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    紫外可见分光光度法基本原理精选PPT.ppt

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    紫外可见分光光度法基本原理精选PPT.ppt

    关于紫外可见分光光度法基本原理第1页,讲稿共30张,创作于星期二一、概述一、概述 光光谱谱分分析析法法是是指指在在光光(或或其其它它能能量量)的的作作用用下下,通通过过测测量量物物质质产产生生的的发发射射光光、吸吸收收光光或或散散射射光光的的波波长长和和强强度度来来进行分析的方法。进行分析的方法。吸收光谱吸收光谱(Absorption Spectrometry)发射光谱发射光谱(Emission Spectrometry)分子光谱分子光谱(Molecular Spectrometry)原子光谱原子光谱(Atomic Spectrometry)紫外紫外可见分光光度法是一种分子吸收光谱法。可见分光光度法是一种分子吸收光谱法。第2页,讲稿共30张,创作于星期二概述概述:在在光光谱谱分分析析中中,依依据据物物质质对对光光的的选选择择性性吸吸收收而而建建立立起起来来的的分析方法称为吸光光度法分析方法称为吸光光度法,主要有主要有:红红外外吸吸收收光光谱谱(Infrared Absorption Spectroscopy):分分子子振振动动光光谱谱,吸收光波长范围吸收光波长范围2.5 1000 m,主要用于有机化合物结构鉴定。主要用于有机化合物结构鉴定。紫紫外外吸吸收收光光谱谱(Ultraviolet Spectrophotometry):电电子子跃跃迁迁光光谱谱,吸吸收收光光波波长长范范围围200 400 nm(近近紫紫外外区区),可可用用于于结结构构鉴鉴定定和和定定量量分析。分析。可可见见吸吸收收光光谱谱(Visible Spectrophotometry:电电子子跃跃迁迁光光谱谱,吸收光波长范围吸收光波长范围400 750 nm,主要用于有色物质的定量分析。主要用于有色物质的定量分析。本章主要讲授紫外可见吸收光谱法。本章主要讲授紫外可见吸收光谱法。第3页,讲稿共30张,创作于星期二二、紫外可见吸收光谱二、紫外可见吸收光谱 1 1光的基本性质光的基本性质 光是一种电磁波,具有波粒二象性。光的波动性可用波长光是一种电磁波,具有波粒二象性。光的波动性可用波长、频、频率率、光速、光速c、波数(波数(cm-1)等参数来描述:等参数来描述:=c ;波数波数=1/=/c 光是由光子流组成,光子的能量:光是由光子流组成,光子的能量:E=h =h c/(Planck常数常数:h=6.626 10-34 J S)光的波长越短(频率越高),其能量越大。光的波长越短(频率越高),其能量越大。白光白光(太阳光太阳光):由各种单色光组成的复合光:由各种单色光组成的复合光 单色光单色光:单波长的光:单波长的光(由具有相同能量的光子组成由具有相同能量的光子组成)可见光区可见光区:400-750 nm 紫外光区紫外光区:近紫外区:近紫外区200-400 nm 远紫外区远紫外区10-200 nm(真空紫外区)真空紫外区)第4页,讲稿共30张,创作于星期二2.2.