第五章中药制剂分析总论优秀PPT.ppt

第五章第五章 中药制剂分析总论中药制剂分析总论药物分析教研室药物分析教研室第一节第一节 中药制剂定性分析中药制剂定性分析中药定性分析的方法 目的：目的：检定制剂的真实性。检定制剂的真实性。l显微鉴别法显微鉴别法l理化鉴别法理化鉴别法 u一般化学反应法一般化学反应法u升华法升华法u荧光法荧光法u光谱法光谱法u色谱法色谱法 一、中成药的显微鉴别 （一）制片方法 1散剂、胶囊剂 取粉末，干脆加水或水合氯醛 透扮装片。2片剂 用刀片干脆从药片断面刮取少量粉末或 研碎后取少量样品透扮装片。3水丸、锭剂 研成粉末后取少量干脆透扮装片。4蜜丸 取蜜丸切碎，加水搅拌，洗涤后，置离 心管中离心分别沉淀。如此反复处理以 除去蜂蜜后透扮装片。若视察细胞内含物形态，应选用不同试剂制片。淀粉粒 水或甘油醋酸试液；糊粉粒 甘油；水溶性内含物 乙醇或水合氯醛试液(不加热)。固定标本片制片方法固定标本片制片方法 取中成药粉末置离心管中，加乙醇取中成药粉末置离心管中，加乙醇浸过上面，浸过上面，玻棒搅拌玻棒搅拌5 51010分钟后离心使粉末沉分钟后离心使粉末沉积，倾去稀醇液，再加无水乙醇二次，积，倾去稀醇液，再加无水乙醇二次，丙酮一次，丙酮、二甲苯等量混合液丙酮一次，丙酮、二甲苯等量混合液一次，如前操作，每次一次，如前操作，每次10102020分钟；分钟；最终加入纯二甲苯，略加搅拌，取处最终加入纯二甲苯，略加搅拌，取处理后的样品微量置载玻片上，滴加中性理后的样品微量置载玻片上，滴加中性树胶，加盖玻片封藏，贴标签。树胶，加盖玻片封藏，贴标签。（二）视察要点（二）视察要点 中成药粉末镜检时，首先要了解处方中的中成药粉末镜检时，首先要了解处方中的药味组成，明确其药味组成，明确其来源的药用植物的部位，才能依据该部位的显来源的药用植物的部位，才能依据该部位的显微特征来进行检出。微特征来进行检出。1.1.根类根类 木栓组织碎片，表面观多为多角形细胞，木栓组织碎片，表面观多为多角形细胞，排排列紧密。列紧密。导管导管 直径、节的长短、末梢壁的穿孔及增直径、节的长短、末梢壁的穿孔及增厚壁的纹理类型。厚壁的纹理类型。草酸钙结晶晶形、草酸钙结晶晶形、分泌组织、分泌组织、淀粉粒的形态、淀粉粒的形态、脐点脐点 层纹层纹 2.2.根茎类根茎类 与根类药材粉末特征相像。而淀粉粒有时较大，与根类药材粉末特征相像。而淀粉粒有时较大，有鳞叶组织，退化的有鳞叶组织，退化的 鳞叶表皮细胞大多狭鳞叶表皮细胞大多狭长，细胞壁平直或波状弯曲。长，细胞壁平直或波状弯曲。3.茎类 （1）茎类 表皮细胞及垂周壁的形态，气孔的类型，毛茸的类型及形态；导管的类型、直径、长短。管胞的形态；纤维的形态、直径、长短、有无晶纤维等。草酸钙结晶多为方晶及簇晶，单子叶植物偶见针晶。薄壁组织碎片、石细胞。（2）皮类 纤维的直径、长短及形态，是否成束存在，细胞壁厚薄、木化与否，能否看到胞腔及壁孔等。石细胞的形态、细胞壁增厚状况。草酸钙结晶多为方晶及簇晶，砂晶及针晶较少。皮类药材粉末不应含有木质部组织，如导管、管胞等。（3）木类 可见导管、管胞、木纤维、木射线及木薄壁细胞。细胞壁 通常均木化。不应有木栓细胞及绿色组织等。4.4.花类花类 （1 1）苞片及花萼）苞片及花萼 构造类同叶片，表面上可见到气孔及毛茸。构造类同叶片，表面上可见到气孔及毛茸。（2 2）花冠）花冠 上表皮细胞常呈乳头状或绒毛状突起而无气孔，上表皮细胞常呈乳头状或绒毛状突起而无气孔，下表皮细胞常不呈乳头状，下表皮细胞常不呈乳头状，细胞壁微波状弯曲。细胞壁微波状弯曲。维管束组织细小。维管束组织细小。（3 3）雄蕊）雄蕊 1 1）花粉囊内壁细胞的壁不匀整地增厚，呈网状、螺旋状、）花粉囊内壁细胞的壁不匀整地增厚，呈网状、螺旋状、环纹状及点状等；环纹状及点状等；2 2）花粉粒具圆形、长圆形或多面形等多种形态。）花粉粒具圆形、长圆形或多面形等多种形态。通常具内外两层壁，外壁多数具各种雕纹。通常具内外两层壁，外壁多数具各种雕纹。（4 4）雌蕊）雌蕊 柱头的表皮细胞呈乳头状突起，或分化成绒毛状。柱头的表皮细胞呈乳头状突起，或分化成绒毛状。5.叶类 （1）表皮 上下表皮细胞的形态、大小，角质层的形态，垂周壁的形态、厚度或增厚状况以及有无气孔、毛茸等。（2）气孔 气孔的形态、大小、型式，保卫细胞的形态及内含物，副卫细胞的数目、大小、形态。（3）毛茸 留意毛茸的种类。非腺毛：留意细胞的数目、形态、长短、大小、细胞壁的 厚薄及表面形态等。多为单列性多细胞毛，少为单细胞毛。形态一般呈长圆锥形或线形；细胞壁一般较薄，外壁表面大 都光滑。