动物细胞融合和单克隆抗体技术.ppt

关于动物细胞融合与单克隆抗体技术第一张，PPT共五十六页，创作于2022年6月5.1 细胞融合与杂交细胞融合与杂交第二张，PPT共五十六页，创作于2022年6月一、概念一、概念v细胞融合：细胞融合：两个或两个以上相同的细胞合两个或两个以上相同的细胞合并形成一个细胞的过程。并形成一个细胞的过程。v细胞杂交：细胞杂交：两个或两个以上不同的细胞合两个或两个以上不同的细胞合并形成一个细胞的过程，包括并形成一个细胞的过程，包括种内杂交种内杂交和和种间杂交。种间杂交。第三张，PPT共五十六页，创作于2022年6月二、原理二、原理 异核体阶段异核体阶段杂种细胞形成杂种细胞形成同核体同核体异核体异核体合核体合核体关键是膜的融合：关键是膜的融合：v两个亲本细胞并列，细胞膜接触两个亲本细胞并列，细胞膜接触v膜组织局部破坏膜组织局部破坏v形成包围融合细胞的连续胞膜形成包围融合细胞的连续胞膜第四张，PPT共五十六页，创作于2022年6月细胞融合过程可分为：细胞融合过程可分为：凝集：凝集：细胞凝集与细胞膜的糖蛋白有关细胞凝集与细胞膜的糖蛋白有关蛋白质分子重新分布：蛋白质分子重新分布：是细胞融合的必要前提是细胞融合的必要前提脂质分子重排：脂质分子重排：是实现细胞融合的关键是实现细胞融合的关键胞质合并：胞质合并：后续的稳定步骤。后续的稳定步骤。第五张，PPT共五十六页，创作于2022年6月1.1.病毒介导融合：病毒介导融合：（1 1）诱导原理诱导原理三、细胞融合方法三、细胞融合方法（2 2）操作步骤操作步骤(3)(3)病毒诱导融合的特点病毒诱导融合的特点第六张，PPT共五十六页，创作于2022年6月2.2.化学融合剂诱导融合（化学融合剂诱导融合（P107P107）（1 1）化学融合剂的种类）化学融合剂的种类三、细胞融合方法三、细胞融合方法（2）PEG诱导的原理诱导的原理 （3 3）PEGPEG诱导的特点诱导的特点sp3杂化，有孤对电子，杂化，有孤对电子，可与可与H2O形成形成H键而具有键而具有强烈的吸水性。强烈的吸水性。第七张，PPT共五十六页，创作于2022年6月3.电融合技术电融合技术三、细胞融合方法三、细胞融合方法第八张，PPT共五十六页，创作于2022年6月v电融合的特点电融合的特点 融合频率高，对细胞伤害小融合频率高，对细胞伤害小正弦交变电场对细胞的长时间作用会损伤细胞正弦交变电场对细胞的长时间作用会损伤细胞非特异性融合非特异性融合三、细胞融合方法三、细胞融合方法磁磁-电融合电融合声声-电融合电融合电电-机械融合机械融合细胞化学聚集融合细胞化学聚集融合生物素生物素-抗生物素抗生物素-抗原抗原-抗体桥联抗体桥联第九张，PPT共五十六页，创作于2022年6月4.激光诱导细胞融合激光诱导细胞融合（1）原理：）原理：光镊所形成的光学势阱会把细胞拉向光束中心，光镊所形成的光学势阱会把细胞拉向光束中心，钳住细胞，从而实现了对生物粒子的远距离、非钳住细胞，从而实现了对生物粒子的远距离、非接触式捕获。接触式捕获。（2）特点：）特点：可对单个核细胞进行操作，但设备昂贵，操作技可对单个核细胞进行操作，但设备昂贵，操作技术要求高。术要求高。三、细胞融合方法三、细胞融合方法第十张，PPT共五十六页，创作于2022年6月5.微流控芯片的细胞融合技术微流控芯片的细胞融合技术（1 1）原理：）原理：将微通道网络整合到生物芯片上，使得微将微通道网络整合到生物芯片上，使得微流控系统成为细胞融合的理想平台流控系统成为细胞融合的理想平台（2 2）特点：）特点：实现大量单个成对细胞的融合实现大量单个成对细胞的融合（二）细胞融合的方法（二）细胞融合的方法第十一张，PPT共五十六页，创作于2022年6月6.6.