2022年高三生物实验专题复习.docx

精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载高三生物试验专题复习第一部分 学问梳理 ：一、常用仪器、试剂或药品的用途1、NaOH ：用于吸取CO 2或转变溶液的pH 2、CaOH 2：鉴定 CO2 3、CaCl 2：提高细菌细胞壁的通透性4、HCl ：解离（ 15%+95% 酒精 1 : 1 混合）或转变溶液的 pH 5、NaHCO 3：供应 CO2、作为酸碱缓冲剂6、酸碱缓冲剂（Na2CO3/NaHCO 3,Na2HPO4/NaH 2PO4）：用于调剂溶液 pH 7、NaCl ：配制生理盐水（0.9%）或用于提取 DNA （0.14M 或 2M 8、琼脂：激素或其他物质的载体或培育基,用于激素的转移或培育基9、酒精：用于消毒75%、提纯 DNA （ 95%）、叶片脱色、配制解离液（95%的冷酒精）及洗去浮色（ 50%）10、蔗糖：配制蔗糖溶液,测定植物细胞液浓度或观看质壁分别和复原11、二苯胺：用于 DNA 的鉴定（沸水浴,蓝色）12、甲基绿：检测 DNA ,呈绿色13、吡罗红：检测 RNA ,呈红色14、斐林试剂（甲液 0.1g/mL NaOH 、乙液 0.05g/mLCuSO4 ）/班氏试剂：鉴定可溶性仍原性糖（沸水浴,砖红色沉淀）15、双缩脲试剂（A 液： 0.1g/mL 的 NaOH 溶液, B 液： 0.01g/mL的 CuSO4 溶液）：先加 A 摇匀再加 B,用于蛋白质的鉴定（紫色）16、苏丹染液 橘黄色）和苏丹染液 红色）：用于脂肪鉴定17、碘液：用于鉴定淀粉（变蓝色）18、龙胆紫溶液或醋酸洋红（碱性染料）：染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色19、健那绿：检测活的线粒体,专一性让线粒体染色呈蓝绿色 20、重铬酸钾溶液：检测酒精,呈灰绿色 21、溴麝香酚蓝水溶液：检测 CO2,由蓝变绿再变黄 22、伊红美蓝：鉴定有无大肠杆菌的存在 23、卡诺氏固定液：用于细胞有丝分裂根尖的固定 24、解离液（ 5%盐酸和 95%酒精按 1：1 的比例配成）：有丝分裂中根尖的分别与固定 25、层析液：用于叶绿素的分别,主要类型：由 20 份石油醚（在 6090下分馏出来 的）、2 份丙酮和 1 份苯混合而成； 95%的酒精； 93 号汽油； 9 份体积分数为95%的酒精和 1 份苯混合；汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠；26、柠檬酸钠：血液抗凝剂二、试验结果的显示（试验现象的观测指标）1、光合作用： O2释放量或 CO2吸取量或有机物生成量；例：水生植物可依气泡的产生量或产生速率；离体叶片如事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目；植物 体上的叶片可依指示剂（如碘液）处理后叶片颜色深浅；名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共 8 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载2、呼吸作用： O2吸取量或 CO2释放量或有机物消耗量 3、原子或分子转移途径：同位素标记法或元素示踪法 4、细胞液浓度大小或植物细胞活性：质壁分别与复原 5、甲状腺激素作用：动物耗氧量、发育速度等 6、生长激素作用：生长速度 体重、体长变化 7、胰岛素作用：动物活动状态（是否显现低血糖症状 昏迷）8、胰高血糖素作用：尿糖的检测（在尿液中加班氏试剂进行沸水浴,看是否显现砖红 色沉淀）9、菌量的多少：菌落数、亚甲基蓝褪色程度10、生长素作用及浓度高低的显示：来判定（弯曲、高度）11、淀粉：碘液（变蓝色）可通过去除胚芽鞘后补充生长素后的胚芽生长情形12、仍原性糖：斐林试剂 /班氏试剂（沸水浴后生成砖红色沉淀）13、CO 2：CaOH2溶液（澄清石灰水变浑浊 14、乳酸： pH 试纸 15、O2：余烬复燃 16、蛋白质：双缩脲试剂（紫色）17、脂肪：苏丹染液橘黄色）；苏丹染液红色）18、DNA ：二苯胺（沸水浴,蓝色）、甲基绿（染色后,呈绿色）19、RNA ：吡罗红（呈红色） 、苔黑酚乙醇溶液 三、试验原就1、对比原就：空白对比,自身对比,相互对比,条件对比 2、单一变量原就：试验变量（也称自变量,须以试验目的和假设为依据,应具有可变性和可操作性） 与反应变量 （又称因变量或应变量：随自变量变化而产生反应或发生变化的变量, 反应变量是讨论是否胜利的证据,应具可测性和客观性； ）,无关变量与 额外变量,无关变量（无关变量又称干扰变量、掌握变量）与额外变量（试验中由于 无关变量所引起的变化和结果）3、科学原就：即试验方案的设计要科学,包括原理、操作、程序、方法等；4、安全原就： 尽量防止危急性操作（如确需使用, 应注明, 防止环境污染和人身损害）；5、可行原就：试验设计应留意取材便利、药品廉价、装置简洁、经济有用、步骤简洁、操作性强、花时经济,在现有试验条件下能够完成；四、操作设计留意事项1、应留意试验选材的合理性 所选材料应有利于试验现象的观看：如可溶性仍原糖的鉴定中应挑选“ 白色或近白 色” 的材料； 所选材料应简洁获得：尽可能挑选无明显季节性、地域性的材料； 所选材料应价格廉价2、应留意操作细节的合理性 3、应留意操作次序的合理性 4、应留意试验方案的可操作性五、试验设计的基本思路名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 8 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载1、精确把握试验目的：看清题意是要求设计试验方案、步骤仍是分析试验结果,是探 究性试验仍是验证性试验；2、明确试验原理：要解决题目所给的问题,要用到生物学上什么原理；3、确定试验思路：依据原理对试验作出假设,并充分利用试验材料设计试验思路；4、细心设计试验步骤：依据试验目的、原理和思路,设计合理的试验装置和试验操作 步骤；并设置好试验组和对比组,遵循试验设计的原就；并将观看到的现象照实进 行记录；5、精确预期试验结果并分析得出结论：试验步骤一般不连续描述,要分段表达；试管、烧杯等要赐予编号；在表达试验步骤及预期结果时结论时,语言文字要简明扼要,精确科学；五、试验材料的挑选1、材料简洁获得且经济实惠；2、材料在试验过程中易于处理且试验结果明显精确（如无颜色等无干扰）其次部分高中生物试验总结：试验原理 检测生物组织中的仍原糖、脂肪和蛋白质 试验材料用具 试验方法步骤试验结果分析实观看植物细胞的质壁分别和复原试验原理 试验结果的分析试验原理探究影响酶活性的因素试验材料用具、试验方法步骤 试验结果的分析验 试验原理叶绿体中色素的提取和分别试验材料用具、试验方法步骤 试验结果的分析 试验原理探究酵母菌的呼吸方式 试验设计试验结果的分析（一）检测生物组织中的仍原糖、脂肪和蛋白质1 仍原糖的检测和观看（ 1） 试验原理：仍原糖与斐林试剂生成砖红色沉淀,（ 2） 选材：富含仍原糖,白色或近白色的生物组织；（ 3） 试验步骤：制备样液取样 注入试剂 加热；a. 向试管内注入 2mL 待测组织样液；b. 向试管内注入 1mL 斐林试剂 甲乙液等量混合匀称后再注入 ；c. 将试管放入盛有 5065温水的大烧杯中加热约 2min （沸水浴加热）；d. 观看试管中显现的颜色变化；（ 4） 试验结果：试管中显现了砖红色沉淀现象说明待测的组织样液中存在仍原糖（ 5） 留意事项：斐林试剂甲、乙两种液体混合后使用；必修现配现用 制好的生物组织样液不能放置太久以免影响结果；名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页,共 8 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载模拟尿糖的检测 1、取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液 2、检测方法：斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂（由硫酸铜、柠檬酸钠和无水碳酸 钠配置成的蓝色溶液,可以存放备用）或尿糖试纸 3、结果：（用斐林试剂检测）试管内发生显现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未 显现砖红色沉淀的是正常人的尿液；4、分析：由于糖尿病患者的尿液中含有仍原糖,与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀,而正常人尿液中无仍原糖,所以没有发生反应；2. 脂肪的检测和观看（ 1） 试验原理：脂肪被苏丹染液染成橘黄色,脂肪被苏丹染液成红色；（ 2） 试验步骤：制备样液取样 苏丹染液或苏丹染液 观看颜色反应；a 向待测组织样液中滴加3 滴苏丹染液,观看样液被染色的情形；（ 3）试验结果：试管中显现了橘黄色现象说明待测的组织样液中存在脂肪3. 