腺毛：留意头部的形态、大小、细胞的数目、排列状况以 及柄部的长短、细胞数目及行列数目等。6.6.果实类果实类 （1 1）果皮细胞的形态、大小。）果皮细胞的形态、大小。（2 2）外果皮上可能有非腺毛及腺毛，留意长短、形态。）外果皮上可能有非腺毛及腺毛，留意长短、形态。（3 3）中果皮内的分泌组织）中果皮内的分泌组织 油细胞，油室、油管、石细胞等油细胞，油室、油管、石细胞等 （4 4）内果皮石细胞，大小、细胞壁的厚薄，如为镶嵌层，则）内果皮石细胞，大小、细胞壁的厚薄，如为镶嵌层，则 应留意其排列形式。应留意其排列形式。7.7.种子类种子类 （1 1）种皮）种皮 表皮毛的形态、细胞壁的厚薄、是否木化、有无纹理；表皮毛的形态、细胞壁的厚薄、是否木化、有无纹理；石细胞形态、大小、色泽散布及细胞壁的增厚状况。石细胞形态、大小、色泽散布及细胞壁的增厚状况。栅状细胞及油细胞。栅状细胞及油细胞。（2 2）外胚乳）外胚乳 细胞大小、形态、壁厚、色泽、细胞内含物。细胞大小、形态、壁厚、色泽、细胞内含物。（3 3）内胚乳）内胚乳 细胞形态、厚度、内含物。细胞形态、厚度、内含物。（4 4）胚的子叶）胚的子叶 有无分泌组织及细胞的内含物。有无分泌组织及细胞的内含物。（三）应用实例 六味地黄丸的显微定性鉴别 显微鉴别 取本品置显微镜下视察，(1)薄壁组织棕色至黑棕色，细胞多皱缩，内含棕色核状物。(熟地黄)(2)果皮表皮细胞橙黄色，表面观类多 角形，垂周壁略连珠状增厚。(山茱 萸)(3)淀粉粒三角状卵形或矩圆形，直 径2440um，脐点短缝状或人字状。(山药)3a草酸钙针晶束3b淀粉粒 (4)草酸钙簇晶存在于无色薄壁细胞中 ，有时数个排列成行。(牡丹皮)(5)不规则分枝状团块无色，遇水合 氯醛溶化；菌丝无色，直径4-6um。(茯苓)(6)薄壁细胞类圆形，有椭圆形纹孔，集成纹孔群。(泽泻)二、中药制剂的一般理化鉴别法 （一）一般化学反应法 中药制剂一般选择有效成分、特征成分作为鉴别的对象。一般化学反应鉴别法多在试管中用湿法反应进行，制剂样品要先制成适宜的供试液。一般情形下用50-70乙醇回流提取制备供试液。一般化学反应法用于中药制剂鉴别应当留意以下几点：(1)慎重运用专属性不好的分析反应，如泡沫生成反应、三氯化铁显色反应等。(2)在分析前对样品进行分别、精制，除去干扰分析反应的物质借此改善鉴别方法的专属性。(3)接受阴性比照和阳性比照的方式，对拟定的鉴别方法进行反复验证，防止出现假阳性。实例1 牛黄解毒片中大黄、黄芩的定性鉴别反应 取本品6片(去包衣)，研细，加乙醇10ml，温热10分钟，过滤，滤液作如下反应：(1)取滤液5ml，加镁粉少量与盐酸0.5ml，加热，即显红色。（黄芩中有大量黄酮）(2)另取滤液4ml，加氢氧化钠试液，显红色，再加30过氧化氢溶液，加热，红色不消逝，加酸或酸性时，红色变为黄色。（大黄中含有羟基蒽醌）实例2 牙痛一粒丸中蟾蜍、朱砂、雄黄的定性鉴别反应 (1)取本品约0.1 g，研细，加氯仿5ml，浸泡1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酐少量使溶解，再滴加硫酸，初显蓝紫色，渐变为蓝绿色。（蟾蜍）(2)取本品约0.2g，研细，加水潮湿后，加氯酸钾的硝酸饱和溶液2ml，振摇，放冷，离心，取上清液，加氯化钡试液0.5ml，摇匀，溶液呈白色浑浊，离心，弃去上层酸液，再加水2ml，振摇，沉淀不溶解。（雄黄）(3)取本品适量，研细，用盐酸潮湿后，在光滑的铜片上摩擦，铜片表面即显银白色光泽，加热烘烤后，银白色消逝。（朱砂）（二）显微化学鉴别法 1.取药材的切片、粉末或中成药粉末，置载玻片上，滴加各种试剂，加盖玻片 在显微镜下视察产生的结晶或沉淀，以及特殊的颜色等，作为鉴别的特征。例：黄连粉末滴加稀盐酸，放置5分钟，可见小檗碱盐酸盐黄色结晶析出。穿心莲用水潮湿，切成横切片，滴加乙醇后加Kedde试液，叶肉组织显紫红色(穿心莲内酯成分的不饱和内酯环反应)。丁香切片滴加30氢氧化钠饱和溶液，略放置，可见油室内有针状丁香酚钠结晶析出。肉桂粉末加氯仿23滴，略浸渍，速加2盐酸苯肼1滴，可见黄色针状或杆状结晶(肉桂酸反应)。2.取药材粗粉加适当的溶剂浸提，将浸提液置载玻片上，滴加各种试剂，加盖玻片，在显微镜下视察反应。例如：槟榔粉末0.5g，加水34ml及稀盐酸1滴，微热数分钟，过滤，取滤液1滴于载玻片上，加碘化铋钾试液1滴，即发生混浊，放置后可见石榴红球形或方形结晶(槟榔碱)。