细菌形态结构以及观察PPT课件.ppt
关于细菌的形态结构及观关于细菌的形态结构及观察察第一张,PPT共四十七页,创作于2022年6月 一、细菌的形态结构一、细菌的形态结构 二、细菌的观察方法二、细菌的观察方法 三、显微镜的使用方法三、显微镜的使用方法第二张,PPT共四十七页,创作于2022年6月第一节 细菌的大小与形态1.大小:个体微小,通常以微米 (m)为测量单位2.基本形态:有三种:球状、杆状、螺旋状,分别称为球菌、杆菌 和螺形菌第三张,PPT共四十七页,创作于2022年6月球菌球菌螺型菌螺型菌杆菌杆菌第四张,PPT共四十七页,创作于2022年6月第五张,PPT共四十七页,创作于2022年6月细胞壁细胞壁(cell wall):细胞壁是位于细菌细胞膜外的一层坚韧而有弹性的膜状结构。功能(1)维持细菌固有外形,保护细菌不受外界低渗环境的破坏;(2)与细胞膜共同完成胞内外的物质交换;(3)决定细菌的抗原性。(4)某些成分与致病性有关 第六张,PPT共四十七页,创作于2022年6月菌毛菌毛鞭毛鞭毛核质核质DNA荚膜荚膜细胞壁细胞壁细胞膜细胞膜核糖体核糖体胞质颗粒胞质颗粒细胞质细胞质中介体中介体细菌的结构第七张,PPT共四十七页,创作于2022年6月细菌细胞壁所特有成分由多糖骨架、四肽侧链和交联 桥3部分组成第八张,PPT共四十七页,创作于2022年6月磷壁酸(techoic acid)革兰阳性菌特有成分,是由核糖醇或甘油残基经磷酸二酯键相互连接而成的多聚物。作用:(1)调节离子通过粘肽层,有保存和 输送镁离子的作用;(2)为噬菌体的特异性受体;(3)与细菌的致病性有关;(4)具有抗原性可用于细菌的分型。第九张,PPT共四十七页,创作于2022年6月第十张,PPT共四十七页,创作于2022年6月外膜 G-G-细菌在肽聚糖层外面还有三层结构 脂蛋白:由脂质和蛋白质构成外膜 脂质双层 类脂A A 内毒素的毒性部分,无特异性 脂多糖 核心多糖 有属或组的特异性 寡糖重复单位 由3-53-5个单糖组成,有种或型的特异性 脂质双层 是G-菌细胞壁的主要结构,占细胞壁干重的80%80%,结构类似细胞膜,为液态的脂质双层,又称外膜 第十一张,PPT共四十七页,创作于2022年6月第十二张,PPT共四十七页,创作于2022年6月革兰阳性菌及革兰阴性菌细胞壁结构及意义的比较革兰阳性菌及革兰阴性菌细胞壁结构及意义的比较 细胞壁 结构 革兰阳性菌 革兰阴性菌细胞壁强度 较坚硬 较疏松肽聚糖层数 可达50层 12层肽聚糖含量 5080%520%磷壁酸 有 无外膜 无 有五肽交联桥 有(三维结构)无(二维结构)革兰染色 阳性(紫色)阴性(红色)青霉素和溶菌酶 敏感 不敏感 第十三张,PPT共四十七页,创作于2022年6月 2 细胞膜(cell membrane)细胞壁与细胞质之间 半渗透性的生物膜 脂类双层,镶有蛋白质 功能:渗透和运输、生物合成(肽聚糖、磷壁酸、脂多糖等)、呼吸作用、参与细菌分裂。另外,细胞膜是鞭毛基体的着生部位和鞭毛旋转的供能部位。第十四张,PPT共四十七页,创作于2022年6月3 细胞质 是细菌进行新陈代谢的主要场所。含有以下颗粒:核糖体(ribosome):合成蛋白质的 场所 胞浆颗粒(cytoplasmic granules):储藏营养。