细胞融合的影响因素细胞融合的影响因素v细胞的种类和性质细胞的种类和性质 细胞表面性质细胞表面性质 细胞种类细胞种类 亲本细胞的亲缘关系亲本细胞的亲缘关系v融合温度及融合温度及PH等环境条件等环境条件v离子强度及离子种类离子强度及离子种类三、细胞融合方法三、细胞融合方法第十二张，PPT共五十六页，创作于2022年6月四、四、融合子检出的选择系统融合子检出的选择系统v遗传互补选择遗传互补选择v营养缺陷型互补选择营养缺陷型互补选择v抗性互补选择抗性互补选择v形态特征互补选择形态特征互补选择v生长特性选择生长特性选择第十三张，PPT共五十六页，创作于2022年6月遗传互补选择遗传互补选择遗传互补选择遗传互补选择-HAT-HAT-HAT-HAT培养基筛选培养基筛选培养基筛选培养基筛选H,次黄嘌呤次黄嘌呤;A,氨基喋呤氨基喋呤;T,胸腺嘧啶胸腺嘧啶DNADNA内源性途径内源性途径内源性途径内源性途径(主要途径主要途径主要途径主要途径)谷氨酰胺谷氨酰胺 or单磷酸尿苷酸单磷酸尿苷酸四氢叶酸四氢叶酸四氢叶酸四氢叶酸AHHT T外源性途径外源性途径外源性途径外源性途径(旁路途径旁路途径旁路途径旁路途径)(HHypoxanthine ypoxanthine g guznine uznine p phosphohosphor ribosyl ibosyl t transferase)ransferase)次嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶次嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶次嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶次嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 (HGPRTHGPRT )胸腺嘧啶激酶胸腺嘧啶激酶胸腺嘧啶激酶胸腺嘧啶激酶 (TK TK)(T Thymidine hymidine k kinase)inase)B B淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞：HGPRTHGPRT+，TKTK+骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞：HGPRTHGPRT-，TKTK-短期存活，最终死亡短期存活，最终死亡短期存活，最终死亡短期存活，最终死亡死亡死亡死亡死亡外源性途径外源性途径外源性途径外源性途径(旁路途径旁路途径旁路途径旁路途径)杂交瘤细胞：杂交瘤细胞：杂交瘤细胞：杂交瘤细胞：HGPRT+HGPRT+，TK+TK+长期存活长期存活长期存活长期存活第十四张，PPT共五十六页，创作于2022年6月五、融合子的鉴定方法五、融合子的鉴定方法v细胞学鉴定：细胞学鉴定：染色体数目，形态结构染色体数目，形态结构v生化分析：生化分析：同工酶谱为双亲的总和同工酶谱为双亲的总和v分子生物学鉴定：分子生物学鉴定：DNA探针探针第十五张，PPT共五十六页，创作于2022年6月六、细胞融合技术的应用六、细胞融合技术的应用v基因定位和人类基因图谱绘制基因定位和人类基因图谱绘制v肿瘤免疫的研究：肿瘤树突状细胞疫苗肿瘤免疫的研究：肿瘤树突状细胞疫苗v单克隆抗体的生产单克隆抗体的生产v动物新品种的培育动物新品种的培育第十六张，PPT共五十六页，创作于2022年6月5.2 杂交瘤技术杂交瘤技术一、一、B淋巴细胞杂交瘤技术淋巴细胞杂交瘤技术原理：原理：细胞融合细胞融合+克隆选择理论克隆选择理论 第十七张，PPT共五十六页，创作于2022年6月Emil von Behring,1901,antitoxinsGeoreges