第六章中药制剂分析动物矿物药课件.ppt

第六章中药制剂分析动物矿物药第1页，此课件共50页哦二、动物药化学成分 1、蛋白质及其水解产物 2、生物碱类3、甾类化合物4、酮类、酸类成分5、萜类、前列腺素、无机化合物、卤素 第2页，此课件共50页哦牛黄及其制剂的分析牛黄及其制剂的分析 第3页，此课件共50页哦一、来源 牛黄为牛科动物黄牛或水牛的胆囊、胆管或肝管中的结石，称为天然牛黄。具有清心、开窍、镇惊、熄风、解毒等功效。临床上用于热病的神昏谵语、烦躁不安、中风窍闭等，著名中成药有牛黄安宫丸、牛黄解毒丸、牛黄清心丸等。第4页，此课件共50页哦组成组成 牛黄主要含有胆汁酸，胆汁酸主要为胆酸、去氧胆酸及其盐类，并含有胆色素及其钙盐、脂类、蛋白质、肽、氨基酸及无机元素等。第5页，此课件共50页哦人工牛黄人工牛黄是按照天然牛黄的主要成分胆红素、胆酸、胆固醇、无机盐等，人工配制的一种牛黄代用品。第6页，此课件共50页哦天然牛黄、人工牛黄成分对比天然牛黄、人工牛黄成分对比天然牛黄天然牛黄：人工牛黄人工牛黄：胆红素胆红素 胆红素胆红素去氧胆酸去氧胆酸 猪去氧胆酸猪去氧胆酸胆酸胆酸 胆酸胆酸去氧胆酸去氧胆酸 胆固醇胆固醇结合型胆甾酸盐结合型胆甾酸盐 磷酸三钙磷酸三钙牛黄酸牛黄酸 硫酸镁硫酸镁胆固醇胆固醇 硫酸亚铁硫酸亚铁粘蛋白粘蛋白 淀粉淀粉氨基酸氨基酸肽类、脂肪酸肽类、脂肪酸卵磷脂卵磷脂钙盐、无机盐钙盐、无机盐第7页，此课件共50页哦 人工牛黄的质量标准人工牛黄为胆酸、胆红素、胆固醇与无机盐等配合而成，要求胆酸的含量限度应为标示量的90%以上，总胆酸含量应不得少于25%，胆红素含量应为标示量的90%以上，人工牛黄应为黄色疏松的粉末、味苦、微甘。第8页，此课件共50页哦胆汁酸的化学反应胆汁酸的化学反应胆汁酸的主要成分是胆酸胆汁酸的主要成分是胆酸(cholic acid,CA)和和去氧胆酸去氧胆酸(deoxycholic acid,DCA)，较易溶于，较易溶于丙酮与乙醇中，其钠盐易溶于水丙酮与乙醇中，其钠盐易溶于水。第9页，此课件共50页哦1、Pettenkofer反应反应原理：蔗糖经浓硫酸作用生成羟甲基糠醛，原理：蔗糖经浓硫酸作用生成羟甲基糠醛，可与胆汁酸结合生成紫色物质。可与胆汁酸结合生成紫色物质。2、Gregory Pascoe反应反应取胆汁取胆汁1ml加入加入0.3%糠醛溶液糠醛溶液1ml，加，加45%硫酸硫酸6ml，振摇后在，振摇后在65度水浴中放置度水浴中放置30分钟，胆酸存分钟，胆酸存在的溶液显蓝色在的溶液显蓝色第10页，此课件共50页哦3、Hammarsten 反应反应20%铬铬酸酸溶溶液液溶溶解解少少量量样样品品，温温热热，胆胆酸酸显显紫紫色色，鹅鹅去去氧氧胆胆酸酸不不显显色色。可可区区别别胆胆酸同系物酸同系物如如胆胆酸酸、阿阿朴朴胆胆酸酸呈呈阳阳性性反反应应，去去氧氧胆胆酸和鹅去氧胆酸呈阴性反应。酸和鹅去氧胆酸呈阴性反应。第11页，此课件共50页哦胆红素的化学反应胆红素的化学反应胆红素不溶于水，溶于苯、氯仿、氯苯、二胆红素不溶于水，溶于苯、氯仿、氯苯、二硫化碳及碱液中，微溶于乙醇、乙醚。钠盐硫化碳及碱液中，微溶于乙醇、乙醚。钠盐易溶于水。易溶于水。1、Gmelin反应反应加浓硝酸产生绿、蓝、紫等色环，机制是胆色加浓硝酸产生绿、蓝、紫等色环，机制是胆色素被氧化成三烯胆素（蓝绿色）素被氧化成三烯胆素（蓝绿色）2、Van den bergh反应反应与重氮化的对氨基苯磺酸偶合成偶氮染料，此与重氮化的对氨基苯磺酸偶合成偶氮染料，此染料在强酸中呈蓝紫色，染料在强酸中呈蓝紫色，pH2.0-5.5时呈红色，时呈红色，pH5.5以上呈绿色。