物质对光的选择性吸收及吸收曲线物质对光的选择性吸收及吸收曲线M +热M+荧光或磷光 E=E2 -E1=h 量子化量子化;选择性吸收;选择性吸收;分子结构的复杂性使其对不同波长分子结构的复杂性使其对不同波长光的吸收程度不同;光的吸收程度不同;用不同波长的单色光照射,测吸光用不同波长的单色光照射,测吸光度度 吸收曲线与最大吸收波长吸收曲线与最大吸收波长 max;M +h M*光的互补光的互补:蓝:蓝 黄黄基态基态 激发态激发态E1 (E)E2第5页,讲稿共30张,创作于星期二关于吸收曲线的讨论:关于吸收曲线的讨论:(1)同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最)同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为大处对应的波长称为最大吸收波长最大吸收波长max(2)不同浓度的同一种物质,其吸收曲线形状相似)不同浓度的同一种物质,其吸收曲线形状相似max不变。而对于不同物质,它们的吸收曲线形状和不变。而对于不同物质,它们的吸收曲线形状和max则则不同。不同。(动画动画)(3)吸收曲线可以提供物质的结构信息,并作为物质定性分析的依据之一。)吸收曲线可以提供物质的结构信息,并作为物质定性分析的依据之一。(4)不同浓度的同一种物质,在某一定波长下吸光度不同浓度的同一种物质,在某一定波长下吸光度 A 有差异,在有差异,在max处处吸光度吸光度A 的差异最大。此特性可作为物质定量分析的依据。的差异最大。此特性可作为物质定量分析的依据。(5)在在max处吸光度随浓度变化的幅度最大,所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分处吸光度随浓度变化的幅度最大,所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。析中选择入射光波长的重要依据。第6页,讲稿共30张,创作于星期二3.3.紫外紫外可见分子吸收光谱与电子跃迁可见分子吸收光谱与电子跃迁 物质分子内部三种运动形式:物质分子内部三种运动形式:(1)价电子相对于原子核的运动)价电子相对于原子核的运动 (2)原子核在其平衡位置附近的振动)原子核在其平衡位置附近的振动 (3)分子本身绕其重心的转动)分子本身绕其重心的转动 分子具有三种不同能级:电子能级、振动能级和转动能级分子具有三种不同能级:电子能级、振动能级和转动能级 三种能级都是量子化的,且各自具有相应的能量三种能级都是量子化的,且各自具有相应的能量 分子的能量包括分子的能量包括:电子能量电子能量Ee、振动能量振动能量Ev、转动能量、转动能量Er 即即 EEe+Ev+Er 第7页,讲稿共30张,创作于星期二能级跃迁能级跃迁 紫外紫外-可见光谱属于电子可见光谱属于电子跃迁光谱。跃迁光谱。电子能级电子能级间跃迁的同时总间跃迁的同时总伴随有振动和转动能级间的跃伴随有振动和转动能级间的跃迁。即电子光谱中总包含有振迁。即电子光谱中总包含有振动能级和转动能级间跃迁产生动能级和转动能级间跃迁产生的若干谱线而呈现宽谱带。的若干谱线而呈现宽谱带。分子吸收光谱是带状光谱分子吸收光谱是带状光谱evr第8页,讲稿共30张,创作于星期二讨论:讨论:1(1 1)转动能级间的能量差)转动能级间的能量差EEr r:0.0050.0050.0500.050eVeV,跃迁产生吸收光跃迁产生吸收光谱位于远红外区,称为远红外光谱或分子转动光谱;谱位于远红外区,称为远红外光谱或分子转动光谱;1(2 2)振动能级的能量差)振动能级的能量差E Ev v约为:约为:0.050.05eVeV,跃迁产生的吸收光谱跃迁产生的吸收光谱位于红外区,称为红外光谱或分子振动光谱;位于红外区,称为红外光谱或分子振动光谱;1(3 3)电子能级的能量差)电子能级的能量差EEe e较大,为较大,为1 12020eVeV。