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第一章第一章 蛋白质化学复习题蛋白质化学复习题一、填充一、填充1 1在生理条件下在生理条件下(pH(pH 7.07.0 左右左右)，蛋白质分子中的，蛋白质分子中的赖氨酸赖氨酸侧链和侧链和精氨酸精氨酸侧链几乎完全带正电荷，侧链几乎完全带正电荷，但是但是组氨酸组氨酸侧链则带部分正电荷。侧链则带部分正电荷。2.2.脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生黄黄色的物质，色的物质，而其而其他氨基酸与茚三酮反应产生他氨基酸与茚三酮反应产生蓝紫蓝紫色的物质。色的物质。3 3范斯莱克范斯莱克(van(van Slyke)Slyke)法测定氨基氮主要利用法测定氨基氮主要利用-氨基氨基与与亚硝酸亚硝酸作用生成作用生成羟酸和羟酸和 N2N2。4 4 实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反应，然后用碱应，然后用碱(NaOH)(NaOH)来滴定来滴定N+H3N+H3 基基上放出的上放出的H+H+。5 5常用的肽链常用的肽链 N N 端分析的方法有端分析的方法有2,4-2,4-二硝基氟苯二硝基氟苯法、法、丹磺酰氯丹磺酰氯法、法、本异硫氰酸法和本异硫氰酸法和氨肽酶氨肽酶法。法。C C 端分析的方法有端分析的方法有肼解肼解法和法和羧肽酶羧肽酶法等。法等。6 6蛋白质的超二级结构是指蛋白质的超二级结构是指二级结构的基本单位（螺旋、二级结构的基本单位（螺旋、折叠等）折叠等）相互聚集形成有规律的二级结构的聚合体相互聚集形成有规律的二级结构的聚合体，其基本组其基本组合形式为合形式为 结构结构、结构结构、RossmannRossmann 折叠（结构）折叠（结构）、发夹结构（发夹结构（结构结构）、曲折结构曲折结构和和希腊钥匙结构希腊钥匙结构等。等。7 7 蛋白质的二级结构有蛋白质的二级结构有酰胺平面酰胺平面、螺旋结构螺旋结构、折叠结构折叠结构、转角结构转角结构和和环环等几种等几种基本类型。基本类型。8 8确定蛋白质中二硫键的位置，一般先采用确定蛋白质中二硫键的位置，一般先采用酶水解原来的蛋酶水解原来的蛋白质白质，然后用然后用离子交换层析离子交换层析技术分离水解后的技术分离水解后的混合肽段。混合肽段。P107109P1071099 9通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量，这是因为蛋白通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量，这是因为蛋白质分子中的质分子中的苯丙氨酸苯丙氨酸、酪氨酸酪氨酸和和色氨酸色氨酸三种氨基酸的共轭双键有紫外吸收能力。三种氨基酸的共轭双键有紫外吸收能力。1010两条相当伸展的肽链两条相当伸展的肽链(或同一条肽链的两个伸展的片段或同一条肽链的两个伸展的片段)之间之间形成氢键的结构单元称为形成氢键的结构单元称为。1111 在蛋白质分子中相邻氨基酸残基的在蛋白质分子中相邻氨基酸残基的-碳原子如具有侧链会使碳原子如具有侧链会使螺旋不稳定。螺旋不稳定。因此当因此当脯氨酸脯氨酸、甘氨酸甘氨酸和和异异亮氨酸亮氨酸三种氨基酸相邻时，会破坏螺旋。