食品分析实验 酱油中氨基酸态氮含量的测定.pdf

实验九实验九酱油中氨基酸态氮含量的测定酱油中氨基酸态氮含量的测定一、实验内容一、实验内容用电位滴定法测定酱油中氨基酸的总量。二、实验目的与要求二、实验目的与要求1、了解电位滴定法测定氨基酸总量的原理与操作要点。2、熟练使用酸度计。三、实验原理三、实验原理氨基酸含有酸性的COOH，也含有碱性的NH2。它们互相作用使氨基酸成为中性的内盐。加入甲醛溶液时，-NH2与甲醛结合，其碱性消失。这样就可以用碱来滴定COOH，并用间接的方法测定氨基酸的含量。用碱完全中和COOH 时的 pH 值约为 8.59.5,可以利用酸度计来指示终点。四、试剂四、试剂（1）36%中性甲醛（2）0.050 mol/L 氢氧化钠标准溶液五、仪器五、仪器酸度计、复合玻璃电极、磁力搅拌器、10 mL 微量滴定管六、实验步骤六、实验步骤准确吸取酱油 5.0mL，置于 100mL 容量瓶中，加水至标线，混匀后吸取 20.0mL 置于 200mL 烧杯中，加水 60 mL，插入 酸度计的复合玻璃电极，开动磁力搅拌器，用0.05mo1/L 氢氧化钠标准溶液滴定至酸度计指示 pH8.2，记录消耗的氢氧化钠标准溶液的体积。向上述溶液加入 10.0mL 甲醛溶液，混匀。再用 0.05mol/L 的氢氧化钠标准溶液继续滴定至 pH9.2，记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积(V1）。同时取 80mL 蒸馏水置于另一 200mL 烧杯中，先用 0.05mo1/L 氢氧化钠标准溶液滴至 pH8.2(此时不记碱耗量），再加入 10.0mL 甲醛溶液，混匀。用 0.05mo1/L的氢氧化钠标准溶液继续滴定至 pH9.2，作为空白实验。记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积(V2）。七、结果处理七、结果处理（V V2）c0.014氨基酸态氮（%）1100m20/100式中：Vl 样品稀释液在加 入甲醛后滴定至终点(pH9.2)所消耗的氢 氧化钠标准溶液的体积，mL；V2 空白实验在加入甲醛后滴定至终点(pH9.2)所消耗的氢氧化钠标准溶液的体积，mL；C 氢氧化钠标准溶液的浓度，mol/L；m 测定用样品溶液相当于样品的质量，g；0.014 氮的毫摩尔质量，mg/mol。