曼陀罗叶少许，加氯仿提取，提取液蒸干，加发烟硝酸1滴，显黄色，加氢氧化钾1粒，显紫堇色(莨菪烷类成分Vitali反应)。3.取药材切片或粉末，滴加各种试剂，干脆视察反应现象。例如：钟乳石少许，加浓盐酸数滴，能产生大量气泡(碳酸盐分解 产生CO2)。番木鳖胚乳薄片，加1钒酸铵-硫酸试液1滴，胚乳速显紫色 (番木鳖碱)，另取切片加发烟硝酸1滴，即显橙红色(马钱子 碱)。大黄粉末少许，置白磁板上，加氢氧化钠液l滴，显深红色(蒽醌钠盐)。（三）升华法 操作方法：取金属片安放在有圆孔(直径约2cm)的石棉板上，在金属片上放一小金属圈(内径约1.5cm，高约0.8cm)，对准石棉板上的圆孔，圈内放入预先研细成粉末的中药制剂一薄层，圈上覆盖载玻片，在石棉板下圆孔处用酒精灯缓缓加热，至粉末起先变焦，去火待冷，载玻片上有升华物凝集。将载玻片反转后，置显微镜下视察结晶形态、色泽，或取升华物加试液视察反应。实例 牛黄解毒丸微量升华鉴别 取本品进行微量升华，先得白色升华物后（冰片），继得黄色升华物（大黄中蒽醌）。将升华物分别置显微镜下视察：白色升华物呈不定形的无色片状结晶，加新制的1香草醛硫酸溶液，渐显紫红色，黄色升华物呈黄色针状结晶或羽状结晶，遇碱显红色，遇酸变为黄色。（四）荧光法 有些中药材中含有能产生荧光的化学成分，在可见光、紫外光照射下能发出荧光，或经试剂处理后发出荧光。含有这类药材的中药制剂可用荧光法进行鉴别。通常的操作方法是取制剂的提取液点在滤纸上或试纸上，置紫外光灯下(365nm)视察，有时则是加确定的试剂后再进行视察。实例l 元胡止痛片的荧光鉴别 取本品适量，去糖衣，研细，取粉末1g，加0.25molL硫酸液10ml振摇片刻，滤过，取滤液数滴，点于滤纸上，阴干后置紫外光灯(365nm)下视察，显亮黄色荧光。1.可见紫外分光光度法 不同的药材所含的成分不同，在确定条件下吸取光谱的特征可用于鉴别药材。利用这一特点，可见-紫外分光光度法也可用于中药制剂的鉴别。2.红外光谱法（五）光谱法五）光谱法 （六）色谱法 中药制剂可用色谱法鉴定，包括薄层色谱法、纸色谱法、气相色谱法和高效液相色谱法。1.薄层色谱法 运用本法鉴定中药制剂，通常是在同一块薄层板上点入样品和适宜的比照物 接受同一条件依法层析绽开，经显色或用其他方法检精彩谱斑点后，将样品与比照物所得的色谱图进行对比，作出鉴定。（1）样品应作适当的预处理 对样品进行初步的分别精制。常用的预处理方法有：升华法，蒸馏法，溶剂提取法，小型层析柱的柱色谱法、离子交换法等。（2）绽开剂的选择 选用能突出主要斑点，便于分析比较的绽开剂，假如鉴别的对象相同，应首先试用已有的、较成熟的绽开剂。如无现有绽开剂，可先以无水乙醇-苯（14）绽开，如主要物质的Rf在0.8以上，改用苯-氯仿（13），如主要物质的Rf在0.3以下，改用丙酮-甲醇（11）。（3）比照品的选择 中国药典(一部)作薄层鉴别用的比照物有比照品和比照药材两种。TLC用作中药制剂鉴别的另一类比照物是阴阳比照溶液。（4）薄层色谱的扫描定性鉴别 TLC绽开后，斑点的检识方法，有通用性的，如在紫外光灯下视察出现的荧光，或用碘蒸气、稀硫酸、磷钼酸显色等，这类方法专属性不强。另一类是专属性较好的显色剂，例如碘化铋钾试液，茚三酮试液和三氯化铝试液等，一般可依次说明斑点归属。还可用薄层扫描仪将薄层板上的斑点转换绘制成峰形色谱图，这种色谱图以斑点绽开后移动的距离为横坐标，斑点对光辐射的吸取强度或放射荧光的强度为纵坐标的峰形曲线图谱。应用实例 1.大黄及含大黄的成药 1）供试液制备 取各样品适量，加甲醇20ml浸渍1h，过滤，取滤液5ml，蒸干，加水10ml使溶解，再加HCl 1ml，水浴加热30min，马上冷却，乙醚提取两次，20ml/次，合并乙醚液，蒸干，残渣加氯仿溶解成1ml。2）比照液制备 取大黄比照药材0.1g按供试液制备作为比照药材溶液；另取芦荟大黄素，大黄酸，大黄素，大黄素甲醚，大黄酚比照品，加甲醇制成1mg/ml的溶液，作为比照品溶液。3）薄层板 硅胶H加0.3CMC-Na溶液的自制板；厚度：300um 4）点样 分别点样4uL。5）绽开剂 石油醚(3060)-甲酸乙酯-甲酸(1551)放置后的上层溶液。6）绽开方式 上行绽开；展距：7cm。7）显色 置紫外光灯(365nm)下检视。8）色谱识别 紫外光灯(365nm)下，供试品色谱中，在与比照药材色谱相应的位置上，显相同的五个橙黄色荧光主斑点 9）备注 在部分成药样品的色谱中，除大黄的五个蒽醌成分的斑点外，尚有其它荧光斑点，为处方中的其它成分。