生殖器疱疹和尖锐湿疣的检测技术优秀PPT.pptx

一、生殖器疱疹一、生殖器疱疹朱参胜朱参胜 主任技师主任技师陕西省皮肤性病防治所陕西省皮肤性病防治所陕西省性病中心试验室陕西省性病中心试验室2022/11/4单纯疱疹病毒（HSV）引起单纯疱疹病毒（HSV)，大小：150-200nm；DNA病毒；20面核衣壳；胞膜；衣壳蛋白感染生殖器、肛门复发，无彻底治愈的方法具有嗜感觉神经节，形成潜藏感染状态检测方法：细胞培育、核酸检测、干脆免疫荧光、型特异性血清型抗体检测法2022/11/42022/11/4胞膜糖蛋白：胞膜糖蛋白：HSV有10-11种特异性糖蛋白抗原是细胞和体液免疫的主要靶标也是预防和治疗HSV感染的亚单位疫苗或DNA疫苗的候选基因gB,gC,gD,gE,gF,gG,gH,gI,gJ,gL,gM其中gG是型特异性糖蛋白，具有型特异性抗原确定簇，诱导产生特异性抗体HSV抗原型：HSV1和HSV22022/11/42022/11/42022/11/4HSV-2HSV-2引起的生殖器和口腔疱疹引起的生殖器和口腔疱疹2013.8陕西省皮肤性病防治所 朱参胜2022/11/42022/11/4HSV-1和HSV-2同源性高达50感染方式与临床表现不同 HSV-1：主要上半身皮肤和粘膜（口唇、咽、眼等）疱疹，严峻者疱疹性脑炎，STI达10-40%；HSV-2：主要生殖器感染（80），偶可发生口腔及其四周感染。HSV-1复发少，HSV-2复发高HSVHSV感染的临床表现感染的临床表现一、疱疹：一、疱疹：10-20%10-20%1.1.初发疱疹：初发疱疹：原发原发 ：无病史且：无病史且HSV1/2HSV1/2抗体阴性抗体阴性 非原发非原发 ：一种抗体阳性，而引起疱疹病：一种抗体阳性，而引起疱疹病毒型抗体阴性。毒型抗体阴性。原发与非原发临床不能区分，必需试验原发与非原发临床不能区分，必需试验室鉴别。室鉴别。第一次症状（复发）：血清学阳性但以第一次症状（复发）：血清学阳性但以前未出现疱疹前未出现疱疹 2.2.复发疱疹：有典型病史，复发疱疹：有典型病史，HSV2HSV2较较1 1复发复发率高，男比女高率高，男比女高二、潜藏感染：二、潜藏感染：80-9080-90HSVHSV感染感染2013.8HSV传播途经来自无症状的排毒者（最常见）70HSV2感染来自性伴无症状排毒期。通常有症状期性活动较少。多数病例否认与感染者接触的病史。与传染性溃疡接触（排毒达高峰，传染性最强）母婴传播：分3个阶段子宫内：经胎盘或宫颈上行感染，导致胎儿早产、流产、畸形、死亡。围产期：占85，经产道40-60机会被感染诞生后：接触外部HSV传染源，如母亲口腔感染等。2013.8HSV感染后潜藏活动导致长期持续感染新生儿疱疹发病率和死亡率严峻HIV感染协同因素80-90HSV感染为潜藏感染2013.8基本原理：基本原理：HSVHSV在细胞内寄生在细胞内寄生体外细胞培育体外细胞培育特征细胞变更视察。特征细胞变更视察。标本采集：标本采集：疱液：抽取或棉签吸取后洗脱。疱液：抽取或棉签吸取后洗脱。溃疡组织液：干拭子去除污物，棉签吸取后洗脱。溃疡组织液：干拭子去除污物，棉签吸取后洗脱。子宫颈分泌物：拭去黏液后，用另一棉拭子插入子宫颈，捻转取样。子宫颈分泌物：拭去黏液后，用另一棉拭子插入子宫颈，捻转取样。仪器设备：仪器设备：CO2CO2培育箱，细胞（培育箱，细胞（HelaHela细胞），细胞），RPMI1640RPMI1640，小牛血清等。，小牛血清等。