传染性法氏囊病卵黄抗体效价的测定.ppt

技能训练10 传染性法氏囊病卵黄抗体效价的测定 掌握鸡传染性法氏囊病卵黄抗体效价的测定方法实训目标氯化钠、琼脂粉、培养皿、打孔器、酒精灯、鸡蛋、96孔血凝板、微量移液器、烧杯、带盖瓷盘、注射器、生理盐水、蒸馏水、标准抗原等仪器设备方法步骤（一）1%琼脂平板制备（二）稀释卵黄（三）加样（四）反应（一）（一）1%琼脂平板制备琼脂平板制备 1.制板：用810%氯化钠溶液配制1%琼脂溶液，电炉加热使之充分溶化后，倒入直径90 mm培养皿，制成厚度为2.53mm琼脂平板；平置，在室温下冷却凝固后打孔。2.打孔：在琼脂板上按7孔一组的梅花形打孔（中间1孔，周围6孔），孔径5mm，孔距25mm，将孔内的琼脂用8号针头斜面向上轻轻将琼脂挑出，勿伤边缘或使琼脂层脱离皿底。一般打孔两组。3.封底：用酒精灯轻烤平皿底部至微烫，封闭孔底部，以防侧漏。4.编号：在平皿底用蜡笔编号，第一组编号16，第二组编号712。（二）稀释卵黄（二）稀释卵黄 先用微量移液器在96孔血凝板加生理盐水，每孔50微升，共加112孔；再于第一孔加50微升卵黄，倍比稀释至12孔。（三）加样（三）加样 中央孔加入传染性法氏囊病病毒标准抗原，加样量以“满而不溢”为原则。用微量移液器小心的将96孔血凝板中不同浓度卵黄液小心加至琼扩板的周边孔上，血凝板孔号与琼扩板孔号要一一对应，加样从低浓度开始加样，每加一个浓度，吸嘴尽量喷干净（四）反应（四）反应 将琼扩板静置12min，加盖、倒置入湿盒中，放入37的温箱中2448h。（五）结果判断（五）结果判断2448h后，观察出现白色沉淀线的卵黄稀释度，即是IBD抗体效价。课后作业课后作业1.写出实习报告；IBD卵黄抗体的检测方法。