2022年生物工程下游技术知识要点.docx

精选学习资料 - - - - - - - - - 读书之法 ,在循序而渐进 ,熟读而精思第三章 发酵液预处理与固液分别1.加水稀释法（稀释后要过滤速率提高的百分比要 大于加水量）1.降低液体黏度 2.加热法 2.调整 PH （如利用蛋白质的等电点）3.凝结：在电解质作用下,由于胶粒之间双电层电排斥作用降低,电 位下降,而使胶体体系不稳固的现象；过滤特性转变 凝结值越小,凝结才能就越强絮凝： 在有些高分子絮凝剂存在下,絮凝团的过程；混凝：包括上述两种方法；基于桥架作用, 使胶粒形成较大4.加入助滤剂（最常见的是硅藻土）5.加入反应剂1. Ca 2+ : 加草酸钠除杂Mg2+ :加三聚磷酸钠C a2+ ：加黄血盐1.沉淀法2.杂蛋白的除去：2.变性法 （有加热法,调PH,加酒精,丙酮等有机溶剂或表面活性剂等；）3.吸附法 加入某些吸附剂或沉淀剂吸附 杂蛋白而除去 固液分别手段1.离心公式： Q=v 2Z g3ctgvd2SL18Z2nr23r 13g2.过滤 （ 1）板框过滤机（适合固体含量在的悬浮液 的分别）名师归纳总结 （）真空转鼓过滤机（适合固体含量大于）第 1 页,共 21 页（）硅藻土过滤机（适合固体含量小于）- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 读书之法 ,在循序而渐进 ,熟读而精思第五章 细胞破壁细胞破壁破壁方法：（）珠磨法原理：进入珠磨机的细胞悬浮液与极细的玻璃小珠,石英砂, 氧化铝等研磨剂一起快速搅拌或 研磨,研磨剂,珠子与细胞之间的相互剪切,碰撞,使细胞破裂；（2 ）高压匀浆法原理： 利用高压使细胞悬浮液通过针形阀,由于突然减压和高速冲击撞击环使细胞破 碎；是大规模细胞破裂的常用方法；（3）超声破裂法（适合试验室用）（4 ）酶溶法 1 .外加酶法 2. 自溶法（1）加热法（2）干燥法（5）化学渗透法2.破裂率的测定（ 1）直接测定法破裂前利用显微镜计数器直接计数破裂后用染色的方法把破裂的细胞与未受损 的细胞分开；即可直接运算破裂率；（2）目的产物测定法 通过测定破裂液中目的产物的释放量 来估算破裂率；（3）导电率测定法 依据导电率随着破裂率的增加而呈线性 增加第五章溶剂萃取与浸取一、溶剂萃取过程的理论基础：是把目标物质从第一个液相中依靠更强大的溶解力抽提到其次个液相中；如把水相中的醋酸抽提到醋乙酯中；1萃取溶剂的挑选依据萃取目标产物的介电常数,查找极性相接近的溶剂为萃取溶剂；好的溶剂应满意以下要求：萃取容量大,单位体积萃取溶剂能萃取大量产物；挑选性好,只萃取产物而不萃取杂物；有利于相的分散和两相分别,与被萃取相互溶度小,且粘度小,界面传力小易回收和再生；化学致定性好,不易分解,对设备腐蚀性小；经济性好,价廉易得；安全性好,闪点高,对人体无毒或低毒；名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 21 页精选学习资料 - - - - - - - - - 读书之法 ,在循序而渐进 ,熟读而精思二安排定律和分别因数1）分别因数如原先料液中除溶质A 以外, 仍有溶质B,就萃取剂对溶质A、B 的分别才能可用分别因数（B）来表征：平稳后：1 萃取液, 2 萃余液B=（c1A/c1B）/c2A/c2B=c 1A/c2A/c 1B/c2B=k A/kB 如 A 为产物, B 为杂质B=k 产/k 杂B 越偏离于 1,产物与杂质越简洁分别；三、水相条件对萃取的影响1）PH 值 k 表观安排系数 产物的稳固性挑选性 B= k产/k杂2）温度 产物稳固性k 3）盐析无机盐类（硫酸铵、氯化钠等）一般可降低产物在水中的溶解度而使其更易转 入有机溶剂相中,另一方面仍能减小有机溶剂在水相的溶解度；如提取 