转录与转录后加工 (2)讲稿.ppt

关于转录与转录后加工(2)第一页，讲稿共九十一页哦转转录录双链DNA转录产物RNAACCTTGGAUGGA模板链非模板链习惯上，我们将习惯上，我们将DNADNA序列与序列与 RNARNA序列统一起来。因此，序列统一起来。因此，某基因的序列，启动子序列等指的是非模板链的序列。某基因的序列，启动子序列等指的是非模板链的序列。第二页，讲稿共九十一页哦RNA聚合酶双链DNA非模板链模板链转录产物RNA第三页，讲稿共九十一页哦正在解链的双链DNARNA聚合酶模板链非模板链转录产物RNA RNA-DNA 杂交体转录方向第四页，讲稿共九十一页哦正在解链的双链DNA正超螺旋DNA负超螺旋DNA非模板链 RNA-DNA 杂交体转录产物RNARNA聚合酶第五页，讲稿共九十一页哦6.1 6.1 原核微生物基因的转录原核微生物基因的转录第六页，讲稿共九十一页哦1 1，RNARNA聚合酶聚合酶五个亚基组成：五个亚基组成：2 2 ，其中其中 2 2为核心酶。为核心酶。五个亚基的大小，功能如下：五个亚基的大小，功能如下：亚基 KDa功能16识别启动子，选择模板链150催化磷酸二酯键的形成160可能与模板结合有关36.5可能参与全酶和启动子的结合第七页，讲稿共九十一页哦2 2，启动子结构，启动子结构整个启动子分为如下整个启动子分为如下2 2个部分：个部分：RNARNA聚合酶进入位点聚合酶进入位点CAP-cAMPCAP-cAMP结合位点结合位点识别识别位点（位点（-35-35 序列）序列）结合位点（结合位点（-10-10 序列）序列）两位点之间的距离两位点之间的距离(15-20(15-20bp)bp)位点位点 -70 -50 -70 -50 强结合点强结合点位点位点 -50 -40 -50 -40 弱结合点弱结合点CAP-cAMPCAP-cAMP先结合位点先结合位点，然后，然后结合位点结合位点；RNARNA聚合酶先结合聚合酶先结合-35-35 序列，再结合序列，再结合-10-10 序列，序列，最后形成开发性启动子复合物，启动转录。最后形成开发性启动子复合物，启动转录。第八页，讲稿共九十一页哦RNARNA聚合酶进入位点聚合酶进入位点-35-35 序列序列-10-10 序列序列转录转录起点起点E.coliE.coli 启动子序列启动子序列第九页，讲稿共九十一页哦3 3，转录的终止，转录的终止原核微生物基因的两类转录终止子原核微生物基因的两类转录终止子不依赖蛋白质辅助因子的终止子不依赖蛋白质辅助因子的终止子该终止子有富含该终止子有富含GCGC对的回文序列对的回文序列以及回文序列下游方向的多个以及回文序列下游方向的多个ATAT对对.依赖蛋白质辅助因子的终止子依赖蛋白质辅助因子的终止子该终止子有回文序列该终止子有回文序列,但但GCGC对，对，ATAT对较少。对较少。需要辅助因子辅助转录终止。需要辅助因子辅助转录终止。第十页，讲稿共九十一页哦GCGC对对ATAT对对GCGC对对终止子是终止子是DNADNA序列。包含丰序列。包含丰富的富的GCGC对和对和ATAT对。对。该终止子形成的该终止子形成的RNARNA序列呈典型序列呈典型的的茎环结构。茎环结构。该该RNARNA序列在序列在终止子处离开终止子处离开模板模板DNADNA，转录即终止。转录即终止。不依赖蛋白质不依赖蛋白质辅助因子的辅助因子的终止终止第十一页，讲稿共九十一页哦辅助因子辅助因子形成六聚体与正在转录的RNA结合。六聚体追上正在转录的RNA聚合酶。RNA离开 DNA,转录结束。依赖蛋白质辅依赖蛋白质辅助因子的终止。助因子的终止。第十二页，讲稿共九十一页哦6.2 6.2 真核微生物基因的转录真核微生物基因的转录第十三页，讲稿共九十一页哦6.2.16.2.1，酵母菌，酵母菌RNARNA聚合酶聚合酶RNA聚合酶KDa亚基数位置产物RNA聚合酶63013核仁rRNARNA聚合酶56712核质hnRNARNA聚合酶 69714核质tRNASnRNA第十四页，讲稿共九十一页哦12 3 4 5 678910将将RNARNA聚合酶聚合酶进行电泳进行电泳条条1：与：与相当，与模板结合，相当，与模板结合，有一个有一个C C末端结构域（末端结构域（CTDCTD）,含有保守的含有保守的7 7肽：肽：Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser.Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser.通过通过磷酸化与去磷酸化磷酸化与去磷酸化参与参与转录的起始。转录的起始。与原核与原核RNARNA聚合酶聚合酶进行比较进行比较条条2：与：与 相当，相当，与催与催化活性有关。化活性有关。条条3：与：与 相当，相当，参与全参与全酶和启动子的结合酶和启动子的结合条条4：与：与 相当，相当，与与识别识别启动子启动子有关。有关。条条5，6，8三个三个亚基是酵母亚基是酵母三种三种RNARNA聚合酶共有的组份，聚合酶共有的组份，对于存活很重要对于存活很重要。第十五页，讲稿共九十一页哦6.2.26.2.2，第一类基因的转录，第一类基因的转录第一类基因指的是第一类基因指的是RNARNA聚合酶聚合酶转录的基因转录的基因，即即1818S rRNA,5.8S rRNA,28S rRNAS rRNA,5.8S rRNA,28S rRNA的的基因。基因。1，成串排列的成串排列的rRNArRNA基因基因18s-5.8s-28s单位非转录间隔区（Spacer）成串排列的成串排列的rRNArRNA基因被非转录间隔区分开，基因被非转录间隔区分开，非转录间隔区也被转录，只是转录产物很快被降解。非转录间隔区也被转录，只是转录产物很快被降解。第十六页，讲稿共九十一页哦18s-5.8s-28s单位非转录间隔区（Spacer）1818s s5.8s5.8s28s28s第十七页，讲稿共九十一页哦2 2，启动子启动子1 1）上游控制元件（上游控制元件（Upstream control element,UCEUpstream control element,UCE）位于非转录间隔区内，位于非转录间隔区内，-150-150bpbp起。起。功能：大大增加转录效率功能：大大增加转录效率跨间隔区与转录区之间的分界点，与跨间隔区与转录区之间的分界点，与UCEUCE隔隔7070bpbp。序列为：序列为：CTCCGATCG(N)CTCCGATCG(N)5 5TGGGCCGCCGGTGGGCCGCCGG功能：决定转录起始的精确位置。功能：决定转录起始的精确位置。2 2）核心启动子（核心启动子（Core promoterCore promoter）第十八页，讲稿共九十一页哦18s-5.8s-28s单位非转录间隔区（Spacer）上游控制元件上游控制元件核心启动子核心启动子转录起始转录起始第一类基因的转录启动子第一类基因的转录启动子第十九页，讲稿共九十一页哦3 3，转录的起始转录的起始需要：需要：UBF1,SL1,UBF1,SL1,RNARNA聚合酶聚合酶(PolPol)1）UBF1结合到启动子上2）SL1结合3）Pol结合，转录开始第二十页，讲稿共九十一页哦6.2.36.2.3，第三类基因的转录，第三类基因的转录第三类基因指的是第三类基因指的是RNARNA聚合酶聚合酶转录的基因转录的基因，即一些生理上小的即一些生理上小的基因：基因：真核生物真核生物tRNAtRNA基因基因 （内部启动子）（内部启动子）5 5S rRNAS rRNA基因（内部启动子）基因（内部启动子）SnRNASnRNA基因基因 （上游启动子）（上游启动子）第二十一页，讲稿共九十一页哦转录起始点box A,box Bbox A,box B内部启动子内部启动子1 1）TFTFC C结合结合到到box A-Bbox A-B2 2）TFTFB B结合结合到上游。到上游。3 3）PolPol结合结合第二十二页，讲稿共九十一页哦6.2.36.2.3，第二类基因的转录，第二类基因的转录第二类基因指的是第二类基因指的是RNARNA聚合酶聚合酶转录的基因转录的基因，即蛋白质即蛋白质基因。基因。