蛋白质的检测和观看（ 1） 试验原理：蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应；（ 2） 试验步骤：制备样液取样 先注入试剂A 摇匀 再注入试剂B 摇匀 观看颜色反应；a. 向试管内注入待测组织样液 2mL；b. 向试管内注入双缩脲试剂 A 液 1mL,摇匀；c. 向试管内注入双缩脲试剂 B 液 4 滴,摇匀；d. 观看试管中显现的颜色变化（ 3） 试验结果：试管中显现了紫色现象说明待测的组织样液中存在蛋白质（二）观看植物细胞的质壁分别和复原（1） 试验原理： a. 植物细胞的原生质层相当于一层半透膜；b. 由于原生质层比细胞壁的伸缩性大,当细胞不断失水时,原生质层就会与细胞壁逐步分别开来,也就是逐步发生了质壁分别；c. 当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时,外界溶液中的水分就透过原生质层进入细胞液中,整个原生质层就会渐渐地复原成原先的状态,使 植物细胞逐步发生质壁分别的复原；（2） 选材：紫色洋葱鳞片外表皮；（3） 试验步骤：制作暂时装片原生质层的观看质壁分别的观看质壁分别复原的观看；a. 制作洋葱鳞片叶外表皮的暂时装片；b. 用低倍显微镜观看洋葱鳞片叶外表皮细胞中紫色的中心液泡的大小,以及原生质层 的位置；c. 从盖玻片的一侧滴入蔗糖溶液,在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引；这样重复几次,盖玻片下面的洋葱鳞片叶表皮就浸润在蔗糖溶液中；d. 用低倍显微镜观看,看细胞的中心液泡是否逐步变小,原生质层在什么位置,细胞 大小是否变化；e. 在盖玻片的一侧滴入清水,在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引；这样重复几次,洋葱 鳞片叶表皮又浸润在清水中；名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 8 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载f. 用低倍显微镜观看,看中心液泡是否逐步变大,原生质层的位置有没有变化,细胞的大小有没有变化；（4） 试验结果：细胞外溶液浓度细胞内溶液浓度,细胞失水 质壁分别细胞外溶液浓度细胞内溶液浓度,细胞吸水 质壁分别复原（5） 留意事项： 挑选紫色洋葱鳞片外表皮的好处：易于获得单层细胞制片便利,有成熟大液泡现象明显且液泡富含色素廉价观看； 应快速做几次质壁分别与复原试验操作以免细胞死亡； 蔗糖溶液浓度要适中以无法观看的免试验现象（浓度小不会分别太多就细胞简洁死亡）；（三）探究影响酶活性的因素（ 1） 试验原理： a. 细胞中几乎全部的化学反应都是由酶来催化的；b. 酶对化学反应的催化效率称为酶活性；（2） 试验步骤：等量分组编号c. pH 值对酶活性有影响；变量处理 结果检验 结果观看；a. 取 6 支试管,分别向6 支试管中加入质量分数为3%的可溶性淀粉溶液；b. 向 6 支试管加入不同pH 的溶液；c. 分别向 6 支试管加入等量的淀粉酶溶液；d. 向 6 支试管滴加碘液；e. 观看 6 支试管变篮的程度；（3） 试验结果：酶在最相宜的条件下,酶的活性最高；温度和 活性都会明显降低；因而各试管变蓝的程度不同；PH 偏高或偏低,酶的（ 1） 试验原理： a. 细胞中几乎全部的化学反应都是由酶来催化的；b. 酶对化学反应的催化效率称为酶活性；c. 温度对酶活性有影响；（2） 试验步骤：等量分组编号变量处理 结果检验 结果观看；a. 取 6 支试管,分别向 6 支试管中加入质量分数为 3%的可溶性淀粉溶液；再分别放入不同温度梯度的水浴中保温；再取 6 支试管,分别向 6 支试管中加入质量的淀粉酶溶液,分别放入与前6 支试管相同温度梯度的水浴中保温相同时间；b. 分别向 6 支试管加入相同温度梯度下保温过的等量的淀粉酶溶液；c. 向 6 支试管滴加碘液；d. 观看 6 支试管变篮的程度；（3） 试验结果：酶在最相宜的条件下,酶的活性最高；温度偏高或偏低,酶的活性都 会明显降低；因而各试管变蓝的程度不同；（4） 留意事项：酶（淀粉酶）和底物（淀粉）要先在相同的温度条件下同时保温后再混合以保证变量唯独；（四）叶绿体色素提取和分别（1） 试验原理： a. 绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中,所以可以用无水乙醇提取绿叶中的色素；b. 