V B12 时,加入（NHa ）2so4 可促其自水转到有机相；但盐的用量要相宜,防止促杂质一起转至有机相,仍要考试成本,必要时可回收；4）带溶剂能和产物形成复合物,使产物更易溶于有机相中,且该复合物在肯定条件下 又简洁分解；四、乳化和去乳化1、乳化1）乳化一种液体（分散相）分散在另一种不相混溶的液（连续相）体中的现象；有两种形式：水包油 O/W 、W/O ；在乳浊液中,界面积大,物系的自由能大,故为热力学不稳固系统,时间一长,乳浊液会自行破坏；2）稳固的措施：加入表面活性剂,降低表面传力；影响稳固的因素：表面活性剂在界面上形成的爱护膜的情形；名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页,共 21 页精选学习资料 - - - - - - - - - 读书之法 ,在循序而渐进 ,熟读而精思液滴是否带电（带电、同性互斥,稳）介质的粘度（粘大,不易集合,稳）3）乳化给萃取带来的不良影响 有机相与水相分层困难,显现两种夹带 水相中夹有有机相产物的丢失 有机相中夹有水相后续精制困难 2、破乳化 工业生产中,自量物系中的一些物质会成为表面活性剂,使乳化液较稳固；如在发酵液中,蛋白质就成为表面活性剂,且多形成 O/W 乳化液；破乳方法：过滤或离心分别 物理法（加电解质中和离子型乳浊液的电荷）物理法（加热、稀释、吸附等）顶替法： 加入表面活性更大,但因其碳链较短难以形成牢固的爱护膜的物质,取代界面上的乳化剂；转型法：向O/W 中加入亲油性乳化剂,有转化成W/O 倾向,又不稳固,而破乳；其次节浸取一、浸取过程 1过程 浸取过程系指出溶媒进入细胞组织溶解、浸取目的产物后,变成浸取液的全部过程；1）浸油：材料与浸取溶剂混合时,溶剂第一附着于材料表面使之润湿,然后通过毛细管和 细胞间隙进入细胞组织中；2）溶解：溶剂进入组织后,溶解可溶性成分；3）扩散：溶剂溶解目的产物后,具有较高的浓度,故即形成扩散点,不停地向四周扩散,这是浸取的动力；4）置换：浸取的关键在于保持最大的浓度梯度；是把握浸出过程和设计浸出器械的关键问题；二、溶剂的挑选1）原就：“ 相像相溶” 原理；2）良好溶剂要求：用浸取溶剂随时置换材料四周的浓浸取液,名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 21 页精选学习资料 - - - - - - - - - 读书之法 ,在循序而渐进 ,熟读而精思对目的产物的安排系数K D 大且对目的物质的挑选性高；价廉、无毒,无腐蚀性,闪点高,无爆炸性,易于除去和回收；3）产物用途限制：食品（无毒,不能致癌）；3、增溶作用 用酶或酸碱催化生物大分子发生水解反应或促使大分子溶解,使原先不溶或难溶性的生物 大分子物质向可溶性的、分子量较小的生物物质转变；某些场合下,这些反应不能进行过度；如浸取或胶物质时,过度降解会降低胶体物质的成 胶才能；4、固体原料预处理 1）恰当地粉碎原料：以缩短固体或细胞内部溶质分子向其表面扩散的距离；过细：粉碎能耗上升有害物质的过度溶出 过滤与分别困难 固体床层被压实,不利于溶剂渗透和溶质的扩散 2）有机溶剂浸取前,对含水物料进行干燥,否就影响浸润过程；第六章超临界流体超临界流体第一节一、临界点 横坐标为温度,纵坐标为压力,1001200 的直线为等密度线；固相与液相的界线；介线：固相与气相的界线；沸腾线：液相与气相界线 三重点 Tri-Point ：熔融线、升华线、沸腾线；相交点、临界点：二条相互垂直的虚线的交 点,其概念可用临界温度和临界压力来说明；1、临界温度是指高于此温度时,无论加压多大也不能使气体液化；所以沸腾线从三重 