1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 样品：1芦荟大黄素；2大黄酸；3大黄素；4大黄素甲醚；5大黄酚；6大黄(掌叶大黄)比照药材；7大黄(唐古特大黄)比照药材；8大黄流浸膏；9小儿化毒散；10槟榔四消丸；11木香槟榔丸；12枳实导滞丸；13牛黄上清丸；14清宁丸；15一捻金；16牛黄解毒片；17牛黄解毒丸 2.黄连、黄柏及含黄连、黄柏的成药 1）供试液制备 取各品种药粉适量，加甲醇5ml，置水浴回流15min，过滤滤液浓缩至1ml。2）比照液制备 取盐酸香槟酒小檗碱，硫酸黄连碱，硫酸表小檗碱，非 洲防己碱，药根碱，盐酸巴马汀比照品，加甲醇制成每0.5mg/ml的溶液，作为 比照品溶液。3）薄层板 硅胶G自制板；厚度：500um 4）点样 分别点样1-2ul 5）绽开剂 苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液 (631.51.50.5)另槽中加入与绽开剂等体积浓氨试液 6）绽开方式 绽开箱预平衡15分钟；上行绽开；展距：8cm 7）显色 置紫外光灯(365nm)下检视。8）色谱识别 中国药典黄连项下收载有味连，雅连，云连三种，总体分析黄连可见45个主要的黄色荧光斑点，自下而上，分别为l.非洲防己碱+药根碱(量少)；2.巴马汀；3.小檗碱；4.表小檗碱(云连不含，雅连含量低)；5.黄连碱(味连含量高)。黄柏主要检出巴马汀及小檗碱，可与黄连区分。1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 样品：样品：1.1.黄连黄连(味连味连)；2.2.黄连；黄连；3.3.黄连黄连(雅连雅连)；4.4.黄连黄连(云连云连)；5.5.黄连黄连(野连野连)；6.6.黄连黄连(日本黄连日本黄连)；7.7.小儿化毒散；小儿化毒散；8.8.万应锭；万应锭；9.9.大补阴丸；大补阴丸；10.10.木香槟榔丸；木香槟榔丸；11.11.香连丸；香连丸；12.12.黄柏；黄柏；13.13.非洲防己碱；非洲防己碱；14.14.药根碱；药根碱；15.15.巴马汀；巴马汀；16.16.小檗碱；小檗碱；17.17.表小檗碱；表小檗碱；18.18.黄连碱。黄连碱。2.纸色谱法 3.气相色谱法 气相色谱法的分别效能高，检测器种类多而且灵敏度高，是 混合物鉴别的有效方法。该法目前主要是用于含挥发油和挥 发性成分的制剂分析。4.高效液相色谱法 主要是利用化合物在特定的色谱柱上，在确定条件下的保留 值，将某一样品与其比照品在同一条件下，进行保留时间的 干脆比较作为鉴别依据。对于困难未知成分，也可以加入对 照品，视察被测峰是否增高，以初步作定性结论。对于困难 组分尚可接受联机技术，如本法与质谱联用，先分别后再作 定性鉴别。其次节其次节 中药制剂杂质检查中药制剂杂质检查中制药制剂检查包括的主要内容：中制药制剂检查包括的主要内容：u制剂通则检查制剂通则检查u一般杂质检查一般杂质检查u特殊杂质检查特殊杂质检查u微生物限度检查微生物限度检查一、杂质的来源：一、杂质的来源：中药制剂中存在的杂质，来源于三个方面：中药制剂中存在的杂质，来源于三个方面：u由中药材原料中带入；由中药材原料中带入；u在生产制备过程中引入；在生产制备过程中引入；u贮存过程中受外界条件的影响而使中药制贮存过程中受外界条件的影响而使中药制剂剂 u 的理化性质变更而产生。的理化性质变更而产生。u一般杂质：指在自然界中分布较广泛，在一般杂质：指在自然界中分布较广泛，在多种药材的采集、收购、加工以及制剂的多种药材的采集、收购、加工以及制剂的生产或贮存过程中简洁引入的杂质。生产或贮存过程中简洁引入的杂质。u特殊杂质：指在该制剂的生产和贮存过程特殊杂质：指在该制剂的生产和贮存过程中，依据其来源、生产工艺及药品的性质中，依据其来源、生产工艺及药品的性质有可能引入的杂质。有可能引入的杂质。杂质的分类：杂质的分类：二、杂质的限量检查二、杂质的限量检查 u杂质限量：杂质限量：u 药物中所含杂质的最大允许量，通常药物中所含杂质的最大允许量，通常用百分之几或百万分之几来表示。用百分之几或百万分之几来表示。u u限量检查：限量检查：u 规定确定限度，要求所检样品中某组规定确定限度，要求所检样品中某组分含量不超过此限度。分含量不超过此限度。三、杂质限量计算方法三、杂质限量计算方法例：重金属限量计算：例：重金属限量计算：取供试品取供试品1.0g1.0g与标准铅溶液与标准铅溶液2.0ml2.0ml制成制成的比照液比较，计算重金属限量。的比照液比较，计算重金属限量。