1 1，SV40SV40的启动子的启动子TATA box TATA box 转录起始点的选择转录起始点的选择CCAAT box CCAAT box 转录起始的频率转录起始的频率增强子增强子 转录的频率转录的频率第二十三页，讲稿共九十一页哦2 2，酵母的启动子酵母的启动子1 1）上游激活序列（）上游激活序列（Upstream activation sequence,UASUpstream activation sequence,UAS）长度为长度为10-3010-30bpbp位于上游位于上游50-50050-500bpbp处处一个启动子包括几个一个启动子包括几个UASUAS，2 2个个UASUAS才能有激活作用。才能有激活作用。与增强子的功能相当与增强子的功能相当 为特定的为特定的DNADNA结合蛋白所识别结合蛋白所识别2 2）TATATATA元件元件3 3）InrInr元件元件 与与TATATATA元件的功能相当，无元件的功能相当，无TATATATA，用，用InrInr代替代替TATAboxTATAboxUASUAS第二十四页，讲稿共九十一页哦3 3，转录因子转录因子即在即在转录过程中起辅助作用的蛋白质因子。转录过程中起辅助作用的蛋白质因子。转录因子不是转录因子不是RNARNA聚合酶的一部分。聚合酶的一部分。2 2），），通用转录因子通用转录因子对所有合成对所有合成RNARNA的启动子都需要。酵母的通用转录因子：的启动子都需要。酵母的通用转录因子：TFTF D D 包括一个包括一个TATATATA结合蛋白结合蛋白(TBP)TBP)及其辅助因子及其辅助因子(TAF)TAF)TFTF B B 结合于结合于TATATATA与起始转录位点之间。与起始转录位点之间。TFTF F F 与与RNARNA聚合酶聚合酶作用。作用。TFTF H H 使使RNARNA聚合酶聚合酶的的CTDCTD磷酸化。磷酸化。TFTF E E 结合于启动子的空隙中。结合于启动子的空隙中。TFTF A A 影响影响TBPTBP与与TATATATA的结合。的结合。TFTF J J1 1），），激活因子和抑制因子激活因子和抑制因子第二十五页，讲稿共九十一页哦DNATATA-boxTFTF D DTF D 起始起始TF BTFTF B BTFTF A ATFTF A ATFTF F FTF FPolPolPolTFTF E ETF ETFTF H HTF HTFTF J JTF J第二十六页，讲稿共九十一页哦第二十七页，讲稿共九十一页哦第二十八页，讲稿共九十一页哦第二十九页，讲稿共九十一页哦TATATATA结合蛋白结合蛋白(TBP)TBP)与与TATA-boxTATA-box的结合的结合 TBPTBPTATA-boxTATA-box第三十页，讲稿共九十一页哦3 3），），转录因子的结构类型转录因子的结构类型 螺旋螺旋-转角转角-螺旋螺旋（helix-turn-helixhelix-turn-helix）螺旋(识别螺旋)螺旋转角第三十一页，讲稿共九十一页哦螺旋转角螺旋(识别螺旋)螺旋螺旋-转角转角-螺旋与螺旋与DNADNA的结合的结合第三十二页，讲稿共九十一页哦螺旋螺旋-转角转角-螺旋与螺旋与DNADNA的结合的结合第三十三页，讲稿共九十一页哦不同的螺旋不同的螺旋-转角转角-螺旋螺旋第三十四页，讲稿共九十一页哦 锌指锌指（Zinc fingerZinc finger）锌锌锌指锌指第三十五页，讲稿共九十一页哦DNADNA结合域结合域第三十六页，讲稿共九十一页哦锌指锌指第三十七页，讲稿共九十一页哦锌指锌指第三十八页，讲稿共九十一页哦锌指与锌指与DNADNA的结合的结合第三十九页，讲稿共九十一页哦 亮氨酸拉链亮氨酸拉链（Leucine zipperLeucine zipper）螺旋(-helix)螺旋(-helix)DNADNA结合域结合域亮氨酸拉链第四十页，讲稿共九十一页哦螺旋(-helix)亮氨酸拉链亮氨酸拉链DNADNA结合域结合域第四十一页，讲稿共九十一页哦亮氨酸拉链与亮氨酸拉链与DNADNA的结合的结合亮氨酸拉链与DNA的结合第四十二页，讲稿共九十一页哦亮氨酸拉链与亮氨酸拉链与DNADNA的结合的结合亮氨酸拉链DNA第四十三页，讲稿共九十一页哦 