点到临界温度至；2、临界压力是指在临界温度,液化气体所需的压力；3、临界点：临界温度与临界压力相交所构成的点；二、超临界流体1、定义：是相图中,状态高于临界温度和临界压力的流体；名师归纳总结 （即虚线构出的右上角长方形区）；第 5 页,共 21 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 读书之法 ,在循序而渐进 ,熟读而精思2、特点：在临界点的邻近,密度线集合于临界点四周,压力或温度的小范畴变化,就会引起 co2 密 度的大幅度变化；其次节 超临界萃取的原理 1、定义 2、图 6-1 （a）癸酸熔点31,沸点269,常温下呈固态；至-196,且抽真空；（b）升温至 19.5,真空不再, 由于固体升华成气态,可算出癸酸向真空中的溶解度（浓度）为3× 10-6g/L ；产生压力 （3× 10-6mn/g）由 pv=nRT ,（c） 用乙炔 Tc=283k,Pc=50atm 做为超临界（T=292.5,p=82atm ）萃取溶剂,此时乙炔密度为 0.3g/nl ,接近于液体密度,溶解度为 7g/l ,与（ b）比增加了 1 亿倍；（d）压力温度与（c）同,与（ c）不同的是用 N2 代替了乙炔；由于 T=292.5k 距 Tc=126k较远,等温线较陡,Pr= 82 2,对应的密度很小,0.06g/ml ,其溶解复与（b）相近；33 . 5说明白：并非全部超临界流体溶剂在同 TP 下具有相同的溶解复；溶质在超临界流体中的溶解度,与其密度有关；P 越大,溶解越大,P 越小,溶解越小；3、原理：由超临界流体的特点相知：在临界点邻近（即工作区里）剂的 P 大幅度增加,对溶质溶解度大幅度增加,有利于溶质的萃取；而, P 上升或 T 下降就溶 P 下降或 T 上升,就溶剂的 P 大幅度减小,对溶质的溶解度将大幅度减小,有利于溶质的分别和溶剂的回收；前面我们从能量的角度,分析过溶解过程；溶剂与溶质间的分子作用力强,就溶解得好,此时作用力的大小,与溶剂的分子数量/单位体积,即密度有关,P 大,溶解度大；1、定义：超临界萃取是将超临界流体作为萃取溶剂的一种萃取液；第三节 超临界 co2 萃取 一、 SC-Co2萃取1）纵坐标为相对含量,横坐标是混合参数（挥发性、分子量、极性、化学物性等构成；）从左右依次为香精油组分、萜烯类、游离脂肪酸、脂肪、蜡、树脂、色素等；水蒸气蒸馏法：获得香精油部分（萃取物）名师归纳总结 良好的非极性溶剂（甲叉氯）：少许高聚物乘余（萃余物）第 6 页,共 21 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 读书之法 ,在循序而渐进 ,熟读而精思SC-co2 萃取与压力、温度有关,3Ompa60 pB30g/ 与甲叉氯相像； （萃取多,可用其萃余物）,p 下降、p 下降、溶解度下降, 分别线左移, 也可获得水蒸汽蒸馏的产品（取其萃取物） ；2）全萃取物色较深,可通过转变 P or T,转变 co2 萃取才能, 来转变萃取物的色度；30mpa co2 萃酒花制品绿色,14mpa 为黄色；二、超临界 co 2（简称 SC-co 2）萃取的优点表 6-1 为一些超临界萃取溶剂的临界点性质,其中 SC-co2 优点：co2 在工业上应用广泛；无毒、无腐蚀性、不行燃烧,纯度高且价格低廉；粘度低SC-co2 的粘度是通常有机溶剂粘度的几特别之一,0. 