁量子数1/2;第十一页，讲稿共三十七页哦n n核磁共振：采用横向外加适当能量的射频场核磁共振：采用横向外加适当能量的射频场B B1 1，仪适当频率的电，仪适当频率的电磁波照射核时可发生能级间的跃迁。磁波照射核时可发生能级间的跃迁。n n满足条件：满足条件：n n不同的原子核，由于不同的原子核，由于不同，在同一磁场中发生共振时的频率不同，在同一磁场中发生共振时的频率不同：鉴别元素或同位素；同一种核，磁感应强度改变，共振不同：鉴别元素或同位素；同一种核，磁感应强度改变，共振频率改变。频率改变。第十二页，讲稿共三十七页哦弛豫过程弛豫弛豫(relaxtion)高能态的核以非辐射的方式回到低能态。高能态的核以非辐射的方式回到低能态。饱和饱和(saturated)低能态的核等于高能态的核。低能态的核等于高能态的核。第十三页，讲稿共三十七页哦驰豫过程驰豫过程1.1.自旋自旋-晶格驰豫：高能态的以热能形式传递给周围的离子。晶格驰豫：高能态的以热能形式传递给周围的离子。全体核的总能量下降，纵向驰豫。全体核的总能量下降，纵向驰豫。驰豫时间驰豫时间T1T1：反映驰豫过程效率，：反映驰豫过程效率，粘度不大，浓度合适的溶液粘度不大，浓度合适的溶液2.2.自旋自旋-自旋驰豫：相邻两能态不同的相同核之间发生的能量交换自旋驰豫：相邻两能态不同的相同核之间发生的能量交换过程。体系的总能量不变，横向驰豫。过程。体系的总能量不变，横向驰豫。驰豫时间驰豫时间T2T2：固体试样的小，使得共振吸收峰的宽度增大，分辨率：固体试样的小，使得共振吸收峰的宽度增大，分辨率降低。降低。固体试样配置成溶液固体试样配置成溶液 第十四页，讲稿共三十七页哦化学位移化学位移n n定义：同一种核，由于在分子定义：同一种核，由于在分子中所处的化学环境不同，吸收中所处的化学环境不同，吸收峰有所变化。峰有所变化。n n理想化：裸露的原子核。裸露的原子核。n n原子核受周围不断运动着的电子原子核受周围不断运动着的电子影响。由楞次定律产生一个感应影响。由楞次定律产生一个感应磁场磁场BB会起到屏蔽作用，使实会起到屏蔽作用，使实际受到的外磁场作用减小。际受到的外磁场作用减小。第十五页，讲稿共三十七页哦n n各官能团的原子核具有不同的屏蔽常数，共振吸收峰对应各官能团的原子核具有不同的屏蔽常数，共振吸收峰对应不同的频率或磁场强度。不同的频率或磁场强度。n n固定射频，扫描磁感应强度作图。固定射频，扫描磁感应强度作图。大的原子核大的原子核B B0需增需增大才产生共振，将在高磁场处出现吸收峰：原子核结构类大才产生共振，将在高磁场处出现吸收峰：原子核结构类型鉴定。型鉴定。第十六页，讲稿共三十七页哦2.化学位移的表示方法位移通常很小，难以准确测定绝对值。相对标准：四甲基硅烷Si(CH3)4（TMS）（内标）以其峰位为谱图坐标原点，测定试样和标准物质的共振频率差。第十七页，讲稿共三十七页哦位移的表示方法 与裸露的氢核相比，TMS的化学位移最大，但规定 TMS=0，其他种类氢核的位移为负值，负号不加。小，屏蔽强，共振需要的磁场强度大，在高场出现，图右侧；大，屏蔽弱，共振需要的磁场强度小，在低场出现，图左侧；为什么用为什么用TMS作为基准作为基准?a.12个氢处于完全相同的化学环境，只产生一个尖峰；b.屏蔽强烈，位移最大。与有机化合物中的质子峰不重迭；c.化学惰性；易溶于有机溶剂；沸点低，易回收。第十八页，讲稿共三十七页哦化学位移的测定化学位移的测定n n测定时将内标TMS和试样溶于氘代溶剂中。n n试验方法：1）固定照射的电磁波频率，不断改变磁感应强度，从低场向高场变化，称为扫场 2）固定磁感应强度，改变照射频率的方法称为扫频。第十九页，讲稿共三十七页哦8.2.4自旋偶合与自旋裂分 每类核磁共振峰不总表现为单峰，有时多重峰。原因：核磁矩之间的相互作用，称为自旋-自旋耦合作用第二十页，讲稿共三十七页哦峰的裂分多重峰的峰间距：偶合常数（J），用来衡量偶合作用的大小，取决于所涉及到的两个核的性质及相隔键的数目，因耦合作用一般是通过成键电子对传递的，范围一般不超过三个键。第二十一页，讲稿共三十七页哦 峰裂分数：n+1 规律；相邻碳原子上的质子数；系数符合二项式的展开式系数；峰面积与同类质子数成正比，仅能确定各类质子之间的相对比例。第二十三页，讲稿共三十七页哦峰裂分数：教材以乙醇为例第二十四页，讲稿共三十七页哦n n在常规乙醇中由于微量H3O或OH能促进乙醇分子间OH质子的迅速交换，消除了亚甲基与羟基质子之间的自旋自旋相互作用，使亚甲基仍保持四重峰。n n在高纯乙醇中不发生分子间羟基质子交换，由于羟基质子的两种自旋状态，使亚甲基四重峰的每一条线有分裂为双线，成为八重峰，羟基分裂为三重峰。