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药物分析课件现在学习的是第1页，共52页基本要求基本要求 一一、掌掌握握吡吡啶类、吩吩噻嗪类、苯苯并并二二氮氮杂卓卓类药物的物的鉴别和含量和含量测定的基本原理与方法。定的基本原理与方法。二二、熟熟悉悉本本类药物物中中典典型型药物物国国外外药典典收收载的的鉴别和含量和含量测定方法。定方法。返 回现在学习的是第2页，共52页第一第一节 吡吡啶类药物物一、典型一、典型药物的物的结构与主要化学性构与主要化学性质（一）典型（一）典型药物的物的结构构 吡吡啶（pyridinepyridine）异烟异烟肼（isoniazidisoniazid）现在学习的是第3页，共52页尼可刹米（尼可刹米（nikethamidenikethamide）现在学习的是第4页，共52页硝苯地平（硝苯地平（nifedipine)现在学习的是第5页，共52页 （二）主要化学性（二）主要化学性质 1 1、弱碱性、弱碱性 吡吡啶环上的氮上的氮为碱性氮原子，吡碱性氮原子，吡啶环的的pKpKb b 值为8.88.8（水中）。尼可刹米除了吡（水中）。尼可刹米除了吡啶环 上氮外，上氮外，位上被位上被酰氨基取代。氨基取代。酰氨基化氨基化 学性学性质不甚活不甚活泼，但遇碱水解后，但遇碱水解后释放出具放出具 有碱性的有碱性的二乙胺二乙胺，故可以，故可以进行行鉴别。现在学习的是第6页，共52页 2 2、还原性原性 异烟异烟肼的吡的吡啶环位上被具有位上被具有还原性原性 酰肼取代，可被氧化取代，可被氧化剂氧化，可与含氧化，可与含羰基的化合基的化合 物物发生生缩合反合反应。3 3、吡、吡啶环的特性的特性 异烟异烟肼和尼可刹米的吡和尼可刹米的吡啶环 、位未取代，而位未取代，而或或位被位被羧基衍生物所基衍生物所 取取代代，其其吡吡啶环可可发生生开开环反反应。（戊戊烯烯二二醛醛反反应）应）现在学习的是第7页，共52页二、二、鉴别试验（一）吡（一）吡啶环的开的开环反反应 本反本反应适用于吡适用于吡啶环的的、位无取代基的异位无取代基的异 烟烟肼和尼可刹米。和尼可刹米。1.1.戊戊烯二二醛反反应（k kning ning 反反应）尼可刹米尼可刹米+溴化溴化氰H2O戊戊烯二二醛衍生物衍生物苯胺苯胺黄色黄色现在学习的是第8页，共52页现在学习的是第9页，共52页（黄色（黄色黄棕色）黄棕色）现在学习的是第10页，共52页（二）（二）酰肼基基团的反的反应1 1还原反原反应异烟异烟肼+AgNOAgNO3 3异烟酸异烟酸银+N2+Ag(白色）白色）银镜异烟异烟肼+亚硒酸硒酸硒硒（红色色）现在学习的是第11页，共52页2 2缩合反合反应 异烟异烟肼的的酰肼基与芳基与芳醛缩合形成合形成腙，其有固定的，其有固定的熔点，可熔点，可用以用以鉴别。ChPChP和和BPBP均采用本法均采用本法鉴别.黄色黄色结晶晶 mpmp为228228231231 现在学习的是第12页，共52页（三）分解三）分解产物的反物的反应使湿使湿润的的红色石蕊色石蕊试纸变蓝尼可刹米尼可刹米+NaOHNaOH二乙胺二乙胺现在学习的是第13页，共52页（一）异烟（一）异烟肼中游离中游离肼的的检查 1.1.TLCTLC法法 Ch.PCh.P中异烟中异烟肼及其注射及其注射,采用采用TLCTLC法中法中杂质对照法照法。