毒物分析第二章优秀课件.ppt

毒物分析第二章第1页，本讲稿共43页第二章毒物分析的方法与特点第2页，本讲稿共43页 毒物分析：是应用化学、物理、生物毒物分析：是应用化学、物理、生物和现代仪器分析的原理和技术，对毒物可和现代仪器分析的原理和技术，对毒物可疑物质进行快速、准确鉴别与测定的一门疑物质进行快速、准确鉴别与测定的一门学科。学科。一、毒物分析的性质第3页，本讲稿共43页v为了抢救及医疗服务为了抢救及医疗服务v为了环境保护和卫生监测为了环境保护和卫生监测v查明中毒原因，澄清事故查明中毒原因，澄清事故二、毒物分析的目的和任务第4页，本讲稿共43页三、对毒物分析人员素质的要求三、对毒物分析人员素质的要求v具有化学及仪器分析的精湛技术；具有化学及仪器分析的精湛技术；v具有药理和毒理的基础知识；具有药理和毒理的基础知识；v具有临床医疗的常识具有临床医疗的常识第5页，本讲稿共43页1.1.样品纯度较低：样品纯度较低：检验样品检验样品:包含在食品、呕吐物、排泄物、尸体等之中包含在食品、呕吐物、排泄物、尸体等之中非非化化学学纯纯或或药药典典标标准准的的物物质质，含含有有影影响响测测定定结果的物质结果的物质需要分离和净化需要分离和净化四、毒物分析的特点第6页，本讲稿共43页2.2.要求迅速准确：要求迅速准确：毒毒物物分分析析项项目目具具有有突突然然性性：要要求求很很快快提提供供结果，且其结果务必准确无误。结果，且其结果务必准确无误。3.3.要求分析方法的灵敏度高：要求分析方法的灵敏度高：检检品品量量少少，被被测测物物浓浓度度低低（101066-10-101212 g g）采采用用微微量量或或半半微微量量分分析析方方法法：较较高高灵灵敏敏度度及专属性及专属性第7页，本讲稿共43页五、试样采集1.1.1.1.认真勘查现场认真勘查现场认真勘查现场认真勘查现场 现现现现场场场场勘勘勘勘查查查查（环环环环境境境境、症症症症状状状状、尸尸尸尸检检检检、口口口口供供供供、调调调调查查查查资资资资料料料料）对对对对检检检检测测测测对对对对象象象象的的的的组组组组分分分分、检检检检验验验验目目目目标标标标物物物物、选选选选择择择择分分分分析析析析方方方方法法法法、及及及及结结结结论论论论的的的的可可可可信信信信性都有极其重要的意义。性都有极其重要的意义。性都有极其重要的意义。性都有极其重要的意义。第8页，本讲稿共43页颜面樱红色：一氧化碳；颜面樱红色：一氧化碳；颜面樱红色：一氧化碳；颜面樱红色：一氧化碳；颜面潮红：阿托平、河豚；颜面潮红：阿托平、河豚；颜面口唇青紫：亚硝酸盐、苯胺、硝基苯；颜面口唇青紫：亚硝酸盐、苯胺、硝基苯；口鼻泡沫溢出：有机磷杀虫剂、巴比妥、安妥等。口鼻泡沫溢出：有机磷杀虫剂、巴比妥、安妥等。口鼻泡沫溢出：有机磷杀虫剂、巴比妥、安妥等。口鼻泡沫溢出：有机磷杀虫剂、巴比妥、安妥等。v特殊面容：特殊面容：第9页，本讲稿共43页蒜臭味：有机磷杀虫剂、黄磷、磷化锌；蒜臭味：有机磷杀虫剂、黄磷、磷化锌；蒜臭味：有机磷杀虫剂、黄磷、磷化锌；蒜臭味：有机磷杀虫剂、黄磷、磷化锌；酶臭味：六六六；酶臭味：六六六；酶臭味：六六六；酶臭味：六六六；酒精味：乙醇、甲醇和其他醇类；酒精味：乙醇、甲醇和其他醇类；来苏味：酚、甲酚；来苏味：酚、甲酚；来苏味：酚、甲酚；来苏味：酚、甲酚；杏仁味：氰化物、硝基苯等。