030.091033pas扩02.30.10pas散系数大（溶质在SC-co2 中扩散系数比通常液体中高出50-100 倍）传质性能良好,使萃取能在相对较短的时间内完成；Pc 和 Tc 相对较低,适合于处理某些热敏性生物制品和自然物产品；适合于得到萃取物的目的,也适合于获得萃取后的余留物质的场合；三、拖带剂作用 拖带剂能增加物质的溶解度和萃取挑选性的帮助溶剂；如： co2 添加 14%丙酮后,甘油酯的溶解度增加了22 倍；SC-co2 由于有极性的H2co3 ,纯 co2 几乎不能从咖啡中萃取咖啡因,但加湿（水）的在肯定条件下,能挑选地溶解萃取极性咖啡因；第五节 SC-co2 萃取流程1、萃取工段特别别工段（溶质和 co2 分别）1）图 6-9 中,（ A）等温条件下,萃取相,PV 、膨胀、溶质分别；co2经压缩后再加至萃取 槽；2）（B）为等压条件下,萃取相、升温,溶质分别；3）（C）为萃取相中的溶质由分别槽中的吸附吸附,第七章双水相萃取技术co2经压缩后再加至萃取槽；co2再回到萃取槽中；萃取是最常用的一种液液分别方法,一般的有机溶剂萃取法由于以下缘由难于应用于蛋白质分别： 1；很多蛋白质都有极强的亲水性,不溶于有机溶剂；失活；2；蛋白质在有机溶剂中易变性第一节双水相分别理论名师归纳总结 - - - - - - -第 7 页,共 21 页精选学习资料 - - - - - - - - - 读书之法 ,在循序而渐进 ,熟读而精思一双水相的形成当两种混合物相互混合时,到底是否分别或混合成一相,取决于：一为体系熵的增加,二为分子间的作用力； ,分子量越大,分子间的作用力也越大两种被混合分子间如存在空间排斥力,它们的线团结构无法相互渗透,就在达到平稳后就有可能分为两相,形成双水相；广泛应用的双水相体系有：聚乙二醇（二相图PEG）/葡聚糖（ DEX ）体系, PEG/盐等体系；VT 表示上相体积,VB 表示下相体积VT/VB=BM/MT 当点 M 向下移动时,系线长度缩短,两相差别减小,到达C 点时,系线长度为0,两相间差别消逝而成为一相,因此C 点为系统临界点；三物质在两相中的安排1表面自由能的影响2表面电荷的影响3综合考虑4影响安排平稳的参数（1） 聚合物的影响（2） 体系中无机盐离子的影响（3） 体系 pH 的影响（4） 体系温度的影响（5） 体系微生物的影响第八章 反胶团萃取第一节 概述反胶团的微小界面和微小水相具有两个特异性功能：（1）具有分子识别并答应挑选性头国的半透膜的功能；（2）在蔬水性环境中具有使亲水性大分子如蛋白质等保持活性的功能；其次节 反胶团的形成一反胶团的构造当向非极性溶剂中加入表面活性剂时,如表面活性剂的浓度超过肯定的数值时,也会在非极性溶剂内形成表面活性剂的集合体；与在水相中不同的是,非极性溶剂内形成的表面活性剂集合体,与蔬水性的非极性尾部向外,指向非极性溶剂,而极性头向内,与在水相中形成的微胶团方向相反,因而称之为反胶团或反向胶团（Reversed Micelles ）；阳离子型、 和表面活性剂的存在是构成反胶团的必要条件,有三类表面活性剂即阴离子型、非离子表面活性剂； 在用反胶团萃取技术分别蛋白质的争论中使用得最多的是阴离子型表面活性剂 AOT ,其化学名称是琥珀酸二（2-乙基己基）酯磺酸钠；AOT 简洁获得,它具有双链,形成反胶团时无需添加帮助表面活性剂且有教好的强度；它的极性基团较小,所形成的反胶团空间较大,有利于生物发分子的进入；二反胶团的物理化学特性1 反胶团的临界胶团浓度2 反胶团含水率 W 三制备名师归纳总结 - - - - - - -第 8 页,共 21 页精选学习资料 - - - - - - - - - 读书之法 ,在循序而渐进 ,熟读而精思1 注入法 2 相转移法 3 溶解法 第三节生理活性物质的分别浓缩 1 反胶团萃取原理（P157-158）2 蛋白质的溶解（158-159）3反胶团萃取（P159-164）第六章 膜分别过程膜的定义两相之间的不连续区间；膜即“ 区间” 不是通常的相界面,可为气相、液相和固 相,可以均相或非均相、对称或非对称,荷电或中性；膜的优点：过程一般较简洁,费用低、效率较高、常温下操作；第一节 膜和膜分别过程的分类与特性一、膜的分类 