细菌的遗传分析 (3)精选PPT.ppt
关于细菌的遗传分析(3)第1页，讲稿共39张，创作于星期三细菌的培养方式细菌的培养方式第2页，讲稿共39张，创作于星期三大大 肠肠 杆杆 菌菌第3页，讲稿共39张，创作于星期三E.coli 4.6Mb.4288genesE.coli K12 DNA sequence，1997 90%encode protein8 locations of remnants of bacteriophage genomes.Insertion sequences(IS)大肠杆菌基因组结构大肠杆菌基因组结构第4页，讲稿共39张，创作于星期三二、大肠杆菌的有性生殖二、大肠杆菌的有性生殖1 1、F F质粒的结构质粒的结构（1 1）转移区（）转移区（transfer regiontransfer region）（2 2）复制区（复制区（replication regionreplication region）（3 3）插入区（插入区（insertion regioninsertion region）第5页，讲稿共39张，创作于星期三2 2、F F质粒在细胞内的存在形式质粒在细胞内的存在形式第6页，讲稿共39张，创作于星期三三、大肠杆菌的突变型及其筛选三、大肠杆菌的突变型及其筛选第7页，讲稿共39张，创作于星期三四、接合与染色体作图四、接合与染色体作图AB CD AB CDABCD杂交杂交实验实验Lederberg 和和 Tatum 1946,E.coli K12第8页，讲稿共39张，创作于星期三U U型管实验排除转化型管实验排除转化第9页，讲稿共39张，创作于星期三第10页，讲稿共39张，创作于星期三2、F+F-第11页，讲稿共39张，创作于星期三第12页，讲稿共39张，创作于星期三3、Hfr F-第13页，讲稿共39张，创作于星期三第14页，讲稿共39张，创作于星期三第15页，讲稿共39张，创作于星期三4、F F-第16页，讲稿共39张，创作于星期三第17页，讲稿共39张，创作于星期三五、五、中断杂交试验（中断杂交试验（interrupted interrupted mating experimentmating experiment）和基因定位和基因定位 1957，Wollman and Jacob第18页，讲稿共39张，创作于星期三第19页，讲稿共39张，创作于星期三第20页，讲稿共39张，创作于星期三六、转化（六、转化（transformationtransformation）和转导作图和转导作图 （一）转化（一）转化 概念：转化是指某一基因型的细胞从周围介质概念：转化是指某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型细胞的中吸收来自另一基因型细胞的DNADNA而使受体的而使受体的基因型和表型发生相应变化的现象。基因型和表型发生相应变化的现象。1 1、自然转化、自然转化 感受态的出现感受态的出现 双链双链DNADNA的接合和进入的接合和进入 DNADNA的整合的整合第21页，讲稿共39张，创作于星期三2 2、人工转化、人工转化 PEGPEG介导的转化介导的转化 电穿孔法电穿孔法 基因枪法基因枪法第22页，讲稿共39张，创作于星期三（三）利用转化绘制遗传图（三）利用转化绘制遗传图第23页，讲稿共39张，创作于星期三第24页，讲稿共39张，创作于星期三（二）、转导（二）、转导 概念：以噬菌体为媒介，将供体菌的部分概念：以噬菌体为媒介，将供体菌的部分DNADNA转转移到受体菌内的现象。移到受体菌内的现象。1 1、普遍性转导（、普遍性转导（generalized transduction)generalized transduction)（1 1）转导现象的发现）转导现象的发现 19511951年，年，J.LederbergJ.Lederberg 和和 N.ZinderN.Zinder沙门氏菌沙门氏菌用用PhePhe-trptrp-tyrtyr-hishis 与与 PhePhe trptrp tyrtyrhishis-原养型菌落原养型菌落10-5回复突变率为回复突变率为10-8 第25页，讲稿共39张，创作于星期三 U型管实验型管实验A:Phe-trp-tyr-his 与与B:Phe trp tyrhis-可滤因子（FA）第26页，讲稿共39张，创作于星期三 FAFA与沙门氏菌的温和噬菌体与沙门氏菌的温和噬菌体P22P22在生物学特性上的一致性：在生物学特性上的一致性：(1)(1)P22P22的侵染力与和的侵染力与和FAFA的遗传力均可被的遗传力均可被脱氧核糖脱氧核糖 核酸酶和胰蛋白酶核酸酶和胰蛋白酶破坏破坏(2)(2)用用抗抗P22P22或用加热的处理或用加热的处理均可使均可使P22P22的侵染力和的侵染力和 FAFA的遗传能力失活，失活速率相同。的遗传能力失活，失活速率相同。(3)(3)用用抗抗P22P22的菌株作亲本的菌株作亲本进行上述混合培养，进行上述混合培养，FAFA丧失侵染能力，丧失侵染能力，不能出现重组体。不能出现重组体。(4)(4)P22P22和和FAFA在在大小和质量上相同大小和质量上相同。FAFA的生物学特性的生物学特性第27页，讲稿共39张，创作于星期三普遍性转导（普遍性转导（generalized transduction)generalized transduction)A 细菌B 细菌进入裂解周期时，进入裂解周期时，由于噬菌体颗粒的由于噬菌体颗粒的错误包装错误包装，将，将A菌菌部分染色体片段部分染色体片段包装入噬菌体，形成包装入噬菌体，形成转导噬菌体转导噬菌体。第28页，讲稿共39张，创作于星期三普遍性转导的应用普遍性转导的应用 共转导共转导 是指两个处在同一个转导片段上的基因一是指两个处在同一个转导片段上的基因一起整合进受体染色体中。共转导频率越高，两个起整合进受体染色体中。共转导频率越高，两个基因间的距离越近，连锁越紧密。基因间的距离越近，连锁越紧密。共转导判断基因间连锁关系共转导判断基因间连锁关系第29页，讲稿共39张，创作于星期三2 2、局限性转导（、局限性转导（specialized transduction)specialized transduction)只能使供体一个或少数几个基因转移到只能使供体一个或少数几个基因转移到受体的转导作用称为局限性转导。受体的转导作用称为局限性转导。以以噬菌体为例：噬菌体为例：第30页，讲稿共39张，创作于星期三噬菌体简介噬菌体简介 （1 1）形态及遗传物质）形态及遗传物质第31页，讲稿共39张，创作于星期三（2 2）基因组）基因组 相关功能的基因聚集成簇相关功能的基因聚集成簇第32页，讲稿共39张，创作于星期三第33页，讲稿共39张，创作于星期三第34页，讲稿共39张，创作于星期三七、细菌同源重组的机制七、细菌同源重组的机制（一）细菌同源重组的特点（一）细菌同源重组的特点（二）细菌同源重组的分子基础（二）细菌同源重组的分子基础1、重组热点、重组热点 chi序列序列 5 GCTGGTGG 3 3 CGACCACC 52、重组相关的酶、重组相关的酶 RecBCD,RecA,RuvA,RuvB,RuvC 第35页，讲稿共39张，创作于星期三第36页，讲稿共39张，创作于星期三第37页，讲稿共39张，创作于星期三第38页，讲稿共39张，创作于星期三感谢大家观看第39页，讲稿共39张，创作于星期三