（一）细胞培育法（一）细胞培育法2013.8陕西省皮肤性病防治所 朱参胜操作步骤：操作步骤：单层细胞制备：单层细胞制备：2424孔板培育，长成单层细胞备用（常用细孔板培育，长成单层细胞备用（常用细胞株为胞株为Vero,Hela,BHK)Vero,Hela,BHK)标本接种：接种标本接种：接种0.2ml0.2ml，培育，培育3737日日CPE(cytopathic effect)CPE(cytopathic effect)视察：接种后，每日视察视察：接种后，每日视察病毒传代：至少病毒传代：至少50%50%以上细胞出现以上细胞出现CPECPE后，收集培育物，再后，收集培育物，再次接种至簇新细胞中。次接种至簇新细胞中。鉴定和分型：鉴定和分型：50%50%以上细胞出现以上细胞出现CPECPE后，收集感染细胞和培后，收集感染细胞和培育物，离心后，沉淀用免疫荧光或酶免试验鉴定。育物，离心后，沉淀用免疫荧光或酶免试验鉴定。2013.8陕西省皮肤性病防治所 朱参胜结果判读：结果判读：视察视察CPE:CPE:连续连续7 7日视察，细胞一般在日视察，细胞一般在2424日出现病变，变圆，肿胀和气日出现病变，变圆，肿胀和气球样变，可见融合细胞和多核巨细胞，初步判定球样变，可见融合细胞和多核巨细胞，初步判定HSVHSV阳性。阳性。用免疫荧光法对用免疫荧光法对HSVHSV进一步鉴定和分型。进一步鉴定和分型。结果报告：结果报告：出现出现CPE:“CPE:“单纯疱疹病毒分别可疑单纯疱疹病毒分别可疑”鉴定后：鉴定后：“单纯疱疹病毒单纯疱疹病毒I I型（型（IIII型）生长型）生长”临床意义：临床意义：细胞培育法是细胞培育法是“金标准金标准”用免疫荧光法对用免疫荧光法对HSVHSV进一步鉴定和分型进一步鉴定和分型2013.8陕西省皮肤性病防治所 朱参胜留意事项留意事项:选择敏感细胞系，且细胞应为活力强的幼龄细胞选择敏感细胞系，且细胞应为活力强的幼龄细胞取材时不用消毒剂和润滑剂取材时不用消毒剂和润滑剂尽量取水泡液或脓疱液进行接种培育尽量取水泡液或脓疱液进行接种培育取材后尽快接种，取材后尽快接种，24h24h不能接种，存放于不能接种，存放于-70-70其他疱疹病毒如水痘，带状疱疹病毒感染也可以引起类似的其他疱疹病毒如水痘，带状疱疹病毒感染也可以引起类似的CPECPE，因，因此须要进一步鉴定此须要进一步鉴定2013.8陕西省皮肤性病防治所 朱参胜HeLa细胞株是由正常子宫颈细胞被一种人类乳突状瘤病毒（Human Papillomavirus 18 或HPV18）转型成癌细胞的，而且和正常子宫颈细胞有很多不同。2013.8陕西省皮肤性病防治所 朱参胜Hela Hela 细胞感染细胞感染HSV-2:A HSV-2:A 正常细胞；正常细胞；B:HSV-2B:HSV-2感染细胞。感染细胞。2013.8陕西省皮肤性病防治所 朱参胜（二）干脆免疫荧光抗原检测（二）干脆免疫荧光抗原检测基本原理：基本原理：HSVHSV抗体抗体(标记标记FITC)FITC)标本标本HSVHSV荧光显微镜视察荧光显微镜视察标本采集：标本采集：细胞培育标本：收集细胞培育阳性标本，可作细胞爬片。细胞培育标本：收集细胞培育阳性标本，可作细胞爬片。病损标本：收集病损部位基底部细胞病损标本：收集病损部位基底部细胞仪器设备：荧光显微镜；仪器设备：荧光显微镜；HSV(I/II)mAb;PBSHSV(I/II)mAb;PBS溶液溶液操作步骤：操作步骤：固定：冷丙酮（固定：冷丙酮（-20-20）或甲醇固定标本）或甲醇固定标本10min10min洗涤：洗涤：PBSPBS洗洗3 3次，或自然干燥次，或自然干燥染色：双份标本中滴加染色：双份标本中滴加HSV-1HSV-1和和HSV-2HSV-2荧光抗体工作液，荧光抗体工作液，3737湿盒湿盒30min30min洗涤：洗涤：PBS,PBS,双蒸水双蒸水封片镜检：封片镜检：90%90%甘油甘油+10%PBS+10%PBS2013.8陕西省皮肤性病防治所 