第三节第三节 一般杂质检查方法一般杂质检查方法 一、重金属检查法：一、重金属检查法：（一）基本原理（一）基本原理1 1、在弱酸性条件下：、在弱酸性条件下：CHCH3 3CSNHCSNH2 2+H+H2 2OCHOCH3 3CONHCONH2 2+H+H2 2S S Pb Pb2+2+H+H2 2SPbS+2HSPbS+2H+2 2、在碱性条件下：、在碱性条件下：Pb Pb2+2+S+S2-2-PbSPbS（二）检查方法（二）检查方法 中国药典中国药典20052005版规定重金属检查方法有四种。版规定重金属检查方法有四种。第一法第一法 适用于供试品不经有机破坏，在酸性溶液中显色的重金属限量适用于供试品不经有机破坏，在酸性溶液中显色的重金属限量检查检查 取两支纳氏比色管取两支纳氏比色管甲管甲管乙管乙管标准铅溶液标准铅溶液+醋酸盐缓醋酸盐缓冲液（冲液（pH3.5pH3.5）2ml+2ml+水水或各药品项下规定的或各药品项下规定的溶剂稀释成溶剂稀释成25ml 25ml 供试品溶供试品溶液液25ml25ml硫代乙酰胺试液各硫代乙酰胺试液各2ml 2ml 摇匀摇匀 放置放置2min 2min 同置白纸上同置白纸上,自上向下透视自上向下透视 乙管中显出的颜色不得比甲管更深乙管中显出的颜色不得比甲管更深其次法其次法 适于供试品需灼烧破坏，取炽灼残渣项下遗留的残渣，经处理适于供试品需灼烧破坏，取炽灼残渣项下遗留的残渣，经处理后在酸性溶液中显色的重金属限检查。后在酸性溶液中显色的重金属限检查。取炽灼残渣项取炽灼残渣项下遗留的残渣下遗留的残渣 移置纳氏移置纳氏比色管中比色管中 蒸干至氧化蒸干至氧化氮蒸汽除尽氮蒸汽除尽 加硝酸加硝酸0.5ml0.5ml放放冷冷 加水加水15ml 15ml 置水浴置水浴上蒸干上蒸干 滴加氨试液至对滴加氨试液至对酚酞指示液显中性酚酞指示液显中性 加醋酸盐缓冲液加醋酸盐缓冲液（pH3.5pH3.5）2ml 2ml 加盐酸加盐酸2ml2ml微热微热溶解溶解 加水稀释加水稀释成成25ml 25ml 另取配制供试另取配制供试品溶液的试剂品溶液的试剂 置瓷皿中蒸干置瓷皿中蒸干 加醋酸盐缓冲液加醋酸盐缓冲液（pH3.5pH3.5）2ml 2ml 加水加水15ml 15ml 移置纳氏移置纳氏比色管中比色管中 微热微热溶解溶解 加标准铅加标准铅溶液确定量溶液确定量 用水稀释用水稀释成成25ml 25ml 以上两管溶液，以上两管溶液，照上述第一法检查照上述第一法检查 第三法第三法 适用于检查能溶于碱而不溶于稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）适用于检查能溶于碱而不溶于稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）的药品中的重金属检查。的药品中的重金属检查。置纳氏比色管中硫化钠试液置纳氏比色管中硫化钠试液5 5滴，摇匀滴，摇匀 甲管甲管乙管乙管标准铅溶液适量标准铅溶液适量氢氧化钠试液氢氧化钠试液5ml5ml水水20ml20ml硫化钠试硫化钠试液液5 5滴，摇匀滴，摇匀 供试品适量供试品适量氢氧化钠氢氧化钠试液试液5ml5ml水水20ml20ml溶解溶解 乙管中显出的颜色不得比甲管更深乙管中显出的颜色不得比甲管更深第四法第四法 适用于有色溶液或重金属限量低的品种。适用于有色溶液或重金属限量低的品种。用微孔滤膜过滤，用微孔滤膜过滤，使重金属硫化物深厚富使重金属硫化物深厚富集成色斑后与确定量标集成色斑后与确定量标准铅溶液获得的色斑进准铅溶液获得的色斑进行比较检查行比较检查 二、砷盐检查法二、砷盐检查法 砷盐检查法系指用于药品中微量砷（以砷盐检查法系指用于药品中微量砷（以AsAs计计算）限量检查的方法。算）限量检查的方法。（一）古蔡法（一）古蔡法 1.1.基本原理：基本原理：AsO AsO3 33-3-+3Zn+9H+3Zn+9H+AsHAsH3 3+3Zn+3Zn2+2+3H+3H2 2O O 产生的砷化氢与溴化汞试纸作用产生的砷化氢与溴化汞试纸作用:AsH AsH3 3+2HgBr+2HgBr2 22HBr+AsH(HgBr)2HBr+AsH(HgBr)2 2 (黄色黄色)AsH AsH3 3+3 HgBr+3 HgBr2 23HBr 3+As(HgBr)3HBr 3+As(HgBr)3 3 (棕色棕色)五价五价砷在酸性溶液中也能被金属锌砷在酸性溶液中也能被金属锌还还原原为砷化氢，但生成砷化氢为砷化氢，但生成砷化氢比三价砷慢比三价砷慢。2.2.