以上呈绿色。第12页，此课件共50页哦定性鉴别定性鉴别理化鉴别理化鉴别1、胆红素反应、胆红素反应加硫酸与过氧化氢各加硫酸与过氧化氢各2滴，显绿色滴，显绿色2、胆酸反应、胆酸反应Gregory Pascoe反应反应3、取牛黄少许，水合氯醛装片，不加热，、取牛黄少许，水合氯醛装片，不加热，置显微镜下观察，由黄棕色或棕红色小置显微镜下观察，由黄棕色或棕红色小颗粒组成不规则团块，加水合氯醛色素颗粒组成不规则团块，加水合氯醛色素迅速溶解，显金黄色，久置变绿色。迅速溶解，显金黄色，久置变绿色。第13页，此课件共50页哦薄层色谱法吸附剂：常用硅胶第14页，此课件共50页哦分离游离胆汁酸的展开剂分离游离胆汁酸的展开剂异异辛辛烷烷：异异戊戊醚醚：冰冰乙乙酸酸：正正丁丁醇醇：水水（10：5：5：3：1）异辛烷：乙酸乙酯：乙酸（异辛烷：乙酸乙酯：乙酸（5：5：1）甲苯：冰醋酸：水（甲苯：冰醋酸：水（10：10：1）氯仿：甲酸：水（氯仿：甲酸：水（65：25：4）异戊醇：冰醋酸：水（异戊醇：冰醋酸：水（18：5：3）正丁醇：冰醋酸：水（正丁醇：冰醋酸：水（17：2：1）异辛烷：异丙醇：醋酸（异辛烷：异丙醇：醋酸（40：10：1）第15页，此课件共50页哦分离结合胆汁酸的展开剂分离结合胆汁酸的展开剂氯仿：异丙醇：醋酸：水（氯仿：异丙醇：醋酸：水（30：30：4：1）正丁醇：醋酸：水（正丁醇：醋酸：水（20：4：3）醋酸乙酯：甲醇：醋酸：水（醋酸乙酯：甲醇：醋酸：水（35：12：2：2）正丁醇：水（正丁醇：水（20：3）醋酸乙酯：甲醇：水（醋酸乙酯：甲醇：水（35：12：2）正丁醇：吡啶正丁醇：吡啶：水（水（20：4：3）甲苯：冰醋酸：水（甲苯：冰醋酸：水（10：10：0.8）第16页，此课件共50页哦显色剂显色剂30%硫酸试剂、硫酸乙醇紫外灯下观察硫酸试剂、硫酸乙醇紫外灯下观察10%磷钼酸乙醇试剂、磷钼酸乙醇试剂、苯甲酸试剂、茴香醛试剂、苯甲酸试剂、茴香醛试剂、三氯化铁试剂、三氯化锑试剂、三氯化铁试剂、三氯化锑试剂、重铬酸钾饱和的重铬酸钾饱和的80%硫酸试剂等。硫酸试剂等。第17页，此课件共50页哦 含量测定含量测定1、胆酸的含量测定、胆酸的含量测定 化学法、比色法、化学法、比色法、TLC、HPLC第18页，此课件共50页哦2、胆红素的含量测定、胆红素的含量测定分光光度法：重氮化试剂显色分光光度法：重氮化试剂显色HPLC第19页，此课件共50页哦麝香及其制剂的分析麝香及其制剂的分析第20页，此课件共50页哦麝香是鹿科动物林麝、马麝、原麝中成麝香是鹿科动物林麝、马麝、原麝中成熟雄体香囊中的干燥分泌物。熟雄体香囊中的干燥分泌物。具有抗炎、具有抗炎、强心、雄性激素样作用，是多种中成药强心、雄性激素样作用，是多种中成药的组成成分之一，如的组成成分之一，如牛黄安宫丸、六神牛黄安宫丸、六神丸、苏合香丸、再造丸等。丸、苏合香丸、再造丸等。第21页，此课件共50页哦（一）化学成分及性质（一）化学成分及性质 1、大大环环化化合合物物 麝麝香香酮酮（含含量量2%以以上上，是是天天然然麝麝香香的的主主要要有有效效成成分分之之一一，也也是是麝麝香香的的香香味味成成分分，有有特特异异强强烈烈的的香香气气，对对冠冠心心病病有有如如同同硝硝酸酸甘甘油油一一样样的的作作用用）、降降麝麝香香酮酮、麝香醇、麝香醇、麝香吡啶和羟基麝香吡啶麝香吡啶和羟基麝香吡啶A、B 等等。