对照品：照品：硫酸硫酸肼0.200.20mg/mlmg/ml（相当于游离相当于游离肼5050gg）薄薄层板：板：硅胶（用硅胶（用羧甲基甲基纤维素素钠溶液制溶液制备）展开展开剂：异丙醇异丙醇-丙丙酮（3 3：2 2）显色色剂：乙醇制乙醇制对-二甲氨基苯甲二甲氨基苯甲醛试液液 检测结果：果：供供试品主斑点前方，不得品主斑点前方，不得显黄色斑点黄色斑点 三、有关物三、有关物质检查现在学习的是第14页，共52页(二二)尼可刹米中有关尼可刹米中有关杂质检查 因有关因有关杂质的化学的化学结构不明，故构不明，故Ch.pCh.p采用采用TLCTLC法中的法中的高低高低浓度度对比法比法进行行检查。现在学习的是第15页，共52页(三三)硝苯地平中有关物硝苯地平中有关物质检查 硝苯地平遇光分子内部硝苯地平遇光分子内部发生光化学歧化作用，降解生光化学歧化作用，降解为4-4-（2-2-硝硝基苯基）基苯基）-2,6-2,6-二甲基吡二甲基吡啶-3,5-3,5-二二羧酸二甲酸二甲酯（A A）和和4-4-（2-2-亚硝基苯基）硝基苯基）-2,6-2,6-二甲基吡二甲基吡啶-3,5-3,5-二二羧酸二甲酸二甲酯（B B）。）。其化学其化学结构如下构如下:现在学习的是第16页，共52页第二第二节 吩吩噻嗪类药物物一、基本一、基本结构与化学性构与化学性质（一）（一）结构特点与典型构特点与典型药物物现在学习的是第17页，共52页现在学习的是第18页，共52页现在学习的是第19页，共52页奋乃静乃静现在学习的是第20页，共52页癸氟癸氟奋乃静乃静现在学习的是第21页，共52页盐酸氟酸氟奋乃静乃静现在学习的是第22页，共52页盐酸三氟拉酸三氟拉嗪现在学习的是第23页，共52页（二）主要化学性（二）主要化学性质 1.1.紫外和紫外和红外吸收光外吸收光谱特征特征 硫氮硫氮杂蒽母核蒽母核为共共轭三三环系系统 三个最大吸收峰三个最大吸收峰别在：在：205205nmnm、254nm254nm、300nm300nm 由于由于2 2位、位、1010位上的取代基不同，可引起最大吸收峰的位移。位上的取代基不同，可引起最大吸收峰的位移。硫氮硫氮杂蒽母核的蒽母核的硫硫为二价二价，易氧化，易氧化为砜和和亚砜，其紫外吸，其紫外吸 收光收光谱有明有明显不同，它不同，它们具有四个峰具有四个峰值。另外，另外，取代基取代基R R和和R R的不同，的不同，则可可产生不同的生不同的红外光外光谱现在学习的是第24页，共52页2.2.易氧化呈色易氧化呈色 u二二价价硫硫易易氧氧化化，遇遇不不同同氧氧化化剂如如硫硫酸酸、硝硝酸酸、三三氯化化铁试液液及及过氧化氧化氢等，随着取代基的不同，而呈不同的等，随着取代基的不同，而呈不同的颜色。色。3.3.与金属离子与金属离子络合呈色合呈色 u本本类药物物中中未未被被氧氧化化的的硫硫，可可与与钯离离子子形形成成配配位位化化合合物物，其其氧氧化化产物物则无无此此反反应。此此性性质可可用用于于鉴别和和含含量量测定，并具有定，并具有专属性，可消除氧化属性，可消除氧化产物的干物的干扰。