2022年重点高中生物专题微生物的培养与应用课题微生物的实验室培养.docx

精选学习资料 - - - - - - - - - 重点高中生物专题2 微生物的培养与应用课题 1 微生物的试验室 培育 11 名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 作者：日期：2 名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 专题 2 课题 1 微生物的试验室培育一、课题目标 1. 学问目标 a. 明白有关培育基的基础学问；b. 明白消毒和灭菌方法；2. 才能目标 a. 进行无菌技术操作；b. 进行微生物培育；3. 情感目标 形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神；二、课题重点 无菌技术操作；三、课题难点 无菌技术操作；四 教学流程教学老师活动同学设计流程活动意图问题 1：培育基包括哪些基本成分？水、碳源、氮源、无机盐 问题 2：从细胞的化学元素组成来看,培育基中为什么都含有这些养分成分？C、H、O、N、P、S是构成细胞原生质的基本元素,约占原生质总量的 97以上；【小结】共同归纳培育基的基本成分和主要来源；（2）特别成分和条件提示同学培育基仍需要满意不同微生物生长对PH、氧气、特别养分物质的要求：如乳酸杆菌时需要添加维生素,霉菌需要将培育基pH调剂为酸性,细菌时需要将pH 调剂为中性或微碱性；（二）无菌技术 讲解：无菌操作泛指在培育微生物的操作中,全部防止杂菌污染的方法；强调无菌操作是 培育微生物胜利的关键；1. 主要方面 讲解无菌技术主要方面：3 名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - （1）对试验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；（2）将培育器皿、接种用具和培育基等器具进行 灭菌 ；（3）为防止四周微生物污染,试验操作应在 酒精灯火焰邻近 旁进行；（4）防止已灭菌处理的材料用具与 四周物品相接触；2. 消毒与灭菌的比较列表让同学进行比较；节环一、基础学问读、阅解培了（一）培育基二：1. 概念：讲解培育基概念：由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁衍使用倾养基的混合养分基质；讲授2. 种类听；相关新课展现培育基相关图片,讲解依据物理性质划分的培育基种类、用途；知识；分析、回答；3. 成分（ 1）基本成分展现1000mL牛肉膏蛋白胨培育基的养分构成表格,让同学分析回答疑题；纳、归培育基成分供应的主要养分物质牛肉膏 5g 碳源、磷酸盐和维生素蛋白胨 10g 氮源和维生素NaCl 5g 无机盐H2O定容至 1000ml 氢元素、氮元素问题 1：培育基包括哪些基本成分？水、碳源、氮源、无机盐回问题 2：从细胞的化学元素组成来看,培育基中为什么都含有这些养分成分？4 名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - C、H、O、N、P、S 是构成细胞原生质的基本元素,约占原生质总量的97以答；上；【小结】共同归纳培育基的基本成分和主要来源；养分含义主要来源听、倾解消了物质碳源能供应碳元素的物质无机物： CO2、NaHCO3；有机物：糖类、脂肪酸、石油、花生粉饼等氮源能供应氮元素的物质无机物： N2、NH3、氨盐、硝酸盐；有机物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等水细胞生命活动必不行少的物培育基、大气、代谢产物质无机供应除碳、氮元素以外的各种培育基、大气盐重要元素,包括某些大量元素（ 2）特别成分和条件阅毒和提示同学培育基仍需要满意不同微生物生长对PH、氧气、特别养分物质的要读、灭菌求：如乳酸杆菌时需要添加维生素,霉菌需要将培育基pH调剂为酸性,细思方考、法；菌时需要将pH调剂为中性或微碱性；（二）无菌技术回讲解： 无菌操作泛指在培育微生物的操作中,全部防止杂菌污染的方法；强答；调无菌操作是培育微生物胜利的关键；1. 主要方面讲解无菌技术主要方面：（ 1）对试验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；旁进行；较、比（ 2）将培育器皿、接种用具和培育基等器具进行灭菌 ；（ 3）为防止四周微生物污染,试验操作应在酒精灯火焰邻近（ 4）防止已灭菌处理的材料用具与四周物品相接触；2. 消毒与灭菌的比较列表让同学进行比较；项目理化因素强度毁灭微生物数量是否毁灭芽孢和孢子回消毒温顺部分否答；灭菌剧烈全部是3. 常用的消毒与灭菌的方法让同学阅读教材 “ 试验室常用的消毒和灭菌方法”材料, 共同归纳常用的消毒名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 与灭菌的方法,回答疑题；（ 1）消毒方法：；读、阅日常生活常常用到的是煮沸消毒法；对一些不耐高温的液体,就使用巴氏消毒法（作简要介绍）对接种室、接种箱或超净工作台第一喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以增强消归毒成效,然后使用紫外线进行物理消毒；纳、试验操作者的双手使用酒精进行消毒；回饮水水源用氯气进行消毒；（ 2）灭菌方法：答；接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法,所用器械是干热灭菌箱；培育基、无菌水等使用 高压蒸汽灭菌法,所用器械是 高压蒸汽灭菌锅；表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法,所用器械是紫外灯；问题 1. 无菌技术除了用来防止试验室的培育物被其他外来微生物污染外,仍有什么目的？