生物芯片技术及其发展精.ppt

生物芯片技术及其发展第1页，本讲稿共44页生物芯片的定义生物芯片的定义生生物物芯芯片片（BiochipBiochip或或BioarrayBioarray）是是指指包包被被在在固固相相载载体体上上的的高高密密度度DNADNA、抗抗原原、抗抗体、细胞或组织的微点阵体、细胞或组织的微点阵(microarray(microarray）。）。生物芯片包括生物芯片包括DNADNA芯片、抗原芯片、抗体芯片、抗原芯片、抗体芯片、细胞芯片、组织芯片等。芯片、细胞芯片、组织芯片等。19981998年世界十大科技突破之一。年世界十大科技突破之一。未来十年最具发展潜力的技术。未来十年最具发展潜力的技术。第2页，本讲稿共44页特点特点高度并行性：提高实验进程、利于显示高度并行性：提高实验进程、利于显示图谱的快速对照和阅读。图谱的快速对照和阅读。多样性：可进行样品的多方面分析，多样性：可进行样品的多方面分析，提高精确性，减少误差。提高精确性，减少误差。微型化：减少试剂用量和反应液体微型化：减少试剂用量和反应液体积，提高样品浓度和反应速率。积，提高样品浓度和反应速率。自动化：降低成本，保证质量。自动化：降低成本，保证质量。第3页，本讲稿共44页生物芯片分类生物芯片分类尚未统一。尚未统一。广义上：矩阵型芯片、处理型芯片广义上：矩阵型芯片、处理型芯片固化材料：基因芯片、蛋白质芯片、固化材料：基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片、组织芯片细胞芯片、组织芯片第4页，本讲稿共44页研究历史研究历史1991 Affymatrix1991 Affymatrix公司公司Stephen Fodor:Stephen Fodor:光刻与光化学技光刻与光化学技术、术、多肽和寡聚核苷酸微阵列。多肽和寡聚核苷酸微阵列。DNA ChipDNA Chip概念概念 StanfordStanford大学大学BrownBrown实验室：预先合成，机械手阵列实验室：预先合成，机械手阵列1995 Schena1995 Schena等：基因表达谱等：基因表达谱1996 Chee et al1996 Chee et al：DNADNA测序测序1996 Cronin et al1996 Cronin et al：突变检测：突变检测1996 Sapolsley&Lipshutz1996 Sapolsley&Lipshutz：基因图克隆：基因图克隆1996 Shalon et al1996 Shalon et al：复杂：复杂DNADNA样本分析样本分析1996 Shoemaker et al1996 Shoemaker et al：缺省突变定量表型分析：缺省突变定量表型分析第5页，本讲稿共44页分类（根据应用）分类（根据应用）基因变异检测芯片基因变异检测芯片疾病检测疾病检测(如如HIVHIV、P53P53基因、结核杆菌基因、结核杆菌)法医鉴定法医鉴定(如如DNADNA指纹图谱指纹图谱)表达谱芯片表达谱芯片肿瘤相关基因肿瘤相关基因(正常与肿瘤组织表达差异正常与肿瘤组织表达差异)药物筛选药物筛选(培养细胞药物刺激前后表达差异培养细胞药物刺激前后表达差异)发育发育(同一组织不同发育时期基因表达差异同一组织不同发育时期基因表达差异)组织发生组织发生(不同组织或器官的基因表达差异不同组织或器官的基因表达差异)第6页，本讲稿共44页分类（根据工艺和载体）分类（根据工艺和载体）原位合成法：原位合成法：密集程度高，可合成任意序列的密集程度高，可合成任意序列的寡聚核苷酸，但特异性较差，寡聚核苷酸合成长度寡聚核苷酸，但特异性较差，寡聚核苷酸合成长度有限，且随长度增加，合成错误率增高。成本较高，有限，且随长度增加，合成错误率增高。成本较高，设计和制造较烦琐费时。设计和制造较烦琐费时。DNADNA微矩阵法：微矩阵法：成本低，易操作，点样密度通常成本低，易操作，点样密度通常能满足需要。芯片的载体需表面紧质、光滑的固体，能满足需要。芯片的载体需表面紧质、光滑的固体，如硅，陶，玻璃等，如硅，陶，玻璃等，DNADNA微矩阵芯片常用玻片为载体。