检查方法：检查方法：A A为为100ml100ml标准磨口锥形瓶标准磨口锥形瓶B B为中空的标准磨口塞为中空的标准磨口塞 C C为导气管为导气管,全长约全长约180mm180mmD D为具孔的有机玻璃旋塞为具孔的有机玻璃旋塞 E E为中心具有圆孔的有机玻璃旋塞盖为中心具有圆孔的有机玻璃旋塞盖古古蔡蔡法法装装置置 顶端平面上放一片溴化汞试纸顶端平面上放一片溴化汞试纸 盖上旋塞盖上旋塞E E并旋紧并旋紧 样品溶液样品溶液中装入醋酸铅棉花中装入醋酸铅棉花60mg60mg（装管高度为（装管高度为606080mm80mm）(2)(2)标准砷斑的制备标准砷斑的制备 精密量取标准砷溶液精密量取标准砷溶液2ml2ml，置置A A瓶中，加盐酸瓶中，加盐酸5ml5ml与水与水2ml2ml，再加碘化钾试液再加碘化钾试液5ml5ml与酸性氯化与酸性氯化亚锡试液亚锡试液5 5滴，在室温放置滴，在室温放置1010分分钟后，加锌粒钟后，加锌粒2g2g，马上将照上，马上将照上法装妥的导气管法装妥的导气管C C密塞于密塞于A A瓶上，瓶上，并将并将A A瓶置瓶置25254040水浴中反应水浴中反应4545分钟，取出溴化汞试纸，即分钟，取出溴化汞试纸，即得。得。(3)(3)检查法检查法 取按各药品项下规定方法制成的供试取按各药品项下规定方法制成的供试品溶液，置品溶液，置A A瓶中，照标准砷斑的制备，自瓶中，照标准砷斑的制备，自“再加碘化钾试液再加碘化钾试液5ml”5ml”起，依法操作。将起，依法操作。将生成的砷斑与标准砷斑比较，不得更深。生成的砷斑与标准砷斑比较，不得更深。（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDCAg-DDC法）法）1.1.基本原理：基本原理：二乙基二硫代氨基甲酸银二乙基二硫代氨基甲酸银 二乙基二硫代氨基甲酸二乙基二硫代氨基甲酸（简称（简称Ag-DDCAg-DDC）（简称（简称HDDCHDDC）2.2.检查方法：检查方法：（1 1）仪器装置）仪器装置 A A为为100ml100ml标准磨口锥形瓶；标准磨口锥形瓶；B B为中空的标准磨为中空的标准磨口塞，口塞，C C上连导气管上连导气管;D;D为平底玻璃管为平底玻璃管 测试时，于导气管测试时，于导气管C C中装入醋酸铅棉花中装入醋酸铅棉花60mg60mg（装管高度为（装管高度为60-80mm60-80mm）；并于）；并于D D管中精密加入二管中精密加入二乙基二硫代氨基甲酸银试液乙基二硫代氨基甲酸银试液5ml5ml。（2 2）标准砷比照液的制备）标准砷比照液的制备 精密量取标准砷溶液精密量取标准砷溶液5ml5ml（3 3）检查法）检查法 将所得溶液与标准砷比照液同置白将所得溶液与标准砷比照液同置白色背景上，从色背景上，从D D管上方向下视察、比较，所得溶液管上方向下视察、比较，所得溶液的颜色不得比标准砷比照液更深。的颜色不得比标准砷比照液更深。3.3.留意事项：留意事项：（1 1）有机碱液的选择）有机碱液的选择 该法须要加入确定量该法须要加入确定量的有机碱以中和反应中的二乙基二硫代氨基甲酸。的有机碱以中和反应中的二乙基二硫代氨基甲酸。（2 2）反应的温度和时间）反应的温度和时间 本法在本法在25254040水水浴中反应浴中反应4545分钟为宜。在此温度下，有部分氯仿分钟为宜。在此温度下，有部分氯仿挥发损失，故在比色前应添加氯仿至挥发损失，故在比色前应添加氯仿至5.00ml5.00ml，摇，摇匀后再进行比色测定。匀后再进行比色测定。三、干燥失重测定法三、干燥失重测定法1 1、药品的干燥失重：、药品的干燥失重：系指药品在规定的条件下，经干燥后所减系指药品在规定的条件下，经干燥后所减失的重量，主要是指水分、结晶水，但也包括失的重量，主要是指水分、结晶水，但也包括其他挥发性的物质如乙醇等。其他挥发性的物质如乙醇等。2 2、水分分为、水分分为必要的水分：即结晶水或组成水分；必要的水分：即结晶水或组成水分；不必要的水分不必要的水分:即附着水分或吸留的水分。即附着水分或吸留的水分。3 3、检查方法、检查方法常用干燥失重测定法常用干燥失重测定法4 4、留意事项、留意事项（1 1）供试品的颗粒大小）供试品的颗粒大小 一般将颗粒限制在一般将颗粒限制在2mm2mm以以 下，若供试品为较大结晶，为了避开在研下，若供试品为较大结晶，为了避开在研磨过程磨过程 中水分等损失，应先快速捣碎成中水分等损失，应先快速捣碎成2mm2mm以下以下的小粒。的小粒。（2 2）供试品用量）供试品用量 除另有规定外，一般取供试除另有规定外，一般取供试品约品约1g1g。