三种氨基酸相邻时，会破坏螺旋。1212在螺旋中在螺旋中 C=OC=O 和和 N NH H 之间形成的氢键最稳定，因为这之间形成的氢键最稳定，因为这三个原子以三个原子以平行平行排列。排列。1313氨基酸的结构通式为氨基酸的结构通式为。1414 组成蛋白质分子的碱性氨基酸有组成蛋白质分子的碱性氨基酸有 精氨酸精氨酸、组组氨酸氨酸和和赖氨酸赖氨酸。酸性氨基酸有。酸性氨基酸有天冬氨酸天冬氨酸和和谷谷氨酸氨酸。1515在下列空格中填入合适的氨基酸名称。在下列空格中填入合适的氨基酸名称。(1)(1)酪氨酸酪氨酸是带芳香族侧链的极性氨基酸。是带芳香族侧链的极性氨基酸。(2)(2)苯丙氨酸苯丙氨酸和和色氨酸色氨酸是带芳香族侧链的是带芳香族侧链的非极性氨基酸。非极性氨基酸。(3(3半胱氨酸半胱氨酸是含硫的极性氨基酸。是含硫的极性氨基酸。(4)(4)甘氨酸甘氨酸或或脯氨酸脯氨酸是相对分子质量小且是相对分子质量小且不含硫的氨基酸，不含硫的氨基酸，在一个肽链折叠的蛋白质中它能形成内部氢在一个肽链折叠的蛋白质中它能形成内部氢键。键。(5)(5)在一些酶的活性中心中起重要作用并含羟基的极性较小的在一些酶的活性中心中起重要作用并含羟基的极性较小的氨基酸是氨基酸是。1616氨基酸的等电点氨基酸的等电点(pI)(pI)是指是指氨基酸的氨基和羧基的解离度完氨基酸的氨基和羧基的解离度完全相等时其所处的溶液全相等时其所处的溶液 PHPH。1717氨基酸在等电点时，氨基酸在等电点时，主要以主要以两性两性离子形式存在，离子形式存在，在在pHpIpHpI 的溶液中，大部分以的溶液中，大部分以负负离子形式存在，在离子形式存在，在pHpJpHpJ 的溶液中，大部分以的溶液中，大部分以正正离子形式存在。离子形式存在。1818PaulingPauling 等人提出的蛋白质螺旋模型，每圈螺旋包含等人提出的蛋白质螺旋模型，每圈螺旋包含 3.63.6个氨基酸残基，高度为个氨基酸残基，高度为0.54nm0.54nm。每个氨基酸残基沿。每个氨基酸残基沿轴上升轴上升0.15nm0.15nm，并沿轴旋转，并沿轴旋转100100度。度。1919胶原蛋白是由胶原蛋白是由3 3股肽链组成的超螺旋结构。股肽链组成的超螺旋结构。2020 一般来说，一般来说，球状蛋白质的球状蛋白质的疏水疏水性氨基酸侧链位于分性氨基酸侧链位于分子内部，子内部，亲水亲水性氨基酸侧链位于分子表面。性氨基酸侧链位于分子表面。2121 维持蛋白质构象的化学键有维持蛋白质构象的化学键有肽键肽键、二硫键二硫键、酯键酯键、配位键配位键、氢键氢键和和离子离子键键。2222当溶液中盐离子强度低时，当溶液中盐离子强度低时，可增加蛋白质的溶解度，可增加蛋白质的溶解度，这种现这种现象称象称盐溶盐溶。当溶液中盐离子强度高时，当溶液中盐离子强度高时，可使蛋白质沉可使蛋白质沉淀，这种现象称淀，这种现象称盐析盐析。2323脯氨酸脯氨酸不是氨基酸，它经常改变肽链折叠的方不是氨基酸，它经常改变肽链折叠的方式。式。2424维持蛋白质构象的次级键主要有维持蛋白质构象的次级键主要有氢键氢键、离子离子键键、范德华力范德华力和和疏水作用疏水作用。二、是非题二、是非题1 1一个化合物如能和茚三酮反应生成紫色，说明这化合物是氨一个化合物如能和茚三酮反应生成紫色，说明这化合物是氨基酸、肽或蛋白质。