微矩阵芯片常用玻片为载体。第7页，本讲稿共44页分类（根据分类（根据DNADNA成分）成分）寡聚核苷酸或寡聚核苷酸或DNADNA片段：约片段：约2020 2525个核个核苷酸碱基，常用于基因类型的分析，苷酸碱基，常用于基因类型的分析，如突变、正常变异（多态性）。如突变、正常变异（多态性）。全部或部分全部或部分cDNAcDNA：约：约500500 50005000个核苷个核苷酸碱基，通常用于两种或以上样本的酸碱基，通常用于两种或以上样本的相关基因表达分析。相关基因表达分析。第8页，本讲稿共44页基因芯片的种类基因芯片的种类Science ChipScience Chip：生物分析和诊断。生物分析和诊断。Nutri ChipNutri Chip：食物分析、转基因、污染检测。：食物分析、转基因、污染检测。Leuko ChipLeuko Chip：血液分析、病毒分析、：血液分析、病毒分析、HLAHLA分析。分析。Aqua ChipAqua Chip：水质分析。：水质分析。Secure ChipSecure Chip：含：含DNADNA的物质鉴定。的物质鉴定。Chromo ChipChromo Chip：基因分析和染色体序列。：基因分析和染色体序列。Prokaryo ChipProkaryo Chip：原核生物、兽医、环保等。：原核生物、兽医、环保等。第9页，本讲稿共44页生物芯片技术主要环节生物芯片技术主要环节芯片制备：微点阵芯片制备：微点阵样本制备：样本制备：DNADNA提纯、扩增、标记提纯、扩增、标记杂交：样本与互补模板形成双链杂交：样本与互补模板形成双链检测：共聚焦扫描，双色激光检测：共聚焦扫描，双色激光数据处理：定量软件，数据库检索，数据处理：定量软件，数据库检索，RNARNA印迹等。印迹等。结果结果 第10页，本讲稿共44页生物芯片分析生物芯片分析1 1、测定过程应包括五个基本步骤：、测定过程应包括五个基本步骤：需解决的生物学问题需解决的生物学问题样本制备样本制备生物化学反应生物化学反应检测检测数据分析数据分析第11页，本讲稿共44页2 2、生物学系统控制必须精确地与检测目的相匹配。、生物学系统控制必须精确地与检测目的相匹配。3 3、生物学样本必须精确地与生物学种类相匹配。、生物学样本必须精确地与生物学种类相匹配。4 4、所有基因分析必须平行处理。、所有基因分析必须平行处理。5 5、基因分析技术必须适合微型化和自动化。、基因分析技术必须适合微型化和自动化。6 6、平行格式必须精确的依据生物学样本的次序。、平行格式必须精确的依据生物学样本的次序。7 7、检测系统必须能精确地获得数据。、检测系统必须能精确地获得数据。8 8、检测系统获得的数据必须能被精确地控制和重复。、检测系统获得的数据必须能被精确地控制和重复。第12页，本讲稿共44页9 9、两种或以上平行数据组比较应受到单、两种或以上平行数据组比较应受到单 个实验所固有特性的限制。个实验所固有特性的限制。1010、绝对比例关系只存在于组合实验的平、绝对比例关系只存在于组合实验的平 行数据组内。行数据组内。1111、平行格式包括内在和外部的整个系统、平行格式包括内在和外部的整个系统 误差的分析因素。误差的分析因素。1212、在每个系统模块中采集到该系统所有、在每个系统模块中采集到该系统所有 变量的四维数据时，才能称为完成生变量的四维数据时，才能称为完成生 物系统平行基因分析。物系统平行基因分析。第13页，本讲稿共44页生物芯片技术的生物芯片技术的1212条原则只是一个基本框架。条原则只是一个基本框架。其术语的详细定义和有关理论可参见其术语的详细定义和有关理论可参见http:/cmgm.stanford.edu/schena/http:/cmgm.stanford.edu/schena/http:/ situ synthesis):in situ synthesis):又可分为原位又可分为原位光控合成法和原位标准试剂合成法。适用于寡核光控合成法和原位标准试剂合成法。适用于寡核苷酸，使用光引导化学原位合成技术。是目前制苷酸，使用光引导化学原位合成技术。是目前制造高密度寡核苷酸最为成功的方法。