杏仁味：氰化物、硝基苯等。杏仁味：氰化物、硝基苯等。杏仁味：氰化物、硝基苯等。v特殊气味特殊气味：第10页，本讲稿共43页剧烈腹痛：强酸、强碱、砷、汞化合物等。剧烈腹痛：强酸、强碱、砷、汞化合物等。剧烈呕吐与腹泻：砷、汞化合物、巴豆、桐油、剧烈呕吐与腹泻：砷、汞化合物、巴豆、桐油、蓖麻等。蓖麻等。口渴：磷化锌、砷化合物等。口渴：磷化锌、砷化合物等。流涎：有机磷杀虫剂、乌头以及砷化合物、汞流涎：有机磷杀虫剂、乌头以及砷化合物、汞化合物等。化合物等。第11页，本讲稿共43页 昏睡、呼吸减慢：安眠药、麻醉药、吗啡、一氧化碳、甲昏睡、呼吸减慢：安眠药、麻醉药、吗啡、一氧化碳、甲昏睡、呼吸减慢：安眠药、麻醉药、吗啡、一氧化碳、甲昏睡、呼吸减慢：安眠药、麻醉药、吗啡、一氧化碳、甲醇、乙醇等。醇、乙醇等。醇、乙醇等。醇、乙醇等。痉挛：士的宁、氰化物、有机磷杀虫剂等。痉挛：士的宁、氰化物、有机磷杀虫剂等。瞳孔缩小：吗啡、有机磷杀虫剂、巴比妥类等。瞳孔缩小：吗啡、有机磷杀虫剂、巴比妥类等。瞳孔缩小：吗啡、有机磷杀虫剂、巴比妥类等。瞳孔缩小：吗啡、有机磷杀虫剂、巴比妥类等。瞳孔扩大：阿托平、颠茄、乌头、钩吻、大麻、奎宁。瞳孔扩大：阿托平、颠茄、乌头、钩吻、大麻、奎宁。瞳孔扩大：阿托平、颠茄、乌头、钩吻、大麻、奎宁。瞳孔扩大：阿托平、颠茄、乌头、钩吻、大麻、奎宁。其他：其他：血色鲜红：一氧化碳、氰化物；血色鲜红：一氧化碳、氰化物；血色鲜红：一氧化碳、氰化物；血色鲜红：一氧化碳、氰化物；血呈酱油色：亚硝酸盐、苯胺、硝基苯；血呈酱油色：亚硝酸盐、苯胺、硝基苯；血呈酱油色：亚硝酸盐、苯胺、硝基苯；血呈酱油色：亚硝酸盐、苯胺、硝基苯；广泛性出血：敌鼠钠盐、肝素、蛇毒等。广泛性出血：敌鼠钠盐、肝素、蛇毒等。广泛性出血：敌鼠钠盐、肝素、蛇毒等。广泛性出血：敌鼠钠盐、肝素、蛇毒等。第12页，本讲稿共43页2.2.正确收集检体正确收集检体:检体应收集含毒物最多的部分。检体是否适当，检体应收集含毒物最多的部分。检体是否适当，检体应收集含毒物最多的部分。检体是否适当，检体应收集含毒物最多的部分。检体是否适当，影响检验成败。甚至发生判断错误。因此以收影响检验成败。甚至发生判断错误。因此以收影响检验成败。甚至发生判断错误。因此以收影响检验成败。甚至发生判断错误。因此以收集多种检体为好。集多种检体为好。集多种检体为好。集多种检体为好。v胃内容物、呕吐物量较大，可能尚未分解；胃内容物、呕吐物量较大，可能尚未分解；胃内容物、呕吐物量较大，可能尚未分解；胃内容物、呕吐物量较大，可能尚未分解；v血是分析血是分析血是分析血是分析COCOCOCO的唯一检体；的唯一检体；的唯一检体；的唯一检体；v尿检验非挥发性毒物；尿检验非挥发性毒物；尿检验非挥发性毒物；尿检验非挥发性毒物；v肝、肾等是检测重金属中毒的较好检体。肝、肾等是检测重金属中毒的较好检体。肝、肾等是检测重金属中毒的较好检体。肝、肾等是检测重金属中毒的较好检体。