朱参胜结果判读：结果判读：阳性、阴性比照结果正常阳性、阴性比照结果正常阳性标本为亮绿色荧光阳性标本为亮绿色荧光结果报告：结果报告：阳性：见到上述荧光阳性：见到上述荧光阴性：未见到上述荧光阴性：未见到上述荧光临床意义：临床意义：一般用于一般用于HSVHSV分别培育阳性标本的鉴定和分型分别培育阳性标本的鉴定和分型留意事项留意事项:每批试验均设置比照每批试验均设置比照高质量荧光显微镜和技术娴熟操作人员高质量荧光显微镜和技术娴熟操作人员取材是应避开出血，以免影响结果推断取材是应避开出血，以免影响结果推断干脆皮损标本：简洁脱片干脆皮损标本：简洁脱片2013.8陕西省皮肤性病防治所 朱参胜HCE inoculated with a high viral load clinical specimen positive for HSV-1.Notethepresenceofmanyinfectedcellsshowingapplegreenfluorescence.Indirectimmunofluorescenceassay,125.Athmanathanet al.BMC Ophthalmology20022:32013.8陕西省皮肤性病防治所 朱参胜（三）抗原（三）抗原ELISAELISA法法基本原理：基本原理：抗抗HSVHSV单克隆抗体包被单克隆抗体包被标本标本HSVHSV抗原抗原酶标记抗体，底物显色。酶标记抗体，底物显色。标本采集：标本采集：同细胞培育法同细胞培育法操作步骤：操作步骤：加样：比照和样品，孵育加样：比照和样品，孵育加酶结合物：洗板后，加入酶结合物，孵育加酶结合物：洗板后，加入酶结合物，孵育显色：显色：终止：终止：2013.8陕西省皮肤性病防治所 朱参胜结果判读：结果判读：阳性、阴性比照在规定范围阳性、阴性比照在规定范围依据要求计算设定阈值依据要求计算设定阈值结果报告：结果报告：阳性阳性阴性阴性临床意义：临床意义：临床上常用的检测抗原的方法临床上常用的检测抗原的方法留意事项留意事项:接受部位正确，尽可能多采样接受部位正确，尽可能多采样不同批号试剂禁止混用不同批号试剂禁止混用2013.8陕西省皮肤性病防治所 朱参胜（四）抗体检测（四）抗体检测ELISA:检测原理：将型特异性HSV抗原gG包被在酶标板微孔中俘获血清中的HSV抗体，形成抗原抗体复合物再与辣根过氧化物酶标记的抗人抗体结合，加入酶底物显色酶标仪比色定量血清中HSV抗体含量。器材：酶标仪，洗板机、恒温水浴箱、型特异HSV-ELISA试剂盒。检测流程：试剂准备（平衡，混匀，稀释，阴性，阳性比照设置；加入标本；温育；洗版；加酶标记物；洗板；显色；终止；读板。结果判读及报告：阳性、阴性比照应在要求范围；临界值确定。阳性、阴性判定。CIA:(省略）2022/11/4HSVHSV型特异性抗体检测的临床意义型特异性抗体检测的临床意义HSV感染诊断：首次感染93IgM阳性，复发感染13以下，IgGHSV分型诊断：HSV1和HSV2感染的严峻程度和预后存在差异，为预后供应参考依据。原发与复发疱疹类型的鉴别检出隐性感染：80-90%无症状感染，削减性与母婴传播2022/11/4感染者性伴的HSV感染状况的推断：80%以上的患者渴望了解自身和伴侣的HSV感染的血清型，并且获知结果后对治疗方案的依从性增加79%。HSV感染的血清流行病学调查：为卫生监管部门供应更加有效、牢靠的HSV的流行病学数据。用于性病门诊（诊断与高危人群筛查）生殖医学门诊(提高IVF的成功率)妇产科门诊(孕前和产前筛查，削减新生儿疱疹感染)器官移植科（检测HSV感染）2022/11/4（五）核酸检测（五）核酸检测目的基因：目前均选择高保守序列区，主要集中在DNA聚合酶基因区、胸腺嘧啶核苷激酶(TK)基因区、糖蛋白基因区。