仍能有效防止操作者自身被微生物感染；问题 2. 请你判定以下材料或用具是否需要消毒或灭菌；假如需要,请挑选合适的方法；（1） 培育细菌用的培育基与培育皿；管；（3） 试验操作者的双手（ 1）、（ 2）需要灭菌； （ 3）需要消毒；【典型例题】（2） 玻棒、试管、烧瓶和吸细菌培育过程中分别采纳了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理,这练、演行无进些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌 A. 接种环、手、培育基B. 高压锅、手、接种环C. 培育基、手、接种环D.接种环、手、高压锅【答案】 C 【方法点拨】 灭菌是指完全杀灭微生物使其永久丢失生长繁衍的才能,对于培回养基、 操作器皿和接种环等都需要灭菌；消毒仅指杀死物体表面或内部一部分答；对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害,如操作者的手和衣着需要消毒处理；高压蒸汽通常用于培育基的灭菌；用酒精擦拭双手是消毒的一种方法；火焰灼烧可以快速完全地灭菌,适用于微生物的接种工具,如接种环；二、试验操作菌技（一）制备牛肉膏蛋白胨培育基术操让同学阅读教材,讲解制备步骤：作；6 名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 1. 运算：依据配方比例,运算100mL培育基各成分用量；2. 称量：精确称取各成分；称取牛肉膏和蛋白胨时动作要快速,目的是防 止牛肉膏吸取空气中水分；3. 溶化：加水加热熔化牛肉膏；加入蛋白胨和氯化钠连续加热；加 入琼脂；用蒸馏水定容到 100mL；整个过程不断用玻棒搅拌,目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂；4. 调 pH：用 1mol/LNaOH溶液调剂 pH至偏碱性；5. 灭菌：将配制好的培育基转移到锥形瓶中,锅灭菌；所用培育皿用报纸包扎后用干热灭菌箱灭菌；加塞包扎后用高压蒸汽灭菌6. 倒平板：待培育基冷却至 50左右时在酒精灯火焰邻近操作进行；【方法点拨】倒平板的方法及留意事项 图文讲解倒平板的方法及留意事项,让同学回答疑题；阅 读、倾 听、思 考、回 答；7 名师归纳总结 - - - - - - -第 7 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 进 行微生物 培 养；倾 听、思 考；火焰旁右手拿锥形瓶,左手拔出棉塞；右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口快速通过火焰；读、阅左手将培育皿打开一条缝隙,右手将培育基倒入培育皿,马上盖上皿盖；待平板冷却凝固后,将平板倒过来放置；倾问题 1. 培育基灭菌后, 需要冷却到50 左右时, 才能用来倒平板；你用什么方法来估量培育基的温度？听、培育基灭菌后,需要冷却到50 左右时,才能用来倒平板；你用什么方法来思估量培育基的温度？考、问题 2. 为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？回通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培育基；答；问题 3. 平板冷凝后,为什么要将平板倒置？平板冷凝后,皿盖上会凝聚水珠,凝固后的培育基表面的湿度也比较高,将平8 名师归纳总结 - - - - - - -第 8 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 板倒置, 既可以使培育基表面的水分更好地挥发,入培育基,造成污染；又可以防止皿盖上的水珠落问题 4. 在倒平板的过程中,假如不当心将培育基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板仍能用来培育微生物吗？为什么？空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培育基上滋生,平板培育微生物；（二）纯化大肠杆菌因此最好不要用这个表达： 微生物接种方法许多,最常用的接种方法有：平板划线法和稀释涂布平 板法；1. 平板划线法（ 1）定义和目的讲解平板划线法定义和目的：通过接种环在琼脂固体培育基表面连续画线的操作 , 将集合的菌钟逐步稀释分散到培育基的表面；在数次画线后 , 可以分别到由一个细胞繁衍而来的肉眼可见的子细胞群体 , 这就是菌落；分别后,一个菌体便会形成一个菌落,这是排除污染杂菌的通用方法,也是用于挑选菌株的最简便方法之一；（ 2）操作步骤让同学阅读教材平板划线法操作图文资料,讲解操作步骤,让同学回答疑题；将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红；在酒精灯火焰旁冷却接种环,并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞；将菌种试管口通过火焰达到毁灭试管口杂菌的目的；听、倾将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种；将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞；阅将皿盖打开一条缝隙,把接种环伸入平板内划35 条平行线,盖上皿读、盖,不要划破培育基；灼烧接种环, 冷却后从第一区划线末端开头向其次区域内划线；重复上思述过程,完成三、四、五区域内划线；留意不要将第五区的划线与第一区划线考、相连；将平板倒置放在培育箱中培育；回问题1. 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操答；作终止时,仍旧需要灼烧接种环吗？为什么？