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天然药物化学黄酮类ppt课件第六章第六章黄酮类化合物黄酮类化合物flavonoidsflavonoids 分类依据分类依据：A A环和环和B B环中间的三碳链的（环中间的三碳链的（1 1）氧化程度氧化程度；（；（2 2）三三碳链是否构成环状结构碳链是否构成环状结构；（；（3 3）B B环（苯基）连接的位置环（苯基）连接的位置（2 2或或3 3位）等特点。位）等特点。可将重要的天然黄酮类化合物分类如下所示。可将重要的天然黄酮类化合物分类如下所示。名称名称 三碳链部分结构三碳链部分结构 黄酮类黄酮类 (flavones)(flavones)黄酮醇黄酮醇(flavonol)(flavonol)一一.概述概述 二氢黄酮类二氢黄酮类二氢黄酮醇类二氢黄酮醇类 (flavanones)(flavanonols)花色素类花色素类 (anthocyanidins)一一.概述概述+黄烷黄烷-3-3，4-4-二醇类二醇类 双苯吡酮类双苯吡酮类(酮类酮类)(flavan-3 (flavan-3，4-diols)(xanthones)4-diols)(xanthones)黄烷黄烷-3-3-醇类醇类(flavan-3-ols)(flavan-3-ols)一一.概述概述 异黄酮类异黄酮类 二氢异黄酮类二氢异黄酮类 (isoflavones)(isoflavanones)(isoflavones)(isoflavanones)查耳酮类查耳酮类 山酮（双苯吡酮）双黄酮类山酮（双苯吡酮）双黄酮类(chalcones)一一.概述概述 二氢查耳酮类二氢查耳酮类 橙酮类（噢哢类）橙酮类（噢哢类）(dihydrochalcones)(aurones)高异黄酮类高异黄酮类 (homoisoflavones)一一.概述概述麦冬高异黄酮类麦冬高异黄酮类P114 黄黄酮酮类类化化合合物物广广泛泛分分布布于于植植物物界界中中，而而且且生生理理活活性性多多种种多多样样，引引起起了了国国内内外外的的广广泛泛重重视视，研研究究进进展展很很快快。仅仅截截止止到到19741974年年为为止止，国国内内外外已已发发表表的的黄黄酮酮类类化化合合物物共共16741674个个（主主要要是是天天然然黄黄酮酮类类，也也有有少少部部分分为为合合成成品品，其其中中苷苷元元902902个个，苷苷722722个个），并并以以黄黄酮酮醇醇类类最最为为常常见见，约约占占总总数数的的三三分分之之一一，其其次次为为黄黄酮酮类类，占占总总数数的的四四分分之之一一以以上上。至至于于双双黄黄酮酮类类多多局局限限分分布布于于裸裸子子植植物物，尤尤其其松松柏柏纲纲，银银杏杏纲纲和和凤凤尾尾纲纲等等植植物物中中。至至19801980年年，黄黄酮酮类类化化合合物物总总数数已已达达到到27212721个个，到到19931993年年统统计计，黄黄酮酮类类化化合合物物总总数已超过数已超过40004000种种。一一.概述概述黄酮类化合物的主要生理活性：黄酮类化合物的主要生理活性：对心血管系统的作用：对心血管系统的作用：葛根总黄酮、银杏叶总黄酮等具有扩张葛根总黄酮、银杏叶总黄酮等具有扩张冠状血管作用，临床可用于治疗冠心病；冠状血管作用，临床可用于治疗冠心病；芦丁、橙皮苷、芦丁、橙皮苷、d-d-儿茶素儿茶素等具有降低毛细血管脆性和异常通透性作用。等具有降低毛细血管脆性和异常通透性作用。抗肝脏毒作用：抗肝脏毒作用：水飞蓟素水飞蓟素、异水飞蓟素及次水飞蓟素等。、异水飞蓟素及次水飞蓟素等。抗炎作用：抗炎作用：杜鹃素、川陈皮素、槲皮素具止咳祛痰作用。杜鹃素、川陈皮素、槲皮素具止咳祛痰作用。雌性激素样作用：雌性激素样作用：金雀花异黄素、大豆素等异黄酮类。金雀花异黄素、大豆素等异黄酮类。抗菌及抗病毒作用：抗菌及抗病毒作用：木犀草素、黄芩苷、黄芩素以及槲皮素、木犀草素、黄芩苷、黄芩素以及槲皮素、桑色素等。桑色素等。抗肿瘤作用：抗肿瘤作用：牡荆素、桑色素、牡荆素、桑色素、d-d-儿茶素等。儿茶素等。解痉作用解痉作用：异甘草素及大豆素等具有类似罂粟碱的作用，可解异甘草素及大豆素等具有类似罂粟碱的作用，可解除平滑肌痉挛。除平滑肌痉挛。牡荆素牡荆素 木犀草素木犀草素 芹菜素芹菜素黄芩苷黄芩苷 黄酮类化合物：黄酮类化合物：O OO OH H O OO O H HO O H HO O H H1.1.黄酮类、黄酮类、黄酮醇类是世界上黄酮醇类是世界上分布最多的一种黄酮类化合物分布最多的一种黄酮类化合物芹菜素芹菜素、芫花素、木犀草素具芫花素、木犀草素具有抗菌、抗炎、降压、解痉有抗菌、抗炎、降压、解痉 一一.