现在学习的是第25页，共52页（一）紫外特征吸收和一）紫外特征吸收和红外吸收光外吸收光谱本本类药物可用物可用UV和和IR鉴别，Ch.P中中UV鉴别实例如下：例如下：药物名称物名称 溶溶 剂 浓度（度（g/mlg/ml）maxmax（nmnm）A E A E1%1%1cm1cm盐酸酸氯丙丙嗪 盐酸（酸（9 10009 1000）5 254 0.46 915 5 254 0.46 915 306 306 盐酸异丙酸异丙嗪 盐酸（酸（0.010.01mol/Lmol/L）6 249 6 249 883937 883937奋乃静乃静 无水乙醇无水乙醇 7 258 0.65 7 258 0.65 癸氟癸氟奋乃静乃静 乙醇乙醇 10 260 10 260 盐酸氟酸氟奋乃静乃静 盐酸（酸（9 10009 1000）10 255 10 255 553593 553593 盐酸三氟拉酸三氟拉嗪 盐酸（酸（1 201 20）10 256 10 256 630 630盐酸硫利达酸硫利达嗪 乙醇乙醇 8 264 8 264与与315 315 二、二、鉴别试验现在学习的是第26页，共52页（二）二）显色反色反应1.与氧化与氧化剂的的显色反色反应 药物名称物名称 硫硫 酸酸 硝硝 酸酸 过氧化氧化氢 盐酸酸氯丙丙嗪 显红色色,渐变淡黄色淡黄色 盐酸异丙酸异丙嗪 显樱桃桃红色色,放置放置 生成生成红色沉淀色沉淀,加加热即溶解即溶解,后后颜色色渐变深深 溶液由溶液由红色色转变为橙黄色橙黄色 奋乃静乃静 显深深红色色;放置后放置后 红色色渐褪去褪去 盐酸氟酸氟奋乃静乃静 显淡淡红色色,温温热 后后变成成红褐色褐色 盐酸三氟拉酸三氟拉嗪 生成微生成微带红色的白色沉淀色的白色沉淀;放放 置后置后,红色色变深深,加加热后后变黄色黄色 盐酸硫利达酸硫利达嗪 显蓝色色 现在学习的是第27页，共52页2.与与钯离子离子络合合显色反色反应 利用分子利用分子结构中未被氧化的硫与金属构中未被氧化的硫与金属钯离子离子络合形成有色合形成有色络 合物，如与癸氟合物，如与癸氟奋乃静形成乃静形成红色色络合物。合物。现在学习的是第28页，共52页现在学习的是第29页，共52页（三）分解三）分解产物的反物的反应 癸氟癸氟奋乃静乃静 碳酸碳酸钠及碳酸及碳酸钾 F F-+酸性茜素酸性茜素锆试液液 ZrFZrF6 6 2-2-配位离子，茜素游离使溶液由配位离子，茜素游离使溶液由红色色变为黄黄色。色。600600炽灼灼现在学习的是第30页，共52页盐酸异丙酸异丙嗪中特殊中特殊杂质检查u 主要有：主要有：2-2-二甲氨基二甲氨基-1-1-丙醇；丙醇；N,N,-N,N,-三甲基三甲基-10-10H-H-吩吩噻嗪-10-10-乙胺异构体和乙胺异构体和结构不清的分解构不清的分解产物物。因此采用。因此采用TLCTLC法中的法中的 高低高低浓度度对比法比法控制上述控制上述这些些杂质的限量。的限量。三、三、特殊特殊杂质检查返 回现在学习的是第31页，共52页第三第三节 苯并二氮苯并二氮杂卓卓类药物物一、一、结构特征与典型构特征与典型药物物NNClH3CO地西泮地西泮现在学习的是第32页，共52页阿普阿普唑仑现在学习的是第33页，共52页奥沙西泮奥沙西泮现在学习的是第34页，共52页氯氮卓氮卓NNNCH3OClH现在学习的是第35页，共52页(一一)化学化学鉴别试验 1 1。沉淀反。沉淀反应 氯氮卓氮卓 橙橙红色色沉淀沉淀 阿普阿普唑仑 盐酸氟西泮酸氟西泮 KBiIKBiI4 4 也生成也生成橙橙红色色沉淀沉淀 氯硝西泮硝西泮 放置后，沉淀放置后，沉淀颜色色变深，深，因此可以相互区因此可以相互区别。二、二、鉴别试验阿普阿普唑仑+遇硅遇硅钨酸酸 白色沉淀，白色沉淀，药典中也用于典中也用于鉴别。