第13页，本讲稿共43页第14页，本讲稿共43页样品样品样品样品被检测物质的分离、富集被检测物质的分离、富集被检测物质的分离、富集被检测物质的分离、富集选择合适检测方法检测六、毒物分析的一般方法第15页，本讲稿共43页除蛋白质除蛋白质除蛋白质除蛋白质萃取萃取萃取萃取浓缩、富集浓缩、富集浓缩、富集浓缩、富集（一）毒物的分离、富集（一）毒物的分离、富集（一）毒物的分离、富集（一）毒物的分离、富集采用适宜方法检测第16页，本讲稿共43页是测定血浆、血清、全血及组织匀浆等样品中物质是测定血浆、血清、全血及组织匀浆等样品中物质的第一步的第一步目的：释放结合型被检测物质，利于提取，保护仪器，目的：释放结合型被检测物质，利于提取，保护仪器，防止干扰防止干扰1.1.1.1.除蛋白质除蛋白质除蛋白质除蛋白质加入沉淀剂和变性试剂 酶消化法 超滤法常常见见方方法法第17页，本讲稿共43页加入沉淀剂和变性试剂加入沉淀剂和变性试剂使使pro脱水：脱水：硫酸铵硫酸铵、与水混合有机溶剂与水混合有机溶剂(乙醇乙醇、甲醇、甲醇、乙腈乙腈)使使pro成不溶性盐而沉淀：成不溶性盐而沉淀：阴离子型沉淀剂（三氯醋酸、高阴离子型沉淀剂（三氯醋酸、高氯酸、钨酸、焦磷酸）氯酸、钨酸、焦磷酸）、阳离子型沉淀剂（含锌盐、铜盐阳离子型沉淀剂（含锌盐、铜盐）第18页，本讲稿共43页酶消化法酶消化法 蛋白水解酶中的枯草菌溶素：酶解蛋白水解酶中的枯草菌溶素：酶解组织组织，使被检测物质析，使被检测物质析出。出。优点：优点：温和条件下进行，可避免某些被检测物质在酸中水解及高温温和条件下进行，可避免某些被检测物质在酸中水解及高温降解；降解；可显著改善对蛋白结合率强的被检测物质的回收率；可显著改善对蛋白结合率强的被检测物质的回收率；可用有机溶剂直接提取消化液而无乳化生成的危险；可用有机溶剂直接提取消化液而无乳化生成的危险；缺点：不适用于一些在高缺点：不适用于一些在高pH时易水解的时易水解的被检测物质被检测物质。第19页，本讲稿共43页超滤法超滤法被检测物质和代谢产物多为低分子化合物，被检测物质和代谢产物多为低分子化合物，与与pro相比相差甚远，可用特殊微孔滤膜超相比相差甚远，可用特殊微孔滤膜超滤滤不适合与不适合与pro结合力强的被检测物质结合力强的被检测物质影响被检测物质的回收率影响被检测物质的回收率易堵塞易堵塞第20页，本讲稿共43页2.2.2.2.萃取萃取萃取萃取液液萃取液固萃取：加速液相萃取固相萃取固相微萃取第21页，本讲稿共43页 溶液的pH调节 提取溶剂的极性(1)、液液萃取第22页，本讲稿共43页溶液的溶液的pH调节调节最佳最佳pH选择主要与被检测物质的选择主要与被检测物质的pKa值有关。值有关。pHpKa时，时，50%的被检测物质以非电离形式存在。的被检测物质以非电离形式存在。碱性被检测物质最佳碱性被检测物质最佳pH值要高于值要高于pKa值值1-2个个pH单位；反单位；反之，则低之，则低1-2个单位，可使个单位，可使90%被检测物质以非电离被检测物质以非电离形式存在，易为溶剂提取。形式存在，易为溶剂提取。高解离被检测物质采用高解离被检测物质采用“离子对离子对”技术进行提取和定技术进行提取和定量量体内酸性物质较多，在碱性条件下不会被萃取出来，故在体内酸性物质较多，在碱性条件下不会被萃取出来，故在pH值偏高的情况下进行提取较好。值偏高的情况下进行提取较好。