第一步灼烧接种环是为了防止接种环上可能存在的微生物污染培育物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线终止后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时, 接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐步削减,以便得到菌落； 划线终止后灼烧接种9 名师归纳总结 - - - - - - -第 9 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 环,能准时杀死接种环上残留的菌种,防止细菌污染环境和感染操作者；问题 2. 在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线？以免接种环温度太高,杀死菌种；问题 3. 在作其次次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端 开头划线？划线后, 线条末端细菌的数目比线条起始处要少,始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步削减,繁衍而来的菌落；2. 稀释涂布平板法（ 1）定义和目的每次从上一次划线的末端开 最终能得到由单个细菌讲解定义和目的：将菌液进行一系列梯度稀释,并将不同稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培育基上进行培育；当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的标准菌落；（ 2）操作步骤讲够对能让同学阅读教材稀释涂布平板法的系列稀释操作和涂布平板操作图文材料,解相关操作步骤,让同学回答疑题；试验系列稀释操作结果进行分演 析；练、回答；取盛有 9mL水的无菌试管6 支,编号 101、10 2、103、104、105、 106；用灼烧冷却的移液管吸取1mL菌液注入编号为101 试管中,并吹吸 3 次,使之混匀；从 101倍液中吸取1mL菌液注入到编号为10 2 试管内吹打匀称, 获得 102析、分倍液；依此类推；10 名师归纳总结 - - - - - - -第 10 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 留意：移液管需要经过灭菌；操作时,试管口和移液管离火焰12cm处；回涂布平板操作答；问题： 涂布平板的全部操作都应在火焰邻近进行；结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,想一想,第 2 步应如何进行无菌操作？应从操作的各个细节保证“ 无菌”；例如,酒精灯与培育皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰四周等；【典型例题】以下关于微生物接种的描述,正确选项 A. 平板划线法只用于固体培育基的接种,的接种 B. 平板划线法不能用于微生物的计数,而稀释涂布平板法只用于液体培育基而稀释涂布平板法可用于微生物的计数C. 利用平板划线法不能得到单菌落,而利用稀释涂布平板法能得到单菌落D. 平板划线法所用的接种工具不需要灭菌,需要灭菌【答案】 B 而稀释涂布平板法所用的接种工具【方法点拨】 这两种接种方法都可用于固体培育基的接种,都能用于形成单菌落,接种器具都要进行严格灭菌处理；三、结果分析与评判 让同学分析回答相关问题,加以讲解；1. 未接种的培育基表面是否有菌落生长？假如有菌落生长,说明什么？培育未接种培育基作用是对比,有菌落形成,说明培育基灭菌不完全；2. 接种大肠杆菌培育基上,独立菌落颜色、外形、大小如何？大肠杆菌菌落呈白色,为圆形,光滑有光泽,边缘整齐；11 名师归纳总结 - - - - - - -第 11 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 3. 培育 12h 和 24h 后,观看到结果一样吗？假如不同,分析产生差异缘由；菌落大小不同；菌落分布位置相同；缘由是时间越长,菌落中细菌繁衍越多,菌落体积越大；菌落的位置不动,但菌落数增多；4. 假如你在培育基上观看到不同外形菌落,可能是哪些缘由引起的？培育基灭菌不完全或杂菌感染等；节环共同回忆本节要点：应、呼出本突一、培育基三：1 养分构成：都含有水、碳源、氮源和无机盐；回节重课堂2 种类：液体培育基和固体培育基；答；点；二、无菌技术小结三、大肠杆菌的纯化培育 1 制备牛肉膏蛋白胨固体培育基12 名师归纳总结 - - - - - - -第 12 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - （ 2）常用的微生物接种方法节环a. 平板划线法 b.稀释涂布平板法 练、演出重突2022 · 江苏 做“ 微生物的分别与培育” 试验时,以下表达正确选项A. 高压灭菌加热终止时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖四：B. 倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培育基溅到皿盖上回点；课堂C.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落答；练习D.用记号笔标记培育皿中菌落时,应标记在皿底上【答案】 D 【方法点拨】 1. 倒平板时左手拿培育皿,右手拿锥形瓶, 左手将培育皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,倒入培育基后立刻盖上培育皿皿盖,防止杂菌污染；2. 灼烧接种环之后, 要在火焰旁冷却后才能伸入菌液,菌种；以免温度太高杀死名师归纳总结 - - - - - - -第 13 页,共 13 页