（3 3）铺设的厚度）铺设的厚度 应将供试品平铺在扁形称量应将供试品平铺在扁形称量瓶中，瓶中，厚度不行超过厚度不行超过5mm5mm，如为疏松物质，厚度，如为疏松物质，厚度不行超不行超 过过10 mm10 mm。（4 4）瓶盖的放置）瓶盖的放置 将称量瓶放入烘箱或干燥器将称量瓶放入烘箱或干燥器中中 时，应将瓶盖取下，置称量瓶旁或将瓶盖时，应将瓶盖取下，置称量瓶旁或将瓶盖半开进半开进 行干燥。取出时须将瓶盖盖好。在每次干行干燥。取出时须将瓶盖盖好。在每次干燥后应燥后应 先置干燥器内放冷至室温，然后称定重量。先置干燥器内放冷至室温，然后称定重量。（5 5）如供试品未达到规定的干燥温度即溶化）如供试品未达到规定的干燥温度即溶化 时，应先将供试品置较低的温度下干燥时，应先将供试品置较低的温度下干燥 至大部分水分除去后，再按规定条件干至大部分水分除去后，再按规定条件干 燥。燥。（6 6）减压时需留意压力变更，如真空度较高）减压时需留意压力变更，如真空度较高 时，干燥器易爆炸！初次运用新干燥器时，干燥器易爆炸！初次运用新干燥器 时，宜用较厚的布包在外部，以防玻璃时，宜用较厚的布包在外部，以防玻璃 飞溅而引起损害。飞溅而引起损害。（7 7）恒重系指供试品连续）恒重系指供试品连续2 2次干燥后的重量次干燥后的重量 差异在差异在0.3mg0.3mg以下，干燥至恒重的第以下，干燥至恒重的第2 2次次 及以后各次的称重均应在规定条件下继及以后各次的称重均应在规定条件下继 续干燥续干燥1h1h后进行。后进行。四、水分测定法四、水分测定法 水分测定法是指接受规定的方法对不同性质的水分测定法是指接受规定的方法对不同性质的中药材及其制剂进行水分含量测定。中药材及其制剂进行水分含量测定。干燥失重测定法除测定水特别尚含有挥发成分，干燥失重测定法除测定水特别尚含有挥发成分，而水分测定仅仅是测定供试品中的水分。而水分测定仅仅是测定供试品中的水分。因此，它们之间测定方法、测定条件和要求并不因此，它们之间测定方法、测定条件和要求并不尽相同。尽相同。（一）测定方法（一）测定方法烘干法烘干法 本法适用于不含或含少量挥发性成分的本法适用于不含或含少量挥发性成分的药品药品 测定方法：取供试品测定方法：取供试品2 25g5g平铺于干燥至平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过5mm5mm，疏松样品不超过疏松样品不超过10mm10mm，精密称定，打开，精密称定，打开瓶盖在瓶盖在100100105105干燥干燥5 5小时，将瓶盖盖小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却好，移置干燥器中，冷却3030分钟，精密分钟，精密称定重量，再在上述温度干燥称定重量，再在上述温度干燥1 1小时，冷小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超却，称重，至连续两次称重的差异不超过过5mg5mg为止。依据减失的重量，计算供试为止。依据减失的重量，计算供试品中含水量（品中含水量（%）。）。甲苯法甲苯法 适用于含挥发性成分的药品适用于含挥发性成分的药品测定方法：取供试品适量精密称定，置测定方法：取供试品适量精密称定，置A A瓶中，瓶中，加甲苯约加甲苯约200ml200ml，自冷凝管顶端加入甲苯，至，自冷凝管顶端加入甲苯，至充溢充溢B B管的狭细部分。将管的狭细部分。将A A瓶置电热套中或用瓶置电热套中或用其它适宜方法缓缓加热，待甲苯起先沸腾时，其它适宜方法缓缓加热，待甲苯起先沸腾时，调整温度，使每秒钟馏出调整温度，使每秒钟馏出2 2滴。馏出液甲苯和滴。馏出液甲苯和水分进入水分测定管中，水的相对密度大于水分进入水分测定管中，水的相对密度大于甲苯，沉于底部，甲苯流回甲苯，沉于底部，甲苯流回A A瓶中。待水分完瓶中。待水分完全馏出，即测定管刻度部分的水量不再增加全馏出，即测定管刻度部分的水量不再增加时，将冷凝管内部先用甲苯冲洗，再用饱蘸时，将冷凝管内部先用甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷或其他适当方法，将管壁上附着甲苯的长刷或其他适当方法，将管壁上附着的甲苯推下，接着蒸馏的甲苯推下，接着蒸馏5 5分钟，放冷至室温，分钟，放冷至室温，拆卸装置，如有水粘附在拆卸装置，如有水粘附在B B管的管壁上，可用管的管壁上，可用蘸甲苯的铜丝推下，放置，使水分与甲苯完蘸甲苯的铜丝推下，放置，使水分与甲苯完全分别（可加显色剂）。检读水量，并计算全分别（可加显色剂）。