Kohler and Cesar Milstein,1984,monoclonal antibodySusumu Tonegama,1987,structure of Ig geneGerald Edelman and Rodney Porter,1972,structure of antibodyPaul Ehrlich,1908,production of antibodyNobel Prize winners第十八张，PPT共五十六页，创作于2022年6月免疫球蛋白的免疫球蛋白的单体分子结构单体分子结构 第十九张，PPT共五十六页，创作于2022年6月第二十张，PPT共五十六页，创作于2022年6月第二十一张，PPT共五十六页，创作于2022年6月第二十二张，PPT共五十六页，创作于2022年6月第二十三张，PPT共五十六页，创作于2022年6月第二十四张，PPT共五十六页，创作于2022年6月第二十五张，PPT共五十六页，创作于2022年6月第二十六张，PPT共五十六页，创作于2022年6月1.1.1.1.亲本细胞的制备亲本细胞的制备亲本细胞的制备亲本细胞的制备（1 1）骨髓瘤细胞特性）骨髓瘤细胞特性）骨髓瘤细胞特性）骨髓瘤细胞特性 不能分泌抗体不能分泌抗体不能分泌抗体不能分泌抗体 HGPRT HGPRT或或或或TKTK缺陷型缺陷型缺陷型缺陷型 长命细胞长命细胞长命细胞长命细胞二、二、二、二、BB淋巴细胞杂交瘤技术的操作流程淋巴细胞杂交瘤技术的操作流程淋巴细胞杂交瘤技术的操作流程淋巴细胞杂交瘤技术的操作流程（2 2）B B淋巴细胞特性：淋巴细胞特性：淋巴细胞特性：淋巴细胞特性：分泌抗体分泌抗体分泌抗体分泌抗体 短命细胞短命细胞短命细胞短命细胞第二十七张，PPT共五十六页，创作于2022年6月动物免疫：动物免疫：动物免疫：动物免疫：目的：目的：目的：目的：在在在在细细细细胞胞胞胞融融融融合合合合后后后后获获获获得得得得尽尽尽尽可可可可能能能能多多多多的的的的分分分分泌泌泌泌针针针针对对对对于于于于该该该该目目目目标标标标抗抗抗抗原原原原的的的的特特特特异异异异性性性性抗抗抗抗体体体体的的的的杂杂杂杂交交交交瘤细胞瘤细胞瘤细胞瘤细胞.特定特定特定特定目标抗原目标抗原目标抗原目标抗原动物动物动物动物免疫免疫免疫免疫脾脏中脾脏中脾脏中脾脏中B B淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞B B淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞大量增殖大量增殖大量增殖大量增殖刺激刺激刺激刺激能分泌针对于该抗原的能分泌针对于该抗原的能分泌针对于该抗原的能分泌针对于该抗原的特异性抗体特异性抗体特异性抗体特异性抗体第二十八张，PPT共五十六页，创作于2022年6月2.2.饲养细胞的制备及作用饲养细胞的制备及作用饲养细胞的作用：饲养细胞的作用：v提高培养细胞的密度，使待克隆细胞容易生存与繁提高培养细胞的密度，使待克隆细胞容易生存与繁殖。殖。v腹腔细胞能清除培养中的死亡细胞，从而促进单个腹腔细胞能清除培养中的死亡细胞，从而促进单个细胞克隆的生长。细胞克隆的生长。v饲养细胞能释放诸如细胞生长因子类物质，起到促饲养细胞能释放诸如细胞生长因子类物质，起到促进细胞分裂、增殖的作用。进细胞分裂、增殖的作用。饲养细胞的制备：饲养细胞的制备：腹腔巨噬细胞腹腔巨噬细胞第二十九张，PPT共五十六页，创作于2022年6月3.3.3.3.