膜分别的实质物质通过膜的传递速率不同而得到分别；1、对称膜：膜的结构与方向无关,如具有不规章的孔结构,或者全部的孔具有确定的直径；2、非对称膜：分别层（薄而致密）二多孔支撑层；二层为同一种材料活性膜,孔径的大小 和表皮的性质打算了分别特性,而厚度主要打算传递速度,该层必需朝向的原溶液；优点：高传质速率（分层等）和良好的机械强度；被脱除物附在表面,易于清除；3、复合膜 膜的性能：不仅打算于挑选薄层,而且受微孔支撑活物、孔径、孔分布和多孔率的影响；4、荷电膜：即离子交换膜,属于对称膜 溶胀胶固定有正电荷可交换的为阴离子；5、液膜,有关章节争论；6、微孔膜：孔径大小为 0.0520 m 的膜 7、动态膜：在多孔介质上（如陶瓷管）沉积一层颗粒物（如氯化铝）作为有挑选作用的膜；可在高温下应用,但膜很不稳固；二、重要的膜分别过程（表 9-1 ）1、渗透和透析（推动力浓度差）2、反渗透和超滤（推动力压力差）3、电渗析（电位差为推动力）名师归纳总结 - - - - - - -第 9 页,共 21 页精选学习资料 - - - - - - - - - 读书之法 ,在循序而渐进 ,熟读而精思4、气体分别（压力差为推动力）是利用微孔或无孔膜进行气体分别；膜的材料可以是高分子聚合物膜,也可以是金属膜或玻动膜；主要用于合成氨工业中氢的回收等；其次节 膜的基本理论一、膜分别过程的机理1、膜分别过程的基本传质形式1）被动传递：是最简洁的形式,从化学势高向低处传递；化学势能量状态,是转变一单位物质（如 学势较高区域到较低区域；mol ）时内能的变化率,所以物质自发地从化内能与物质量有关,化学势是与物质量无关的能量状态；被动传递的推动力是化学势梯度（可以是压力差、浓度差、电势差）；2）促进传递：推动力仍是化学势梯度；组分由特定载体带入膜中,是高挑选性的被动传递,能和 B 结合的 A 被传递；3）主动传递：从化学势低处传至化学势高处,需做功,由膜内某化学反应供应推动力；2、膜过程中的物质传递 以被膜脱除的溶质（或非优先挑选的）i,通过非对称膜为例,如反渗透；1）主流体系区间：在稳固情形下,溶质的浓度是匀称的,且在垂直于膜表面的方向无浓度 梯度；2）边界层区间：当溶剂透过膜,而溶质留在膜上,使膜面浓度增大,并高于主体中浓度,称此为浓差极化（浓度极化）；是造成膜或膜体系效率下降的主要因素；可导致溶质自膜面反扩 散至主体中；是可逆的,需用搅拌等方式促进其反扩散和提高脱除率；3）表面区间：在此区间发生着两种过程,是溶质向膜表面扩散时,被吸附而溶入膜中；一是由于膜的不完整和表面上的小孔缺陷,溶质有对流现象（即扩散透过膜的动向,又反扩散离膜而出）；即膜边界层料液中的溶质没有全部进入膜的表层；因此此区间的溶质浓度；此边界层的溶质浓度低得多；不行能完全被吸附；4）表皮层区间：此区间是高度致密的表皮,是抱负无孔型的,反渗透非对称膜表皮层是对溶质的脱除性；要求这层愈薄愈好,有利于降低流淌的阻力和增加膜的渗透率；溶质和渗透物在此区间以分子扩散为主,也有小孔缺陷中的少量对流；名师归纳总结 - - - - - - -第 10 页,共 21 页精选学习资料 - - - - - - - - - 读书之法 ,在循序而渐进 ,熟读而精思5）多孔支区间：是高度多孔的区度,对表皮层起支撑作用,对渗透物质的流淌有肯定的阻 力；6）表面区间：此区间溶质从膜中解吸,离开膜进入低压侧；由于多孔层基本上无挑选性,安排系数7）边界层区：物质扩散方向与膜垂直；浓度随流淌方向而降低；8）主流体区间：在稳固状态下,其中溶质的主流体浓度为；综上所述,溶质在膜中的渗透率取决于：膜本身的化学物质（吸附、挑选、缺陷）膜两边溶液的条件（压力、搅拌、浓度）传质总阻力：为边界层+膜层阻力之和；概论第七章液膜分别第一节一、定义1、液膜液体膜,是从生物膜神奇的挑选性输送功能上得到启示而仿照的一种人工膜；液体膜是一层很薄的液体（称为膜相）,这层液体既可以是水溶液,也可以是有机深夜；它 