造高密度寡核苷酸最为成功的方法。合成后交联（合成后交联（post-synthetic attachment):post-synthetic attachment):利利用手工或自动点样装置将预先制备好的寡核苷酸用手工或自动点样装置将预先制备好的寡核苷酸或或cDNAcDNA样品点在经特殊处理过的玻片或其他材料样品点在经特殊处理过的玻片或其他材料上。主要用于诊断、检测病原体及其他特殊要求上。主要用于诊断、检测病原体及其他特殊要求的中、低密度芯片的制备。的中、低密度芯片的制备。第15页，本讲稿共44页两种制备方法比较原位合成：原位合成：测序、查明点突变测序、查明点突变高密度、根据已知的高密度、根据已知的DNADNA编制程序编制程序制作复杂、价格昂贵、不能测定未知制作复杂、价格昂贵、不能测定未知DNADNA序列序列合成后交联：合成后交联：比较分析比较分析制备方式直接和简单，点样的样品可事先纯化，制备方式直接和简单，点样的样品可事先纯化，交联方式多样，可设计和制备符合自己需要的芯片。交联方式多样，可设计和制备符合自己需要的芯片。中、低密度，样品浪费较多且制备前需储存大量样品。中、低密度，样品浪费较多且制备前需储存大量样品。第16页，本讲稿共44页杂交杂交是芯片技术中除方阵构建外最重要的一步是芯片技术中除方阵构建外最重要的一步液相中探针与液相中探针与DNADNA片段按碱基配对规则形成片段按碱基配对规则形成双链反应。双链反应。选择杂交条件时，必须满足检测时的灵敏度选择杂交条件时，必须满足检测时的灵敏度和特异性。使能检测到低丰度基因，且能保和特异性。使能检测到低丰度基因，且能保证每条探针都能与互补模板杂交。证每条探针都能与互补模板杂交。合适长度的合适长度的DNADNA有利于与探针杂交。有利于与探针杂交。温度、非特异性本底等均会影响杂交结果。温度、非特异性本底等均会影响杂交结果。最好在封闭循环条件下杂交，杂交炉。最好在封闭循环条件下杂交，杂交炉。第17页，本讲稿共44页样本制备样本制备制备高质量样本是困难的但又是极其重要的。制制备高质量样本是困难的但又是极其重要的。制备细胞、组织或整个器官样本应特别小心。温度、备细胞、组织或整个器官样本应特别小心。温度、激素和营养环境、遗传背景、组织成分等轻微改激素和营养环境、遗传背景、组织成分等轻微改变都会使基因表达的结果发生明显变化。变都会使基因表达的结果发生明显变化。用于基因类型分析的样本是用于基因类型分析的样本是DNADNA，用于表达研究的样，用于表达研究的样本是本是cDNAcDNA。样本制备后应进行标记，通常为酶标记、荧光标样本制备后应进行标记，通常为酶标记、荧光标记和核素标记。记和核素标记。第18页，本讲稿共44页结果分析结果分析 芯片与标记的靶芯片与标记的靶DNADNA或或RNARNA杂交后，或与标记的靶抗原杂交后，或与标记的靶抗原或抗体结合后，可采用下列方法分析处理数据：或抗体结合后，可采用下列方法分析处理数据：共聚焦扫描仪：应用最广，重复性好但灵敏度较低。共聚焦扫描仪：应用最广，重复性好但灵敏度较低。质谱法：快速、精确，可准确判断是否存在基因质谱法：快速、精确，可准确判断是否存在基因突变和精确判断突变基因的序列位置。探针合成突变和精确判断突变基因的序列位置。探针合成较复杂。较复杂。化学发光、光导纤维、二极管方阵检测、直接电化学发光、光导纤维、二极管方阵检测、直接电荷变化检测等。荷变化检测等。第19页，本讲稿共44页芯片扫读装置芯片扫读装置根据采用的光电偶合器件，分为光电倍根据采用的光电偶合器件，分为光电倍增管型和增管型和CCDCCD型。型。根据激光光源，可分为激光型和非激光根据激光光源，可分为激光型和非激光型。型。应用最为广泛的是激光光源的共聚焦扫应用最为广泛的是激光光源的共聚焦扫描装置，分辨率、灵敏度极高，有良好描装置，分辨率、灵敏度极高，有良好的定位功能，可定量，应用广泛。的定位功能，可定量，应用广泛。第20页，本讲稿共44页图象分析复杂的杂交图谱一般需由图象分析软件复杂的杂交图谱一般需由图象分析软件来完成。来完成。