现在学习的是第36页，共52页2.2.水解后呈芳伯胺反水解后呈芳伯胺反应 氯氮卓和奥沙西泮，其反氮卓和奥沙西泮，其反应如下：如下：现在学习的是第37页，共52页3.3.硫酸硫酸-荧光反光反应 本本类药物溶于硫酸后，在紫外光（物溶于硫酸后，在紫外光（365365nmnm）下，下，显不同不同颜色的色的荧光。例如：光。例如：地西泮地西泮 黄黄绿色色 黄色黄色 氯氮卓氮卓 黄色黄色 紫色紫色 艾司艾司唑仑 +H H2 2SOSO4 4 亮亮绿色色 +稀硫酸稀硫酸 天天蓝色色 硝西泮硝西泮 淡淡蓝色色 蓝绿色色 奥沙西泮奥沙西泮 淡黄淡黄绿色色现在学习的是第38页，共52页4.4.分解分解产物的反物的反应 本本类药物多物多为有机有机氯化合物，用氧瓶燃化合物，用氧瓶燃烧法破坏，法破坏，显氯化物反化物反应。Ch.PCh.P用于地西泮和三用于地西泮和三唑仑药物的物的鉴别。现在学习的是第39页，共52页（二）紫外特征吸收和（二）紫外特征吸收和红外吸收光外吸收光谱药物名称物名称 溶溶 剂 浓度（度（g/mlg/ml）maxmax（nmnm）A A地西泮地西泮 0.5%0.5%硫酸甲醇溶液硫酸甲醇溶液 5 242 5 242 约0.510.51 282 282 约0.230.23 366 366 氯氮卓氮卓 盐酸溶液酸溶液(91000)7 245,308 (91000)7 245,308 阿普阿普唑仑 盐酸溶液酸溶液(91000)12 264 (91000)12 264 盐酸氟西泮酸氟西泮 硫酸甲醇硫酸甲醇(136)10 2392,2842(136)10 2392,2842 比比值1.951.952.502.50 3622 3622 氯硝西泮硝西泮 0.5%0.5%硫酸甲醇溶液硫酸甲醇溶液 10 2392,3072 10 2392,3072 奥沙西泮奥沙西泮 乙醇乙醇 10 229,3152(10 229,3152(较弱弱)红外吸收光外吸收光谱:已用于地西泮、阿普已用于地西泮、阿普唑仑、艾司、艾司唑仑、盐酸氟西酸氟西 泮、泮、氯硝西泮和奥沙西泮的硝西泮和奥沙西泮的鉴别。现在学习的是第40页，共52页 （一）有关物（一）有关物质检查 Ch.P Ch.P 收收载的八种本的八种本类药物，除物，除氯氮卓外，其余氮卓外，其余均作此均作此项检查。其。其检查方法除了方法除了三三唑仑采用采用GCGC法法外，外，其余均用其余均用TLCTLC法法进行行检查。USP(24)USP(24)和和BP(2000)BP(2000)中中对氯氮卓氮卓都都规定了此定了此项检查，而且均用，而且均用TLCTLC法法进行行检查。三、特殊三、特殊杂质检查现在学习的是第41页，共52页 1.1.地西泮中有关物地西泮中有关物质的的检查 地西泮在合成地西泮在合成过程中因其副反程中因其副反应，可能引入可能引入N-N-去甲基苯甲二氮卓去甲基苯甲二氮卓及及化学化学结构不清的有关物构不清的有关物质，可，可 采用采用TLCTLC法中的高低法中的高低浓度度对比法比法进行行检查。2.2.氯氮卓中有关物氮卓中有关物质的的检查 USP(24)USP(24)用用TLCTLC法法检查氯氮卓中的氮卓中的 有关物有关物质，并，并规定其分解定其分解产物物2-2-氨基氨基-5-5-氯-2-2-苯甲苯甲酮含量不得含量不得 过0.01%0.01%；中；中间体体7-7-氯-1-1，3-3-二二氢-5-5-苯基苯基-2-2H-1H-1，4-4-苯并二氮苯并二氮杂卓卓-2-2-酮-4-4-氧化物氧化物含量不得含量不得过0.1%0.1%。