概述概述抗炎、祛痰止咳、降压、抗炎、祛痰止咳、降压、增加冠状动脉血流量增加冠状动脉血流量山柰酚山柰酚杨梅素杨梅素芦丁芦丁 R=R=芸香糖基芸香糖基黄酮醇类：黄酮醇类：一一.概述概述 而榕碱而榕碱(ficine)(ficine)及异榕碱及异榕碱(isoficine)(isoficine)则则为为生物碱型黄酮生物碱型黄酮。一一.概述概述2.2.二氢黄酮、二氢黄酮醇二氢黄酮、二氢黄酮醇甘草苷、甘草素、补骨脂甲素（补骨脂黄酮）甘草苷、甘草素、补骨脂甲素（补骨脂黄酮）P113P113 少数黄酮类化合物结构较为复杂，如水飞蓟素少数黄酮类化合物结构较为复杂，如水飞蓟素(silybin)(silybin)为黄酮木脂体类化合物。为黄酮木脂体类化合物。黄酮木脂素黄酮木脂素橙皮素橙皮素 R=H 橙皮苷橙皮苷 R=芸香糖基芸香糖基 甘草素甘草素 R=H R=H 甘草苷甘草苷 R=glcR=glc二氢黄酮二氢黄酮二氢槲皮素二氢槲皮素二氢桑色素二氢桑色素 黄柏素黄柏素-7-O-7-O-葡萄糖苷葡萄糖苷二氢黄酮醇二氢黄酮醇一一.概述概述OOHOHOOHHOOH3.3.异黄酮、二氢异黄酮类异黄酮、二氢异黄酮类 一一.概述概述 天然黄酮类天然黄酮类C-C-糖甙糖甙（C-glycosidesC-glycosides），如），如葛根黄素葛根黄素（PuerarinPuerarin），），葛根黄素木糖甙葛根黄素木糖甙(Puerarin xyloside)(Puerarin xyloside)等，为中药等，为中药葛根中的扩冠有效成分葛根中的扩冠有效成分。一一.概述概述Puerarin（葛根素葛根素）：）：R1R2R4R5H，R3Glc3-OH-puerarin：R1R2R5H，R3Glc,R4=OHDaidzin（大豆苷）（大豆苷）：R1R3R4R5H，R2GlcDaidzein大豆苷元大豆苷元(素素）：R1R3R4R5R2H芒果苷：芒果苷：R1R2R3R4H，R5Me4.4.二氢异黄酮二氢异黄酮紫檀素紫檀素 R=CHR=CH3 3 三叶豆紫檀苷三叶豆紫檀苷 R=glcR=glc高丽槐素高丽槐素 R=HR=H 一一.概述概述一一.概述概述5.5.查耳酮、二氢查耳酮类查耳酮、二氢查耳酮类查耳酮从化学结构上可视为是由查耳酮从化学结构上可视为是由苯甲醛与苯乙酮苯甲醛与苯乙酮类缩合而成类缩合而成的一类化合物的一类化合物。二氢黄酮二氢黄酮2 2-羟基查耳酮羟基查耳酮梨根苷梨根苷 新红花苷新红花苷(无色）无色）红花苷红花苷(黄色）黄色）醌式红花苷醌式红花苷(红色）红色）红花的花中含红花苷、新红花苷和醌式红花苷。红花的花中含红花苷、新红花苷和醌式红花苷。OOOHOHOHOglcOHOOHOHOHglcOOHOOOOHOglcSO2OH-花色苷一般用花色苷一般用20%20%盐酸煮沸盐酸煮沸3 3分钟即可水解生成苷元和糖类。分钟即可水解生成苷元和糖类。6.6.花色素类：花色素类：矢车菊苷元矢车菊苷元 R R1 1=OH R=OH R2 2=H=H 飞燕草苷元（素）飞燕草苷元（素）R R1=R=R2=OH=OH天竺葵苷元天竺葵苷元 R R1 1=R=R2 2=H=H 一一.概述概述7.7.黄烷醇类：黄烷醇类：此类化合物在植物体内可作此类化合物在植物体内可作鞣质的前体鞣质的前体，常以分子聚合的形式，常以分子聚合的形式而生成鞣质。而生成鞣质。儿茶素类、白矢车菊苷元等，有儿茶素类、白矢车菊苷元等，有收敛、生肌收敛、生肌作用作用。（1 1）黄烷）黄烷-3-3-醇类醇类 又称为儿茶素类。又称为儿茶素类。黄烷黄烷-3-3-醇醇黄烷黄烷-3-3，4-4-二醇二醇（+）儿茶素）儿茶素 （）表儿茶素（）表儿茶素 一一.概述概述（2 2）黄烷）黄烷-3-3，4-4-二醇类二醇类 又称为无色花色素类又称为无色花色素类 无色矢车菊素无色矢车菊素 R R1 1=OH R=OH R2 2=H=H 无色飞燕草素无色飞燕草素 R R1 1=R=R2 2=OH =OH 无色天竺葵素无色天竺葵素 R R1 1=R=R2 2=H=H一一.概述概述8.8.橙酮类（噢哢类橙酮类（噢哢类）橙酮类又称噢哢类，其结构特点是橙酮类又称噢哢类，其结构特点是C C环为含氧五元环环为含氧五元环，它，它的定位母核碳原子的编号也与其他黄酮类不同。的定位母核碳原子的编号也与其他黄酮类不同。硫磺菊素（黄波斯菊素）硫磺菊素（黄波斯菊素）C1一一.概述概述9.9.高异黄酮、山酮（双苯吡酮）高异黄酮、山酮（双苯吡酮）高异黄酮类高异黄酮类异芒果素异芒果素山酮类山酮类一一.概述概述10.10.双黄酮类（银杏素）双黄酮类（银杏素）银杏双黄酮具有解痉、降压和扩张冠状血管作用，临床上用银杏双黄酮具有解痉、降压和扩张冠状血管作用，临床上用于治疗冠心病。