槐花米中芦丁的提取与鉴定.ppt

槐花米中芦丁的提取与鉴定槐花米中芦丁的提取与鉴定背景知识背景知识1.1.来源来源n芦丁（芦丁（RutinRutin）又称）又称芸香苷，芸香苷，广泛存在于植物界中，现已广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在发现含芦丁的植物至少在7070种以上，如烟叶、槐花、荞麦种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。尤以槐花米（为植物和蒲公英中均含有。尤以槐花米（为植物Sophora Sophora japonica L japonica L 的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。（含量为为大量提取芦丁的原料。（含量为12121616.）2.2.结构组成结构组成n芦丁是由芦丁是由槲皮素槲皮素（QuercetinQuercetin）3 3位上的羟基与位上的羟基与芸香糖芸香糖（RutinoseRutinose）葡萄糖（）葡萄糖（GlucoseGlucose）与鼠李糖）与鼠李糖（RhamnoseRhamnose）组成的双糖脱水形成的苷。分子式：）组成的双糖脱水形成的苷。分子式：C C2727H H3030O O1616 结构组成结构组成芦丁分子中具有芦丁分子中具有较较多酚羟基多酚羟基，显，显弱酸性，易溶于弱酸性，易溶于碱液，酸化后又碱液，酸化后又可析出，因此，可析出，因此，本实验采用碱提本实验采用碱提取酸沉淀法提取取酸沉淀法提取芦丁。芦丁。斛皮素斛皮素芸香糖芸香糖3.3.理化性质理化性质n芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有3 3分子的结晶分子的结晶水，熔点为水，熔点为174-178174-178，无水物，无水物188-190188-190。n溶解度：溶解度：黄酮为平面性较强的分子，难溶于水。而黄酮苷黄酮为平面性较强的分子，难溶于水。而黄酮苷因引入糖，水溶性增强，糖链越长水溶性越大，一般易溶因引入糖，水溶性增强，糖链越长水溶性越大，一般易溶于水、甲醇、乙醇等强溶剂中。于水、甲醇、乙醇等强溶剂中。冷水中为冷水中为1:100001:10000；沸水；沸水中中1:2001:200；冷乙醇；冷乙醇1:6501:650；热乙醇；热乙醇1:601:60；冷吡啶；冷吡啶1:121:12。微溶。微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。于碱而呈黄色。4.4.药理作用药理作用n芦丁具有维生素芦丁具有维生素P P样作用。能维持血管的正常通透样作用。能维持血管的正常通透性，减低血管的脆性，缩短流血时间，可作为高性，减低血管的脆性，缩短流血时间，可作为高血压病的辅助治疗剂。亦可用于防治因缺乏芦丁血压病的辅助治疗剂。亦可用于防治因缺乏芦丁所致的其他出血症。所致的其他出血症。一、实验目的一、实验目的n通过芦丁的提取与精制掌握碱通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取黄酮类酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。化合物的原理及操作。n掌握黄酮类成分的主要性质及黄酮苷，苷元和掌握黄酮类成分的主要性质及黄酮苷，苷元和糖部分的鉴定方法。糖部分的鉴定方法。二、实验要求二、实验要求n独立完成实验，从槐花米中提取出芦丁并进行独立完成实验，从槐花米中提取出芦丁并进行鉴定。鉴定。三、实验原理三、实验原理 芦丁属芦丁属黄酮类黄酮类化合物，分子中有较多化合物，分子中有较多酚羟基酚羟基，具弱酸性，易溶于热碱中，酸化后又析出，因具弱酸性，易溶于热碱中，酸化后又析出，因此可以用此可以用碱溶酸沉碱溶酸沉的方法提取芦丁，又利用芦的方法提取芦丁，又利用芦丁在冷水和热水中溶解度相差较大的特性进行丁在冷水和热水中溶解度相差较大的特性进行重结晶精制。