《流式基本介绍》PPT课件.ppt

流式细胞仪及其临床应用流式细胞仪及其临床应用To help all people live healthy livesTo help all people live healthy lives1973年BD推出世界第一台流式细胞仪FACS I（Fluorescence Activated Cell Sorter）1980年中国的第一台流式细胞仪FACS II生物学、免疫学、遗传学、药理学、肿瘤学、血液学、临床检验等领域FACS流式细胞仪市场占有率：全球75%，中国70%台式机台式机 FACSCalibur=双激光：488nm/635nm=四荧光六分析参数=动化程度高=分析速度快=灵活的设计=细胞分选系统细胞富集系统大型机大型机 FACS Vantage SE=多激光多波长=八特征参数=设计灵活=高速分选=单细胞点对点分选流式细胞术的基本概念流式细胞术的基本概念=流式细胞术（Flow Cytometry,简称FCM）是一种可以快速、准确、客观，并且同时检测单个微粒（通常是细胞）的多项特性，并加以定量的技术，同时可以对特定群体加以分选=研究对象为生物颗粒，如各种细胞、微生物及人工合成微球等=研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征，并加以定量流式细胞仪仪器结构流式细胞仪仪器结构液流系统液流系统光学系统光学系统激光光源光收集系统电子系统电子系统光电转换数据处理系统10-15%zDNA倍体分析：结合临床病理的形态学诊断，对一些恶性肿瘤进行早期诊断，跟踪随访和早期治疗，大大提高一些肿瘤的治愈率和生存率。尤其对一些细胞抽吸物、体液、组织液的脱落细胞的分析，意义尤为重要。z增殖状态分析：反映了肿瘤的生长速度和侵袭性DNA细胞周期分析（ModFIT）细胞凋亡的分析细胞凋亡的分析z细胞凋亡与细胞坏死是两个不同的过程z细胞凋亡的主要检查手段y形态学检查yLadders实验y流式细胞仪检查z与凋亡相关的病理过程yHIVy自身免疫性疾病y肿瘤细胞凋亡的分析细胞凋亡的分析z细胞凋亡的主要表现y细胞内酶改变：Caspase-3活化y细胞膜不对称性改变，磷脂酰丝氨酸外翻，但仍然保持膜的完整性：Annexin V/PIy细胞核DNA的断裂改变：TUNNEL实验（APO-BRDU，APO-DIRECT）z凋亡相关蛋白：yFasyBcl-2细胞凋亡细胞凋亡Caspases-3细胞凋亡细胞凋亡Annexin 细胞凋亡细胞凋亡BrdU