基酸、肽或蛋白质。错错2 2一个蛋白质样品经酸水解后，能用氨基酸自动分析仪准确测一个蛋白质样品经酸水解后，能用氨基酸自动分析仪准确测定它的所有氨基酸。定它的所有氨基酸。错错只有只有 1616 种种3 3用纸电泳法分离氨基酸主要是根据氨基酸的极性不同。用纸电泳法分离氨基酸主要是根据氨基酸的极性不同。对对4 4蛋白质分子中所有的氨基酸蛋白质分子中所有的氨基酸(除甘氨酸外除甘氨酸外)都是左旋的。都是左旋的。对对5 5自然界的蛋白质和多肽类物质均由自然界的蛋白质和多肽类物质均由 L-L-型氨基酸组成。型氨基酸组成。错错 甘甘氨酸氨酸6 6只有在很高或很低只有在很高或很低 pHpH 值时，氨基酸才主要以非离子化形式值时，氨基酸才主要以非离子化形式存在。存在。错错7 7CNBrCNBr 能裂解能裂解 Gly-Met-ProGly-Met-Pro 三肽。三肽。8 8双缩脲反应是肽和蛋白质特有的反应，所以二肽也有双缩脲双缩脲反应是肽和蛋白质特有的反应，所以二肽也有双缩脲反应。反应。对对9 9可用可用 8mol8molL L 尿素拆开蛋白质分子中的二硫键。尿素拆开蛋白质分子中的二硫键。1010维持蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键维持蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键。错。错1111到目前为止，自然界发现的氨基酸为到目前为止，自然界发现的氨基酸为 2020 种左右。种左右。错错1212蛋白质分子的亚基与结构域是同义词。蛋白质分子的亚基与结构域是同义词。错错1313天然氨基酸都具有一个不对称天然氨基酸都具有一个不对称-碳原子。碳原子。错错1414亮氨酸的疏水性比丙氨酸强。对亮氨酸的疏水性比丙氨酸强。对1515 当溶液的当溶液的 pHpH 值大于某一可解离基团的值大于某一可解离基团的 pKapKa 值时，值时，该基团有该基团有一半以上被解离。一半以上被解离。1616某蛋白质在某蛋白质在 pH 6pH 6 时向阳极移动，则其等电点小于时向阳极移动，则其等电点小于 6 6。1717大多数蛋白质的主要带电基团是由它大多数蛋白质的主要带电基团是由它 N N 端的氨基和端的氨基和 C C 端的端的羧基组成。羧基组成。1818蛋白质的亚基蛋白质的亚基(或称亚单位或称亚单位)和肽链是同义的。和肽链是同义的。错错1919 变性蛋白质溶解度降低是因为蛋白质分子的电荷被中和以及变性蛋白质溶解度降低是因为蛋白质分子的电荷被中和以及除去了蛋白质外面的水化层所引起的。除去了蛋白质外面的水化层所引起的。2020在多肽分子中只存在一种共价键即肽键。在多肽分子中只存在一种共价键即肽键。错错2121溶液的溶液的 pHpH 值可以影响氨基酸的等电点。值可以影响氨基酸的等电点。错错2222 如用阳离子交换树脂分离如用阳离子交换树脂分离 D D、K K 和和 MM 三种氨基酸，三种氨基酸，用用 pH 7.0pH 7.0的缓冲溶液洗脱时，先下来的氨基酸为的缓冲溶液洗脱时，先下来的氨基酸为 D D。对对三、单选题三、单选题1 1下列氨基酸溶液除哪个外都能使偏振光发生旋转下列氨基酸溶液除哪个外都能使偏振光发生旋转?(?