于治疗冠心病。银杏素银杏素 R R1 1=CH=CH3 3 R R2 2=H=H异银杏素异银杏素 R R1 1=H R=H R2 2=CH=CH3 3白果素白果素 R R1 1=H R2=H=H R2=H扁柏黄酮扁柏黄酮 一一.概述概述 天天然然黄黄酮酮甙甙类类化化合合物物，由由于于糖糖的的种种类类、数数量量、联联接接位位置置及及联联接接方方式式不不同同，可可以以组组成成各各种种各各样样的的黄酮甙类：黄酮甙类：单糖类：单糖类：D-D-葡葡萄萄糖糖、D-D-半半乳乳糖糖、D-D-木木糖糖、L-L-鼠鼠李李糖糖、L-L-阿阿拉拉伯糖及伯糖及D-D-葡萄糖醛酸等。葡萄糖醛酸等。双糖类：双糖类：槐槐糖糖（glcglc 12glc12glc）、龙龙胆胆二二糖糖(glc(glc 16glc)16glc)、芸芸香香糖糖(rh(rh 16glc)16glc)、新新橙橙皮皮糖糖（rhrh 12glc12glc）、刺刺槐二糖（槐二糖（rhrh 16gal16gal）等。）等。一一.概述概述 叁糖类：叁糖类：龙龙胆胆三三糖糖(glc(glc 1 16glc6glc 1 12fru)2fru)、槐槐三三糖糖(glc(glc 1 12glc2glc 1 12glc)2glc)等。等。酰化糖类：酰化糖类：2-22-2酰酰葡葡萄萄糖糖、咖咖啡啡酰酰基基葡葡萄萄糖糖(caffeoylglucose)(caffeoylglucose)等。等。黄黄酮酮甙甙中中糖糖的的联联接接位位置置与与甙甙元元的的结结构构类类型型有有关关。如如黄黄酮酮醇醇类类常常形形成成3-3-，7-7-，3 3-，4 4-单单糖糖甙甙，或或3 3，7-7-，3 3，4 4-及及7 7，4 4-双糖链甙等。双糖链甙等。一一.概述概述二、黄酮类化合物的性质二、黄酮类化合物的性质 与颜色反应与颜色反应一、黄酮类化合物的概述一、黄酮类化合物的概述三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第五章第五章 黄酮类化合物黄酮类化合物 1.1.性状性状 黄黄酮酮类类化化合合物物多多为为晶晶状状固固体体，少少数数（如如黄黄酮酮甙甙类类）为无定形粉末。为无定形粉末。2.2.旋光性旋光性 苷苷元元中中，二二氢氢黄黄酮酮、二二氢氢黄黄酮酮醇醇、黄黄烷烷及及黄黄烷烷醇醇具具有有手手性性碳碳，具具旋旋光光性性，其其余余黄黄酮酮类类无无旋旋光光性性。苷苷类类结构中含糖的部分结构，故均有结构中含糖的部分结构，故均有旋光性，且多为左旋旋光性，且多为左旋。二二.黄酮类化合物的性质与颜色反应黄酮类化合物的性质与颜色反应 二氢黄酮类二氢黄酮类 二氢黄酮醇类二氢黄酮醇类(flavanones)(flavanones)(flavanonols)(flavanonols)黄烷黄烷-3,4-3,4-二醇类二醇类 (flavan-3,4-diols(flavan-3,4-diols)二二.黄酮类化合物的性质与颜色反应黄酮类化合物的性质与颜色反应 黄烷黄烷-3-3-醇类醇类 (flavan-3-ols(flavan-3-ols)二二.黄酮类化合物的性质与颜色反应黄酮类化合物的性质与颜色反应HO-3.3.颜色颜色 黄酮的黄酮的色原酮部分无色色原酮部分无色，在，在2-2-位上引入苯环后，即形成交叉位上引入苯环后，即形成交叉共轭体系，使共轭链延长，因而呈现出颜色。共轭体系，使共轭链延长，因而呈现出颜色。黄酮、黄酮醇及黄酮、黄酮醇及其苷类多显其苷类多显灰黄灰黄黄色黄色，查耳酮为，查耳酮为黄黄橙黄色橙黄色，异黄酮类显，异黄酮类显微微黄色黄色，二氢黄酮、二氢黄酮醇二氢黄酮、二氢黄酮醇不显色不显色。在上述黄酮、黄酮醇分子中，尤其在在上述黄酮、黄酮醇分子中，尤其在7-7-位及位及4 4-位引入位引入-OH-OH及及-OCH-OCH3 3等等供电基后供电基后，化合物的颜色加深，但在其它位置引入，化合物的颜色加深，但在其它位置引入OHOH、OCHOCH3 3等供电基影响较小。等供电基影响较小。花色甙及其甙元的颜色随花色甙及其甙元的颜色随pHpH不同而改变，一般显红色不同而改变，一般显红色(pHpH 7 7)、紫色、紫色(pH8.5pH8.5)、蓝色蓝色(pHpH 8.58.5)等颜色。等颜色。二二.黄酮类化合物的性质与颜色反应黄酮类化合物的性质与颜色反应 4.4.溶解度溶解度 一一般般来来说说，游游离离苷苷元元难难溶溶或或不不溶溶于于水水，易易溶溶于于甲甲醇醇、乙乙醇醇、醋醋酸酸乙乙酯酯、乙乙醚醚等等有有机机溶溶剂剂及及稀稀碱碱液液中中。