分析软件的功能：鉴定每个点阵、最大分析软件的功能：鉴定每个点阵、最大限度消除本底荧光的干扰、解析多种颜限度消除本底荧光的干扰、解析多种颜色图象、可标记或排除假阳性、识别和色图象、可标记或排除假阳性、识别和分析对照实验是否成功、可将信号标准分析对照实验是否成功、可将信号标准化等。化等。图象处理软件必须具备提取基因库和数图象处理软件必须具备提取基因库和数据库的能力。据库的能力。第21页，本讲稿共44页质量控制实验对照：实验对照：体体外外转转录录从从cDNAcDNA合合成成mRNAmRNA，参参入入标标本本中中作作为为对对照照。此此mRNAmRNA不与点阵的核酸杂交。不与点阵的核酸杂交。将将不不同同浓浓度度的的不不同同基基因因参参入入标标本本中中，可可作作为为标标本本间间标准化的参照。标准化的参照。用用两两种种不不同同吸吸收收光光谱谱的的荧荧光光素素同同时时分分析析两两个个标标本本，如如果果两两种荧光强度一致，可排除标本间变异因素。种荧光强度一致，可排除标本间变异因素。用单一碱基错配的寡核苷酸做对照可排除交叉杂交。用单一碱基错配的寡核苷酸做对照可排除交叉杂交。第22页，本讲稿共44页结果有效性的证实在表达矩阵上，有时难于区分极其相似的序列，如基在表达矩阵上，有时难于区分极其相似的序列，如基因族成员，亚类或异类的存在。因族成员，亚类或异类的存在。比较两种不同比较两种不同DNADNA序列表达水平时，有些参数如核苷序列表达水平时，有些参数如核苷酸的成分、二级结构的存在和矩阵上酸的成分、二级结构的存在和矩阵上DNADNA的长度都会的长度都会影响杂交。影响杂交。证实矩阵分析的结果可用证实矩阵分析的结果可用RT-PCR(RT-PCR(区别基因族成员区别基因族成员,比较比较不同不同DNADNA种系表达种系表达,证实基因变异或突变和精确测定证实基因变异或突变和精确测定DNADNA表达水平表达水平)、Northern Blot(Northern Blot(证实某一基因的相对表达证实某一基因的相对表达水平水平)、Western Blot(RNAWestern Blot(RNA表达是否达到细胞中的蛋表达是否达到细胞中的蛋白水平白水平)、质谱仪、质谱仪(证实矩阵结果是否在蛋白水平证实矩阵结果是否在蛋白水平)等。等。第23页，本讲稿共44页生物芯片技术的应用生物芯片技术的应用基因表达分析：肿瘤基因表达分析：肿瘤基因突变检测：遗传性疾病基因突变检测：遗传性疾病测序、基因图绘制和多态性分析：测序测序、基因图绘制和多态性分析：测序微生物菌种鉴定：毒力基因、抗药基因微生物菌种鉴定：毒力基因、抗药基因药物研究：新药筛选、指导合理用药药物研究：新药筛选、指导合理用药克隆选择及文库筛选克隆选择及文库筛选第24页，本讲稿共44页生物芯片技术的发展发展趋势发展趋势微型化：微型化：DNADNA矩阵越来越小。矩阵越来越小。集成化：矩阵上的基因组越来越大。集成化：矩阵上的基因组越来越大。多样化：测定范围越来越广。多样化：测定范围越来越广。微量化：测定所需样本越来越少。微量化：测定所需样本越来越少。全自动化：样品制备到结果显示全部分析过程。全自动化：样品制备到结果显示全部分析过程。定量化：如激光捕获技术，显微解剖技术等可定量化：如激光捕获技术，显微解剖技术等可精确测定一个细胞内的一个基因的表达。精确测定一个细胞内的一个基因的表达。DNADNA矩阵数据信息库的完善。矩阵数据信息库的完善。第25页，本讲稿共44页生物芯片技术的发展生物芯片技术的发展技术技术毛细管电泳芯片技术毛细管电泳芯片技术PCRPCR芯片技术芯片技术(PCR-Chip)(PCR-Chip)缩微芯片实验室缩微芯片实验室(lab-on-a-chip)(lab-on-a-chip)微珠芯片技术微珠芯片技术(beadArray)(beadArray)抗体和蛋白质阵列技术抗体和蛋白质阵列技术(Antibody and(Antibody and protein-array technology)protein-array technology)自我定制芯片技术（自我定制芯片技术（make your own chip)make your own chip)血气分析芯片血气分析芯片第26页，本讲稿共44页毛细管电泳芯片技术MathiesMathies最早报道毛细管电泳芯片测序结果，在最早报道毛细管电泳芯片测序结果，在1010分分钟内完成了对钟内完成了对433433个碱基序列的测定。