(B B)(A)(A)丙氨酸丙氨酸(B)(B)甘氨酸甘氨酸(C)(C)亮氨酸亮氨酸(D)(D)丝氨酸丝氨酸(E)(E)缬氨酸缬氨酸2 2下列蛋白质组分中，哪一种在下列蛋白质组分中，哪一种在280nm280nm 具有最大的光吸具有最大的光吸收收?(?()(A)(A)色氨酸的吲哚环色氨酸的吲哚环(B)(B)酪氨酸的酚环酪氨酸的酚环(C)(C)苯丙苯丙氨酸的苯环氨酸的苯环(D)(D)半胱氨酸的硫原子半胱氨酸的硫原子(E)(E)肽键肽键3 3下列氨基酸中，哪个含有吲哚环下列氨基酸中，哪个含有吲哚环?(?(C C)(A)(A)甲硫氨酸甲硫氨酸(B)(B)苏氨酸苏氨酸(C)(C)色氨酸色氨酸(D)(D)缬氨酸缬氨酸(E)(E)组氨酸组氨酸4 4下列哪种氨基酸有米伦下列哪种氨基酸有米伦(Millol)(Millol)反应反应?(?(B B)(A)(A)色氨酸色氨酸(B)(B)酪氨酸酪氨酸(c)(c)苯丙氨酸苯丙氨酸(D)(D)组氨酸组氨酸(E)(E)精氨酸精氨酸5 5有一多肽经酸水解后产生等摩尔的有一多肽经酸水解后产生等摩尔的 LysLys，GlyGly 和和 AlaAla。如用胰。如用胰蛋白酶水解该肽，蛋白酶水解该肽，仅发现有游离的仅发现有游离的 GlyGly 和一种二肽。和一种二肽。下列多肽下列多肽的一级结构中，哪一个符合该肽的结构的一级结构中，哪一个符合该肽的结构?(?(BDBD)(A)Gly-Lys-Ala-Lys-Gly-Ala(A)Gly-Lys-Ala-Lys-Gly-Ala(B)Ala-Lys-Gly(B)Ala-Lys-Gly(C)Lys-Gly-Ala(C)Lys-Gly-Ala(D)Gly-Lys-Ala(D)Gly-Lys-Ala(E)Ala-Gly-Lys(E)Ala-Gly-Lys6 6下列有关氨基酸的叙述，哪个是错误的下列有关氨基酸的叙述，哪个是错误的?(?(D D)(A)(A)酪氨酸和苯丙氨酸都含有苯环酪氨酸和苯丙氨酸都含有苯环(B)(B)酪氨酸和丝氨酸都含羟基酪氨酸和丝氨酸都含羟基(C)(C)亮氨酸和缬氨酸都是分支氨基酸亮氨酸和缬氨酸都是分支氨基酸(D)(D)脯氨酸和酪氨酸都是非极性氨基酸脯氨酸和酪氨酸都是非极性氨基酸(E)(E)组氨酸、色氨酸和脯氨酸都是杂环氨基酸组氨酸、色氨酸和脯氨酸都是杂环氨基酸7 7下列关于多肽下列关于多肽 Glu-His-Arg-Val-Lys-AspGlu-His-Arg-Val-Lys-Asp 的叙述，哪个是错的叙述，哪个是错的的?(?()(A)(A)在在 pH 12pH 12 时，在电场中向阳极移动时，在电场中向阳极移动(B)(B)在在 pH 3pH 3 时，在电场中向阴极移动时，在电场中向阴极移动(C)(C)在在 pH 5pH 5 时，在电场中向阴极移动时，在电场中向阴极移动(D)(D)在在 pH 11pH 11 时，在电场中向阴极移动时，在电场中向阴极移动(E)(E)该多肽的等电点大约在该多肽的等电点大约在 pH 8pH 88 8测定小肽氨基酸序列的最好方法是测定小肽氨基酸序列的最好方法是(B B)(A)2(A)2，4-4-二硝基氟苯法二硝基氟苯法(FDNB(FDNB 法法)(B)(B)二甲氨基萘磺酰氯二甲氨基萘磺酰氯法法(DNS-Cl(DNS-Cl 法法)(C)(C)氨肽酶法氨肽酶法(D)(D)苯异硫氰酸法苯异硫氰酸法(PITC(PITC 法法)(E)(E)羧肽酶羧肽酶法法9 9典型的螺旋是典型的螺旋是(C C)(A)2.6(A)2.61010(B)3(B)31010(C)3.6(C)3.61313(D)4.0(D)4.01515(E)4.4(E)4.416161010用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键键?