电子跃迁产生的吸收光电子跃迁产生的吸收光谱在紫外谱在紫外可见光区,称为可见光区,称为紫外紫外可见光谱可见光谱或分子的或分子的电子光谱电子光谱。第9页,讲稿共30张,创作于星期二讨论:讨论:1 (4 4)吸收光谱的波长分布是由产生谱带的跃迁能级间的能量差所决)吸收光谱的波长分布是由产生谱带的跃迁能级间的能量差所决定,反映了分子内部能级分布状况,是物质定性的依据。定,反映了分子内部能级分布状况,是物质定性的依据。1 (5 5)吸收谱带强度与分子偶极矩变化、跃迁几率有关,也提供吸收谱带强度与分子偶极矩变化、跃迁几率有关,也提供分子结构的信息。通常将在最大吸收波长处测得的摩尔吸光系数分子结构的信息。通常将在最大吸收波长处测得的摩尔吸光系数max也作为定性的依据。也作为定性的依据。不同物质的不同物质的max有时可能相同,但有时可能相同,但max不一不一定相同定相同;1 (6 6)吸收谱带强度与该物质分子吸收的光子数成正比,这是定量)吸收谱带强度与该物质分子吸收的光子数成正比,这是定量分析的依据。分析的依据。第10页,讲稿共30张,创作于星期二三、分子吸收光谱与电子跃迁三、分子吸收光谱与电子跃迁1 1有机化合物的紫外有机化合物的紫外可见吸收光谱可见吸收光谱 有机化合物的紫外有机化合物的紫外可见吸收光谱,是其分子中外层价电子跃迁的可见吸收光谱,是其分子中外层价电子跃迁的结果(三种):结果(三种):电子、电子、电子、电子、n电子电子。分子轨道理论分子轨道理论:一个成键一个成键轨道必定有一个相应的反键轨道必定有一个相应的反键轨道。通常外层电子均处于轨道。通常外层电子均处于分子轨道的基态,即成键轨分子轨道的基态,即成键轨道或非键轨道上。道或非键轨道上。外层电子吸收紫外或可见辐射后,就从基态向激发态外层电子吸收紫外或可见辐射后,就从基态向激发态(反键轨道反键轨道)跃跃迁。主要有四种跃迁所需能量迁。主要有四种跃迁所需能量大小顺序为:大小顺序为:n n n n 第11页,讲稿共30张,创作于星期二跃迁跃迁 所需能量最大,所需能量最大,电子只有吸收远紫外光的能量才能发生跃迁。电子只有吸收远紫外光的能量才能发生跃迁。饱和烷烃的分子吸收光谱出现在远紫外区饱和烷烃的分子吸收光谱出现在远紫外区(吸收波长吸收波长200nm。这类跃迁在跃迁选律上属于这类跃迁在跃迁选律上属于禁阻跃迁,摩尔吸光系数一般为禁阻跃迁,摩尔吸光系数一般为10100 Lmol-1 cm-1,吸吸收谱带强度较弱。分子中孤对电子和收谱带强度较弱。分子中孤对电子和键同时存在时发生键同时存在时发生n 跃迁跃迁。丙酮。丙酮n 跃迁的跃迁的为为275nm max为为22 Lmol-1 cm-1(溶剂环己烷溶剂环己烷)。第13页,讲稿共30张,创作于星期二几类有机化合物的紫外吸收光谱:几类有机化合物的紫外吸收光谱:饱和烃饱和烃饱饱和和单键单键碳碳氢氢化合物只有化合物只有 键电子键电子,一般在远紫外区一般在远紫外区(10200nm)才有吸收带。才有吸收带。这类化合物在这类化合物在2001000nm范围内无吸收带,在紫外吸收光谱分析中常用作溶剂范围内无吸收带,在紫外吸收光谱分析中常用作溶剂(如己烷、如己烷、庚烷、环已烷等庚烷、环已烷等)。当当饱饱和和单键单键碳碳氢氢化合物中的化合物中的氢氢被氧、氮、被氧、氮、卤卤素、硫等素、硫等杂杂原子取代原子取代时时,产产生生 n*跃跃迁。例如甲迁。