个碱基序列的测定。宾夕法尼亚大学宾夕法尼亚大学WildingWilding等成功地利用毛细管电泳等成功地利用毛细管电泳芯片分离了用于诊断杜鑫芯片分离了用于诊断杜鑫-贝克肌萎缩的多条贝克肌萎缩的多条DNADNA片段。片段。瑞士瑞士Ciba-GeigyCiba-Geigy公司和加拿大公司和加拿大AlbertaAlberta大学合作利大学合作利用玻璃毛细管电泳芯片完成了对寡核苷酸的分离。用玻璃毛细管电泳芯片完成了对寡核苷酸的分离。第27页，本讲稿共44页缩微芯片实验室在一张芯片上完成样品(如血液、组织等)制备、化学反应、检测和数据分析。1998年程京博士首次应用LOC实现了从样品制备到反应结果显示的全部过程，成果地从混有大肠杆菌的血清中分离出了细菌。含有加热器、微泵微阀、微流量控制器、电子化学和电子发光探测器的芯片已经问世。也已出现样品制备、化学反应和分析检测部分结合的芯片。LOC与卫星传输和网络生物信息学结合，将实现高通量、一体化和移动性的“未来型掌上实验室”的构想。第28页，本讲稿共44页抗体和蛋白质阵列技术蛋白质组学蛋白质组学(protiomics)(protiomics)的兴起，促的兴起，促进了抗体和蛋白质阵列技术的发展。进了抗体和蛋白质阵列技术的发展。Pareick BrownPareick Brown使用特异性抗体微矩阵，使用特异性抗体微矩阵，测定了细胞和体液样本中数千种不同的蛋测定了细胞和体液样本中数千种不同的蛋白质。白质。LeukingLeuking等采用蛋白质微阵列技术，测定等采用蛋白质微阵列技术，测定了了10pg10pg的微量蛋白质，并证实假阳性极低。的微量蛋白质，并证实假阳性极低。第29页，本讲稿共44页乳腺癌基因芯片第30页，本讲稿共44页Stanford 乳腺癌微矩阵(Perou et al.1999)每种基因的数据以行表示，每个实验用每种基因的数据以行表示，每个实验用列表示。列表示。颜色强度表示对照和实验颜色强度表示对照和实验cDNAcDNA的比率。的比率。比率相同时为比率相同时为1 1。结果为红色表示结果为红色表示mRNAmRNA增加，绿色表示减增加，绿色表示减少，灰白色表示缺乏。少，灰白色表示缺乏。两种基因的相似性用两种基因的相似性用PearsonPearson相关公式或相关公式或EuclidianEuclidian测距公式计算。测距公式计算。第31页，本讲稿共44页DNA微矩阵分析软组织肉瘤表达Kavine Maillard et al(1999)cDNAscDNAs进行进行DNADNA表达矩阵，表达矩阵，PCRPCR产物包被在产物包被在经赖氨酸处理的玻片上，用经赖氨酸处理的玻片上，用Cys3-Cys3-和和Cys5-Cys5-标记的标记的cDNAcDNA进行杂交，洗涤后用进行杂交，洗涤后用Scanarray3000Scanarray3000扫描仪测定矩阵，表达扫描仪测定矩阵，表达数据储存在数据储存在ACeDBACeDB数据库中，根据数据表数据库中，根据数据表达类型区分不同的基因。达类型区分不同的基因。第32页，本讲稿共44页微矩阵分析微矩阵分析DNADNA和蛋白表达和蛋白表达Holger Eickhoff et al.(1999)Holger Eickhoff et al.(1999)根据已有的序列数据，组合根据已有的序列数据，组合800000800000人类人类ESTEST序列，已序列，已重矩阵了重矩阵了3800038000克隆用于克隆用于RNARNA表达分析，克隆经表达分析，克隆经PCRPCR扩扩增后共价结合于玻片上，每张玻片固定增后共价结合于玻片上，每张玻片固定1920019200个基因个基因片段，标记人组织片段，标记人组织RNAsRNAs与被选的与被选的3800038000人基因片段人基因片段的矩阵进行杂交，比较健康与疾病组织的图象，用的矩阵进行杂交，比较健康与疾病组织的图象，用软件分析点识别和点定量。