2、甾族化合物甾族化合物 含十多种雄甾烷衍生物，如雄性酮、表含十多种雄甾烷衍生物，如雄性酮、表雄酮等，麝香的雄性激素样作用是与麝香所含的雄甾烷衍雄酮等，麝香的雄性激素样作用是与麝香所含的雄甾烷衍生物有关。生物有关。3、胆固醇、酯和蜡胆固醇、酯和蜡第22页，此课件共50页哦4、蛋白质、肽、氨基酸蛋白质、肽、氨基酸 MP（musk peptide fraction）是是麝麝香香中中含含有有的的一一种种分分子子量量为为1000的的多多肽肽，有有很很强强的的抗抗炎炎活活性性，至至少少是是氢氢化化可可的的松松的的40倍倍，另另有有一一种种分分子子量量约约为为5000-6000的的多肽，抗炎活性为氢化可的松的多肽，抗炎活性为氢化可的松的20倍。倍。5、无机盐无机盐6、其他成分、其他成分尿尿囊囊素素（消消肿肿有有效效成成分分）、胆胆酸酸和和胆胆红红素素样样物物质质、尿素、纤维素等尿素、纤维素等第23页，此课件共50页哦（二）二）定性鉴别定性鉴别1、化学法化学法取取麝麝香香细细粉粉，加加五五氯氯化化锑锑共共研研，香香气气消消失失，再再加加少许氨水共研，香气恢复。少许氨水共研，香气恢复。第24页，此课件共50页哦2、气相色谱法、气相色谱法3、紫外光谱法、紫外光谱法乙醇提取液：乙醇提取液：220nm附近有最大吸收、附近有最大吸收、270nm附近有肩峰附近有肩峰乙醚提取液：乙醚提取液：231nm附近有最大吸收、附近有最大吸收、265nm附近有肩峰附近有肩峰正已烷提取液：正已烷提取液：220nm附近有最大吸收、附近有最大吸收、265nm附近有肩峰附近有肩峰第25页，此课件共50页哦4、薄层色谱法薄层色谱法取取麝麝香香2g，加加入入硅硅藻藻土土5g，研研磨磨均均匀匀，置置索索氏提取器中，用氏提取器中，用200ml无水乙醚提取无水乙醚提取。吸附剂：硅胶吸附剂：硅胶常用展开剂：甲苯常用展开剂：甲苯-丙酮丙酮-乙醇（乙醇（8：1：0.1）二氯甲烷二氯甲烷-乙醚，苯：乙醚，二氯甲烷乙醚，苯：乙醚，二氯甲烷-丙酮等丙酮等显色剂：显色剂：30%硫酸乙醇、紫外灯下检视。硫酸乙醇、紫外灯下检视。第26页，此课件共50页哦（三）含量测定（三）含量测定 1、气相色谱法、气相色谱法2、薄层扫描法、薄层扫描法3、高效液相色谱法、高效液相色谱法第27页，此课件共50页哦熊胆及其制剂的分析熊胆及其制剂的分析第28页，此课件共50页哦熊熊胆胆：是是指指棕棕熊熊或或黑黑熊熊的的干干燥燥胆胆汁汁。具具有清热、解痉、平肝、明目的功效。有清热、解痉、平肝、明目的功效。第29页，此课件共50页哦 （一）熊胆的化学成分及性质（一）熊胆的化学成分及性质主要为胆汁酸，胆汁酸的成分为牛磺熊去主要为胆汁酸，胆汁酸的成分为牛磺熊去氧胆酸，经碱水解后得熊去氧胆酸，氧胆酸，经碱水解后得熊去氧胆酸，并含并含有鹅去氧胆酸、胆酸及去氧胆酸等，这些有鹅去氧胆酸、胆酸及去氧胆酸等，这些胆酸通常与牛磺酸、甘氨酸结合并形成钠胆酸通常与牛磺酸、甘氨酸结合并形成钠或钙盐而存在。或钙盐而存在。熊胆的解痉作用主要有效成分就是熊去氧熊胆的解痉作用主要有效成分就是熊去氧胆酸，它也是熊胆特有的成分胆酸，它也是熊胆特有的成分牛磺熊去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸是差向牛磺熊去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸是差向异构体同时存在。