光学显微镜的使用.ppt

光学显微镜的使用 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望一、光学显微镜构造和使用 目的要求 用品材料 实验内容 复习预习 目的要求 用品材料 实验内容 复习预习光学显微镜构造和使用显微镜的构造和使用目的要求目的要求v 熟悉光学显微镜基本结构和用途；v 掌握显微镜维护的基本知识；v 初步掌握低倍镜、高倍镜使用方法。显微镜的构造和使用用品材料用品材料v 玻片标本 字母装片、头发装片、玻璃纤维v 实验材料 显微镜、擦镜纸、载玻片、擦布、香 柏油、二甲苯 显微镜的构造和使用实验内容实验内容v 重新认识显微镜的结构v 显微镜的正确使用方法v 显微镜使用的注意事项v 其他常用的光学显微镜显微镜的构造和使用实验内容实验内容 机械系统部分 光学系统部分 照明系统部分 图像记录系统光学显微镜的构造光学显微镜的构造机械部分机械部分调焦器镜筒物镜转换器载物台推片器与游标卡尺镜座镜柱活动关节镜臂光学系统部分光学系统部分目镜(接目镜)物镜(接物镜)“5”，“10”的含义。目镜指针低倍镜(8x，10 x)：0.25,160高倍镜(40 x,45x):0.65,160/0.17油 镜(90 x,100 x):1.25,160/0.17如何计算显微镜的放大倍数？如何计算显微镜的放大倍数？照明系统部分照明系统部分光 源反光镜聚光镜光 圈：内光源与外光源：凹面镜与平面镜：升高与降低聚光镜：放开与关闭光圈如何调节观察视野的明暗度？如何调节观察视野的明暗度？普通生物显微镜显微图象系统生物显微镜(含摄影系统)数码生物显微镜返回上一层返回上一层显微镜的构造和使用实验内容实验内容光学显微镜的使用光学显微镜的使用 取镜 放镜 对光 放片 调焦(粗调焦和细调焦)低倍镜的使用低倍镜的使用显微镜的构造和使用实验内容实验内容光学显微镜的使用光学显微镜的使用 定位 换镜 调焦(细调焦)高倍镜的使用高倍镜的使用显微镜的构造和使用实验内容实验内容字母装片：观察中注意字母像与实际装片的位置关系，为什么？头发装片：调节推片器定位头发的十字交叉点玻璃纤维：调节推片器定位玻璃纤维的十字交叉点问题思考：对颜色深的标本与颜色浅的标本在观察过程中有何不同？使用练习使用练习光学显微镜的使用光学显微镜的使用返回上一层返回上一层显微镜的构造和使用实验内容实验内容显微镜使用注意事项显微镜使用注意事项 显微镜持取正确姿势 使用前后的镜头维护 注意标本的放置方向 观察时注意双目齐睁 高倍镜不得使用粗调 严禁拆卸任何部件 使用后恢复机器原貌返回上一层返回上一层显微镜的构造和使用实验内容实验内容其他常用光学显微镜其他常用光学显微镜 检测显微镜 解剖显微镜 倒置显微镜 偏光显微镜检测显微镜SFC-86双筒解剖显微镜其他几种显微镜介绍其他几种显微镜介绍其他几种显微镜介绍其他几种显微镜介绍倒置显微镜光路图倒置显微镜偏振光显微镜返回上一层返回上一层显微镜的构造和使用复习预习复习预习v 复习“使用显微镜的注意事项”v 预习“生物绘图的要求及方法”(p10)v 预习第二次实验“细胞形态和显微测量”v 携带实验报告纸、铅笔、橡皮擦、直尺 目的要求 用品材料 实验内容 实验报告 复习预习二、细胞形态和显微测量细胞形态和显微测量目的要求目的要求v 掌握光镜下细胞的基本形态结构；v 掌握临时制片和显微绘图的方法；v 进一步掌握显微镜的正确使用方法；v 了解细胞显微测量的原理。