花花色色苷苷元元（花花青青素素）类类以以离离子子形形式式存存在在，水水溶溶度度较较大大。黄酮类苷元分子中羟基数越多，水中的溶解度越大。黄酮类苷元分子中羟基数越多，水中的溶解度越大。黄黄酮酮苷苷类类，水水溶溶性性比比相相应应苷苷元元为为大大；糖糖链链越越长长，则则水水溶溶度度越越大大，一一般般易易溶溶于于水水、甲甲醇醇、乙乙醇醇等等强强极极性性溶剂中，但难溶或不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。溶剂中，但难溶或不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。二二.黄酮类化合物的性质与颜色反应黄酮类化合物的性质与颜色反应 5.5.酸碱性酸碱性酸性：酸性：黄黄酮酮类类化化合合物物因因分分子子中中多多含含有有游游离离酚酚羟羟基基，故故显显酸酸性性，可可溶溶于于碱碱性性水水溶溶液液、吡吡啶啶、甲甲酰酰胺胺及及二二甲甲基甲酰胺。基甲酰胺。酸性强弱顺序依次为：酸性强弱顺序依次为：7 7，4 4-二二OH OH 7-7-或或4 4-OH-OH 一般酚一般酚OH OH 5-OH5-OH 溶于碳酸氢钠溶于碳酸氢钠 溶于碳酸钠溶于碳酸钠 溶于氢氧化钠溶于氢氧化钠此性质可用于提取、分离及鉴定工作此性质可用于提取、分离及鉴定工作。二二.黄酮类化合物的性质与颜色反应黄酮类化合物的性质与颜色反应碱性：碱性：黄黄酮酮类类化化合合物物分分子子中中-吡吡喃喃酮酮环环上上的的1-1-位位氧氧原原子子，可可与与强强无无机机酸酸，如如浓浓硫硫酸酸、盐盐酸酸等等生生成成羊羊盐盐，该该羊羊盐极不稳定，加水后即分解。盐极不稳定，加水后即分解。可用于黄酮类化合物结构类型的初步鉴别。可用于黄酮类化合物结构类型的初步鉴别。二二.黄酮类化合物的性质与颜色反应黄酮类化合物的性质与颜色反应 6.6.显色反应：显色反应：1 1）盐酸盐酸-镁粉（或锌粉）反应：镁粉（或锌粉）反应：多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物显化合物显橙红橙红紫红色紫红色，少数显，少数显紫紫蓝色蓝色。查耳查耳酮、橙酮、儿茶素类酮、橙酮、儿茶素类不显色不显色。异黄酮类一般不显色。异黄酮类一般不显色。2 2）四氢硼钠（钾）反应：四氢硼钠（钾）反应：NaBHNaBH4 4是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂。与二氢黄酮类化合物产生种还原剂。与二氢黄酮类化合物产生红红紫色紫色。其它黄酮类化合物均不显色。其它黄酮类化合物均不显色。二二.黄酮类化合物的性质与颜色反应黄酮类化合物的性质与颜色反应与与1%1%三氯化铝或硝酸铝溶液反应机理：三氯化铝或硝酸铝溶液反应机理：5-5-羟基黄酮铝络合物羟基黄酮铝络合物 黄酮醇铝络合物黄酮醇铝络合物 AlAlO OO O O O O OO OO O AlAl2 2+2 2+3 3）铝盐：铝盐：生成的络合物多为生成的络合物多为黄色黄色（max=415nmmax=415nm），并），并有有荧光荧光，可用于定性及定量分析。常用试剂为可用于定性及定量分析。常用试剂为1%1%三三氯化铝或硝酸铝溶液。氯化铝或硝酸铝溶液。4 4）铅盐：铅盐：常常用用1%1%醋醋酸酸铅铅及及碱碱式式醋醋酸酸铅铅水水溶溶液液，碱碱式式醋醋酸酸铅铅反应能力更强，可生成反应能力更强，可生成黄黄红色沉淀红色沉淀。5 5）锆盐：锆盐：多多用用2%2%二二氯氯氧氧化化锆锆（ZrOClZrOCl2 2）甲甲醇醇溶溶液液。黄黄酮酮类类化化合合物物分分子子中中有有游游离离的的3-3-或或5-OH5-OH存存在在时时，均均可可反反应应生生成成黄色黄色的锆络合物。的锆络合物。3-OH3-OH，4-4-酮酮基基络络合合物物的的稳稳定定性性 5-OH5-OH，4-4-酮酮基基络络合物（仅合物（仅二氢黄酮醇除外二氢黄酮醇除外）。）。二二.黄酮类化合物的性质与颜色反应黄酮类化合物的性质与颜色反应与与ZrOClZrOCl2 2甲醇溶液反应机理与用途：甲醇溶液反应机理与用途：用途：区别黄酮类化合物分子中用途：区别黄酮类化合物分子中C3C3、C5-OHC5-OH。再加入。再加入2%2%的枸椽酸的枸椽酸甲醇溶液，甲醇溶液，C5C5OHOH黄酮显著褪色，黄酮显著褪色，C3C3OHOH黄酮溶液仍呈黄酮溶液仍呈鲜黄色鲜黄色。现象：锆盐络合物斑点多呈黄色并有荧光。现象：锆盐络合物斑点多呈黄色并有荧光。6）镁盐：镁盐：二氢黄酮、二氢黄酮醇类与醋酸镁的甲醇溶液，二氢黄酮、二氢黄酮醇类与醋酸镁的甲醇溶液，加热可显加热可显天蓝色荧光，若具有天蓝色荧光，若具有C5-OHC5-OH，色泽更为明显，色泽更为明显。