第23页，本讲稿共43页提取溶剂的极性提取溶剂的极性v满足提取要求，极性尽可能小满足提取要求，极性尽可能小v加入少量醇类加入少量醇类(乙醇乙醇)可克服小极性溶剂可克服小极性溶剂(庚烷庚烷)提提取能力弱的不足和减小被检测物质在容器表面的取能力弱的不足和减小被检测物质在容器表面的吸附损失吸附损失v利用不同极性的混合溶剂来提取被检测物质和净利用不同极性的混合溶剂来提取被检测物质和净化脂肪酸类，如己烷化脂肪酸类，如己烷甲醇甲醇 第24页，本讲稿共43页定义定义：在较高温度：在较高温度(50-200)(50-200)和压力和压力(10.3-20.6(10.3-20.6MpaMpa或或1000-3000 1000-3000 psi)psi)下用溶剂萃取固体或半固体样品。下用溶剂萃取固体或半固体样品。溶出速度增快数十倍。溶出速度增快数十倍。特点:有机溶剂用量少(10g样品仅需溶剂15ml)、快速(1次萃取全过程仅需15min).（2）加速液相萃取(Accelerated Solvent Extraction,ASE)第25页，本讲稿共43页第26页，本讲稿共43页（3）、固相萃取聚丙烯管滤板样品室填料(固相床)由液固萃取技术和柱相色谱技术结合发展而来v无乳化现象v溶剂多为水和甲醇，安全价廉v萃取效率高v速度快v生物样品离心后方能萃取v多为一次性产品，成本高优优点点缺缺点点第27页，本讲稿共43页柱分两类：柱分两类：一种是阻留全部样品在柱上：一种是阻留全部样品在柱上：亲水性装填物，可捕集全部样品。样亲水性装填物，可捕集全部样品。样品全部吸附在固相颗粒表面。品全部吸附在固相颗粒表面。采用一种与水不相混溶的有机溶剂如氯乙烷倾入柱中，洗提被检测物质。采用一种与水不相混溶的有机溶剂如氯乙烷倾入柱中，洗提被检测物质。一种则仅阻留被检测物质及其相关物质，较有选择性。一种则仅阻留被检测物质及其相关物质，较有选择性。可装填疏水物可装填疏水物(活活性碳、聚苯乙烯或性碳、聚苯乙烯或C18化学键合硅胶化学键合硅胶)或离子交换树脂。或离子交换树脂。疏水柱：吸附亲脂性被检测物质，用有机溶剂洗提分离。疏水柱：吸附亲脂性被检测物质，用有机溶剂洗提分离。离子交换柱：高极性、可电离的被检测物质。离子交换柱：高极性、可电离的被检测物质。第28页，本讲稿共43页柱预处理（活化）平衡萃取柱装载样品洗去干扰物回收分析物第29页，本讲稿共43页（4 4）固相微萃取）固相微萃取(Solid-phase Micro-extraction)Solid-phase Micro-extraction)定义：以柱分离方式进行操作，又称为固相提取柱法。定义：以柱分离方式进行操作，又称为固相提取柱法。在固相萃取基础上发展起来的，保留了其所有的优点，摒在固相萃取基础上发展起来的，保留了其所有的优点，摒弃了其需要柱填充物和使用溶剂进行解吸的弊病。弃了其需要柱填充物和使用溶剂进行解吸的弊病。固相物质固相物质:氧化铝、活性碳、硅藻土、离子交换树脂、凝胶或氧化铝、活性碳、硅藻土、离子交换树脂、凝胶或C C1818化学化学键合硅胶等。键合硅胶等。洗脱相：采用不同溶剂洗脱被检测物质。洗脱相：采用不同溶剂洗脱被检测物质。第30页，本讲稿共43页第31页，本讲稿共43页第32页，本讲稿共43页固相微萃取分为两步固相微萃取分为两步第一步是萃取，将针头插入试样容器中，推出石英纤维第一步是萃取，将针头插入试样容器中，推出石英纤维对试样中的分析组分进行萃取；对试样中的分析组分进行萃取；第二步是在进样过程中将针头插入色谱进样器，推出石英纤第二步是在进样过程中将针头插入色谱进样器，推出石英纤维中完成解吸、色谱分析等步骤。