细胞形态和显微测量用品材料用品材料v 玻片标本 人口腔上皮细胞、平滑肌装片、牛脊髓横 切片、小鼠肝细胞切片、蛙血涂片v 实验材料 显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、小镊 子、载玻片、盖玻片、吸管、牙签、纱布、擦镜纸、吸水纸、解剖刀、剪刀等 细胞形态和显微测量实验内容实验内容v 细胞的形态观察v 细胞的显微测量 细胞形态和显微测量实验内容实验内容 扁平细胞人类口腔上皮细胞 柱状细胞小鼠小肠上皮细胞 星形细胞牛脊髓神经细胞 梭形细胞小鼠平滑肌细胞 圆形细胞蛙血(示红细胞)小鼠肝细胞切片观察第一部分第一部分细胞的形态结构观察细胞的形态结构观察返回上一层返回上一层人口腔上皮细胞制备人口腔上皮细胞制备(临时制片临时制片)取口腔上皮细胞盖上盖玻片亚甲基蓝染色观 察取干净载玻片滴入0.9%NaCl溶液人口腔上皮细胞扁平上皮细胞扁平上皮细胞扁平上皮细胞扁平上皮细胞蟾蜍扁平上皮细胞(HE染色)柱状上皮细胞柱状上皮细胞蝾螈小肠切片(HE染色)星状细胞星状细胞离体培养的新生老鼠脊髓神经细胞(HE染色)平滑肌细胞平滑肌细胞小鼠平滑肌细胞小鼠肝细胞切片小鼠肝细胞切片小鼠肝细胞内DNA的显示(Feulgen反应)圆形细胞圆形细胞人血涂片(Giemsa染色)(红色箭头示白细胞，兰色箭头示红细胞)细胞形态和显微测量实验内容实验内容 细胞的显微测量需要以目镜测微尺来进行，但其分度值随着放大倍数的变化而变化，长度也不一样，因此需要事先进行标定。而镜台测微尺的长度是已知的，目镜测微尺的标定是通过镜台测微尺来进行的。第二部分第二部分细胞的显微测量细胞的显微测量返回上一层返回上一层0.01mm01234012345678目镜测微尺(长度随放大倍数发生改变)镜台测微尺(每一大刻度值为0.1mm，小刻度值为0.01mm)目镜测微尺与镜台测微尺目镜测微尺与镜台测微尺细胞形态和显微测量实验内容实验内容 标定镜台测微尺 蛙红细胞的测量细胞的显微测量细胞的显微测量放镜台测微尺于载物台调节使镜台测微尺与目镜测微尺平行取下镜台测微尺*装入目镜测微尺记录二者在重合线之间的刻度计算标定值目镜测微尺的标定目镜测微尺的标定如在低倍镜下重合线之间目镜测微尺的长度为50格 镜台测微尺的长度为68格则：50:68=1:x x=1.36格，即目镜测微尺的1小格相当于镜台测微尺的1.36格，而镜台测微尺每1小格的长度为10um，则目镜测微尺每1小格的长度为13.6um。标定时标定时应注意应注意的问题的问题 标定时必须严格按照操作规程，以免损坏测微尺；重合线的判断应在二者刻度线完全重合；比例式的计算；标定值只能在同一放大倍数下进行测量。如何进行蛙细胞的显微测量？如何进行蛙细胞的显微测量？目镜测微尺短轴长轴转动目镜镜筒细胞形态和显微测量实验报告实验报告?描绘在显微镜下观察到的口腔上皮细胞?记录蛙红细胞显微测量结果 细胞膜细胞质细胞核蛙红细胞示意图蛙红细胞示意图分别记录5个蛙红细胞的长径和短径，并计算平均值。蛙红细胞测量结果单位：m12345平均长径短径目镜测微尺标定目镜测微尺标定（1 1）标定物镜：）标定物镜：4040（2 2）重合线之间，）重合线之间，目镜测微尺目镜测微尺 格，镜台测微格，镜台测微 尺格尺格（3 3）求值：）求值：目镜测微尺的每一小格相当于镜台测微尺的目镜测微尺的每一小格相当于镜台测微尺的 小格小格 目镜测微尺的标定值为目镜测微尺的标定值为 微米微米细胞形态和显微测量复习预习复习预习v 预习实验一中“血涂片的制作方法”(p6)v 预习第三次实验“细胞的化学成分”Thank YouThank You