异染颗粒:染成与细菌其他部分不同的颜色,如:白喉杆菌-鉴别 质粒(plasmid):第十五张,PPT共四十七页,创作于2022年6月质粒:染色体外的遗传物质 双股环状DNADNA 携带某些遗传信息,控制某些遗传性状 R R质粒(resistance plasmid)resistance plasmid):耐药性质粒 F F质粒(fertility plasmid)fertility plasmid):致育性质粒 ViVi质粒(virulence plasmid)(virulence plasmid):毒力质粒第十六张,PPT共四十七页,创作于2022年6月第十七张,PPT共四十七页,创作于2022年6月 细菌的特殊结构 荚膜、芽胞、鞭毛、菌毛 1.荚膜(capsule)(capsule)定义:某些细菌胞壁外围绕一层较厚的粘液性物壁外围绕一层较厚的粘液性物 质,称为荚膜。形成条件:动物体内、营养丰富的培养基内形成条件:动物体内、营养丰富的培养基内化学成分:多糖化学成分:多糖分类:荚膜、微荚膜、粘液层分类:荚膜、微荚膜、粘液层-糖被糖被功能:鉴别细菌、分型依据(因有抗原性):鉴别细菌、分型依据(因有抗原性)致病性有关(抵抗吞噬、消化等)致病性有关(抵抗吞噬、消化等)第十八张,PPT共四十七页,创作于2022年6月 2.鞭毛(flagellum)定义:为附着在某些菌体上的细长而 呈波状弯曲的丝状物 种类:单毛菌:如霍乱弧菌 双毛菌:如空肠弯曲菌 丛毛菌:如铜绿假单胞菌 周毛菌:如伤寒沙门菌 化学成分:蛋白质 性质:是运动器官 功能:与致病性有关:粘附性 第十九张,PPT共四十七页,创作于2022年6月第二十张,PPT共四十七页,创作于2022年6月第二十一张,PPT共四十七页,创作于2022年6月3 3.菌毛(fimbria or pili)(fimbria or pili)定义:某些细菌表面遍布着比鞭毛 纤细、短而直的丝状物。只 有在电镜下才能观察。化学成分:主要是蛋白质菌毛的种类与作用:普通菌毛:数量多,粘附于受体上-致病性性菌毛:少,雄性菌(F+)F+),雌性菌(F-)F-)-接合;噬菌体吸附受体第二十二张,PPT共四十七页,创作于2022年6月第二十三张,PPT共四十七页,创作于2022年6月4.芽胞(endospore or spore)(endospore or spore):定义:细菌在一定环境条件下,胞浆脱水浓缩,在菌体内形成的多层膜状结构的圆形或卵圆形小体。形成条件:缺乏营养物质,有害代谢产物堆积性质:是休眠状态,不是繁殖方式功能对细菌起保护作用:多层膜包绕,通透性降低芽孢死亡作为灭菌是否彻底的指标第二十四张,PPT共四十七页,创作于2022年6月第二十五张,PPT共四十七页,创作于2022年6月一 细菌的染色方法二 显微镜的使用方法第二十六张,PPT共四十七页,创作于2022年6月三三、细菌染色法、细菌染色法:第二十七张,PPT共四十七页,创作于2022年6月1.简单染色简单染色2.革兰氏染色革兰氏染色3.鞭毛染色鞭毛染色4.芽孢染色芽孢染色第二十八张,PPT共四十七页,创作于2022年6月用于生物简单染色的染料主要有碱性、酸性和中性染料三大类简单染色法是只用一种染料使细菌着色以显示其形态(简单染色不能辨别细菌细胞的构造)第二十九张,PPT共四十七页,创作于2022年6月主要步骤:(1)涂片:直接在载玻片上制薄的涂面(2)晾干:让涂片自然晾干(3)固定:菌膜朝上,通过火焰2-3次固定(4)染色:将固定过的涂片放在废液缸上的 搁架上,加复红染色1-2min。(5)水洗:用水洗去涂片上的染色液(6)干燥:将涂片放在空气中晾干(7)镜检:在涂片上加香柏油一滴,将油镜 头浸入油滴中仔细调焦观察细菌的形态。第三十张,PPT共四十七页,创作于2022年6月杆菌杆菌第三十一张,PPT共四十七页,创作于2022年6月革兰氏染色革兰氏染色 革兰氏染色是采用二种染料对细菌细胞进行染色,初染革兰氏染色是采用二种染料对细菌细胞进行染色,初染革兰氏染色是采用二种染料对细菌细胞进行染色,初染革兰氏染色是采用二种染料对细菌细胞进行染色,初染采用的是结晶紫,复染采用的是番红。