细胞融合技术：细胞融合技术：细胞融合技术：细胞融合技术：脾细胞脾细胞脾细胞脾细胞(B(B淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞)骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞长命长命长命长命不分泌抗体不分泌抗体不分泌抗体不分泌抗体分泌抗体分泌抗体分泌抗体分泌抗体短命短命短命短命分泌抗体分泌抗体分泌抗体分泌抗体长命长命长命长命KhlerKhler和和和和Milstein,1975Milstein,19751984年年 Nobel医医 学学 奖奖第三十张，PPT共五十六页，创作于2022年6月4.HAT4.HAT4.HAT4.HAT选择性培养基的筛选选择性培养基的筛选选择性培养基的筛选选择性培养基的筛选融合后细胞混合液融合后细胞混合液融合后细胞混合液融合后细胞混合液HATHATHATHAT培养基培养基培养基培养基2 weeks later2 weeks laterHTHTHTHT培养基培养基培养基培养基正常培养基正常培养基正常培养基正常培养基1 week later1 week later第三十一张，PPT共五十六页，创作于2022年6月杂交瘤细胞的筛选杂交瘤细胞的筛选杂交瘤细胞的筛选杂交瘤细胞的筛选 ：脾细胞脾细胞脾细胞脾细胞(B(B淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞)骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞脾细胞脾细胞脾细胞脾细胞/脾细胞脾细胞脾细胞脾细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞/骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞脾细胞脾细胞脾细胞脾细胞筛选出筛选出筛选出筛选出不能长期存活不能长期存活不能长期存活不能长期存活不能长期存活不能长期存活不能长期存活不能长期存活不能长期存活不能长期存活不能长期存活不能长期存活第三十二张，PPT共五十六页，创作于2022年6月5.5.5.5.阳性杂交瘤细胞的筛选（抗体的检测）阳性杂交瘤细胞的筛选（抗体的检测）阳性杂交瘤细胞的筛选（抗体的检测）阳性杂交瘤细胞的筛选（抗体的检测）常用方法：常用方法：常用方法：常用方法：要求：要求：要求：要求：简便、快速、敏感简便、快速、敏感简便、快速、敏感简便、快速、敏感;在短时间内能检测大量样品在短时间内能检测大量样品在短时间内能检测大量样品在短时间内能检测大量样品vv酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)vv间接免疫荧光法间接免疫荧光法(Indirect immunofluorescence,IFA)vv放射免疫法放射免疫法(radioimmunoassay,RIA)vv双相扩散法双相扩散法第三十三张，PPT共五十六页，创作于2022年6月酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法(ELISA)(ELISA)(ELISA)(ELISA)抗原抗原抗原抗原第第第第1 1抗体抗体抗体抗体酶酶酶酶第第第第2 2抗体抗体抗体抗体待检杂交瘤培养上清液待检杂交瘤培养上清液待检杂交瘤培养上清液待检杂交瘤培养上清液底物底物底物底物有色产物有色产物有色产物有色产物酶标仪检测酶标仪检测酶标仪检测酶标仪检测技术原理：技术原理：技术原理：技术原理：第三十四张，PPT共五十六页，创作于2022年6月6.6.6.6.