而黄酮、黄酮醇及异黄酮类等则显而黄酮、黄酮醇及异黄酮类等则显黄黄橙黄橙黄 褐色。褐色。（纸色谱鉴定纸色谱鉴定）7）氯化锶（氯化锶（SrCl2）：）：在在氨性甲醇氨性甲醇溶液中，可与分子中具有邻二酚羟溶液中，可与分子中具有邻二酚羟基结构的黄酮类化合物生成基结构的黄酮类化合物生成绿色绿色棕色乃至黑色沉淀棕色乃至黑色沉淀。二二.黄酮类化合物的性质与颜色反应黄酮类化合物的性质与颜色反应机理和现象：绿色至棕色乃至黑色沉淀机理和现象：绿色至棕色乃至黑色沉淀用途：用途：鉴别邻二酚羟基鉴别邻二酚羟基。8）三氯化铁反应：三氯化铁反应：多多数数黄黄酮酮类类化化合合物物因因分分子子中中含含有有游游离离酚酚羟羟基基，与与三三氯氯化化铁铁水水溶溶液液或或醇醇溶溶液液可可产产生生正正反反应应，呈呈现现颜颜色色；当当含含有有氢键缔合的酚羟基时，颜色更明显氢键缔合的酚羟基时，颜色更明显。OOOHOHOHOHOHOHSrOOOOHOOHSrOHHO+2-212+9）硼酸显色反应硼酸显色反应 ：在无机酸或有机酸存在条件下，在无机酸或有机酸存在条件下，5-5-羟基黄酮及羟基黄酮及2-羟基查耳酮羟基查耳酮可与硼酸反应，呈可与硼酸反应，呈亮黄色亮黄色。二二.黄酮类化合物的性质与颜色反应黄酮类化合物的性质与颜色反应在酸性条件下，可与硼酸反应，产生在酸性条件下，可与硼酸反应，产生亮黄色亮黄色；一般在草酸存在下显黄色并具有一般在草酸存在下显黄色并具有绿色荧光绿色荧光；在枸橼酸丙酮存在的条件下，则只在枸橼酸丙酮存在的条件下，则只显黄色而无荧光显黄色而无荧光。用途：用途：5-5-羟基黄酮或羟基黄酮或2-2-羟基查耳酮类化合物呈阳性。羟基查耳酮类化合物呈阳性。1010）碱性试剂显色反应：碱性试剂显色反应：在日光及紫外光下，通过纸斑反应，观察样品用氨蒸在日光及紫外光下，通过纸斑反应，观察样品用氨蒸气和其他碱性试剂处理后的色变深的情况。气和其他碱性试剂处理后的色变深的情况。当分子当分子中有中有邻二酚羟邻二酚羟基取代或基取代或3 3，4 4-二羟基二羟基取代时，在碱取代时，在碱液中很快氧化，最后生成液中很快氧化，最后生成绿棕色沉淀绿棕色沉淀；黄酮类在碱黄酮类在碱性溶液中先呈黄色，通入空气变为绿色。性溶液中先呈黄色，通入空气变为绿色。二二.黄酮类化合物的性质黄酮类化合物的性质 与颜色反应与颜色反应一一.黄酮类化合物的概述黄酮类化合物的概述三三.黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离四四.黄酮类化合物的波谱黄酮类化合物的波谱第五章第五章 黄酮类化合物黄酮类化合物 （一）提取（一）提取黄酮苷类黄酮苷类以及极性稍大的苷元（如羟基黄酮等），以及极性稍大的苷元（如羟基黄酮等），一般可用一般可用丙酮、醋酸乙酯、乙醇丙酮、醋酸乙酯、乙醇提取。提取。一些多糖苷类可一些多糖苷类可用沸水提取用沸水提取。在提取花青素类化合物时，可加入少量酸在提取花青素类化合物时，可加入少量酸（0.1%0.1%盐酸，应当慎用，避免发生水解）。盐酸，应当慎用，避免发生水解）。大多大多数黄酮数黄酮苷元苷元宜用用宜用用氯仿、乙醚、醋酸乙酯氯仿、乙醚、醋酸乙酯等中极性溶剂提取，等中极性溶剂提取，而对多甲氧基黄酮类游离苷元，甚至可用而对多甲氧基黄酮类游离苷元，甚至可用苯苯等低极性溶等低极性溶剂进行提取。剂进行提取。三三.黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离 对得到的粗提物可进行下列对得到的粗提物可进行下列精制处理精制处理，常用方法有：，常用方法有：（1 1）溶剂萃取法）溶剂萃取法 利用黄酮类化合物与混入的杂质极性不同，选利用黄酮类化合物与混入的杂质极性不同，选用不同溶剂进行用不同溶剂进行萃取萃取可达到精制纯化目的。可达到精制纯化目的。例如植例如植物叶子的醇浸液，可用物叶子的醇浸液，可用石油醚石油醚处理，以便除去叶绿处理，以便除去叶绿素、胡萝卜素等脂溶性色素。素、胡萝卜素等脂溶性色素。而某些药料水溶液则而某些药料水溶液则可加入多倍量可加入多倍量浓醇浓醇，以沉淀除去蛋白质、多糖类等，以沉淀除去蛋白质、多糖类等水溶性杂质。水溶性杂质。三三.黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离 有时溶剂萃取过程也可以用有时溶剂萃取过程也可以用逆流分配法逆流分配法连续进行。连续进行。常用的溶剂系统有：常用的溶剂系统有：水水-醋酸乙酯，正丁醇醋酸乙酯，正丁醇-石油醚石油醚等。等。