过硫酸钾氧化紫外分光光度法.doc

过硫酸钾氧化紫外分光光度法1 原理总氮 total nitrogenTN，指可溶性及悬浮颗粒中的含氮量，包括水中亚硝酸盐氮、硝酸盐氮、无机铵盐、溶解态氨及大局部有机含氮化合物中氮的总与。在60以上水溶液中，过硫酸钾可分解产生硫酸氢钾与原子态氧，硫酸氢钾在溶液中离解而产生氢离子。分解出的原子态氧在120124条件下，使水样中含氮化合物的氮元素转化为硝酸盐，采用紫外分光光度法于波长220nm与275nm处，分别测定吸光度A220及A275，按以下公式计算校正吸光度A，AA2202A275 总氮以NO3-N计含量与校正吸光度成正比。 过硫酸钾分解反响式如下： K2S2O8+H2O2KHSO4+21O2 KHSO4K+HSO4- HSO4-H+SO42-本方法的有效测定范围为。2 实验用品2.1仪器：1000ml容量瓶、100ml容量瓶、10ml比色管假设干、最大量程分别为5ml、1ml、0.2ml的移液枪一支、分光光度计；2.2 药品：氢氧化钠、过硫酸钾、硝酸钾、浓盐酸HCl、浓硫酸H2SO4； 试剂配制：1碱性过硫酸钾溶液:称取40.0g 过硫酸钾，溶于600ml水中可置于50水浴中加热至全部溶解；另称取15.0g 氢氧 化钠溶于300ml水中。待氢氧化钠溶液恢复到室温后，混合 两种溶液定容至1000ml，并存放在聚乙烯瓶内，可保存一周；2硝酸钾标准贮备液： 称取硝酸钾，溶于适量水中，移至1000ml容量瓶中定容，混匀。其中的总氮含量为100mg/L。参加1ml2ml三氯甲烷为保护剂，在010暗处保存，可稳定6个月；3标准硝酸钾工作液：准确移取硝酸钾标准贮备液至100ml容量瓶中定容，混匀，临用现配。其中的总氮含量为10mg/L；45mol/L NaOH溶液 :称取20gNaOH，加水定容至100ml；5硫酸溶液：取10ml浓硫酸参加350ml水中冷却备用；6盐酸溶液：取10ml浓盐酸参加90ml水中冷却备用；3 实验步骤取10支试管，按以下表格参加试剂显色，以蒸馏水为参比水样进展调零，并测定吸光值A220、A275工程0123456硝酸钾标准工作液/ml0各个管分别加水稀释至4ml碱性过硫酸钾溶液/ml塞紧管口后，于高压蒸汽灭菌锅121ºC反响30min，冷却至室温盐酸溶液/ml用蒸馏水定容至10ml对应各管中4ml溶液总氮浓度以NO3N计/(mg/L)0A275Ar= A2202 A275A= ArAr0以编号17的数据作标准曲线，横坐标为对应各管中10ml溶液总氮浓度以NO3N计mg/L，纵坐标为A；(附图为3月28日数据)取0.2ml经处理过的水样如有必要先稀释或减少用量于10ml比色管，用氢氧化钠溶液或硫酸溶液调节pH至59，然后参加蒸馏水稀释至4ml后，分别参加2ml碱性过硫酸钾溶液，然后塞紧管口后，置于高温蒸汽灭菌锅121ºC加热30min，冷却至室温；之后分别参加盐酸溶液ml，用水稀释至10ml；以蒸馏水为参比水样进展调零，并测定各管吸光值A220、A275，计算各个吸光值Ar=A2202A275各值减去空白试验即标准曲线0号管的吸光值Ar(0)=A220(0)2A275(0)即为校正值A此全过程应与标准曲线同时操作；工程0ABCDEF水样/ml0各个管分别加水稀释至4ml稀释倍数1111111碱性过硫酸钾溶液/ml塞紧管口后，于高压蒸汽灭菌锅121ºC反响30min，冷却至室温盐酸溶液/ml用蒸馏水定容至10mlA220A275Ar= A2202 A275A= ArAr0对应各管中10ml溶液总氮浓度以NO3N计/(mg/L)3.3水中氨氮的浓度按下式计算： N(TN)= 4×(A-a)/(b×V) ×D 式中：N(TN)原水样中总氮的浓度，mg/L，以N 计；A试样校正后的吸光值；b标准曲线的斜率；a标准曲线的截距；V所取试样的体积，ml；D稀释倍数水样未经稀释时此值为1；4 考前须知实验中玻璃器皿应用硫酸溶液浸泡，用自来水冲洗后再用蒸馏水冲洗数次；该方法可测量范围跨度很大，但也意味着溶液中总氮浓度过小会造成的误差几率也大，因此溶液所取量应尽量往高浓度方向进展；出于对所用蒸馏水可能含有含氮物质的缘故，会令标准曲线测试样及水样的测得值大于实际值，因此以0号管消去去蒸馏水可能含有含氮物质所造成的误差，所以标准曲线不过原点。第 6 页