原理：一对单纯疱疹病毒型特异性引物一条单纯疱疹病毒型特异性荧光探针，配以PCR反应液、Taq酶、dNTPs,用PCR体外扩增法检测单纯疱疹病毒DNA临床意义：鉴别诊断溃疡或生殖器疱疹的患者，区分I和II型HSV病毒；对脑组织、脑脊液测定有优势。2022/11/4（六）检测方法评价（六）检测方法评价急性期感染确诊：培育法：金标准，试验条件，人员素养要求高。免疫学方法：区分型别。核酸检测：敏感性最高，SFDA认可的试剂；HSV感染筛查，无症状感染者检查：血清抗体检测（ELISA/CIA)：妇产科、性病门诊广泛运用，说明以前感染过HSV，IgM近期感染。2022/11/4二、尖锐湿疣二、尖锐湿疣尖锐湿疣：尖锐湿疣：(Condyloma Acuminatum,CA)，又称生殖器疣，是由人乳头瘤病毒(Human papilloma virus,HPV)引起，主要通过性传播、在肛门及外生殖器所致的表皮瘤样增生的一种STD。HPVHPV：人类乳突病毒（Human Papillomavirus，）是一种分子较小（直径55nm）的DNA病毒。已知的人类乳突病毒有一百多种基因型，其中有三十余种会感染人类生殖器官的皮肤及黏膜，造成各种疾病。主要类型为HPV1、2、6、11、16、18、31、33及35型等，其中HPV16和18型长期感染可能与女性宫颈癌的发生有关。2022/11/4病毒DNA：8000个碱基对非编码上游调整（LCR）,早期 ORF(E1-E7)；晚期 ORF(L1 和 L2)分型：按E6,E7,L1的ORF，DNA序列同源性小于90%HPV的致病性:引起细胞良性增生：扁平疣、寻常疣、尖锐湿疣诱导细胞永生化和转化:宫颈癌、肛门癌检测方法：HPV核酸检测和组织病理检测。2022/11/4依据HPV引起细胞病理变更的不同，分为高危型和低危型 高危型：16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68 低危型：6、11、42、43、442022/11/4HPV传播途径 性接触传播：HPV的主要感染方式，相同的HPV亚型可以在性伴侣中检出。干脆接触：皮肤干脆接触也是传播方式 母婴传播：母亲生殖道HPV感染也可以传给婴儿2022/11/4症状和体征HPV感染后，潜藏期3周8个月，平均3个月。男性：多见于冠状沟、包皮、系带、龟头和肛周，其次是尿道口、阴茎体和阴囊；女性：多见于大小阴唇、后联合、阴蒂、宫颈、阴道壁和肛周。其它：腋下、腹股沟、乳房下和口腔内2022/11/4特征特征初发为淡红、褐色细小丘疹，针头至绿豆大小。以后突起，渐渐增大增多并扩散扩散，表面粗糙。疣体：丘疹型、乳头型、菜花型、鸡冠型和巨大型CA。一般无感觉，部分有异物、痒或压迫感，或因磨擦而破溃、糜烂，性交易出血。女性患者常伴阴道炎。鉴别诊断：假性湿疣（阴茎珍宝状丘疹，绒毛状小阴唇），扁平湿疣、鲍温样丘疹病和鳞状细胞癌。2022/11/42022/11/4部位：部位：外生殖器或肛门外生殖器或肛门皮损特点：皮损特点：疣状、菜花状赘生物疣状、菜花状赘生物2022/11/42022/11/4醋酸白试验：用醋酸白试验：用5%5%醋酸溶液醋酸溶液涂抹皮损处，涂抹皮损处，3 35 min5 min后皮后皮损表面变白，协助性诊断。损表面变白，协助性诊断。实时荧光实时荧光PCRPCR技术技术基本原理：基本原理：两类引物：通用引物针对两类引物：通用引物针对L1L1的保守区，可以扩增全部性病相关的保守区，可以扩增全部性病相关HPV-DNAHPV-DNA；另一；另一类特异的引物和探针。类特异的引物和探针。