现在学习的是第42页，共52页(二二)降解降解产物的物的检查 地地西西泮泮注注射射液液列列入入此此项检查，因因本本品品在在贮藏藏过程程中中有有可可能能分分解解成成2-2-甲甲氨氨基基-5-5-氯-二二苯苯甲甲酮等等杂质。采采用用HPLCHPLC法法进行行检查。返 回现在学习的是第43页，共52页一、非水溶液滴定法一、非水溶液滴定法(一一)基本原理基本原理第四第四节 含量含量测定定当当HAHA酸性酸性较强时，反，反应不能定量完不能定量完成，必成，必须除去或降低除去或降低HAHA的酸性，使反的酸性，使反应顺利地完成。利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游离碱游离碱类盐被置被置换出的弱酸出的弱酸因此，要根据不同情况采用相因此，要根据不同情况采用相应测定条件。定条件。现在学习的是第44页，共52页(二二)一般方法一般方法供供试品品+冰冰醋醋酸酸10ml30ml若供若供试品品为氢卤酸酸盐再加再加5%5%醋酸汞的冰醋酸液醋酸汞的冰醋酸液3ml5ml结果果高高氯酸滴定液滴定酸滴定液滴定以空白以空白试验校正校正现在学习的是第45页，共52页 (三三)问题讨论1.1.适用范适用范围 主要用于主要用于K Kb b1010-8-8的有机碱的有机碱盐的含量的含量测定。定。对碱性碱性较弱弱 的的杂环类药物，只要物，只要选择合适的溶合适的溶剂、滴定、滴定剂和和终点指示的方法，点指示的方法，可使可使pKpKb b为8 81313的弱碱性的弱碱性药物采用本法滴定。物采用本法滴定。一般来一般来说：K Kb b为1010-8-81010-10-10时，宜，宜选冰醋酸作冰醋酸作为溶溶剂；药物的物的 K Kb b为1010-10-101010-12-12时，宜，宜选冰醋酸与醋冰醋酸与醋酐的混合溶液；的混合溶液；K Kb b1010-12-12时，应用醋用醋酐作作为溶溶剂。另外，另外，在冰醋酸中加入不同量的在冰醋酸中加入不同量的甲酸甲酸，也能使滴定突，也能使滴定突跃显著增著增 大，使一些碱性极弱的大，使一些碱性极弱的杂环类药物物获得得满意意测定定结果果。现在学习的是第46页，共52页 2.2.酸根的影响：酸根的影响：无机酸无机酸类，在醋酸介，在醋酸介质中的酸性以下列排序中的酸性以下列排序递减：减：高高氯酸酸氢溴酸硫酸溴酸硫酸盐酸硝酸酸硝酸 消除消除HXHX干干扰的方法：的方法：加加Hg(Ac)Hg(Ac)2 2 量不足量不足终点不明点不明显，结果偏低。果偏低。2 2B BHX +Hg(Ac)HX +Hg(Ac)2 2 2B 2BHAc +HgXHAc +HgX2 2 过量量(1(13 3倍倍)不影响不影响测定定结果果现在学习的是第47页，共52页3.3.终点指示方法点指示方法 u 常用常用电位法和指示位法和指示剂法法 Ch.PCh.P收收载的的本本类药物物大大多多采采用用结晶晶紫紫指指示示剂指指示示终点点，少少数数采采用用电位法指示位法指示终点点。现在学习的是第48页，共52页(四四)应用用实例例 1.1.游离弱碱性游离弱碱性药物物测定定 异烟异烟肼、尼可刹米、地西泮及、尼可刹米、地西泮及氯氮卓等。基于氮卓等。