螺旋螺旋-环环-螺旋螺旋（helix-loop-helix,HLHhelix-loop-helix,HLH）螺旋螺旋环第四十四页，讲稿共九十一页哦螺旋（H）螺旋（H）螺旋（H）螺旋（H）环(L)环(L)DNADNA结合域结合域第四十五页，讲稿共九十一页哦HLHHLH与与DNADNA的结合的结合H HH HL LDNADNA第四十六页，讲稿共九十一页哦HLHHLH与与DNADNA的结合的结合第四十七页，讲稿共九十一页哦螺旋螺旋-环环-螺旋有活性和非活性之分螺旋有活性和非活性之分有活性的HLH能与DNA结合无活性的HLH不能与DNA结合第四十八页，讲稿共九十一页哦6.3 6.3 转录后加工转录后加工第四十九页，讲稿共九十一页哦6.3.1 6.3.1 核糖核蛋白核糖核蛋白 （RibonucleoproteinsRibonucleoproteins，RNPsRNPs ）Ribonucleoproteins=Ribonucleoproteins=RNA protein complexs RNA protein complexs RNA RNA 蛋白质复合体蛋白质复合体细胞中的细胞中的RNARNA一般一般是与蛋白质结合形成复合体是与蛋白质结合形成复合体而存在的。而存在的。第五十页，讲稿共九十一页哦第五十一页，讲稿共九十一页哦RNPRNP颗粒的低温电镜图颗粒的低温电镜图第五十二页，讲稿共九十一页哦核糖体核糖体是最大，最多的是最大，最多的RNPRNP第五十三页，讲稿共九十一页哦6.3.2 6.3.2 转录本的加帽和加尾修饰转录本的加帽和加尾修饰第五十四页，讲稿共九十一页哦第五十五页，讲稿共九十一页哦加帽加帽-加尾后的加尾后的mRNAmRNA5cap55UTRUTRAUG翻译区翻译区exon-intronUGA33UTRUTR3polyA tail第五十六页，讲稿共九十一页哦帽帽子子结结构构m m7 7GpppXmYmGpppXmYm连接连接RNARNA第五十七页，讲稿共九十一页哦6.3.3 6.3.3 稳定稳定RNARNA的生成的生成稳定稳定RNARNA指的是指的是rRNA,tRNArRNA,tRNA第五十八页，讲稿共九十一页哦1,rRNA1,rRNA的产生的产生第五十九页，讲稿共九十一页哦rRNA operon:Pre-16S rRNAPre-tRNAPre-23S rRNA pre-5S rRNAPre-tRNAPromotersTerminatorsTranscription30S pre-rRNA:Cleavage at16S rRNAtRNA23S rRNA5S rRNAtRNARNase III III P F III III P F P E RNase M16 M16 M23 M23 M5原核微生物原核微生物稳定稳定RNARNA的生成的生成rRNA operonrRNA operon30S pre-rRNA:16S rRNA16S rRNA23S rRNA23S rRNAtRNAtRNA第六十页，讲稿共九十一页哦第六十一页，讲稿共九十一页哦2,tRNA2,tRNA的加工的加工第六十二页，讲稿共九十一页哦第六十三页，讲稿共九十一页哦第六十四页，讲稿共九十一页哦第六十五页，讲稿共九十一页哦第六十六页，讲稿共九十一页哦第六十七页，讲稿共九十一页哦6.3.4 6.3.4 内含子的剪接内含子的剪接内含子的剪接也称内含子的剪接也称RNARNA的剪接的剪接(Splicing):Splicing):剪剪去内含子，连去内含子，连接接外显子的过程。外显子的过程。四种四种内含子：内含子：tRNAtRNA内含子内含子;类内含子；类内含子；类内含子；类内含子；mRNAmRNA内含子内含子.第六十八页，讲稿共九十一页哦1,tRNA1,tRNA内含子的剪接内含子的剪接第六十九页，讲稿共九十一页哦以酵母为例以酵母为例酵母酵母tRNAtRNA酵母酵母tRNAtRNA内含子的特点内含子的特点每个不成熟的每个不成熟的tRNAtRNA内有一个内有一个 内含子内含子与反密码子的与反密码子的3端毗邻。端毗邻。长度为长度为14-46 bpbp。内含子内含子与反密码子有一定程度的与反密码子有一定程度的 互补。互补。