杂交瘤细胞的克隆培养杂交瘤细胞的克隆培养杂交瘤细胞的克隆培养杂交瘤细胞的克隆培养常用克隆化方法：常用克隆化方法：常用克隆化方法：常用克隆化方法：有限稀释法有限稀释法有限稀释法有限稀释法软琼脂平板法软琼脂平板法软琼脂平板法软琼脂平板法显微操作法显微操作法显微操作法显微操作法uu1 1个细胞个细胞个细胞个细胞/96/96孔孔孔孔uu饲养细胞饲养细胞饲养细胞饲养细胞(feeder cells)(feeder cells)ELISAELISAELISAELISA法法法法检检检检测测测测单单单单克克克克隆隆隆隆杂杂杂杂交交交交瘤瘤瘤瘤细细细细胞胞胞胞的的的的培培培培养养养养上上上上清清清清，选选选选出出出出分分分分泌泌泌泌特特特特异异异异性性性性抗抗抗抗体体体体的的的的阳阳阳阳性性性性孔孔孔孔，所所所所分分分分泌泌泌泌抗抗抗抗体体体体即即即即为为为为单单单单克克克克隆抗体。隆抗体。隆抗体。隆抗体。第三十五张，PPT共五十六页，创作于2022年6月7.7.杂交瘤细胞的冻存与复苏杂交瘤细胞的冻存与复苏v目的：目的：保种保种v方法：方法：离心收集杂交瘤细胞悬液，用含离心收集杂交瘤细胞悬液，用含10DMSO和和10FBS的培养基调整细胞密度，若短期保存，可置的培养基调整细胞密度，若短期保存，可置-80度冰盒中；若长期保存，则从冰盒转入液氮中。度冰盒中；若长期保存，则从冰盒转入液氮中。v复苏：复苏：如果冻存的细胞是来自如果冻存的细胞是来自96孔板的一孔，复苏孔板的一孔，复苏后也应接种到后也应接种到96孔板的一个孔中孔板的一个孔中第三十六张，PPT共五十六页，创作于2022年6月8.8.单克隆抗体的规模化生产单克隆抗体的规模化生产 主要有两种方法主要有两种方法（1 1）体外法：用人工反应器大量培养杂交瘤细胞）体外法：用人工反应器大量培养杂交瘤细胞（2 2）体内法：用生物体作为细胞反应器大规模培养杂交）体内法：用生物体作为细胞反应器大规模培养杂交瘤细胞瘤细胞第三十七张，PPT共五十六页，创作于2022年6月转瓶培养转瓶培养第三十八张，PPT共五十六页，创作于2022年6月微载体培养微载体培养第三十九张，PPT共五十六页，创作于2022年6月9.9.融合后杂交瘤不生长的原因分析：融合后杂交瘤不生长的原因分析：v聚乙二醇有毒聚乙二醇有毒v小牛血清的质量有问题；小牛血清的质量有问题；v支原体污染支原体污染vHATHAT有问题有问题第四十张，PPT共五十六页，创作于2022年6月10.10.杂交瘤细胞不分泌抗体或停止分泌抗体原因分析杂交瘤细胞不分泌抗体或停止分泌抗体原因分析 融合后经融合后经HATHAT选择有细胞克隆出现，但不能筛选选择有细胞克隆出现，但不能筛选出产生特异抗体的杂交瘤，常见原因是：出产生特异抗体的杂交瘤，常见原因是：v抗体检测法不够敏感抗体检测法不够敏感vHATHAT选择失败选择失败v动物免疫不成功动物免疫不成功v染色体丢失和克隆竞争染色体丢失和克隆竞争第四十一张，PPT共五十六页，创作于2022年6月三、三、T淋巴细胞杂交瘤淋巴细胞杂交瘤v概念：概念：T淋巴细胞亚群经有丝分裂原刺激后能淋巴细胞亚群经有丝分裂原刺激后能分泌多种淋巴因子。将之与胸腺瘤或淋巴瘤分泌多种淋巴因子。将之与胸腺瘤或淋巴瘤BW5147株融合而建立的株融合而建立的T淋巴细胞杂交瘤株。淋巴细胞杂交瘤株。v淋巴因子：淋巴因子：干扰素、白细胞介素干扰素、白细胞介素2、巨噬细胞、巨噬细胞激活因子等激活因子等第四十二张，PPT共五十六页，创作于2022年6月四、抗体的发展现状四、抗体的发展现状v人鼠型杂交瘤：人鼠型杂交瘤：人淋巴细胞人淋巴细胞+鼠骨髓瘤细胞鼠骨髓瘤细胞 问题：易丢失人染色体问题：易丢失人染色体v人型杂交瘤：人型杂交瘤：人淋巴细胞人淋巴细胞+人骨髓瘤细胞人骨髓瘤细胞 问题：问题：尚未获得理想的瘤系，尚未获得理想的瘤系，建株困难，抗体产量太低等建株困难，抗体产量太低等1.人源单克隆抗体人源单克隆抗体第四十三张，PPT共五十六页，创作于2022年6月2.