(?()(A)(A)双缩脲反应双缩脲反应(B)(B)凯氏定氮凯氏定氮(C)(C)紫外吸收紫外吸收(D)(D)茚三酮反应茚三酮反应(E)(E)奈氏试剂奈氏试剂1111SangerSanger 试剂是试剂是(B B)(A)(A)苯异硫氰酸苯异硫氰酸(异硫氰酸苯酯异硫氰酸苯酯)(B)2(B)2，4-4-二硝基氟苯二硝基氟苯(c)(c)丹磺酰氯丹磺酰氯(D)(D)对氯汞苯甲酸对氯汞苯甲酸(E)(E)-巯基乙醇巯基乙醇1212下列有关螺旋的叙述哪个是错误的下列有关螺旋的叙述哪个是错误的?(?(C C)(A)(A)分子内的氢键使螺旋稳定分子内的氢键使螺旋稳定(B)(B)减弱减弱 R R 基团间不利的相互作用使螺旋稳定基团间不利的相互作用使螺旋稳定(C)(C)疏水作用使螺旋稳定疏水作用使螺旋稳定(D)(D)在某些蛋白质中，螺旋是二级结构中的一种类型在某些蛋白质中，螺旋是二级结构中的一种类型(E)(E)脯氨酸和甘氨酸残基使螺旋中断脯氨酸和甘氨酸残基使螺旋中断1313血红蛋白的氧合曲线呈血红蛋白的氧合曲线呈(C C)(A)(A)双曲线双曲线(B)(B)抛物线抛物线(C)S(C)S 形曲线形曲线(D)(D)直线直线(E)(E)钟罩形钟罩形1414为了充分还原核糖核酸酶，除了应用为了充分还原核糖核酸酶，除了应用-巯基乙醇外，还需巯基乙醇外，还需()(A)(A)过甲酸过甲酸(B)(B)尿素尿素(C)(C)调调 pHpH 值值到碱性到碱性(D)(D)调调 pHpH 值到酸性值到酸性(E)(E)加热到加热到 50501515一个蛋白质的相对分子质量为一个蛋白质的相对分子质量为 70 00070 000，由两条螺旋肽链构由两条螺旋肽链构成，其分子长度为成，其分子长度为(C C)(A)50nm(A)50nm(B)100nm(B)100nm(C)47.7nm(C)47.7nm(D)95.4nm(D)95.4nm(E)36.5nm(E)36.5nm1616若用电泳分离若用电泳分离 Gly-LysGly-Lys、Asp-ValAsp-Val 和和 Ala-HisAla-His 三种二肽，在三种二肽，在下列哪个下列哪个 pHpH 值条件下电泳最为合适值条件下电泳最为合适?(?()(A)pH 2(A)pH 2 以下以下(B)pH 2(B)pH 24 4(C)pH 7(C)pH 79 9(D)pH 10(D)pH 101212(E)pH 12(E)pH 12 以上以上1717下列有关折叠的叙述哪个是错误的下列有关折叠的叙述哪个是错误的?(?(A A)(A)(A)球状蛋白质中无折叠的结构球状蛋白质中无折叠的结构(B)(B)折叠靠链间氢键而稳定折叠靠链间氢键而稳定(C)(C)它的氢键是肽链的它的氢键是肽链的 C CO O 与与 N NH H 间形成的间形成的(D)(D)-角蛋白可以通过加热处理而转变成折叠的结构角蛋白可以通过加热处理而转变成折叠的结构(E)(E)折叠有平行的折叠和反平行的折叠折叠有平行的折叠和反平行的折叠