维中完成解吸、色谱分析等步骤。固相微萃取的萃取方式有两种：固相微萃取的萃取方式有两种：石英纤维直接插入试样中进行萃取，适用于气体与液体石英纤维直接插入试样中进行萃取，适用于气体与液体中的分析组分中的分析组分顶空萃取：试样中挥发性、半挥发性分析组分。顶空萃取：试样中挥发性、半挥发性分析组分。第33页，本讲稿共43页（1 1）KL-512KL-512氮吹氮吹仪仪仪仪氮气快速、连续、可控地吹到加热氮气快速、连续、可控地吹到加热氮气快速、连续、可控地吹到加热氮气快速、连续、可控地吹到加热样品表面，实现样品快速浓缩样品表面，实现样品快速浓缩样品表面，实现样品快速浓缩样品表面，实现样品快速浓缩。由。由。由。由底盘、中心杆、样品定位架、配气底盘、中心杆、样品定位架、配气底盘、中心杆、样品定位架、配气底盘、中心杆、样品定位架、配气系统等构成。试管由定位架弹簧和系统等构成。试管由定位架弹簧和系统等构成。试管由定位架弹簧和系统等构成。试管由定位架弹簧和托盘固定。气体通过可调流量计到托盘固定。气体通过可调流量计到托盘固定。气体通过可调流量计到托盘固定。气体通过可调流量计到达配气系统，经软管到各样品针阀达配气系统，经软管到各样品针阀达配气系统，经软管到各样品针阀达配气系统，经软管到各样品针阀管，吹向溶液表面管，吹向溶液表面管，吹向溶液表面管，吹向溶液表面 原理：原理：原理：原理：3.3.浓缩、富集浓缩、富集第34页，本讲稿共43页 性能：性能：v样品位数：样品位数：样品位数：样品位数：12121212v适用于试管、锥形瓶、离心管适用于试管、锥形瓶、离心管适用于试管、锥形瓶、离心管适用于试管、锥形瓶、离心管v试管尺寸试管尺寸试管尺寸试管尺寸10-29mm10-29mm，样品容量样品容量1-501-50mlmlmlmlv针阀控制各样品位氮气流速及开关针阀控制各样品位氮气流速及开关v氮气流量氮气流量氮气流量氮气流量0-50-50-50-5L/minL/min，压力小于压力小于200200kPakPa第35页，本讲稿共43页MF-10A MF-10A MF-10A MF-10A 薄膜蒸发器薄膜蒸发器薄膜蒸发器薄膜蒸发器NE-1001NE-1001NE-1001NE-1001旋转薄膜蒸发器旋转薄膜蒸发器旋转薄膜蒸发器旋转薄膜蒸发器3.3.浓缩、富集浓缩、富集-蒸发器蒸发器第36页，本讲稿共43页毒品检验定性分析定量分析（二）毒物分析常用方法（二）毒物分析常用方法第37页，本讲稿共43页毒毒物物分分析析常常用用方方法法化学法化学法仪器分析法仪器分析法仪器分析法仪器分析法生物法生物法物理法物理法色谱法色谱法光谱法光谱法光谱法光谱法质谱法质谱法TLCHPLCGCCEUVIRAASFLu免疫分析法免疫分析法第38页，本讲稿共43页七、导致待测物损失的因素七、导致待测物损失的因素一）吸附一）吸附一）吸附一）吸附玻璃表面或胶塞：吸附脂肪胺类及含硫化物玻璃表面或胶塞：吸附脂肪胺类及含硫化物玻璃表面或胶塞：吸附脂肪胺类及含硫化物玻璃表面或胶塞：吸附脂肪胺类及含硫化物血样中红血球和纤维蛋白元凝块的形成，常能引血样中红血球和纤维蛋白元凝块的形成，常能引血样中红血球和纤维蛋白元凝块的形成，常能引血样中红血球和纤维蛋白元凝块的形成，常能引起待测物的共沉淀：起待测物的共沉淀：起待测物的共沉淀：起待测物的共沉淀：措施：全血加入缓冲液后再行提取措施：全血加入缓冲液后再行提取措施：全血加入缓冲液后再行提取措施：全血加入缓冲液后再行提取 