详见教材P202 图8-7第二十五页，讲稿共三十七页哦结论结论1）n+1规律：Mn+1 n表示邻近的产生耦合的原子核数（I1/2)2）每相邻两条谱线间的距离相等。3）具有I1/2的耦合核，每组多重谱线间强度比为（a+b)n展开式的各项系数。第二十六页，讲稿共三十七页哦峰裂分数1:11:3:3:11:11:2:1第二十七页，讲稿共三十七页哦峰裂分数1H核与核与n个不等价个不等价1H核相邻时，裂分峰数：核相邻时，裂分峰数：（n+1)(n+1)个；个；(nb+1)(nc+1)(nd+1)=22 2=8Ha裂分为裂分为8重峰重峰1:3:3:11:2:11:11:6:15:20:15:6:1第二十八页，讲稿共三十七页哦峰裂分数Ha裂分为多少重峰？裂分为多少重峰？01234JcaJbaJca JbaHa裂分峰裂分峰:(3+1)(2+1)=12实际实际Ha裂分峰裂分峰:(5+1)=6强度比近似为：强度比近似为：1:5:10:10:5:1第二十九页，讲稿共三十七页哦耦合常数耦合常数 J1 1）J J的大小表示相邻两核间作用力的强弱。的大小表示相邻两核间作用力的强弱。2 2）耦合作用通过成键电子对传递从而耦合常数的大小与相隔化学）耦合作用通过成键电子对传递从而耦合常数的大小与相隔化学键的数目密切相关。键的数目密切相关。随化学键数目增加，随化学键数目增加，J J迅速下降；四个以上的单键难以存在耦合作迅速下降；四个以上的单键难以存在耦合作用，若有就是远程耦合。用，若有就是远程耦合。3 3）J J值与取代基团、分子结构等因素有关。值与取代基团、分子结构等因素有关。4 4）在谱图中观测不到等价核之间的耦合作用。）在谱图中观测不到等价核之间的耦合作用。耦合常数是耦合常数是NMRNMR提供的极为重要的参数之一。提供的极为重要的参数之一。第三十页，讲稿共三十七页哦8.3核磁共振波谱仪：测量化学位移及自旋耦合的精细结构，需具有高分辨率。测量化学位移及自旋耦合的精细结构，需具有高分辨率。射频不同：连续波核磁共振仪射频不同：连续波核磁共振仪CW-NMRCW-NMR和脉冲傅立叶变换核磁共振和脉冲傅立叶变换核磁共振仪（仪（PFT-NMR)PFT-NMR)连续波核磁共振仪连续波核磁共振仪连续波核磁共振仪连续波核磁共振仪组成：磁体、射频发生器、射频接收器以及探头等部分。第三十一页，讲稿共三十七页哦核磁共振波谱仪第三十二页，讲稿共三十七页哦1永久磁铁永久磁铁：提供强的稳定均匀外磁场。超导磁体是方向，但维护费用高 采用频率锁定（内或外）系统保证磁场的稳定性2 射频振荡器射频振荡器：线圈垂直于外磁场，发射一定频率的电磁辐射信号仪提供能量产生跃迁。要求稳定性好。3 射频信号接受器：检测器的作用。射频信号接受器：检测器的作用。4探头：心脏，使试样管保持在磁场中某一固定的位置。整个探头探头：心脏，使试样管保持在磁场中某一固定的位置。整个探头置于磁体的磁极之间。置于磁体的磁极之间。5.扫描单元：控制扫描速度，扫描范围等。扫描单元：控制扫描速度，扫描范围等。第三十三页，讲稿共三十七页哦工作原理工作原理n n扫场方式：扫场线圈在磁体产生的磁感应强度基础上连续扫场方式：扫场线圈在磁体产生的磁感应强度基础上连续作微小改变，扫过全部可能发生共振的区域，当磁感应强作微小改变，扫过全部可能发生共振的区域，当磁感应强度恰好符合某一化学环境的磁核的共振条件，该核便吸收度恰好符合某一化学环境的磁核的共振条件，该核便吸收能量发生跃迁。能量发生跃迁。n n单通道仪器，只能依次逐个扫过设定的磁场范围。从而单通道仪器，只能依次逐个扫过设定的磁场范围。从而扫描效率低，信息量少，灵敏度低且难以实现信号累加。扫描效率低，信息量少，灵敏度低且难以实现信号累加。n n优点：适合于大磁矩、优点：适合于大磁矩、I I 为为1/21/2和高天然丰度的灵敏核和高天然丰度的灵敏核素的波谱测定。素的波谱测定。第三十四页，讲稿共三十七页哦傅立叶变换核磁共振波谱仪 不是通过扫场或扫频产不是通过扫场或扫频产生共振；生共振；恒定磁场，施加强而恒定磁场，施加强而短的全频脉冲，使不同短的全频脉冲，使不同核素同时产生共振，采核素同时产生共振，采集产生的感应电流信号，集产生的感应电流信号，累加后经过傅立叶变换累加后经过傅立叶变换获得一般核磁共振谱图。获得一般核磁共振谱图。（类似于一台多道仪）（类似于一台多道仪）第三十五页，讲稿共三十七页哦FTNMR的特点的特点n n宽频谱的射频脉冲提供的能量使所有核素跃迁，经傅立叶变换得到谱图。n n优点：大大提高了分析速度、信躁比。不但可改善灵敏核素谱图质量，还可使那些磁旋比低、磁矩小、自然丰度低的非灵敏核素实现常规NMR测定；应用面扩展。第三十六页，讲稿共三十七页哦感谢大家观看第三十七页，讲稿共三十七页哦