重结晶精制。四、实验材料和器皿四、实验材料和器皿【器皿】【器皿】烧杯（烧杯（500ml500ml）2 2个，试管个，试管2 2个，布氏漏斗个，布氏漏斗1 1个，个，玻璃棒玻璃棒1 1根，抽滤瓶根，抽滤瓶1 1个，移液管（个，移液管（10ml10ml）1 1根，根，洗耳球洗耳球1 1个。个。【材料】【材料】槐米花槐米花20g20g，CaCa（OHOH），镁粉，），镁粉，pHpH试纸，浓盐试纸，浓盐酸，酸，95%95%乙醇，乙醇，10%10%萘酚乙醇溶液，浓硫酸。萘酚乙醇溶液，浓硫酸。五、实验内容五、实验内容n流程图：流程图：芦丁的提取与分离流程图芦丁的提取与分离流程图操作步骤：操作步骤：n 称取称取20g20g槐花米于研钵中研成粉状物，置于槐花米于研钵中研成粉状物，置于500mL500mL烧烧杯中，加水杯中，加水300ml300ml，在搅拌下加入，在搅拌下加入石灰乳石灰乳（150ml150ml水和水和1gCa1gCa（OHOH）2 2），调节），调节ph8-9ph8-9,加热至沸，并不断搅拌，煮加热至沸，并不断搅拌，煮沸沸3030分钟后，趁热抽滤。然后用分钟后，趁热抽滤。然后用浓盐酸调节浓盐酸调节pHpH值为值为4-54-5。放置放置1-2h1-2h，使沉淀完全，抽滤，沉淀，使沉淀完全，抽滤，沉淀用水洗涤用水洗涤2-32-3次次，得，得到芦丁的粗产物。到芦丁的粗产物。n 然后将粗产物（连同抽滤用滤纸）放置在适宜大小的然后将粗产物（连同抽滤用滤纸）放置在适宜大小的培养皿上，于培养皿上，于7070条件下干燥条件下干燥30-40min30-40min，最后收集干燥产，最后收集干燥产物，进行下一步操作。物，进行下一步操作。六、实验关键及注意事项六、实验关键及注意事项1.1.加入饱和石灰水溶液既可达到碱溶液提取芦丁的加入饱和石灰水溶液既可达到碱溶液提取芦丁的目的，又可除去槐花米中大量多糖粘液质，更容目的，又可除去槐花米中大量多糖粘液质，更容易过滤。也可直接加入易过滤。也可直接加入150mL150mL水水和和1g1g氢氧化钙氢氧化钙粉末，粉末，而不必配成饱和溶液。而不必配成饱和溶液。值过低会使芦丁形成烊盐而增加了水溶性，降低收值过低会使芦丁形成烊盐而增加了水溶性，降低收率。率。七、芦丁的鉴定七、芦丁的鉴定芦丁的定性反应芦丁的定性反应 取芦丁取芦丁3-4mg3-4mg，加乙醇，加乙醇5-6ml5-6ml使其溶解，分成二份使其溶解，分成二份作下述试验：作下述试验：A.A.盐酸盐酸-镁粉反应：镁粉反应：取上述溶液取上述溶液1-2ml1-2ml，加，加2 2滴浓盐酸，滴浓盐酸，再加少许镁粉，注意观察颜色变化情况。（红色）再加少许镁粉，注意观察颜色变化情况。（红色）鉴别黄酮类化合物。鉴别黄酮类化合物。B.MolishB.Molish反应：反应：糖在浓硫酸或浓盐酸的作用下脱糖在浓硫酸或浓盐酸的作用下脱水形成糠醛及其衍生物，再与水形成糠醛及其衍生物，再与-萘酚作用形成萘酚作用形成紫红色复合物，在糖液和浓硫酸的液面间形成紫红色复合物，在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环，紫环，因此又称紫环反应。因此又称紫环反应。MolishMolish反应可以鉴定单糖的存在。反应可以鉴定单糖的存在。取上述溶液取上述溶液1-2ml1-2ml，先加入几滴浓，先加入几滴浓盐酸（硫盐酸（硫酸）酸），再加入等体积的，再加入等体积的10%-10%-萘酚乙醇溶液，萘酚乙醇溶液，注意观察两液面产生的颜色变化（紫红色）。注意观察两液面产生的颜色变化（紫红色）。八、思考题八、思考题1 1、在一开始用酸调节、在一开始用酸调节pHpH值时，如果加入的盐酸值时，如果加入的盐酸过量，过量，pHpH值小于值小于3-43-4，请问对实验会产生什么，请问对实验会产生什么后果？为什么？后果？为什么？2 2、根据这个实验，请总结出用酸碱调节法提取、根据这个实验，请总结出用酸碱调节法提取中药活性成分的适用条件及一般原理。中药活性成分的适用条件及一般原理。