它们在层析液中的溶解度不同；溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；反之就慢；（2） 选材：新奇菠菜嫩叶；（3） 试验步骤：提取色素：称量研磨过滤收集 分别色素：制备滤纸条画滤液细线分别色素观看和记录a. 提取绿叶中的色素；b. 制备滤纸条；名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页,共 8 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载c. 画滤液细线；d. 分别绿叶中的色素；（4） 试验结果： 叶绿体中色素能溶解在有机溶剂无水乙醇中,叶绿体中色素有四种可依据它们在层析液中溶解度不同,可用无水乙醇提取色素,运用纸层析法将它们分别；其中溶解度最高的在滤纸上扩散得最快的是胡萝卜素（橙黄色）,溶解度最低的在滤纸上扩散得最慢的是叶绿素b黄绿色 ,色素在滤纸上由上而下的排列是胡萝卜素（橙黄色）、叶黄素（黄色） 、叶绿素 a蓝绿色 、叶绿素 b黄绿色 ；（5） 药品及用途： SiO2 使研磨充分 Ca CO3爱护叶绿素不被破坏 无水乙醇 溶解色素（提取色素）层析液 分别色素（6） 留意事项： 材料应富含叶绿体且四种色素含量要适中 滤纸条下端要匀称剪去两角以保证层析液在滤纸条上匀称扩散 珠笔画线以免颜色干扰）再匀称画滤液细线 先用铅笔画线 （不能用蓝黑笔或圆 层析是滤液不能埋没滤液细线且层析液不能扩散到滤纸条顶端以免色素带不明显；（五） 观看 DNA 和 RNA 在细胞中的分布（1）试验原理： 甲基绿使 DNA 出现绿色, 吡罗红使 RNA 出现红色 . 利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示 DNA 和 RNA 在细胞中的分布 , 盐酸能够转变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的 利于 DNA 与染色剂结合；DNA 和蛋白质分别,有分布：真核生物 DNA 主要分布在细胞核中, 线粒体和叶绿体内也含有少量的 DNA ；RNA 主要分布在细胞质中；（2） 选材：口腔上皮细胞层或植物叶片下表皮细胞；（2） 试验步骤：制片水解 冲洗 染色 观看a. 将牙签刮下的口腔上皮细胞置于载玻片上滴 0.9%的NaCl溶液 , 载玻片烘干b. 8%HCl中 30保温 5 分钟；c. 用蒸馏水缓流冲洗 10s（10 秒）；d. 2 滴甲基绿、吡罗红混合染色剂染色 5 分钟e. 先低倍镜观看,挑选染色匀称、色泽浅的区域,移至视野中心,调剂清楚后才换用高倍物镜观看；（3）试验结果 : 细胞核呈绿色 ,细胞质呈红色 . （5） 药品及用途： 0.9%的 NaCl 溶液 维护细胞形状 染色质（体）上的蛋白质破坏廉价染色；8%HCl转变膜透性而且可以将（5） 留意事项：材料应无色且易于制作成单层细胞的装片 必修是活细胞（六） 探究酵母菌的呼吸方式（1）试验原理：酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸,产生二氧化碳和水：C 6H12O6 6O 2 6H 2O6CO 2 12H 2O 能量在无氧条件下进行无氧呼吸,产生酒精和少量二氧化碳：C 6H12O6 2C 2H 5OH 2CO 2 少量能量（2） 试验步骤：a. 酵母菌培育液的配制；b. 检测 CO 2的产生；c. 检测酒精的产生；（3） 试验结果：酵母菌在有氧和无氧条件下分别进行有氧呼吸和无氧呼吸；有氧呼吸名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页,共 8 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载比无氧呼吸产生的二氧化碳多；无氧呼吸时产生酒精.检测 CO 2 的产生：使澄清石灰水变浑浊,或使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄；检测酒精的产生：橙色的重铬 酸钾溶液,在酸性条件下与酒精发生反应,变成灰绿色 ；（七）观看有丝分裂 1、材料挑选：洋葱根尖（葱,蒜）2、试验步骤：（一）洋葱根尖的培育（二）装片的制作制作流程：解离 漂洗 染色 制片 1. 