能把两个互溶但组成不同的溶液隔开,并通过这层液实现物质挑选性分别；通常被隔开的溶液是水溶液（内、外水相）,膜相就是与内外水相都不互溶的油性物质；2、液膜分别：三相分别系统（膜相、被萃取相、反萃取相）二、液膜的分类：整体液膜：液膜是一个整体,主要用于载体开发和基础争论上；支持液膜：工业性上应用；乳化液膜：工业性应用的主要类型；三、液膜的膜相组成：膜溶剂、表面活性剂、流淌载体、膜增强剂 1、膜溶剂：是膜相的基体物质,相当于生物膜类脂双分子层中的疏水部分；使用较多的膜溶剂是高分子烷烃、异烷烃类物质；较抱负膜溶剂的几个特点：（1）能保持操作过程的稳固性；有肯定的粘度,又不溶解于内外水相；名师归纳总结 - - - - - - -第 11 页,共 21 页精选学习资料 - - - - - - - - - 读书之法 ,在循序而渐进 ,熟读而精思（2）良好的溶解性；能优先溶解欲提取物质,而对杂质的溶解越少越好,同时对膜相中的 其他组分也有较好的互溶性；（3）膜溶剂与水相应有肯定的相对密度差,以利于操作后期膜相与料液的分别；2、表面活性剂（1%-5% ）是液膜分别系统中稳固油水分界面的最重要部分,相当于生物膜类脂双分子层的亲水端；其挑选特别重要；3、流淌载体（1%-5% ）事实上它经常是某种萃取剂,能对欲提取的物质进行挑选性搬运迁移,相当于生物膜中的蛋白质载体,对挑选性和膜的通量（或分别速度）起打算性作用；4、膜增强剂（很少或没有）起增加膜的稳固性作用；使膜在分别操作时不过早破裂,而在破乳工序中液膜层又简洁破 碎,以利于膜相与内水相的分别；其次节 肥化液的制备与分别机制一、乳化液膜的制备内水相含表面活性剂的油相（内、外水相成分不同隔离）二、乳化液膜的分别机制W/O 乳化液连续水相（外水相中）乳化液膜有两大娄：载体扩散迁移和载体促进传递两大类机制；1、无载体扩散迁移（1）单纯扩散迁移（2）内相化学反应促进迁移（假设内相为接受相）2、载体促进传递（1）载体促进扩散传递 特点：膜相有载体（C）,溶质（ A ）和载体（ C）结合后,在液相中转移,在内相界释放溶 质 A（或以离子形式） ,另外载体得到复元后,连续在外相界与溶质 A 结合；（2）载体促进并流传递：液膜分别青霉素为例（3）载体促进逆流传递 第四节膜分别技术的工艺流程及其应用一、乳化液膜的优点名师归纳总结 - - - - - - -第 12 页,共 21 页精选学习资料 - - - - - - - - - 读书之法 ,在循序而渐进 ,熟读而精思液膜技术在工业上应用时更多地是使用乳化液膜,其优点如下：（1）具有挑选性（2）较高的浓缩才能（一般目标产物从外水到内水的浓缩）（3）连续运转的可能性（4）处理便利、经济性好 二、乳化液膜分别的工艺流程1、乳化（同前也制作）液膜相（ O）和内水相（反萃取相O）通过一猛烈搅拌的装置,制成W/O 乳化液,内水相为分散相,膜相为连续相；2、分别浓缩 将 W/O 乳化液和外水相（料液,被萃取相）置于一带有温顺搅拌的反应器（萃取器）中,形成 W/O/W 型液膜系统；外水相中待分别物质进入内水相中,达到分别浓缩的目的；3、破乳（离心、加热、木目转移法、化学法）（1）W/O/W 经过一澄清分别器（静置）分层,除去外水相；（2）W/O 相,经过破乳,将内水相与膜相分开；膜相可循环用,从内水相中获得产物；电破乳：膜相中随机性运动着的,微米级的分散微水滴（内相）在外加电场作用下,应极化,微 水滴间产生引力,在该引力的作用下发生冲撞而逐步聚结,从有机相中分别出来；表面活性剂的极性端沿内水相、球面匀称分布,对 外加沟通电场的作用下,也发生错位、冲撞集合,使W/O 乳化液的稳固起重要作用,但在 W/O 分成水相和膜相；第五节 