探针：标记不同荧光的型特异性探针；探针：标记不同荧光的型特异性探针；55端端R R基团和基团和33端端Q Q基团；基团；反应前探针完整，无荧光；反应后，反应前探针完整，无荧光；反应后，R R基团和基团和Q Q基团分别，产生荧光；基团分别，产生荧光；每完成一次扩增，就形成一个荧光分子每完成一次扩增，就形成一个荧光分子自动荧光检测仪测定自动荧光检测仪测定仪器设备：荧光仪器设备：荧光PCRPCR仪；恒温水浴；高速离心机；试剂盒；仪；恒温水浴；高速离心机；试剂盒；标本采集：标本采集：宫颈分泌物宫颈分泌物阴道分泌物阴道分泌物男性尿道分泌物男性尿道分泌物组织表面标本组织表面标本2022/11/4标本的采集标本的采集 标本取材部位：宫颈，外阴，包皮龟头等 标本类型：赘生物、丘疹、无症状等 采集方法：赘生物用钝刀或拭子刮取组织细胞 宫颈拭子 直肠拭子的取材2022/11/4操作步骤：操作步骤：分泌物和刮取物标本的处理：充分振荡，洗脱至分泌物和刮取物标本的处理：充分振荡，洗脱至1ml1ml生理生理盐水中，盐水中，12 000rpm12 000rpm离心离心5 5分钟，弃上清；簇新组织需匀浆；分钟，弃上清；簇新组织需匀浆；石蜡包埋组织：切片，脱蜡、乙醇洗涤干燥，提取。石蜡包埋组织：切片，脱蜡、乙醇洗涤干燥，提取。DNADNA提取：加入提取：加入DNADNA提取液，煮沸提取液，煮沸10min10min，离心上清液为模，离心上清液为模版；版；加样：加样：PCRPCR反应管加入阳性、阴性比照，样品反应管加入阳性、阴性比照，样品PCRPCR扩增：将反应管放入扩增：将反应管放入PCRPCR仪，设置名称，反应条件，荧仪，设置名称，反应条件，荧光种类，并起先运行仪器。光种类，并起先运行仪器。2022/11/4结果判读及报告：试验有效性推断，阴性不是结果判读及报告：试验有效性推断，阴性不是S S型曲线，型曲线，阳性为阳性为S S型曲线，型曲线，CT=CT=给定值或参考范围。依据给定值或参考范围。依据CTCT值，确定值，确定阴性，阳性，可疑。阴性，阳性，可疑。临床意义：临床意义：很高的敏感性和特异性，很高的敏感性和特异性，HPVHPV检测较为牢靠的方法检测较为牢靠的方法大量人群感染大量人群感染HPVHPV不发病，用于尖锐湿疣时，结合临床症不发病，用于尖锐湿疣时，结合临床症状和流行病学史综合分析状和流行病学史综合分析不典型症状确诊不典型症状确诊尖锐湿疣疗效判定尖锐湿疣疗效判定留意事项：留意事项：分区进行分区进行检测检测-球蛋白基因评价标本是否合格球蛋白基因评价标本是否合格阴性不解除其他型别阴性不解除其他型别HPVHPV感染（感染（100100种）种）2022/11/4核酸杂交技术HPV基因干脆杂交：原位杂交、斑点杂交、southern转移杂交；扩增后杂交：反向膜杂交、杂交捕获法原位杂交：细胞内HPV病毒的检测和定位。southern转移杂交：电泳分别后杂交。杂交捕获法：唯一通过FDA批准，RNA探针，杂交，化学发光放大信号，检测低危和高危HPV，不能分型。反向斑点杂交：国内SFDA注册批准，生物素/地高辛标记的通用引物扩增目的基因，双链DNA扩增产物经变形后与固定于硝酸纤维素上特异性探针进行杂交，加入酶标地高辛抗体，加入底物，显色反应，形成斑点，区分HPV型别。2022/11/4病理学检查法病理学检查法基本原理：基本原理：HPVHPV感染感染疣状皮损疣状皮损细胞结构和排列发生变更：乳头瘤细胞结构和排列发生变更：乳头瘤样增生、表皮角化不全、棘层肥厚、真皮浅层炎性细胞浸样增生、表皮角化不全、棘层肥厚、真皮浅层炎性细胞浸润、表皮内空泡化细胞等。润、表皮内空泡化细胞等。标本采集标本采集:手术或剪除法切去病变组织，马上放入盛有手术或剪除法切去病变组织，马上放入盛有10%10%中性福尔中性福尔马林小瓶中固定。马林小瓶中固定。