例如甲烷烷一般一般跃跃迁的范迁的范围围在在125135nm(远远紫外区紫外区),碘甲,碘甲烷烷(CH3I)的吸收峰的吸收峰则处则处在在150210nm(跃跃迁迁)及及259nm(跃跃迁迁):第14页,讲稿共30张,创作于星期二(2 2)不饱和脂肪烃)不饱和脂肪烃l这类化合物有孤立双键的烯烃这类化合物有孤立双键的烯烃(如乙烯如乙烯)和共轭双键的烯烃和共轭双键的烯烃(如如丁二烯丁二烯),它们含有,它们含有键电子,吸收能量后产生键电子,吸收能量后产生*跃迁。跃迁。乙烯乙烯(孤立双键孤立双键)的的 为为171nm(15530 );而;而丁二烯丁二烯()由于两个双键共轭,此时吸收峰发由于两个双键共轭,此时吸收峰发生深色移动生深色移动(=217nm),吸收强度也显著增加,吸收强度也显著增加 (21000 )。l 共轭分子包括共轭二烯(环状二烯,链状二烯)、不饱和共轭分子包括共轭二烯(环状二烯,链状二烯)、不饱和酮酮、不饱和酸、多烯、芳香核与双键或羰基的共轭等。、不饱和酸、多烯、芳香核与双键或羰基的共轭等。第15页,讲稿共30张,创作于星期二 K K吸收带和吸收带和R R吸收带吸收带K K吸收带:吸收带:由于共轭双键中由于共轭双键中 *跃迁所产生的吸收带称为跃迁所产生的吸收带称为K K吸收带吸收带 从从德文德文Konjugation(Konjugation(共轭作用共轭作用)得名得名。其特点是强度大,摩尔吸光系数通常在。其特点是强度大,摩尔吸光系数通常在1000010000200000(200000(10104 4)之间;吸收峰位置一般处在之间;吸收峰位置一般处在217217280nm280nm范围内。范围内。K K吸收带的波长及强度与共体系的数目、位置、取代基的种类等有关。例如共吸收带的波长及强度与共体系的数目、位置、取代基的种类等有关。例如共轭双键愈多,深色移动愈显著,甚至产生颜色。据此可以判断共轭体系的存轭双键愈多,深色移动愈显著,甚至产生颜色。据此可以判断共轭体系的存在情况,这是紫外吸收光谱的重要应用。在情况,这是紫外吸收光谱的重要应用。R R吸收带:吸收带:由由n *跃迁所引起的吸收带称为跃迁所引起的吸收带称为R R吸收带吸收带 从德文从德文Radikal(Radikal(基团基团)得名得名 。R R吸收带的强度较弱吸收带的强度较弱()()。第16页,讲稿共30张,创作于星期二(3 3)芳香烃)芳香烃芳香族化合物芳香族化合物为环为环状共状共轭轭体系:体系:l苯在苯在185nm(47000 Lmol-1cm-1)和和204nm (7900 Lmol-1cm-1)处有两个强吸收带,分处有两个强吸收带,分 别称为别称为El和和E2吸收带,是由苯环结构中三个乙烯吸收带,是由苯环结构中三个乙烯 的环状共轭系统的跃迁所产生的,是芳香族化合物的特征吸收。的环状共轭系统的跃迁所产生的,是芳香族化合物的特征吸收。l在在230270nm处处(256nm处处200 Lmol-1cm-1)还有较弱的一系列吸收带,称为精还有较弱的一系列吸收带,称为精细结构吸收带,亦称为细结构吸收带,亦称为B吸收带吸收带从德文从德文Benzenoid(苯的苯的)得名得名,这是由于跃迁和苯,这是由于跃迁和苯环的振动的重叠引起的。环的振动的重叠引起的。B吸收带的精细结构常用来辨认芳香族化合物。吸收带的精细结构常用来辨认芳香族化合物。l苯环与生色团连结时,有苯环与生色团连结时,有B和和K两种吸收带,有时还有两种吸收带,有时还有R吸收带,其中吸收带,其中R吸收吸收带的波长最长带的波长最长。第17页,讲稿共30张,创作于星期二生色团与助色团生色团与助色团生色团生色团(C(Chromophorehromophore):最有用的紫外最有用的紫外可见光谱是由可见光谱是由和和n跃迁产生的。