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实验检测生物组织第1页,本讲稿共11页 斐林试剂斐林试剂苏丹苏丹橘黄色橘黄色红色红色砖红色沉淀砖红色沉淀紫色紫色苏丹苏丹 双缩脲试剂双缩脲试剂鉴定物质鉴定物质试剂试剂实验现象实验现象还原性糖还原性糖脂肪脂肪蛋白质蛋白质某些化学试剂能够使生物组织中的有关有某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的机化合物产生特定的颜色反应颜色反应。l实验原理实验原理第2页,本讲稿共11页选材:含糖量较高的选材:含糖量较高的白色或近于白色的植物组织白色或近于白色的植物组织(排除色素对排除色素对显色的干扰显色的干扰),苹果、梨最好,苹果、梨最好。l实验流程实验流程(步骤步骤)1.可溶性还原糖可溶性还原糖 制备组织样液:制备组织样液:制浆:去皮、切块、研磨,制浆:去皮、切块、研磨,过滤:(用单层纱布)过滤:(用单层纱布)取液:取液:(mL)显色反应显色反应 现象:现象:(用前混匀用前混匀)5065.C水浴水浴加热加热2min第3页,本讲稿共11页还原糖的检测和观察:还原糖的检测和观察:第4页,本讲稿共11页还原糖的检测结果还原糖的检测结果还原糖的检测结果还原糖的检测结果第5页,本讲稿共11页2.脂肪的鉴定脂肪的鉴定 取材:花生种子(浸泡取材:花生种子(浸泡h),去皮,将子叶削成薄片),去皮,将子叶削成薄片 制片:制片:选取最薄的薄片移至载玻片中央选取最薄的薄片移至载玻片中央在薄片上滴加在薄片上滴加苏丹苏丹(或苏丹或苏丹)染液染液2 3滴,滴,染色染色min滴加体积分数为滴加体积分数为50%的酒精的酒精溶液溶液12滴,洗滴,洗去浮色去浮色(多余的苏丹多余的苏丹)吸去余液,滴吸去余液,滴1-2滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片临时装片显微观察:显微观察:先在低倍镜下找到已着色的薄片,后用高倍镜观察先在低倍镜下找到已着色的薄片,后用高倍镜观察现象:现象:有被染成有被染成橘黄色橘黄色(或红色或红色)的脂肪微粒的脂肪微粒脂肪微粒脂肪微粒第6页,本讲稿共11页脂肪的检测结果脂肪的检测结果第7页,本讲稿共11页3.3.蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定 选材与制备选材与制备组织样液:组织样液:豆浆溶液豆浆溶液豆浆豆浆显显色色反反应应现象:现象:无色无色紫色或紫红色紫色或紫红色(创设碱性条件创设碱性条件)(提供提供Cu2+)第8页,本讲稿共11页蛋白质的检测结果蛋白质的检测结果第9页,本讲稿共11页还原性糖的鉴定还原性糖的鉴定关键步骤:斐林试剂甲(关键步骤:斐林试剂甲(0.1g/ml的的NaOH溶液溶液2ml)和乙液()和乙液(0.05g/ml的的CuSO4溶液溶液2ml)先混合,再使用。现配现用先混合,再使用。现配现用。脂肪的鉴定脂肪的鉴定关键步骤:子叶削成理想薄片。关键步骤:子叶削成理想薄片。蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定关键步骤:先加试剂关键步骤:先加试剂A(0.1g/ml的的NaOH溶液溶液2ml),再加试剂,再加试剂B(0.05g/ml的的CuSO4溶液溶液34滴)。滴)。第10页,本讲稿共11页鉴鉴鉴鉴定物定物定物定物质质质质实验试实验试实验试实验试剂剂剂剂实验现实验现实验现实验现象象象象注意事注意事注意事注意事项项项项还还还还原性原性原性原性糖糖糖糖斐林试斐林试斐林试斐林试剂剂剂剂砖红色沉淀砖红色沉淀砖红色沉淀砖红色沉淀试剂现用现配、沸试剂现用现配、沸试剂现用现配、沸试剂现用现配、沸水浴加热水浴加热水浴加热水浴加热脂肪脂肪脂肪脂肪苏丹苏丹苏丹苏丹、橘黄色、橘黄色、橘黄色、橘黄色、红色红色红色红色必须用显微镜观察必须用显微镜观察必须用显微镜观察必须用显微镜观察蛋蛋蛋蛋 白白白白 质质质质双缩脲双缩脲双缩脲双缩脲试剂试剂试剂试剂紫色紫色紫色紫色先加先加先加先加NaOH,NaOH,NaOH,NaOH,后加后加后加后加CuSOCuSOCuSOCuSO4 4 4 4总结第11页,本讲稿共11页