关于液膜过程不利因素的争论一、膜破裂1、缘由：搅拌产生的剪切刀（温顺）过大的内相尺度（强搅）粗劣的膜相组成2、后果：效下降,把已分别进入内相的溶质又送回到外相,仍得依靠于尚未破裂的乳化液膜重新 分别；名师归纳总结 - - - - - - -第 13 页,共 21 页精选学习资料 - - - - - - - - - 读书之法 ,在循序而渐进 ,熟读而精思外相条件变化,使分别难上升；内相中的试剂进入外相引起的；3、防止：转变膜的配方（增加粘度,表活剂浓上升,转变膜相材料）操作条件的合理（体会）二、膜膨胀：是一个传递外相水深液进入内相的过程；是自由水的进入,不是交换（逆流水）；1、表面活性剂水化机理外相盐浓低,水活度高,外界内表面活性剂亲水部分与水结合；然后扩散至内界面；内相盐浓高,水活度低,结合水被脱除至内相；2、外相水溶液的反胶团传递机理第八章 色谱分别色谱分别（ CR）也称为色层分别或层析分别,在分析检测中就常称为色谱分析（CA ）；固定相 +多组分混合物 +流淌相组成；利用多组分混合物中各组分物理化学性质（如吸附力、分子极性、分子外形和大小、分子亲和力、安排系数等）的差异,使各组分以不同的程度分布在两个相中,随流淌相流淌时,就以不同的速率移动,使之分别；第一节 色谱分别的分类一、 按分别机理不同分类（5 大类）1、 吸附色谱分别（AC 分别）2、安排色谱（DC ）3、离子交换色谱（IEC ）（1）IEC：是基于离子交换树脂上可电离的离子与流淌相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换,由于混合物中不同溶质对交换剂具有不同的亲和力而将它们分别；（2）适应性：适应于离子和在溶剂中可发生电离的物质的分别；大多数生物大分子都是极性的,都可使其电离,所以离子交换色谱广泛用于生物大分子的分别纯化,特殊是在蛋白质、多肽、核酸等生物物质的分别纯化中,离子交换色谱分别占主导位置；名师归纳总结 4、凝胶色谱（GC）色谱分别的基本原理第 14 页,共 21 页5、亲和色谱（AFC ）其次节色谱分别原理（图12-1）- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 读书之法 ,在循序而渐进 ,熟读而精思加样,洗脱剂冲洗 各组分与固定相无作用力与洗脱剂一起流淌,得不到分别；各组分与固定相有肯定作用力移动速率低于流淌相；各组分与固定相的作用力大小不同移动速率不同,作用力大,移动慢,各组分得到分离；名词：洗脱剂作为流淌相的液体；绽开加入洗脱剂而使各组分分层的操作；色谱绽开后各组分的分布情形；洗脱液洗脱时从柱中流出的溶液；一、安排色谱 我们已经知道,分别色谱是利用混合物中各组分在两种互不相溶的溶剂中的安排系数不同而得以分别；1、安排系数（1）载体（支持剂）安排色谱中,通常采纳一种多孔的固体（如硅胶、纤维素、淀粉、硅藻土等） 吸附着一种溶剂构成固定相；这种固体本身原分别不起什么作用,仅起一个支持作用；（2）安排系数当一个被分别的混合物在流淌相的携带下通过固定相时,溶质在固定相 和流淌相之间的平稳关系听从安排定律：K d=Cs Cm（3）线性色说与非线性色谱Cs=KdCm 谱；当溶质浓度较低时,Kd 为常数, Cs 与 Cm 成非线关系,其相应的色谱过程称为线性色当溶质浓度较高时（加样量过大）,Kd 将不再是常数,而成为与 Cm 有关的函数（如对数或指数关系） ,此时 Cs 与 Cm 不再是线性关系,其相应的色谱过程称为非线性色谱；其具有以下几个特点：a、溶质洗脱峰不再是对称的正态分布,而是有“ 拖尾” 或“ 伸舌” 现象；b、样品的保留值可变；线性色谱中同一样品的保留值是常数,只随样品不同而变化；c、色谱峰的峰高与浓度不是线性关系；在线性色谱中峰高与组分是线性关系；峰高是定量名师归纳总结 - - - - - - -第 15 页,共 21 页精选学习资料 - - - - - - - - - 读书之法 ,在循序而渐进 ,熟读而精思分析的重要数据；在非线性色谱中,峰高增加的速率随浓度的增加而逐步降低,因而峰高不能作为定量分析的指标；二、吸附色谱 1、吸附现象 固体与气体之间,固体与液体之间的表面上,都可以发生吸附现象；固体表面的分子（离子或原子）和固体内部分子所受的吸引力不同；内部分子,分子之间相互的作用力是对称,春力场相互抵消；表面分子所受的力是不对称的,为了达到力场的平稳（能量最小状态）,能吸附流经其表面的物质分子；2、吸附等温曲线吸附方程式A+B A-B 等温曲线在肯定温度下,溶质分子在两相界面上进行的吸附过程达到平稳时它们在 两相中浓度之间的关系曲线；langmuir 吸附等温曲线（凸形）：是液固系统中常见的一种；acB C（ A-B ）= ab 为吸附常数 bcB 1 三种等温曲线 凸反映溶质分子在固体表面达到饱和时形成单分子层吸附；凹表示形成多分子吸附层,与浓度有关 CB,CB 上升,吸附越多；S是凸形与凹形叠加而成的；溶质被单层吸附,被吸附的溶质进一步吸附其他分子；三、凝胶色谱分别 12-3 ）1、原理（图（1）大小不同分子混合样液加入柱顶端；（2）小分子进入凝胶内部,大分子不能被排阻在凝胶颗粒处；（3）大分子下流通较小,过快,第一被洗毒,而小分子就下流通大,速,与大分子拉开距 离；（4）大分子被洗脱出后,随着洗脱连续进行,小分子开头被洗脱出来；四、离子交换色谱 1、离子交换树脂（1）定义：是一种不溶于酸、碱和有机溶剂的固态高分子材料；由骨架和活性离子两部分名师归纳总结 - - - - - - -第 16 页,共 21 页精选学习资料 - - - - - - - - - 读书之法 ,在循序而渐进 ,熟读而精思组成；骨架：是不能移动的,多价的高分子基团,使树脂有上述化学稳固性和溶解性；活性离子：在树脂中可移动的离子；带正电为阳离子交换树脂,负电阴离交换树 脂；（2）例子：强酸性阳离子树脂R·SO3H RSO 3-+H+Na+ 强弱是以PH 值为准弱酸性阳离子树脂R·COOH RCOO-+H+PH 小,强酸 H+ 大强碱性阴离子树脂R·NR 3OH R·AR3+OH- PH 大,弱酸 H+ 小弱碱性阴离了树脂R·NH 2+H 2O R·NH 3+OH- 等其他类型（3）交换容量 交换容量是表征树脂性能的重要数据,它用单位质量干树脂或单位体积湿树脂所能吸附的1 价离子的毫摩尔数来表示；2、离子交换平稳（1）离子交换反应是可违反应 这种可逆反应并不是在均相溶液中进行,而是在固态的树脂和水溶液接触的界面间发生的；图 11-5,树脂上的活性离子B+ 与水溶液中的同类型离子（正电）An+之间的交换反应如下：An+nR-SO 3-B+B+R·SO3-nAn+ 2离子交换平稳常数 3、实例（1）决明子蛋白质的阴离子交换色谱分别 条件：由决明子蛋白质 P2（有降脂作用）的毛细管等电聚焦检测可知 P2 分为 PI5.88,5-61和 1.95 的三个峰,其中 PI 为 1.95 的带电负电；选阴离子交换柱；操作：用 NaOH0.2mol/L10 倍以上柱体积冲洗柱子,再生（R+·OH-）第五节 柱色谱分别法一、层析剂1、定义用于色谱分别技术中的固定相或分别介质；由基质和表面活性官能团（活动中 心）组心；基质材料应为化学惰性物质,与目的产物和杂质都无结合作用；活性官能团就依据所用色谱进行选用或制取；名师归纳总结 - - - - - - -第 17 页,共 21 页精选学习资料 - - - - - - - - - 读书之法 ,在循序而渐进 ,熟读而精思2、特性：不溶于流淌相,且有较好的化学稳固性和机械强度；能经受使用、 清洗和再生时的各种环境条