这两跃迁产生的。这两种跃迁均要求有机物分子中含有不饱和基团。这类含有种跃迁均要求有机物分子中含有不饱和基团。这类含有键的不饱键的不饱和基团称为生色团。简单的生色团由双键或叁键体系组成,和基团称为生色团。简单的生色团由双键或叁键体系组成,如如乙烯基、羰基、亚硝基、偶氮基乙烯基、羰基、亚硝基、偶氮基NN、乙炔基、腈基乙炔基、腈基CN等等。助色团助色团(A(Auxochromeuxochrome):有一些含有有一些含有n n电子的基团电子的基团(如如OH、OR、NH、NHR、X等等),它们本身没有生色功能它们本身没有生色功能(不能吸收不能吸收200nm200nm的光的光),但,但当它们与生色团相连时,就会发生当它们与生色团相连时,就会发生n n共轭作用,增强生色团的共轭作用,增强生色团的生色能力生色能力(吸收波长向长波方向移动,且吸收强度增加吸收波长向长波方向移动,且吸收强度增加),这样的基团,这样的基团称为助色团。称为助色团。第18页,讲稿共30张,创作于星期二红移红移(Einstein shift)(Einstein shift)与蓝移与蓝移(Blueness shift)(Blueness shift)有机化合物的吸收谱带常常因引有机化合物的吸收谱带常常因引入取代基或改变溶剂使最大吸收波长入取代基或改变溶剂使最大吸收波长maxmax和吸收强度发生变化和吸收强度发生变化:maxmax向长波方向移动称为向长波方向移动称为红移红移,向短,向短波方向移动称为波方向移动称为蓝移蓝移。吸收强度即摩尔吸光系数吸收强度即摩尔吸光系数增大或减增大或减小的现象分别称为小的现象分别称为增色效应增色效应或或减色效减色效应应,如图所示。,如图所示。第19页,讲稿共30张,创作于星期二2.2.金属配合物的紫外金属配合物的紫外可见吸收光谱可见吸收光谱 金属离子与配位体反应生成配合物的颜色一般不同于游离金金属离子与配位体反应生成配合物的颜色一般不同于游离金属离子属离子(水合离子水合离子)和配位体本身的颜色。金属配合物的生色机理和配位体本身的颜色。金属配合物的生色机理主要有三种类型:主要有三种类型:配位体微扰的金属离子配位体微扰的金属离子d d一一d d电子跃迁和电子跃迁和一一电子跃迁电子跃迁 摩尔吸收系数摩尔吸收系数很小,对定量分析意义不大。很小,对定量分析意义不大。金属离子微扰的配位体内电子跃迁金属离子微扰的配位体内电子跃迁 金属离子的微扰,将引起配位体吸收波长和强度的变化。金属离子的微扰,将引起配位体吸收波长和强度的变化。变化与成键性质有关,若静电引力结合,变化一般很小。若共变化与成键性质有关,若静电引力结合,变化一般很小。若共价键和配位键结合,则变化非常明显。价键和配位键结合,则变化非常明显。电荷转移吸收光谱电荷转移吸收光谱 在分光光度法中具有重要意义。在分光光度法中具有重要意义。第20页,讲稿共30张,创作于星期二电荷转移吸收光谱(荷移光谱)电荷转移吸收光谱(荷移光谱)1 当吸收紫外可见辐射后,分子中原定域在金属当吸收紫外可见辐射后,分子中原定域在金属M轨道上电荷的转移到配位体轨道上电荷的转移到配位体L的轨道,或按相反方向转移,这种跃迁称为电荷转移跃迁,所产生的吸收光的轨道,或按相反方向转移,这种跃迁称为电荷转移跃迁,所产生的吸收光谱称为谱称为荷移光谱荷移光谱。1 电荷转移跃迁本质上属于分子内氧化还原反应,因此呈现荷移光谱的必要条件是构电荷转移跃迁本质上属于分子内氧化还原反应,因此呈现荷移光谱的必要条件是构成分子的二组分,一个为电子给予体,另一个应为电子接受体。