(2.1.1)--2.1.植物组织培养实验室布局.pdf

植物组织培养实验室设计 1.1.植物组织培养实验室的设计原则植物组织培养实验室的设计原则 植物组织培养实验室的设计，通常需要考虑两个方面的因素，即所从事实验的性质和规模。所从事的实验是生产性的还是研究性的，是基本层次的还是较高层次的，这些实验性质一定程度上决定了实验室规模的大小，一般而言，用于生产的实验室规模较研究型的大。实验室规模的大小除了要考虑所从事实验的性质以外，也受到经费等其他因素的影响。但无论如何，实验室总体设置应遵循科学、高效、经济和实用的原则。植物组织培养是在严格无菌条件下培养植物材料，因此其实验室的设计除了考虑以上因素，遵循基本原则以外，还应满足以下几点要求：第一点 尽可能远离污染源 保持实验室周边环境清洁，是最基本的要求，也是从根本上有效控制污染的关键。因此组织培养实验室应建立在清洁、远离垃圾场等污染源和繁忙市区。第二点 分区和布局应合理 根据组织培养技术体系，以及对无菌环境的要求，植物组织培养实验室应按功能和培养程序划分为若干个分室。各分室由于功能和实验要求上的差异，应合理安排其大小；布局应充分考虑操作的连续性，避免某些环节倒排，引起日后工作不便甚至混乱。第三点 环境条件易于控制 理想的实验室应充分考虑如何控制其内部环境条件。在实验室设计和建造时，因尽量采用不易产生灰尘的建材，并有相应的过道、防尘等设计；各区域要相对独立，密封隔离；装修应尽量做到室内管道暗装，天花板、地面不留缝隙，以便于日常清理，同时减少微生物滋生；门窗等宜采用滑动门，尽量减少与外界空气的对流；无菌操作室、培养室应便于熏蒸灭菌。规模化生产的组织培养实验室最好建在交通便利的地方，便于培养材料的运输。2.2.植物组织培养实验室的组成及其功能植物组织培养实验室的组成及其功能 根据植物组织培养程序，按照功能的不同，植物组织培养实验室一般划分为洗涤室、培养基配制室、缓冲间、无菌操作室、培养室、观察室、驯化室等，也可根据实际需要加以调整，如将洗涤室和培养基配制室合并为准备室；或增设称量室、物品贮存室等。第一个区域 洗涤室 洗涤室是植物组织培养实验室的基本组成区域，用于各种实验用具的洗涤、干燥、保存等工作，也可进行培养材料的清洗和组培苗的出瓶和处理。洗涤室的大小可根据工作量的大小而定，一般控制在 20 m2左右。第二个区域 培养基配制室 培养基配制室主要用于培养基配制，包括母液等溶液的配制和保存、培养基的配制，以及所用药品的贮备、称量和培养基的分装、灭菌等工作。该区域一般 20 m2左右。第三个区域 缓冲室 为了防止工作人员从外界将灰尘、杂菌等污染物带入无菌接种室，同时也为防止无菌接种室与外界直接的空气流通，组织培养实验室通常设置缓冲室，用于工作人员进入无菌接种室前洗手、更换工作服和拖鞋，戴口罩等。由于缓冲室只是提供缓冲场地的作用，因此其面积较小，一般 3 至 5 m2，多建在无菌操作室外，也可根据情况建在准备室外。第四个区域 无菌接种室 无菌接种室也简称接种室，是植物组织培养实验室对无菌条件要求最严格的区域，主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代等，需要在无菌条件下进行的操作。由于需要严格的无菌环境，因此无菌接种室面积原则上不宜于过大，小型的 5 至8 m2即可，大型的可达 20 至 30 m2。无菌室应定期用 75%酒精喷雾降尘和消毒，用 2%新洁尔灭或 75%酒精抹拭台面和用具，定期使用福尔马林加少量高锰酸钾进行熏蒸，配合紫外线灭菌灯等消毒灭菌手段，以使无菌室经常保持高度的无菌状态；并采用空调控制室温，可使门窗紧闭，减少与外界空气对流；操作中产生的废弃植物材料和培养基残渣应及时清理。新建实验室的无菌室在使用之前采用甲醛和高锰酸钾进行熏蒸灭菌处理。第五个区域 培养室 植物离体材料接种于培养器皿后，需要在一个严格控制温度、光照、湿度等条件的场所进行培养，这个场所即培养室。培养室的大小可根据培养量的需求以及培养设备而定。需要注意的是，面积越大，室内温湿条件控制难度越大，因此培养室原则上不宜过大。培养室最重要的要求是能够严格控制光照、温度、湿度等环境因子，并保持相对的无菌环境，因此，在培养室内除了用于放置培养架外，还有一整套用于环境因子控制的仪器设备，如安装空调、具有空气过滤装置的排风窗或换气扇、定时器、温湿度计、除湿机等设备。此外，还可以根据需要还应配备光照培养箱和人工气候箱等设备，用于植物离体材料的精细培养。培养室环境因子一般控制在室内温度 2027，室内湿度也宜恒定，相对湿度应保持在 70%80%，光照强度 10004000lx，每天光照 1016h，如果条件允许，培养室可建于房屋南面，并安装大窗户，以便采用自然光照，不仅节省能源，而且有利于植物组织材料生长和驯化成活。第六个区域 观察室 观察室主要用于观察并研究培养材料的生长分化情况及其形态发生规律、检查是否脱毒或发生变异、细胞计数、细胞学鉴定、植物材料摄影记录等，此外也可进行植物组织材料的解剖、原生质体游离、培养物成分检测等。用于种苗生产的实验室，此区域可以省掉。第七个区域 驯化室 驯化室通常用于试管苗炼苗移栽。作为植物材料转移至自然环境的一个缓冲过程，培养室培养和自然环境生长的一个中间环节，驯化室 提供组培苗炼苗的环境，通过适当控制温度、湿度、光照、通风，对组培苗进行炼苗，使其适应自然环境，避免剧烈的环境变化造成组培苗死亡。组培苗炼苗可在专用的驯化室进行，也可在温室或塑料大棚内进行，即室内驯化与设施下驯化均可。驯化室 面积根据规模来定。驯化室 内备有弥雾装置、遮荫网、苗床等设施和营养钵、移植穴盘等移植容器，以及草炭、蛭石、珍珠岩等移植基质。试管苗移植一般要求温室温度在 1535，相对湿度 70%以上。