基于这些些药物分子物分子结构中氮原子的弱碱性，可用非水溶液滴定法直接构中氮原子的弱碱性，可用非水溶液滴定法直接测定其含量。定其含量。由于由于这些些药物的碱性物的碱性强弱不同，弱不同，测定定时所采用溶所采用溶剂、指示、指示剂及其指示及其指示终点的方法也不尽相同。点的方法也不尽相同。药物名称物名称 取取样量量(g)g)溶溶 剂 指示指示剂 终点点颜色色 尼可刹米尼可刹米 0.15 0.15 冰醋酸冰醋酸1010ml ml 结晶紫晶紫 蓝绿色色 地西泮地西泮 0.2 0.2 冰醋酸、酸冰醋酸、酸酐1010ml ml 结晶紫晶紫 绿色色 氯氮卓氮卓 0.3 0.3 冰醋酸冰醋酸1010ml ml 结晶紫晶紫 蓝色色现在学习的是第49页，共52页 2.2.氢卤酸酸盐类药物物测定定 当当这些些药物溶于冰醋酸物溶于冰醋酸时，由于，由于氢卤酸在冰醋酸中酸性酸在冰醋酸中酸性较强，对测定有干定有干扰，必，必须先加入先加入过量的量的醋酸汞冰醋酸汞冰醋酸醋酸溶液，使其形成溶液，使其形成难以以电离的离的卤化汞，而化汞，而氢卤酸酸盐药物，物，则转变成可成可测定的醋酸定的醋酸盐。然。然后再用高后再用高氯酸滴定液滴定，并可酸滴定液滴定，并可获得得满意的意的结果。果。应用示例如下：用示例如下：药物名称物名称 取取样量量(g)g)溶溶 剂 加入醋酸汞加入醋酸汞试液液(ml)ml)指示指示剂 终点点颜色色 盐酸酸氯丙丙嗪 0.2 0.2 醋醋酐1010ml 5 ml 5 橙黄橙黄 玫瑰玫瑰红色色 盐酸异丙酸异丙嗪 0.3 0.3 冰醋酸冰醋酸1010ml 4 ml 4 结晶紫晶紫 蓝色色 盐酸氟酸氟奋乃静乃静 0.3 0.3 冰醋酸冰醋酸2020ml 5 ml 5 结晶紫晶紫 蓝绿色色 盐酸酸环丙沙星丙沙星 0.2 0.2 冰醋酸冰醋酸2525ml 5 ml 5 橙黄橙黄 粉粉红色色 氢溴酸溴酸东莨菪碱莨菪碱 0.3 0.3 冰醋酸冰醋酸2020ml 5 ml 5 结晶紫晶紫 纯蓝色色 盐酸硫利达酸硫利达嗪 0.3 0.3 丙丙酮100100ml 5 ml 5 电位滴定法位滴定法 现在学习的是第50页，共52页3.3.硫酸硫酸盐类药物物测定定 硫酸是二元酸，在水溶液中能完成二硫酸是二元酸，在水溶液中能完成二级解离，生解离，生成成SOSO4 42-2-，但在但在非水介非水介质中中，只，只显示一元酸解离示一元酸解离为HSOHSO4 4-，即只供即只供给一个一个H H+，所以硫酸所以硫酸盐类药物在冰醋酸中，只物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸能滴定至硫酸氢盐，因此可以用高，因此可以用高氯酸滴定液直接滴酸滴定液直接滴定。定。现在学习的是第51页，共52页（1 1）硫酸阿托品）硫酸阿托品测定：定：阿托品阿托品为碱性碱性较强的的 一元碱一元碱药物，因而硫酸阿托品的化学物，因而硫酸阿托品的化学结构式可以构式可以 简写写为(BHBH+)2 2SOSO4 42-2-，用高用高氯酸直接滴定酸直接滴定时的反的反 应式式为：(BHBH+)2 2SOSO4 42-2-+HClO +HClO4 4 (BH (BH+)ClOClO4 4-+(BH +(BH+)HSOHSO4 4-可根据可根据1 1molmol的硫酸阿托品消耗的硫酸阿托品消耗1 1molmol高高氯酸的酸的关系关系计算其含量算其含量。现在学习的是第52页，共52页