神经干动作电位的记录与观察精.ppt

神经干动作电位的记录与观察第1页，本讲稿共16页目的目的o通过记录神经干的复合动作电位，掌握生物电记录的一般原则和方法。o学会利用刺激器诱发组织兴奋的方法；掌握设定刺激参数的方法。o学习分析辨别动作电位，了解其产生的基本原理，加强对兴奋性和阈强度的了解。第2页，本讲稿共16页实验原理实验原理o用用电电刺刺激激神神经经，在在刺刺激激电电极极的的负负极极下下神神经经纤纤维维膜膜内内产产生生去去极极化化，当当去去极极化化达达到到阈阈电电位位，膜膜上上产产生生一一次次可可传传导的快速电位反转，即导的快速电位反转，即动作电位动作电位。o神经干由许多神经纤维组成。其动作电位是以神经干由许多神经纤维组成。其动作电位是以膜外记录方膜外记录方式式记录到的记录到的复合动作电位复合动作电位。o如果两个引导电极置于兴奋性正常的神经干表面，兴奋波如果两个引导电极置于兴奋性正常的神经干表面，兴奋波先后通过两个电极处，便引导出两个方向相反的电位波先后通过两个电极处，便引导出两个方向相反的电位波形，称形，称双相动作电位双相动作电位。第3页，本讲稿共16页双相动作电位双相动作电位 Biphasic Action Potential兴奋区细胞外引导电极检流计第4页，本讲稿共16页刺激伪迹(Stimulus artifact)刺激器刺激器放大器放大器+地地刺激电流i-i+R+R-地地刺激伪迹是刺激电流通过导电介质扩散至两引刺激伪迹是刺激电流通过导电介质扩散至两引导电极而形成的电位差信号。导电极而形成的电位差信号。刺激伪迹AP第5页，本讲稿共16页屏蔽盒用有机玻璃制成，盒内有两根导轨，导轨上有屏蔽盒用有机玻璃制成，盒内有两根导轨，导轨上有7个装有银丝电极的有机玻璃滑个装有银丝电极的有机玻璃滑块，每个电极滑块通过导线与标本盒侧壁的一个接线柱相联，其中一对作刺激电极，块，每个电极滑块通过导线与标本盒侧壁的一个接线柱相联，其中一对作刺激电极，l2对作记录电极，记录电极与刺激电极间的电极接地。对作记录电极，记录电极与刺激电极间的电极接地。屏蔽盒内要保持一定的湿度，但电极间不要短路，电极的银丝必需保持清洁；屏蔽盒内要保持一定的湿度，但电极间不要短路，电极的银丝必需保持清洁；实验时标本应经常保持湿润，标本两端的扎线要悬空；实验时标本应经常保持湿润，标本两端的扎线要悬空；神经的近中枢端置于刺激电极一侧，外周端置于记录电极侧。神经的近中枢端置于刺激电极一侧，外周端置于记录电极侧。地0123456刺激通道2通道1第6页，本讲稿共16页实验材料实验材料o动物动物蟾蜍蟾蜍o器械器械常用手术器械、蛙板、毁髓针、玻璃解剖针、常用手术器械、蛙板、毁髓针、玻璃解剖针、神经屏蔽盒神经屏蔽盒、大头针、任氏液、烧杯、培养皿。、大头针、任氏液、烧杯、培养皿。RM6240B生理信号记录仪。生理信号记录仪。第7页，本讲稿共16页操作过程操作过程1.坐骨神经干的制备坐骨神经干的制备o双毁髓双毁髓 （录像）（录像）o制备下肢标本制备下肢标本 （录像）（录像）o制备坐骨神经标本制备坐骨神经标本 （录像）（录像）2.连接实验装置连接实验装置地0123456刺激通道2通道1第8页，本讲稿共16页3.实验操作实验操作进入实验模块进入实验模块：“实验实验”肌肉神经肌肉神经神经干动作神经干动作电位电位 弹出刺激器对话弹出刺激器对话框，并处于示波状态框，并处于示波状态 在刺激器对话框中选择在刺激器对话框中选择同步触发。同步触发。第9页，本讲稿共16页o测量坐骨神经干的阈强度、最适刺激强度测量坐骨神经干的阈强度、最适刺激强度：调整刺激：调整刺激强度从强度从0v递增，求得递增，求得阈强度、最适刺激强度阈强度、最适刺激强度。o在最适刺激强度下，在最适刺激强度下，观察动作电位形状，观察动作电位形状，测量其测量其时程时程及及幅幅度度。根据波形幅度可调节位于屏幕根据波形幅度可调节位于屏幕上显示通道右侧的上显示通道右侧的灵敏度灵敏度。参数调节后，应再次点击参数调节后，应再次点击“开开始刺激始刺激”键，以刷新波形。键，以刷新波形。可用可用“PgUp”与与“PgDn”翻页查翻页查找波形。找波形。第10页，本讲稿共16页第11页，本讲稿共16页第12页，本讲稿共16页n神经损伤对复合动作电位的影响神经损伤对复合动作电位的影响 在第一对记录电极间在第一对记录电极间用镊子夹伤神经干，记录动作电位。观察复合动作电位用镊子夹伤神经干，记录动作电位。观察复合动作电位有何变化。有何变化。+-R1-R1+R2-R2+Peripheral endCentral end第13页，本讲稿共16页注意事项注意事项o制作标本过程中应尽量减少对神经的牵拉，以免损伤神制作标本过程中应尽量减少对神经的牵拉，以免损伤神经。经。o实验过程中，要经常保持标本湿润。实验过程中，要经常保持标本湿润。o神经干应与每个使用的电极密切接触。神经干应与每个使用的电极密切接触。o实验结束后，神经屏蔽盒应清洗、擦干，以防止残留的盐液常腐实验结束后，神经屏蔽盒应清洗、擦干，以防止残留的盐液常腐蚀电极。蚀电极。第14页，本讲稿共16页坐骨神经腓肠肌标本的制备坐骨神经腓肠肌标本的制备方法与步骤：方法与步骤：1.双毁髓双毁髓：毁髓针自枕骨大孔分别进入颅腔和椎管捣毁脑和脊髓；毁髓针自枕骨大孔分别进入颅腔和椎管捣毁脑和脊髓；2.剥制后肢标本剥制后肢标本：剪去头、前肢和内脏，剩余脊柱和后肢；剪去头、前肢和内脏，剩余脊柱和后肢；3.分离两后肢分离两后肢：左右两后肢分开，勿损伤两侧坐骨神经；左右两后肢分开，勿损伤两侧坐骨神经；4.分离坐骨神经分离坐骨神经：玻璃分针，保留一段脊柱骨；玻璃分针，保留一段脊柱骨；5.游离腓肠肌游离腓肠肌：跟腱结扎跟腱结扎6.分离股骨头分离股骨头7.检验标本检验标本：锌铜弓电极锌铜弓电极完整标本完整标本坐骨神经坐骨神经腓肠肌腓肠肌股骨头股骨头一段脊柱骨一段脊柱骨第15页，本讲稿共16页注意事项注意事项：.操作过程中切勿损伤神操作过程中切勿损伤神经，勿用金属器械触碰坐骨经，勿用金属器械触碰坐骨神经；神经；.操作过程中经常用任氏液操作过程中经常用任氏液湿润去皮的标本。湿润去皮的标本。下次实验下次实验：神经干：神经干AP不应期与传导速度的测定不应期与传导速度的测定第16页，本讲稿共16页