鼠源单克隆抗体鼠源单克隆抗体v鼠衍生杂交瘤：鼠衍生杂交瘤：问题：问题：出现人抗鼠抗体反应出现人抗鼠抗体反应 鼠抗体不能有效激活人免疫系统鼠抗体不能有效激活人免疫系统第四十四张，PPT共五十六页，创作于2022年6月(1)(1)抗体抗体DNADNA重组重组 通过基因工程技术用人蛋白取代鼠抗体的恒通过基因工程技术用人蛋白取代鼠抗体的恒定区，仍保留鼠蛋白在抗体中的可变区，形成约定区，仍保留鼠蛋白在抗体中的可变区，形成约含有含有65%65%人蛋白的嵌合抗体。人蛋白的嵌合抗体。问题：问题：含有一定量的鼠蛋白，亲和力差，产量低，含有一定量的鼠蛋白，亲和力差，产量低，纯化费用高，临床效果差纯化费用高，临床效果差3.基因工程抗体基因工程抗体第四十五张，PPT共五十六页，创作于2022年6月人鼠嵌合抗体人鼠嵌合抗体第四十六张，PPT共五十六页，创作于2022年6月第四十七张，PPT共五十六页，创作于2022年6月(2)(2)噬菌体表达技术噬菌体表达技术 用体外基因克隆技术将用体外基因克隆技术将B B细胞全套可变区基因克隆出来，插细胞全套可变区基因克隆出来，插入噬菌体表达载体，转化工程细菌进行表达。入噬菌体表达载体，转化工程细菌进行表达。问题：问题：没有经过天然抗体成熟，亲和力低没有经过天然抗体成熟，亲和力低需要相当复杂的抗体基因技术和多轮筛选才能获得。需要相当复杂的抗体基因技术和多轮筛选才能获得。3.基因工程抗体基因工程抗体第四十八张，PPT共五十六页，创作于2022年6月(3)(3)外因鼠技术外因鼠技术 将小鼠体内产生抗体的基因灭活，然后将人的抗体基因将小鼠体内产生抗体的基因灭活，然后将人的抗体基因转入小鼠早期胚胎，获得含有人抗体的小鼠转入小鼠早期胚胎，获得含有人抗体的小鼠外因鼠。外因鼠。前景：前景：100%100%全人源化单克隆抗体全人源化单克隆抗体 20112011年全球有年全球有7 7种治疗性全人单克隆抗体获得美种治疗性全人单克隆抗体获得美国国FDAFDA和欧盟的批准，这些全人抗体几乎完全由转基因小和欧盟的批准，这些全人抗体几乎完全由转基因小鼠产生。鼠产生。3.基因工程抗体基因工程抗体第四十九张，PPT共五十六页，创作于2022年6月五、单克隆抗体的应用五、单克隆抗体的应用v疾病的诊断或特异性抗原（蛋白）的检测疾病的诊断或特异性抗原（蛋白）的检测免疫胶体金快速检测试纸免疫胶体金快速检测试纸第五十张，PPT共五十六页，创作于2022年6月v疾病的诊断或特异性抗原（蛋白）的检测疾病的诊断或特异性抗原（蛋白）的检测v被动免疫治疗被动免疫治疗v大分子蛋白的提纯大分子蛋白的提纯v生物导向药物生物导向药物五、单克隆抗体的应用五、单克隆抗体的应用第五十一张，PPT共五十六页，创作于2022年6月生物导向药物生物导向药物第五十二张，PPT共五十六页，创作于2022年6月H7N9新型流感病毒新型流感病毒鸡鸡 鸭鸭 野鸟野鸟思考：思考：面对高突变的病毒，面对高突变的病毒，McAb在诊断与治疗的过程在诊断与治疗的过程中是否显得力不从心，抗体的未来发展又该朝向何方？中是否显得力不从心，抗体的未来发展又该朝向何方？第五十三张，PPT共五十六页，创作于2022年6月谢谢各位！谢谢各位！第五十四张，PPT共五十六页，创作于2022年6月小结：小结：v了解细胞融合的方法和原理，以及各自的优缺点。了解细胞融合的方法和原理，以及各自的优缺点。v掌握融合子检出的选择系统，如掌握融合子检出的选择系统，如HAT选择系统的原理选择系统的原理v掌握单克隆抗体的生产技术流程掌握单克隆抗体的生产技术流程v理解人源化单克隆技术理解人源化单克隆技术第五十五张，PPT共五十六页，创作于2022年6月感感谢谢大大家家观观看看16.10.2022第五十六张，PPT共五十六页，创作于2022年6月