采用的是结晶紫,复染采用的是番红。采用的是结晶紫,复染采用的是番红。采用的是结晶紫,复染采用的是番红。G G G G菌菌菌菌:细细细细胞胞胞胞壁壁壁壁较较较较厚厚厚厚,肽肽肽肽聚聚聚聚糖糖糖糖含含含含量量量量较较较较高高高高,基基基基本本本本不不不不含含含含类类类类脂脂脂脂,肽肽肽肽聚聚聚聚糖糖糖糖分分分分子子子子交交交交联联联联度度度度较较较较紧紧紧紧密密密密,故故故故经经经经乙乙乙乙醇醇醇醇处处处处理理理理后后后后,肽肽肽肽聚聚聚聚糖糖糖糖网网网网孔孔孔孔因因因因脱脱脱脱水水水水而而而而明明明明显显显显收收收收缩缩缩缩,使使使使壁壁壁壁的的的的通通通通透透透透性性性性降降降降低低低低保保保保留留留留着着着着结结结结晶晶晶晶紫紫紫紫碘碘碘碘复复复复合合合合物物物物,所以复染液番红不能进入所以复染液番红不能进入所以复染液番红不能进入所以复染液番红不能进入,细胞显细胞显细胞显细胞显紫色紫色紫色紫色。G G G G-菌菌菌菌:细细细细胞胞胞胞壁壁壁壁薄薄薄薄,肽肽肽肽聚聚聚聚糖糖糖糖含含含含量量量量低低低低,类类类类脂脂脂脂含含含含量量量量高高高高,肽肽肽肽聚聚聚聚糖糖糖糖分分分分子子子子交交交交松松松松散散散散,故故故故经经经经乙乙乙乙醇醇醇醇处处处处理理理理后后后后,壁壁壁壁会会会会出出出出现现现现较较较较大大大大的的的的缝缝缝缝隙隙隙隙,细细细细胞胞胞胞透透透透性性性性增增增增大大大大,结结结结晶晶晶晶紫紫紫紫碘碘碘碘复复复复合合合合物物物物易易易易被被被被洗洗洗洗脱脱脱脱出出出出来来来来,再再再再经经经经番番番番红红红红复复复复染染染染后使细胞显后使细胞显后使细胞显后使细胞显红色红色红色红色。第三十二张,PPT共四十七页,创作于2022年6月步骤:结果:阳性菌阳性菌紫色紫色 阴性菌阴性菌红色红色结晶紫初染碘液媒染乙醇脱色番红复染涂片固定由丹麦医生Hans Christian Gram于1884年创立。革兰氏染色法(革兰氏染色法(Gram Stain)第三十三张,PPT共四十七页,创作于2022年6月Figure 1-A Gram stain of Gram+Staphylococcus cells.Figure 2-Gram stain of Gram-E.coli cellsFigure第三十四张,PPT共四十七页,创作于2022年6月 鞭毛是细菌的运动“器官”,一般细菌的鞭毛都非常纤细,其直径为001002m。鞭毛染色是借媒染剂和染色剂的沉淀作用,使染料堆积在鞭毛上,以加粗鞭毛的直径,同时使鞭毛着色。第三十五张,PPT共四十七页,创作于2022年6月(1)选菌(用新培养的菌种为宜)(2)制片(3)染色(4)镜检 主要步骤:第三十六张,PPT共四十七页,创作于2022年6月 芽孢染色法是利用细菌的芽孢和菌体对染料的亲合力不同的原理,用不同染料进行着色,使芽孢和菌体呈不同的颜色而便于区别。第三十七张,PPT共四十七页,创作于2022年6月主要步骤:制片(按常规涂片,干燥,固定)加热染色脱色复染水洗镜检第三十八张,PPT共四十七页,创作于2022年6月细菌芽胞染色技术芽孢染色法染色结果:位于红色细胞内绿色的为芽胞第三十九张,PPT共四十七页,创作于2022年6月1.1.