内含子没有为剪接酶所识别的内含子没有为剪接酶所识别的 一致序列。一致序列。内含子第七十页，讲稿共九十一页哦剪接反应见剪接反应见P220,P220,图图6-296-29，b b首先由核酸内切酶催化内含子的切除首先由核酸内切酶催化内含子的切除然后由然后由RNARNA连接酶连接连接酶连接,需要需要ATPATP第七十一页，讲稿共九十一页哦2,2,类内含子的剪接类内含子的剪接第七十二页，讲稿共九十一页哦类内含子的特点：类内含子的特点：有中部核心结构有中部核心结构由保守的四种序列组成由保守的四种序列组成5-5-P-Q-R-S-3P-Q-R-S-3P P序列与序列与QQ序列，序列，R R与与S S互补互补55剪接位点和剪接位点和33剪接位点剪接位点为为 U U！GG！内含子内含子外显子外显子外显子外显子大部分酵母线粒体基因，原生动物四膜虫大部分酵母线粒体基因，原生动物四膜虫3535SrRNASrRNA基因的内含子为基因的内含子为类内含子。类内含子。第七十三页，讲稿共九十一页哦剪接反应剪接反应（见见P225:P225:）反应的化学本质是：转反应的化学本质是：转酯酯反应反应每次每次pG-OHpG-OH进攻发起剪接反应时，总伴随着进攻发起剪接反应时，总伴随着磷酸二磷酸二酯键的断裂与再生，称酯键的断裂与再生，称转转酯酯反应。反应。每次每次转转酯酯反应都是由反应都是由pG-OHpG-OH引起的：引起的：第一次为细胞中存在的第一次为细胞中存在的pG-OHpG-OH；后来由后来由内含子内含子33端端pG-OHpG-OH引起。引起。不需要能量的输入。不需要能量的输入。最后留下不能再被剪切的只有最后留下不能再被剪切的只有19 19 nt nt 的内含子，的内含子，称称L19L19第七十四页，讲稿共九十一页哦类内含子类内含子具有具有核核酶性质的证明酶性质的证明A.A.催化自我剪接催化自我剪接-核核酶性质的证明一酶性质的证明一体外实验体外实验提取的提取的3535SrRNASrRNA核混合物核混合物小分子小分子能量能量发现了发现了自我剪接自我剪接简化的简化的体外实验体外实验提取的提取的3535SrRNASrRNAMgMg2+2+鸟苷鸟苷发现了发现了自我剪接自我剪接体外转录实验体外转录实验提取的提取的3535SrRNASrRNA克隆克隆E.coli-35SrRNAE.coli-35SrRNA35SrRNA35SrRNA的基因的基因体外转录体外转录35SrRNA35SrRNA成功的自我剪接成功的自我剪接实验证明：实验证明：35SrRNA35SrRNA在在不可能有其它剪接不可能有其它剪接酶和成酶和成分的情况下实现了分的情况下实现了自我自我剪接剪接-核核酶酶分离分离第七十五页，讲稿共九十一页哦A.A.L19L19的的催化合成反应催化合成反应-核核酶性质的证明二酶性质的证明二L195C的底物6C的产物如此循环，如此循环，L19L19将最初的将最初的5 5C C的的底物催化形成底物催化形成3030C C的产物的产物-核核酶酶第七十六页，讲稿共九十一页哦类内含子也参与了编码类内含子也参与了编码一般，一般，内含子不参与编码，在形成的翻译产物中没有内含子不参与编码，在形成的翻译产物中没有内含子的内容。后来发现内含子的内容。后来发现类内含子参与了一种类内含子参与了一种蛋白质的编码。蛋白质的编码。第七十七页，讲稿共九十一页哦RNAaRNAaRNAbRNAbRNARNA成熟成熟酶酶参与参与剪接剪接Pre-RNAPre-RNA翻译翻译翻译翻译细胞色素细胞色素b b去除内含子去除内含子1 1内内含含子子2 2参参与与了了R RN NA A成成熟熟 酶酶的的编编码码。R RN NA A成成 熟熟酶酶的的形形成成是是自自 动动调调节节过过程程。当当R R N N A A成成 熟熟酶酶 量量 大大 时时，R RN NA Aa a减减 少少。R RN NA Aa a减减 少少，R R N N A A成成熟熟酶酶量量减减少少。R RN NA A成成 熟熟酶酶 量量减减 少少，R RN NA Aa a的的 剪剪 接接 减减 少少，R RN NA Aa a量量 升升 高高，R R N N A A成成熟熟酶酶量量升升高高R RN NA A成成熟熟酶酶起起稳稳定定作作用用，被被去去除除的的内内含含子子起起催催化化 作作用用。