溶剂萃取过程在除去杂质的同时，往往还可以收溶剂萃取过程在除去杂质的同时，往往还可以收到分离到分离苷和苷元苷和苷元或极性苷元与非极性苷元的效果或极性苷元与非极性苷元的效果。（2 2）碱提取酸沉淀法）碱提取酸沉淀法 黄酮苷类虽有一定极性，可溶于水，但却黄酮苷类虽有一定极性，可溶于水，但却难溶于难溶于酸性水，易溶于碱性水，酸性水，易溶于碱性水，故可用碱性水提取，再于碱故可用碱性水提取，再于碱水提取液中加入酸，水提取液中加入酸，黄酮苷类即可沉淀析出黄酮苷类即可沉淀析出。此法简。此法简便易行，如便易行，如芦丁、橙皮甙、黄芩甙芦丁、橙皮甙、黄芩甙的提取都应用了这的提取都应用了这个方法。个方法。三三.黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离 以从槐米中提取芦丁为例说明该法的操作过程。以从槐米中提取芦丁为例说明该法的操作过程。槐槐米米（槐槐树树Sophora Sophora japonica japonica L L花花蕾蕾）加加约约6 6倍倍量量水水，煮煮沸沸，在在搅搅拌拌下下缓缓缓缓加加入入石石灰灰乳乳至至pH8pH89 9，在在此此pHpH条条件件下下微微沸沸20203030分分钟钟，趁趁热热过过滤滤，残残渣渣同同上上再再加加4 4倍倍水水煎煎1 1次次，趁趁热热抽抽滤滤。合合并并滤滤液液在在60607070下下，用用浓浓盐盐酸酸调调至至pHpH为为5 5，搅搅匀匀，静静置置2424小小时时，抽抽滤滤。沉沉淀淀物物水水洗洗至至中中性性，6060干干燥燥得得芦芦丁丁粗粗品品，于于水中重结晶，水中重结晶，70708080干燥得干燥得芦丁纯品芦丁纯品。三三.黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离 在用碱酸法进行提取纯化时，应当注意所用在用碱酸法进行提取纯化时，应当注意所用碱液浓碱液浓度不宜过高度不宜过高，以免在强碱性下，尤其加热时破坏黄酮母，以免在强碱性下，尤其加热时破坏黄酮母核。在加酸酸化时，核。在加酸酸化时，酸性也不宜过强酸性也不宜过强，以免生成，以免生成羊盐羊盐，致使析出的黄酮类化合物又重新溶解，降低产品收率。致使析出的黄酮类化合物又重新溶解，降低产品收率。当药材中含有大量果胶、粘液等不溶性杂质时，如当药材中含有大量果胶、粘液等不溶性杂质时，如花、果类药材，宜用花、果类药材，宜用石灰乳或石灰水石灰乳或石灰水代替其它碱性水溶代替其它碱性水溶液进行提取，以使上述含酚羟基的杂质生成钙盐沉淀，液进行提取，以使上述含酚羟基的杂质生成钙盐沉淀，不致溶出。这也有利于黄酮类化合物的纯化处理。不致溶出。这也有利于黄酮类化合物的纯化处理。三三.黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离 （3 3）碳粉吸附法）碳粉吸附法 主要适于苷类的精制工作。主要适于苷类的精制工作。通常，在植物的通常，在植物的乙醇粗提取物中，乙醇粗提取物中，分次加入活性炭分次加入活性炭，搅拌，静置，直，搅拌，静置，直至定性检查上清液无黄酮反应时为止。过滤，收集吸至定性检查上清液无黄酮反应时为止。过滤，收集吸苷的炭末，依次用苷的炭末，依次用沸甲醇、沸水、沸甲醇、沸水、7%7%酚酚/水、水、15%15%酚酚/醇醇溶液进行洗脱，各部分洗脱液进行定性检查（或用溶液进行洗脱，各部分洗脱液进行定性检查（或用PCPC鉴定）。通过对黄酮类化合物的研究证明，大部分黄鉴定）。通过对黄酮类化合物的研究证明，大部分黄酮甙类可用酮甙类可用7%7%酚酚/水水洗下。洗脱液经减压蒸发浓缩，再洗下。洗脱液经减压蒸发浓缩，再用用乙醚振摇除去残留的酚乙醚振摇除去残留的酚，余下水层减压浓缩即得较，余下水层减压浓缩即得较纯的黄酮苷类成分。纯的黄酮苷类成分。三三.黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离 （二）分离二）分离 现将较常用的方法介绍如下：现将较常用的方法介绍如下：1.1.柱层析法柱层析法 分离黄酮类化合物常用的吸附剂或载体有分离黄酮类化合物常用的吸附剂或载体有硅胶硅胶、聚聚酰胺酰胺及及纤维素粉纤维素粉等。等。此外，也有用此外，也有用氧化铝氧化铝、氧化镁氧化镁及硅及硅藻土等。藻土等。（1 1）硅胶柱层析）硅胶柱层析：此法应用范围最广，此法应用范围最广，主要适于分主要适于分离异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及高度甲基化（或乙离异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及高度甲基化（或乙酰化）的黄酮及黄酮醇类酰化）的黄酮及黄酮醇类。