观察工具(观察工具(toolstools)普通光学显微镜普通光学显微镜暗视野显微镜暗视野显微镜相差显微镜相差显微镜荧光显微镜荧光显微镜电子显微镜电子显微镜观察细菌的方法观察细菌的方法第四十张,PPT共四十七页,创作于2022年6月二、显微镜的基本结构及油镜的工作原理1 1、普通光学显微镜的基本结构、普通光学显微镜的基本结构 普通光学显微镜分两部分:普通光学显微镜分两部分:普通光学显微镜分两部分:普通光学显微镜分两部分:1 1)机械装置:)机械装置:)机械装置:)机械装置:镜座、镜筒、镜臂、物镜转换器、载物台、标本镜座、镜筒、镜臂、物镜转换器、载物台、标本镜座、镜筒、镜臂、物镜转换器、载物台、标本镜座、镜筒、镜臂、物镜转换器、载物台、标本移动螺旋、粗调螺旋移动螺旋、粗调螺旋移动螺旋、粗调螺旋移动螺旋、粗调螺旋和和细调螺旋细调螺旋细调螺旋细调螺旋等部件组成。等部件组成。2 2 2 2)光学系统:)光学系统:目镜、物镜、聚光器、虹彩光圈、光源目镜、物镜、聚光器、虹彩光圈、光源等组成 第四十一张,PPT共四十七页,创作于2022年6月普通光学显微镜基本构造第四十二张,PPT共四十七页,创作于2022年6月放大倍数放大倍数=物镜放大倍数物镜放大倍数目镜放大目镜放大倍数倍数第四十三张,PPT共四十七页,创作于2022年6月低倍镜的操作低倍镜的操作1.1.置显微镜于固定的桌上。置显微镜于固定的桌上。2.2.旋动转换器,将低倍镜移到镜筒下方与之对直。旋动转换器,将低倍镜移到镜筒下方与之对直。3.3.转动反光镜向着光源处,同时用眼对准目镜,仔细观察,视野亮转动反光镜向着光源处,同时用眼对准目镜,仔细观察,视野亮度均匀。度均匀。4.4.将标本放在载物台上,使观察的目的物置于圆孔的正中央。将标本放在载物台上,使观察的目的物置于圆孔的正中央。5.5.将粗调节器向下旋转,眼睛注视物镜,以防物镜和载玻片相碰,将粗调节器向下旋转,眼睛注视物镜,以防物镜和载玻片相碰,当物镜的尖端距载玻片约当物镜的尖端距载玻片约0.5cm0.5cm处时停止旋转。处时停止旋转。6.6.左眼向目镜观察,调节粗、细调节器直至目的物清晰为止。左眼向目镜观察,调节粗、细调节器直至目的物清晰为止。第四十四张,PPT共四十七页,创作于2022年6月油镜的操作油镜的操作1.1.如果用高倍镜未能看清目的物,则可用油镜。应先用低倍镜和高如果用高倍镜未能看清目的物,则可用油镜。应先用低倍镜和高倍镜检查标本片,将目的物移到视野正中。倍镜检查标本片,将目的物移到视野正中。2.2.下降载物台下降载物台下降载物台下降载物台在载玻片上滴一滴香柏油,将油镜移至正中央,使在载玻片上滴一滴香柏油,将油镜移至正中央,使油镜头浸没在油中,刚好贴近载玻片。用油镜头浸没在油中,刚好贴近载玻片。用细调节器细调节器微微向上调微微向上调即可。即可。第四十五张,PPT共四十七页,创作于2022年6月暗视野显微镜暗视野显微镜暗视野显微镜是光学显微镜的一种,也叫超显微镜。暗视暗视野显微镜是光学显微镜的一种,也叫超显微镜。暗视野显微镜的聚光镜中央有挡光片,使照明光线不直接进人野显微镜的聚光镜中央有挡光片,使照明光线不直接进人物镜,只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜,因而视物镜,只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜,因而视野的背景是黑的,物体的边缘是亮的。利用这种显微镜能野的背景是黑的,物体的边缘是亮的。利用这种显微镜能见到小至见到小至 4200nm的微粒子,分辨率可比普通显微的微粒子,分辨率可比普通显微镜高镜高50倍。倍。使用方法使用方法第四十六张,PPT共四十七页,创作于2022年6月感感谢谢大大家家观观看看第四十七张,PPT共四十七页,创作于2022年6月