解离 : 用解离液（质量分数为 15%的盐酸 ,体积分数为 95%的酒精 1 : 1 混合液 . 解离 35min ；目的：使组织中的细胞相互分别开来廉价压片；2. 漂洗 : 用清水漂洗约 3. 染色 : 用质量浓度为10min. 目的：洗去解离液,防止解离过度,并有利于染色；0.01g / mL 或 0.02g / mL 的龙胆紫溶液 或醋酸洋红液 染色3 5min 目的：使染色体着色,利于观看；并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖4. 制片 : 将根尖放在载玻片上,加一滴清水,玻片上,再加一片载玻片,然后用拇指轻轻地按压载玻片；目的：使细胞分散开来,有 利于观看；（三）观看a、先在低倍镜下找到根尖分生区细胞：细胞呈正方形, 排列紧密 ,有的细胞正在分裂；b、换高倍镜下观看：分裂中期分裂前、后、末期 分裂间期；（留意各时期细胞内染色体形状和分布的特点）（八） DNA 的粗提取与鉴定；其中,处于分裂间期的细胞数目最多；1（1）试验原理： 血细胞在蒸馏水中易吸水而导致细胞膜和细胞核膜的破裂；利用此特性可得到含有核 DNA 的溶液； NaCl 溶液： DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液的溶解度不同；当 NaCl 的质量浓度为 0.14mol/L 时, DNA 的溶解度最低；利用这一原理,可以使溶解在NaCl 溶液中的 DNA 析出； DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度曲线如右图所示：酒精（体积分数为 95）：DNA 不溶于酒精溶液,可是细胞中的多数物质可溶于酒精溶液,因而可进一步提取含杂质较少的 DNA ；洗涤剂： 能溶解细胞膜,有利于细胞内 DNA 的释放；二苯胺试剂：DNA 遇二苯胺（沸水浴）被染成蓝色,所以二苯胺可用作鉴定 DNA 存在的试剂；（1）试验步骤：破裂细胞 纯 DNA 的鉴定溶解 DNA DNA 的析出 DNA 的初提纯 DNA 的再提 破裂细胞释放DNA ：加入 20 mL 蒸馏水,搅拌5 min ,用 12 层纱布过滤备用使细胞吸水胀破 溶解细胞核中的DNA ：加入 2 mol/L 的氯化钠溶液40 mL ,搅拌 1 min DNA在高浓度氯化钠溶液中,溶解度最大 DNA 的析出：加入蒸馏水约300 mL ,不停地进行匀称搅拌,然后用34 层纱布过滤混合液降低氯化钠浓度,使DNA 的溶解度降到最低 DNA 的初步提纯：加入2 mol/L 的氯化钠溶液20 mL,不停地搅拌,然后用2层纱布过滤混合液 DNA 的再次提纯：加入95%冷酒精 50 mL ,然后进行搅拌浓缩沉淀 DNA DNA 的鉴定：向两支试管中分别加入4 mL 二苯胺试剂,然后将试管在沸水浴名师归纳总结 - - - - - - -第 7 页,共 8 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载中加热 5 min,比较试管中的颜色变化；注：二苯胺溶液要现用现配,否就会影响鉴定成效2方法步骤ADNA 的粗提取（1）预备材料：将新奇菜花和体积分数为95%的酒精溶液放入冰箱冷冻室,至少24小时；（2）取材：称取 30 g 菜花,去梗取花,切碎；（3）研磨：将碎菜花放入研钵中,倒入 10 mL 研磨液,充分研磨 10 min；（4）过滤：在漏斗中垫上尼龙纱布,将菜花研磨液滤入烧杯中（有条件的学校可将滤液倒入塑料离心管中进行离心,用1000 r/min 的旋转频率,离心25 min ；取上清液放入烧杯中） ；在 4冰箱中放置几分钟后,再取上清液；（5）加冷酒精：将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为 95%的酒精溶液中,并且玻璃棒渐渐地轻轻搅拌溶液（玻璃棒不要直插烧杯底部）；沉淀 35 min 后,可见白色的 DNA 絮状物显现；用玻璃棒渐渐旋转,絮状物会缠在玻璃棒上；BDNA 的鉴定（1）配制二苯胺试剂：取0.1 mL B 液；滴入到10 mL A 液中,混匀；（2）鉴定：取 4 mL DNA 提取液放入试管中,加入4 mL 二苯胺试剂,混匀后观看溶液颜色（不变蓝） ；用沸水浴（ 100）加热 10 min；在加热过程中,随时留意试管名师归纳总结 中溶液颜色的变化（逐步显现浅蓝色）；第 8 页,共 8 页- - - - - - -