少数情况下，在加水去活化少数情况下，在加水去活化后也可用于分离极性较大的化合物，如多羟基黄酮醇及后也可用于分离极性较大的化合物，如多羟基黄酮醇及其苷类等。其苷类等。三三.黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离（2 2）聚酰胺柱层析：）聚酰胺柱层析：对分离黄酮类化合物来说，对分离黄酮类化合物来说，聚酰聚酰胺是较为理想的吸附剂胺是较为理想的吸附剂。其吸附强度主要取决于黄酮类。其吸附强度主要取决于黄酮类化合物分子中羟基的数目与位置及溶剂与黄酮类化合物化合物分子中羟基的数目与位置及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。聚酰胺柱层析可用于分离各种类型的黄酮类化合物，聚酰胺柱层析可用于分离各种类型的黄酮类化合物，包括苷及苷元、查耳酮与二氢黄酮等包括苷及苷元、查耳酮与二氢黄酮等 黄酮类化合物从聚酰胺柱上洗脱时大体有下列规律：黄酮类化合物从聚酰胺柱上洗脱时大体有下列规律：苷元相同，洗脱先后顺序一般是：苷元相同，洗脱先后顺序一般是：叁糖甙叁糖甙 双糖甙双糖甙 单糖甙单糖甙 甙元甙元母核母核上增加羟基，洗脱速度即相应减缓上增加羟基，洗脱速度即相应减缓 三三.黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离 不同类型黄酮化合物，先后流出顺序一般是：不同类型黄酮化合物，先后流出顺序一般是：异黄酮异黄酮 二氢黄酮醇二氢黄酮醇 黄酮黄酮 黄酮醇黄酮醇分子中芳香核、共轭双键多者则吸附力强，故查耳分子中芳香核、共轭双键多者则吸附力强，故查耳酮往往比相应的二氢黄酮难于洗脱。上述规律也适用酮往往比相应的二氢黄酮难于洗脱。上述规律也适用于黄酮类化合物在聚酰胺薄层上的行为。于黄酮类化合物在聚酰胺薄层上的行为。（3 3）葡聚糖疑胶）葡聚糖疑胶(Sephadex gel)(Sephadex gel)柱层析柱层析：对于黄酮类化合物的分离，主要用两种型号的凝胶：对于黄酮类化合物的分离，主要用两种型号的凝胶：Sephadex-GSephadex-G型及型及Sephadex-LH-20Sephadex-LH-20型型。三三.黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离 葡聚糖凝胶分离黄酮类化合物的机理是：葡聚糖凝胶分离黄酮类化合物的机理是：分离游离黄酮时，主要靠吸附作用。凝胶对黄酮类分离游离黄酮时，主要靠吸附作用。凝胶对黄酮类化合物的吸附程度取决于游离酚羟基的数目。化合物的吸附程度取决于游离酚羟基的数目。但分离黄但分离黄酮苷时，则分子筛的属性起主导作用。酮苷时，则分子筛的属性起主导作用。在洗脱时，在洗脱时，黄酮黄酮苷类大体上是按分子量由大到小的顺序流出柱体。苷类大体上是按分子量由大到小的顺序流出柱体。葡聚葡聚糖凝胶柱层析中常用的洗脱剂有：糖凝胶柱层析中常用的洗脱剂有：碱性水溶液（如碱性水溶液（如0.1mol/LNH0.1mol/LNH3 3.H.H2 2O O，含盐水溶液，含盐水溶液(0.5mol/L NaCl(0.5mol/L NaCl等等)。)醇及含水醇，如甲醇，甲醇醇及含水醇，如甲醇，甲醇-水（不同比例），丁醇水（不同比例），丁醇-甲醇甲醇(3:1)(3:1)、乙醇等。、乙醇等。其它溶剂：如含水丙酮、甲醇其它溶剂：如含水丙酮、甲醇-氯仿等。氯仿等。三三.黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离 2.梯度梯度pHpH萃取法萃取法 梯度梯度pHpH萃取法适合于酸性强弱不同的黄酮苷元的萃取法适合于酸性强弱不同的黄酮苷元的分离。分离。根据黄酮类苷元酚羟基数目及位置不同其酸性根据黄酮类苷元酚羟基数目及位置不同其酸性强弱也不同的性质，可以将混合物溶于有机溶剂（如强弱也不同的性质，可以将混合物溶于有机溶剂（如乙醚）后，依次用乙醚）后，依次用5%NaHCO5%NaHCO3 3、5%Na5%Na2 2COCO3 3、0.2%NaOH0.2%NaOH及及4%NaOH4%NaOH水溶液萃取，来达到分离的目的。水溶液萃取，来达到分离的目的。酸性酸性：7,47,4-二二OH OH 7-7-或或4 4-OH -OH 一般一般OH OH 5-5-OHOH溶于溶于：5%NaHCO5%NaHCO3 3 5%Na 5%Na2 2COCO3 3 0.2%NaOH 4%NaOH0.2%NaOH 4%NaOH 三三.黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离 3.3.