检读水量，并计算供试品中含水量（供试品中含水量（%）。）。甲苯法水分测定装置甲苯法水分测定装置（二）留意事项（二）留意事项 1.1.测定用的供试品，一般先裂开成直径不超过测定用的供试品，一般先裂开成直径不超过3mm3mm的的颗粒或碎片（裂开时不得运用高速粉碎机）。直径和长度颗粒或碎片（裂开时不得运用高速粉碎机）。直径和长度在在3mm3mm以下者可不裂开。如运用减压干燥法需先经二号筛。以下者可不裂开。如运用减压干燥法需先经二号筛。2.2.甲苯法中，为削减因甲苯与微量水混溶引起水分测甲苯法中，为削减因甲苯与微量水混溶引起水分测定结果偏低，在测定前，甲苯需先加少量水，充分振摇使定结果偏低，在测定前，甲苯需先加少量水，充分振摇使达饱和后放置，将水层分别弃去，经蒸馏后方可运用。达饱和后放置，将水层分别弃去，经蒸馏后方可运用。3.3.进行减压干燥时，减压操作宜渐渐进行，不行隧然进行减压干燥时，减压操作宜渐渐进行，不行隧然大幅度减压。大幅度减压。4.4.接受气相色谱法时需留意接受气相色谱法时需留意无水乙醇含水量约无水乙醇含水量约3%3%，标准溶液与供试品溶液的配制需用同一批号试剂。无水乙标准溶液与供试品溶液的配制需用同一批号试剂。无水乙醇中的含水量须要扣除。醇中的含水量须要扣除。含水量的计算接受外标法。含水量的计算接受外标法。五、炽灼残渣检查法五、炽灼残渣检查法 炽灼残渣（英国药典称为硫酸灰分）：炽灼残渣（英国药典称为硫酸灰分）：中药多由有机化合物组成，有机物经炽灼中药多由有机化合物组成，有机物经炽灼炭化，再加硫酸潮湿炭化，再加硫酸潮湿,加热使硫酸蒸气除尽后，加热使硫酸蒸气除尽后，于高温（于高温（700700800800）炽灼至完全灰化，使有）炽灼至完全灰化，使有机质破坏分解变为挥发性物质逸出，残留的非机质破坏分解变为挥发性物质逸出，残留的非挥发性无机杂质（多为金属的氧化物或无机盐挥发性无机杂质（多为金属的氧化物或无机盐类）成为硫酸盐。类）成为硫酸盐。（一）检查方法（一）检查方法 取供试品取供试品1.01.02.02.0或各药品项下规定的重量，置已或各药品项下规定的重量，置已炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化，炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化，放冷至室温；除另有规定外，加硫酸放冷至室温；除另有规定外，加硫酸0.50.51ml1ml使潮湿，使潮湿，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在低温加热至硫酸蒸气除尽后，在700700800800炽灼使完全炽灼使完全灰化，移置干燥器内，放冷至室温，精密称定后，再在灰化，移置干燥器内，放冷至室温，精密称定后，再在700700800800炽灼至恒重，即可。如需将残渣留作重金属炽灼至恒重，即可。如需将残渣留作重金属检查，则炽灼温度必需限制在检查，则炽灼温度必需限制在500500600600。（二）留意事项（二）留意事项 1.1.取样量可依据炽灼残渣限量来确定，取样取样量可依据炽灼残渣限量来确定，取样量过多，炭化及灰化时间长，取样量少，炽灼残量过多，炭化及灰化时间长，取样量少，炽灼残渣量少，称量误差大。渣量少，称量误差大。2.2.加热时，必需当心地先用小火加热，以免加热时，必需当心地先用小火加热，以免供试品溅出坩埚外，切不行干脆大火加热坩埚底供试品溅出坩埚外，切不行干脆大火加热坩埚底部，否则供试品全部受热引起暴沸或燃烧。部，否则供试品全部受热引起暴沸或燃烧。3.3.生药的灰化可以加确定量已恒重的纯砂或生药的灰化可以加确定量已恒重的纯砂或混以乙醇、甘油，以分散增大其与氧接触的面积，混以乙醇、甘油，以分散增大其与氧接触的面积，使灰化完全。使灰化完全。4.4.如需将残渣留作重金属检查，则炽灼温度如需将残渣留作重金属检查，则炽灼温度必需限制在必需限制在500500600600。5.5.具有挥发性的无机成分中药受热挥发或分具有挥发性的无机成分中药受热挥发或分解，残留非挥发性杂质，也可用炽灼残渣法检查。解，残留非挥发性杂质，也可用炽灼残渣法检查。六、灰分测定法六、灰分测定法 1 1、总灰分、总灰分 中药经粉碎后加热，高温炽灼至灰中药经粉碎后加热，高温炽灼至灰化，则其细胞组织及其内含物成为灰烬而残留，由化，则其细胞组织及其内含物成为灰烬而残留，由此所得灰分为此所得灰分为“生理灰分生理灰分”即总灰分。即总灰分。2 2、酸不溶性灰分、酸不溶性灰分 中药经高温炽灼得到的