成分子的二组分,一个为电子给予体,另一个应为电子接受体。1 电荷转移跃迁在跃迁选律上属于允许跃迁,其摩尔吸光系数一般都较大电荷转移跃迁在跃迁选律上属于允许跃迁,其摩尔吸光系数一般都较大(10 4左左右右),适宜于微量金属的检出和测定。,适宜于微量金属的检出和测定。1 荷移光谱的最大吸收波长及吸收强度与电荷转移的难易程度有关。荷移光谱的最大吸收波长及吸收强度与电荷转移的难易程度有关。例:例:Fe3与与SCN形成血红色配合物,在形成血红色配合物,在490nm处有强吸收峰。其实质是发生了处有强吸收峰。其实质是发生了如下反应:如下反应:Fe3 SCN h=Fe SCN 2 第21页,讲稿共30张,创作于星期二四、光的吸收定律四、光的吸收定律 1.1.朗伯朗伯比耳定律比耳定律(Law of LambertBeer)布格布格(Bouguer)和朗伯和朗伯(Lambert)先后于先后于17291729年和年和17601760年阐明了年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系。光的吸收程度和吸收层厚度的关系。A Ab b (动画(动画1)(动画(动画2)18521852年比耳年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之间也具有类似的关系。间也具有类似的关系。A A c c 二者的结合称为朗伯比耳定律,其数学表达式为:二者的结合称为朗伯比耳定律,其数学表达式为:第22页,讲稿共30张,创作于星期二朗伯朗伯比耳定律数学表达式比耳定律数学表达式 Alg(I0/It)=b c 式中式中A:吸光度;描述溶液对光的吸收程度;吸光度;描述溶液对光的吸收程度;b:液层厚度液层厚度(光程长度光程长度),通常以,通常以cm为单位;为单位;c:溶液的摩尔浓度,单位溶液的摩尔浓度,单位molL;:摩尔吸光系数,单位摩尔吸光系数,单位Lmolcm;或或:Alg(I0/It)=a b c c:溶液的浓度,单位溶液的浓度,单位gL a:吸光系数,单位吸光系数,单位Lgcm a与与的关系为:的关系为:a=/M (M为摩尔质量)为摩尔质量)第23页,讲稿共30张,创作于星期二透光度透光度(透光率透光率)T T透光度透光度T:描述入射光透过溶液的程度描述入射光透过溶液的程度:T=I t /I0吸光度吸光度A与透光度与透光度T的关系的关系:A lg T 朗伯朗伯比耳定律是吸光光度法的理论基础和定量测定的依比耳定律是吸光光度法的理论基础和定量测定的依据。应用于各种光度法的吸收测量;据。应用于各种光度法的吸收测量;摩尔吸光系数摩尔吸光系数在数值上等于浓度为在数值上等于浓度为1 mol/L、液层厚度为液层厚度为1cm时时该溶液在某一波长下的吸光度;该溶液在某一波长下的吸光度;吸光系数吸光系数a(Lg-1cm-1)相当于浓度为相当于浓度为1 g/L、液层厚度为液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。时该溶液在某一波长下的吸光度。第24页,讲稿共30张,创作于星期二2.2.摩尔吸光系数摩尔吸光系数的讨论的讨论 (1 1)吸收物质在一定波长和溶剂条件下的)吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数特征常数;(2 2)不随浓度不随浓度c c和光程长度和光程长度b b的改变而改变的改变而改变。在温度和波长等条。