去除内含子去除内含子2 2第七十八页，讲稿共九十一页哦3,3,类内含子的剪接类内含子的剪接第七十九页，讲稿共九十一页哦如酵母线粒体细胞色素如酵母线粒体细胞色素C C氧化氧化酶亚酶亚基的基因基的基因类内含子的特点：类内含子的特点：没有没有类内含子的类内含子的中部核心结构。中部核心结构。在离在离33端端剪接点几个碱基处有保守序列。剪接点几个碱基处有保守序列。保守序列中有向外突出的保守序列中有向外突出的A A。A AOHOH第八十页，讲稿共九十一页哦第八十一页，讲稿共九十一页哦4,4,核核mRNAmRNA内含子的剪接内含子的剪接第八十二页，讲稿共九十一页哦第八十三页，讲稿共九十一页哦剪接体剪接体的组成：的组成：（前体（前体mRNAmRNA内含子的剪接是由剪接体来完成）内含子的剪接是由剪接体来完成）前体前体mRNAmRNA核小核小RNARNA（snRNAsnRNA）100-300nt100-300nt组成组成每个细胞有每个细胞有1010万万-100-100万个万个snRNAsnRNA含大量尿苷酸，故称含大量尿苷酸，故称U-snRNAU-snRNA蛋白质因子蛋白质因子剪接时加入，完成后释放剪接时加入，完成后释放-外在因子外在因子整合在整合在snRNAsnRNA的不同部位的不同部位-整合蛋白整合蛋白snRNPsnRNP第八十四页，讲稿共九十一页哦 由于核由于核mRNAmRNA内含子也有象内含子也有象类内含子那样的向外类内含子那样的向外突出的突出的A-OHA-OH，所以，其剪接反应与所以，其剪接反应与类内含子剪接类内含子剪接反应类似。两外显子连接成功的同时，产生套索状反应类似。两外显子连接成功的同时，产生套索状内含子。内含子。剪接反应剪接反应两个成功连接的外显子两个成功连接的外显子 套索状内含子套索状内含子第八十五页，讲稿共九十一页哦5,RNA5,RNA编辑编辑第八十六页，讲稿共九十一页哦A AT TA,CCT,GGT,AGGA,CCT,GGT,AGG缺失缺失T T,移码突变移码突变AAC,CTG,GTA,GGAAC,CTG,GTA,GG转录转录AAC,CUG,GUA,GGAAC,CUG,GUA,GGA AU UA,CCU,GGU,AGGA,CCU,GGU,AGG插入插入U U如果直接翻译，可能是致死的恢复到没出现突变之前的状态RNARNA编辑编辑这种加工与前面讲的这种加工与前面讲的mRNAmRNA剪接不同剪接不同.RNARNA剪剪接形成的成熟接形成的成熟RNARNA上的上的信息能在原始的信息能在原始的RNARNA上上找得到。这种加工形成找得到。这种加工形成的成熟的成熟RNARNA上的信息在上的信息在原始的原始的RNARNA上找不到。上找不到。如上面讲的如上面讲的A AU UA A的的U U在在前一个序列对应的位置前一个序列对应的位置找不到。找不到。改变了原始转录本的改变了原始转录本的特异性特异性RNARNA修饰。修饰。第八十七页，讲稿共九十一页哦RNARNA编辑的类型编辑的类型U U的插入与缺失以及的插入与缺失以及U U被被C C取代取代C C的插入以及的插入以及C C被被U U取代取代A A的插入以及的插入以及A A被被G G取代取代G G的插入的插入第八十八页，讲稿共九十一页哦RNARNA编辑的机制编辑的机制本质上也是本质上也是转转酯酯反应反应需要一种需要一种guide RNA(guide RNA(指导指导RNA,gRNA)RNA,gRNA)的参与。的参与。编辑的方向为编辑的方向为3-53-5。第八十九页，讲稿共九十一页哦gRNA（与需要编辑的部分的3方向结合）尚没编辑已经编辑CACAU UA AmRNAmRNA末端尿嘧啶转移末端尿嘧啶转移酶酶内切内切酶酶C CU UA AA AU UTPTPPPiPPiC CU UA AA AU UC CU UA AA AU U连接连接酶酶ATPATPAMP+PPiAMP+PPi编辑的结果是在编辑的结果是在原始的原始的RNARNA上插上插入一个入一个U U第九十页，讲稿共九十一页哦感谢大家观看第九十一页，讲稿共九十一页哦