2022/11/4操作步骤：操作步骤：脱水：脱水：将固定的组织块置入将固定的组织块置入70%70%、80%80%、95%95%和无水乙醇中和无水乙醇中透亮：置入二甲苯中透亮：置入二甲苯中浸蜡：热石蜡注入蜡模中，稍凝固后，放入组织块浸蜡：热石蜡注入蜡模中，稍凝固后，放入组织块切片切片裱片：将切片贴在干净载玻片上裱片：将切片贴在干净载玻片上烤片：切片置入烤片：切片置入7272烤箱中烤箱中12h12h脱蜡：置入二甲苯中脱蜡脱蜡：置入二甲苯中脱蜡1015min1015min脱水：脱水：100%100%、95%95%、80%80%脱水脱水12min12min染色：苏木素染色染色：苏木素染色洗片：自来水冲洗洗片：自来水冲洗15min15min分化：置入盐酸中分化分化：置入盐酸中分化1-2min1-2min染胞质：伊红染色染胞质：伊红染色脱水：脱水：95%95%和无水乙醇中，各和无水乙醇中，各35min35min透亮：二甲苯中二次透亮：二甲苯中二次封片：中性树胶封片：中性树胶2022/11/4结果判读结果判读细胞核深蓝色，胞质红色，可见乳头瘤增生，角化不全、角化过度、细胞核深蓝色，胞质红色，可见乳头瘤增生，角化不全、角化过度、表皮荆棘层肥厚、基底细胞增生、真皮浅层血管扩张，并有淋巴细胞表皮荆棘层肥厚、基底细胞增生、真皮浅层血管扩张，并有淋巴细胞浸润。浸润。表皮浅层可见呈灶状、片状及散在分布空泡化细胞：该细胞体积大，表皮浅层可见呈灶状、片状及散在分布空泡化细胞：该细胞体积大，核深染，核四周可见不同程度的空泡化变更，轻者核四周仅有空泡化核深染，核四周可见不同程度的空泡化变更，轻者核四周仅有空泡化的晕环，重者整个胞质均发生空泡化变更，胞质内可有丝网状或絮状的晕环，重者整个胞质均发生空泡化变更，胞质内可有丝网状或絮状变更变更结果报告：结果报告：依据以上病理组织像进行报告依据以上病理组织像进行报告2022/11/4临床意义：临床意义：特征性病理组织像可作为明确诊断尖锐湿疣的重要依据特征性病理组织像可作为明确诊断尖锐湿疣的重要依据如在病理组织切片中未见空泡化细胞，仅见片状角化不全如在病理组织切片中未见空泡化细胞，仅见片状角化不全或表皮乳头瘤样增生时，并不能解除尖锐湿疣或表皮乳头瘤样增生时，并不能解除尖锐湿疣留意事项：留意事项：必要时，应多取材和连续切片，直到查见特征性病理变更，必要时，应多取材和连续切片，直到查见特征性病理变更，结合临床进一步诊断结合临床进一步诊断典型病理变更高度提示典型病理变更高度提示HPVHPV感染感染2022/11/42022/11/4检测方法评价检测方法评价HPV实时定量PCR:无需扩增后续处理，但不能确定HPV的具体型别或确定的型别较少（6，11，16，18）；用于无症状筛查，有症状病原学诊断。HC-II法：诊断出高危和低危感染，不能确定具体型别；用于风险评估。PCR反向杂交技术：敏感，检测各种型别；用于风险评估。组织病理学：损伤大，诊断尖锐湿疣特异性高。2022/11/4小结 CA由HPV感染引起，但HPV感染不仅仅引起CACA的诊断主要依靠与临床，试验室为协助性HPV检测与分型：CA诊断、高危鉴定、复发推断。2022/11/4性病规范试验室验收（探讨）性病规范试验室验收（探讨）发文（条件要求）申报条件：梅毒（ELISA/CIA（可选）、TPPA、RPR/TRUST，PCR（可选)淋病（培育法、PCR可选）CT（PCR法）HSV-1，2：ELISA/CIA，PCR尖锐湿疣：HPV-6，11/通用/分型验收2022/11/4陕西省淋球菌耐药监测点陕西省淋球菌耐药监测点发文（条件）市CDC落实每个市2个医院条件：开展淋球菌培育管理及人员培训：淋球菌培育、鉴定、标本的收集、保存验收2022/11/42022/11/4