异构体同时存在。第30页，此课件共50页哦（二）熊胆的定性鉴别（二）熊胆的定性鉴别 化学法：化学法：取胆仁粉未在紫外灯下应显黄白色荧光，取胆仁粉未在紫外灯下应显黄白色荧光，而不是显棕黄色荧光；另取粉末约而不是显棕黄色荧光；另取粉末约0.2g溶溶于于7%冰醋酸溶液冰醋酸溶液20ml中，溶液不应显浅中，溶液不应显浅蓝色乳浊荧光（与牛、羊胆区别）蓝色乳浊荧光（与牛、羊胆区别）第31页，此课件共50页哦TLC吸附剂：硅胶吸附剂：硅胶展开剂：展开剂：游离胆酸分离：异辛烷游离胆酸分离：异辛烷-醋酸乙酯醋酸乙酯-醋酸醋酸（5：5：1）、异辛烷）、异辛烷-异戊醚异戊醚-冰醋酸冰醋酸-正正丁醇丁醇-水（水（15：5：5：3：1）分离结合胆酸：甲苯分离结合胆酸：甲苯-冰醋酸冰醋酸-水（水（10：10：1）、氯仿）、氯仿-甲醇甲醇-水（水（65：25：4）显色剂：显色剂：30%硫酸乙醇、碘蒸气硫酸乙醇、碘蒸气第32页，此课件共50页哦（三）熊胆定量分析（三）熊胆定量分析 比色法：比色法：取胆或胆浓缩液于旋转蒸发器中干燥，取胆或胆浓缩液于旋转蒸发器中干燥，再真空干燥，残渣溶于水，取水溶液再真空干燥，残渣溶于水，取水溶液0.1ml(约含约含0.2mg胆酸）加胆酸）加lml0.9%糠醛溶液糠醛溶液及及6ml6N硫酸溶液。混合液于硫酸溶液。混合液于70度加热度加热8min，在冰水中冷却，于，在冰水中冷却，于610nm测量吸收测量吸收度，于标准品（度，于标准品（0.1-0.3mg胆酸，符合比尔胆酸，符合比尔定律）比较计算胆中胆酸的含量。定律）比较计算胆中胆酸的含量。第33页，此课件共50页哦薄层扫描法薄层扫描法HPLC：常用反相高效液相色谱法常用反相高效液相色谱法流动相：常用甲醇流动相：常用甲醇-酸水或乙腈酸水或乙腈-酸水酸水检测：紫外未端检测检测：紫外未端检测GC：衍生化法衍生化法第34页，此课件共50页哦蟾酥及其制剂的分析蟾酥及其制剂的分析 第35页，此课件共50页哦蟾蟾酥酥为为蟾蟾蜍蜍科科动动物物中中华华大大蟾蟾酥酥或或黑黑眶眶蟾蟾酥酥的的耳耳下下腺腺及及皮皮肤肤腺腺的的干干燥燥分分泌泌物物，具具强强心心、升升压压、抗抗肿肿瘤瘤、麻麻醉醉、抗抗炎炎镇镇痛痛等等作作用用，是是中中成成药药六六神神丸丸、救救心心丸丸、牛牛黄消炎丸的组成之一黄消炎丸的组成之一。第36页，此课件共50页哦（一）化学成分及性质（一）化学成分及性质 主要含主要含蟾酥甾二烯蟾酥甾二烯，具具24个碳原子。蟾酥个碳原子。蟾酥甾二烯类又分为游离型和结合型，其游离甾二烯类又分为游离型和结合型，其游离型称蟾毒配基，其结合型多为脂溶性的蟾型称蟾毒配基，其结合型多为脂溶性的蟾酥毒素类，蟾酥配基类和精氨酸等结合的酥毒素类，蟾酥配基类和精氨酸等结合的酯类。酯类。第37页，此课件共50页哦（二）定性鉴别（二）定性鉴别1、显色反应、显色反应 对二甲氨基苯甲醛、硫酸对二甲氨基苯甲醛、硫酸醋酐、硫酸醋酐、硫酸酒石酸、对二甲氨基苯甲醛（蟾酥碱、蟾酒石酸、对二甲氨基苯甲醛（蟾酥碱、蟾酥甲碱中吲哚基反应）酥甲碱中吲哚基反应）第38页，此课件共50页哦2、纸色谱法、纸色谱法 常用甲酰胺为固定相、苯常用甲酰胺为固定相、苯-氯仿为展开剂、氯仿为展开剂、三氯化锑显色三氯化锑显色第39页，此课件共50页哦TLC法法展开剂：环己烷展开剂：环己烷-氯仿氯仿-丙酮（丙酮（4：3：3）环己烷环己烷-丙酮（丙酮（7：3）正己烷正己烷-乙酸乙酯（乙酸乙酯（1：9）乙醚乙醚-乙酸乙酯（乙酸乙酯（6：4）显色剂：硫酸乙醇溶液显色剂：硫酸乙醇溶液 