软件分析点识别和点定量。使用寡聚核苷酸鉴定新的使用寡聚核苷酸鉴定新的cDNAcDNA克隆，和进入表达载体，克隆，和进入表达载体，使相应蛋白能直接表达，矩阵后可分析蛋白使相应蛋白能直接表达，矩阵后可分析蛋白-蛋白和蛋白和蛋白蛋白-DNA-DNA的关系。的关系。第33页，本讲稿共44页生物芯片相关仪器点阵仪：制备芯片。点样针分为实心和点阵仪：制备芯片。点样针分为实心和空心两种，点样方式有非接触喷点和接空心两种，点样方式有非接触喷点和接触点样两种。触点样两种。杂交仪：全自动完成调节、加探针、漂杂交仪：全自动完成调节、加探针、漂洗和热循环的杂交过程。洗和热循环的杂交过程。扫描仪：激光共聚焦或扫描仪：激光共聚焦或CCDCCD直接成像分析直接成像分析结果。结果。第34页，本讲稿共44页微矩阵仪器介绍Q BotQ PixQ ArrayQ PetQ Soft 2000第35页，本讲稿共44页第36页，本讲稿共44页Q Bot超高解析基因筛选暨排列分析仪。超高解析基因筛选暨排列分析仪。基因菌落筛选基因菌落筛选(Colony Picking)(Colony Picking)：3500/h3500/h基因排列打点基因排列打点(Gridding)(Gridding)：100000/h100000/h基因复制基因复制(Replication)(Replication)：969696,9696,96384384基因重新排列基因重新排列(Re-Arraying)(Re-Arraying)：正确的基因置复制：正确的基因置复制盘盘基因微矩阵排列基因微矩阵排列(Micro-Arraying)(Micro-Arraying)：20000/20000/片片全自动液体分注系统全自动液体分注系统(Liquid Handling):96(Liquid Handling):96针，注针，注液量液量1 1 200200 l l，适合，适合PCRPCR产物。产物。分析软件：分析、质控、上网。分析软件：分析、质控、上网。环境控制：紫外线照射、空气滤网、阳极处理铝板环境控制：紫外线照射、空气滤网、阳极处理铝板第37页，本讲稿共44页第38页，本讲稿共44页Q Pix半敞开式基因筛选暨排列分析仪(经济型)基因菌落筛选(Colony Picking)：3500/h基因排列打点(Gridding)：100000/h基因复制(Replication)：9696,96384基因重新排列(Re-Arraying)：正确的基因置复制盘基因微矩阵排列(Micro-Arraying)：20000/片分析软件：分析、质控、上网环境控制：紫外线照射、空气滤网、阳极处理铝板第39页，本讲稿共44页第40页，本讲稿共44页Q Array第三代半敞开式基因微矩阵排列仪。第三代半敞开式基因微矩阵排列仪。基因微矩阵排列基因微矩阵排列(Microarrying)(Microarrying)：同时处理：同时处理8484片玻片，每一打点玻片分片玻片，每一打点玻片分4 4个区域，可安个区域，可安排不同的矩阵排列。可选排不同的矩阵排列。可选1616或或2424针座。针座。仪器容量：玻片仪器容量：玻片8484片，玻片架片，玻片架6 6个，个，384384孔板孔板5 5盘。盘。分析软件：分析、质控、上网。分析软件：分析、质控、上网。环境控制：紫外线照射、空气滤网、阳极处环境控制：紫外线照射、空气滤网、阳极处理铝板。理铝板。第41页，本讲稿共44页自动液体处理系统。第42页，本讲稿共44页杂交仪Affymetrix 640Affymetrix 640杂交仪：杂交仪：温度范围：温度范围：0 0 100100 C C探针用量：探针用量：l l流速：流速：10ml/min 10ml/min样本区：样本区：2.42.4 6.4cm6.4cm第43页，本讲稿共44页扫描仪GenearrayGenearrayTMTM扫描仪：扫描仪：激光：氩离子激光：氩离子,488nm,488nm适用染料：荧光素、适用染料：荧光素、藻红素藻红素单扫描时间：单扫描时间：44分钟分钟分辨率：分辨率：3 3、6 6、9 9或或2424微米微米第44页，本讲稿共44页