血球散开，被检测物质可从血球表面解吸：缓冲液血球散开，被检测物质可从血球表面解吸：缓冲液血球散开，被检测物质可从血球表面解吸：缓冲液血球散开，被检测物质可从血球表面解吸：缓冲液的一定离子强度，可引起蛋白质变性，形成疏松的一定离子强度，可引起蛋白质变性，形成疏松的一定离子强度，可引起蛋白质变性，形成疏松的一定离子强度，可引起蛋白质变性，形成疏松絮状物絮状物絮状物絮状物-减少被检测物质的物理性滞留和共减少被检测物质的物理性滞留和共减少被检测物质的物理性滞留和共减少被检测物质的物理性滞留和共沉淀的损失。沉淀的损失。沉淀的损失。沉淀的损失。第39页，本讲稿共43页二）化学降解二）化学降解二）化学降解二）化学降解三）络合三）络合三）络合三）络合被测物质分解物分解物分解物分解物光、热光、热光、热光、热氧化氧化氧化氧化水解水解水解水解微生物措施措施：采用温和条件制备样品，低温、避光。采用温和条件制备样品，低温、避光。采用温和条件制备样品，低温、避光。采用温和条件制备样品，低温、避光。被测物质络合物或配合物络合物或配合物络合物或配合物络合物或配合物重金属重金属重金属重金属内源性分子第40页，本讲稿共43页四）蒸发四）蒸发被检测物质本身的挥发性（如苯丙胺）被检测物质本身的挥发性（如苯丙胺）蒸发所得残渣未完全溶于所加的小体积溶剂中蒸发所得残渣未完全溶于所加的小体积溶剂中因减压浓缩引起溶液暴沸而导致损失因减压浓缩引起溶液暴沸而导致损失在吹氮过程中被检测物质以气溶胶形式逸出在吹氮过程中被检测物质以气溶胶形式逸出第41页，本讲稿共43页复习题复习题复习题复习题一、选择题：一、选择题：一、选择题：一、选择题：1.1.1.1.中毒者血呈酱油色中毒原因可能是：中毒者血呈酱油色中毒原因可能是：中毒者血呈酱油色中毒原因可能是：中毒者血呈酱油色中毒原因可能是：()()()()A.A.A.A.一氧化碳一氧化碳一氧化碳一氧化碳 B.B.B.B.亚硝酸盐亚硝酸盐亚硝酸盐亚硝酸盐 C.C.C.C.大麻大麻大麻大麻 D.D.D.D.敌鼠钠盐敌鼠钠盐敌鼠钠盐敌鼠钠盐二、填空题二、填空题二、填空题二、填空题由有机磷杀虫剂中毒的人出现的症状有：由有机磷杀虫剂中毒的人出现的症状有：由有机磷杀虫剂中毒的人出现的症状有：由有机磷杀虫剂中毒的人出现的症状有：（）、）、）、）、（）、（）、（）、（）、（）、（、（、（、（）、（、（、（、（）、（）、（）、（）、（）。第42页，本讲稿共43页三、判断题三、判断题三、判断题三、判断题血是分析血是分析血是分析血是分析COCOCOCO的唯一检体。（的唯一检体。（的唯一检体。（的唯一检体。（）尿检验挥发性毒物。（尿检验挥发性毒物。（尿检验挥发性毒物。（尿检验挥发性毒物。（）四、简答题四、简答题四、简答题四、简答题毒物分析的特点毒物分析的特点毒物分析的特点毒物分析的特点 2.2.2.2.毒物分析常用分析方法毒物分析常用分析方法毒物分析常用分析方法毒物分析常用分析方法第43页，本讲稿共43页