第40页，此课件共50页哦4、紫外光谱法、紫外光谱法5、红外光谱法、红外光谱法第41页，此课件共50页哦（三）定量分析（三）定量分析 方法主要有分光光度法、比色法、薄层方法主要有分光光度法、比色法、薄层扫描法、气相色谱法、高效液相色谱法扫描法、气相色谱法、高效液相色谱法 第42页，此课件共50页哦第二节第二节 含含矿物药中药制剂的分析矿物药中药制剂的分析第43页，此课件共50页哦（二）矿物药的分析方法（二）矿物药的分析方法 取样取样试样分解试样分解定性定性定量定量其中试样的分解是将待测组分转入溶液中的重要其中试样的分解是将待测组分转入溶液中的重要步骤，要求试样要分解完全，分解过程中待测组步骤，要求试样要分解完全，分解过程中待测组分不应损失，分解过程中不能引入被测组分或干分不应损失，分解过程中不能引入被测组分或干扰组分。扰组分。第44页，此课件共50页哦常用的分解方法有溶解法（湿法）、熔常用的分解方法有溶解法（湿法）、熔融法（干法）融法（干法）：溶解法：水、稀酸、浓酸、混合酸溶解法：水、稀酸、浓酸、混合酸熔融法：熔融法：熔剂熔剂 碱性熔剂（碳酸钠、氢氧化钠）碱性熔剂（碳酸钠、氢氧化钠）酸性熔剂（硫酸氢钾、焦硫酸钾）酸性熔剂（硫酸氢钾、焦硫酸钾）氧化性熔剂（过氧化钠）氧化性熔剂（过氧化钠）还原性熔剂（碳酸钠加硫）还原性熔剂（碳酸钠加硫）第45页，此课件共50页哦A、容量法容量法 配配位位滴滴定定法法：EDTA（乙乙二二胺胺四四乙乙酸酸）法法应应用用最最广广，多多用用于于测测定定含含钙钙、铝铝等等的的矿矿物物药药，方方法法用用标标准准溶溶液液乙乙二二胺胺四四醋醋酸酸二二钠钠液液直直接接滴滴定定，也也有有加加过过量量乙乙二二胺胺四四醋醋酸二钠溶液用锌液回滴。酸二钠溶液用锌液回滴。酸碱滴定法酸碱滴定法：适用于含碳酸盐类矿物药。：适用于含碳酸盐类矿物药。氧化还原滴定法氧化还原滴定法：适用于含汞、砷、铁：适用于含汞、砷、铁类矿物药。类矿物药。1、化学分析法、化学分析法第46页，此课件共50页哦B、重量法重量法 第47页，此课件共50页哦重量法实验要求重量法实验要求（1）被被测测组组分分要要沉沉淀淀完完全全，且且沉沉淀淀溶溶解解度度要要很很小小。为为促促使使沉沉淀淀完完全全，一一般般以以超超过过20-50%为为宜宜，过过多多可可能能产产生生配配合合反反应应，使沉淀溶解度加大。使沉淀溶解度加大。（2）沉淀要纯净，主要是避免）沉淀要纯净，主要是避免“共沉淀共沉淀”。共沉淀的来源有共沉淀的来源有A：表面吸附。：表面吸附。B：吸留，是：吸留，是由于沉淀速度过快，杂质包入其中。由于沉淀速度过快，杂质包入其中。C：后：后沉淀，是指在放置过程中其它物质沉淀。沉淀，是指在放置过程中其它物质沉淀。第48页，此课件共50页哦（3）要要求求沉沉淀淀颗颗粒粒大大，易易于于洗洗涤涤与与过过滤滤，加加大大颗颗粒粒的的办办法法有有A：减减少少沉沉淀淀物物质质的的浓浓度度，即即在在稀稀溶溶液液中中，慢慢慢慢加加入入沉沉淀淀剂剂，并并不不断断搅搅拌拌，防防止止局局部部浓浓度度过过大大。B：增增加加沉沉淀淀过过程程中中沉沉淀淀的的溶溶解解度度，在在热热溶溶液液中进行沉淀。中进行沉淀。C：陈化，可放一段时间。：陈化，可放一段时间。第49页，此课件共50页哦一、雄黄及其制剂的分析（砷类药）一、雄黄及其制剂的分析（砷类药）第50页，此课件共50页哦