根据分子中某些特定官能团进行分离根据分子中某些特定官能团进行分离 在黄酮类成分的混合物中，具有邻二酚羟基成分在黄酮类成分的混合物中，具有邻二酚羟基成分与无此结构的成分，可用铅盐法分离。与无此结构的成分，可用铅盐法分离。有邻二酚羟基有邻二酚羟基的成分可被醋酸铅沉淀，的成分可被醋酸铅沉淀，不具有邻二酚羟基的成分可不具有邻二酚羟基的成分可被碱式醋酸铅沉淀被碱式醋酸铅沉淀，达到分离的目的。，达到分离的目的。与黄酮类成分混存的其它杂质，如分子中有羧基与黄酮类成分混存的其它杂质，如分子中有羧基（如树胶、粘液、果胶、有机酸、蛋白质、氨基酸等）（如树胶、粘液、果胶、有机酸、蛋白质、氨基酸等）或邻二酚羟基（如鞣质等）时，也可为醋酸铅沉淀达或邻二酚羟基（如鞣质等）时，也可为醋酸铅沉淀达到去杂目的。到去杂目的。三三.黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离 黄酮类化合物与铅盐生成的沉淀，过滤后按常法悬黄酮类化合物与铅盐生成的沉淀，过滤后按常法悬浮在乙醇中，通入浮在乙醇中，通入H H2 2S S进行复分解，滤除硫化铅沉淀，进行复分解，滤除硫化铅沉淀，滤液中可得到黄酮类化合物。但初生成的滤液中可得到黄酮类化合物。但初生成的PbSPbS沉淀具有沉淀具有较高的吸附性，因此现多不主张用较高的吸附性，因此现多不主张用H H2 2S S脱铅，而用硫酸脱铅，而用硫酸盐或磷酸盐，或用阳离子交换树脂脱铅。盐或磷酸盐，或用阳离子交换树脂脱铅。有邻二酚羟有邻二酚羟基的黄酮可与硼酸络合，生成物易溶于水，借此也可基的黄酮可与硼酸络合，生成物易溶于水，借此也可与不具上述结构的黄酮类化合物相互分离。与不具上述结构的黄酮类化合物相互分离。在实际工作中，常将上述柱层析法与各种经典方在实际工作中，常将上述柱层析法与各种经典方法相互配合应用，以达到较好的分离效果。法相互配合应用，以达到较好的分离效果。三三.黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离二二.黄酮类化合物的性质黄酮类化合物的性质 与颜色反应与颜色反应一一.黄酮类化合物的概述黄酮类化合物的概述三三.黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离四四.黄黄酮类化合物的波谱酮类化合物的波谱第五章第五章 黄酮类化合物黄酮类化合物 1.1.黄酮类化合物在甲醇中的黄酮类化合物在甲醇中的UVUV谱特征谱特征溶剂：溶剂：MeOHMeOH四四.黄酮类化合物的波谱黄酮类化合物的波谱+_ _OO_ _+OO带带:200-280nm:200-280nm带带I:300-400nmI:300-400nm黄酮黄酮B B环上增加羟基环上增加羟基等供电子基团，将使紫外光谱等供电子基团，将使紫外光谱带带向红位移向红位移；黄酮黄酮A A环上增加羟基环上增加羟基等供电子基团，将使紫外光谱等供电子基团，将使紫外光谱带带向红位移；向红位移；黄酮黄酮A A环上增加酚羟基，将使环上增加酚羟基，将使A A环上氢质子共振信号向环上氢质子共振信号向高场方向位移；高场方向位移；黄酮母核上黄酮母核上酚羟基甲基化或苷化后酚羟基甲基化或苷化后，将使，将使相应的紫外相应的紫外吸收带吸收带向紫位移；向紫位移；黄酮黄酮7-OH7-OH成苷后，将使邻位成苷后，将使邻位H-6H-6、H-8H-8质子共振信号向质子共振信号向低位方向位移。低位方向位移。1.1.黄酮类化合物在甲醇中的黄酮类化合物在甲醇中的UVUV谱特征谱特征 MeOH+NaOMe:MeOH+NaOMe:带带I I 红移红移40-60nm40-60nm NaOAcNaOAc（熔融）（熔融）:带带I I 红移红移40-65nm40-65nm 强度下降强度下降四四.黄酮类化合物的波谱黄酮类化合物的波谱 1.黄酮类化合物在甲醇中的黄酮类化合物在甲醇中的UV谱特征谱特征1.NaOAc1.NaOAc（未熔融）（未熔融）:带带红移红移5-20nm5-20nm四四.黄酮类化合物的波谱黄酮类化合物的波谱AlCl3/HCl 谱图谱图AlClAlCl3 3 ：无邻二酚羟基。：无邻二酚羟基。AlClAlCl3 3/HCl/HCl 谱图谱图AlClAlCl3 3 ：B B环环有邻二酚羟基：有邻二酚羟基：带带I I 紫移紫移30-40nm30-40nm四四.黄酮类化合物的波谱黄酮类化合物的波谱AlClAlCl3 3/HCl/HCl谱图谱图AlClAlCl3 3：示黄酮（醇）：示黄酮（醇）无无邻二酚羟基邻二酚羟基AlClAlCl3 3/HCl/