在温度和波长等条件一定时,件一定时,仅与吸收物质本身的性质有关,与待测物浓度无关;仅与吸收物质本身的性质有关,与待测物浓度无关;(3 3)可作为)可作为定性鉴定的参数定性鉴定的参数;(4)同一吸收物质在不同波长下的)同一吸收物质在不同波长下的值是不同的。在最大吸收值是不同的。在最大吸收波长波长max处的摩尔吸光系数,常以处的摩尔吸光系数,常以max表示。表示。max表明了该表明了该吸收物吸收物质最大限度的吸光能力质最大限度的吸光能力,也反映了光度法测定该物质可能达到,也反映了光度法测定该物质可能达到的最大灵敏度。的最大灵敏度。第25页,讲稿共30张,创作于星期二摩尔吸光系数摩尔吸光系数的讨论的讨论(5 5)max越大表明该物质的吸光能力越强,用光度法测定该越大表明该物质的吸光能力越强,用光度法测定该物质的灵敏度越高。物质的灵敏度越高。105:超高灵敏;:超高灵敏;=(610)104:高灵敏;:高灵敏;2104 :不灵敏。:不灵敏。第26页,讲稿共30张,创作于星期二3.3.偏离朗伯偏离朗伯比耳定律的原因比耳定律的原因 标准曲线法测定未知溶液的浓度时,发现:标准曲线常发生弯曲标准曲线法测定未知溶液的浓度时,发现:标准曲线常发生弯曲(尤其当溶液浓度较高时),这种现象称为对朗伯(尤其当溶液浓度较高时),这种现象称为对朗伯比耳定律的偏离。比耳定律的偏离。引起这种偏离的因素(两大类):引起这种偏离的因素(两大类):(1 1)物理性因素,即仪器的非理想引起的;)物理性因素,即仪器的非理想引起的;(2 2)化学性因素。)化学性因素。第27页,讲稿共30张,创作于星期二(1)物理性因素物理性因素 难以获得真正的纯单色光难以获得真正的纯单色光。朗朗比耳定律的前提条件之一是入射光为单色光。比耳定律的前提条件之一是入射光为单色光。分光光度计只能获得近乎单色的狭窄光带。复合光可导致分光光度计只能获得近乎单色的狭窄光带。复合光可导致对朗伯对朗伯比耳定律的正或负偏离。比耳定律的正或负偏离。为克服非单色光引起的偏离,首先应为克服非单色光引起的偏离,首先应选择比较好的单色器。此外还应将入射波选择比较好的单色器。此外还应将入射波长选定在待测物质的最大吸收波长且吸收长选定在待测物质的最大吸收波长且吸收曲线较平坦处。曲线较平坦处。第28页,讲稿共30张,创作于星期二(2)(2)化学性因素化学性因素 朗朗比耳定律的假定:所有的吸光质点之间不发生相互作用;比耳定律的假定:所有的吸光质点之间不发生相互作用;这个假定只有在稀溶液这个假定只有在稀溶液(c10 2 mol/L 时,吸光质点间可能发生缔合等相时,吸光质点间可能发生缔合等相互作用,直接影响了对光的吸收。互作用,直接影响了对光的吸收。故:朗伯故:朗伯比耳定律只适用于稀溶液比耳定律只适用于稀溶液。溶液中存在着离解、聚合、互变异构、配合物的形成等化学平衡时。溶液中存在着离解、聚合、互变异构、配合物的形成等化学平衡时。使吸光质点的浓度发生变化,影响吸光度。使吸光质点的浓度发生变化,影响吸光度。例:例:铬酸盐或重铬酸盐溶液中存在下列平衡:铬酸盐或重铬酸盐溶液中存在下列平衡:CrO42-2H=Cr2O72-H2O 溶液中溶液中CrO42-、Cr2O72-的颜色不同,吸光性质也不相同。故的颜色不同,吸光性质也不相同。故此时溶液此时溶液pH 对测定有重要影响。对测定有重要影响。第29页,讲稿共30张,创作于星期二2022/10/15感感谢谢大大家家观观看看第30页,讲稿共30张,创作于星期二

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