实验一、微生物常用仪器设备,无菌操作技术.ppt

实验一、微生物常用仪器设备,无菌操作技术 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望微生物学实验的任务 v学学习习研研究究与与应应用用微微生生物物的的主主要要方方法法与与技技术术，掌掌握握适适应应于于从从事事相相关关学学科科的的基基础础理理论论研研究究与实际生产应用的微生物学实验技能。与实际生产应用的微生物学实验技能。v与与微微生生物物学学基基础础理理论论课课紧紧密密结结合合，在在实实验验中中更更深深地地理理解解基基础础理理论论，提提高高学学生生的的综综合合能力与创新意识。能力与创新意识。v提高学生分析问题和解决问题的能力。提高学生分析问题和解决问题的能力。教学要求教学要求 v注注重重微微生生物物学学基基础础实实验验技技能能的的掌掌握握与与提提高高，克克服服盲目追求新颖而忽视基础的倾向；盲目追求新颖而忽视基础的倾向；v实实验验课课前前要要预预习习，明明确确每每次次实实验验的的目目的的与与基基本本步步骤；骤；v在在实实验验中中要要有有严严谨谨的的科科学学态态度度，尊尊重重事事实实与与实实验验结果，要善于发现新现象；结果，要善于发现新现象；v树树立立密密切切合合作作的的风风气气，包包括括学学生生与与老老师师、班班与与班班、组与组、组长与组员之间的密切配合。组与组、组长与组员之间的密切配合。教学方法教学方法 v以学生自己动手为主，老师在适当时间予以提示；以学生自己动手为主，老师在适当时间予以提示；v对对实实验验中中所所出出现现的的一一些些现现象象多多向向学学生生提提出出问问题题，使他们学会分析结果，并与理论知识有机结合；使他们学会分析结果，并与理论知识有机结合；v根根据据实实验验的的进进行行程程度度，引引导导学学生生更更深深入入思思考考，逐逐步树立他们的创新意识；步树立他们的创新意识；v严严格格要要求求使使操操作作技技能能规规范范化化，老老师师作作示示范范，强强调调其要点学生自己练。其要点学生自己练。实验室制度1 1、每每次次实实验验前前必必须须对对实实验验内内容容进进行行充充分分预预习习，以以了了解解实实验验的的目目的的、原原理理和和方方法法，做做到到心心中中有有数数，思思路路清楚。清楚。2 2、认认真真及及时时做做好好实实验验记记录录，对对于于当当时时不不能能得得到到结结果果而而需需要要连连续续观观察察的的实实验验，则则需需记记下下每每次次观观察察的的现现象象和结果，以便分析。和结果，以便分析。3 3、实实验验室室内内应应保保持持整整洁洁、勿勿高高声声谈谈话话和和随随便便走走动动，保持室内安静。保持室内安静。4 4、实实验验时时小小心心仔仔细细，全全部部操操作作应应严严格格按按操操作作规规程程进进行行，万万一一遇遇有有盛盛菌菌试试管管或或瓶瓶不不慎慎打打破破、皮皮肤肤破破伤伤或或菌菌液液吸吸入入口口中中等等意意外外情情况况发发生生时时，应应立立即即报报告告指指导导教师，及时处理，切勿隐瞒。教师，及时处理，切勿隐瞒。5 5、实实验验过过程程中中，切切勿勿使使酒酒精精、乙乙醚醚、丙丙酮酮等等易易燃燃药药品品接接近近火火焰焰。如如遇遇火火险险，应应先先关关掉掉火火源源，再再用用湿湿布布或沙土掩盖灭火。必要时用灭火机。或沙土掩盖灭火。必要时用灭火机。6 6、使使用用显显微微镜镜或或其其他他贵贵重重仪仪器器时时，要要求求细细心心操操作作，特特别别爱爱护护。对对消消耗耗材材料料和和药药品品等等要要力力求求节节约约，用用毕毕后仍放回原处。后仍放回原处。7 7、每每次次实实验验完完毕毕后后，必必须须把把所所用用仪仪器器抹抹净净放放妥妥，将将实实验验室室收收拾拾整整齐齐。擦擦净净桌桌面面，如如有有菌菌液液污污染染桌桌面面或或其其他他地地方方时时，可可用用3%3%来来苏苏尔尔液液或或5%5%石石炭炭酸酸液液覆覆盖盖其其上上半半小小时时后后擦擦去去。如如系系芽芽孢孢杆杆菌菌，应应适适当当延延长长消消毒毒时时间间。凡凡带带菌菌之之工工具具(如如吸吸管管、玻玻璃璃刮刮捧捧等等)在在洗洗涤涤前须浸泡在前须浸泡在3%3%来苏尔液中进行消毒。来苏尔液中进行消毒。8 8、每每次次实实验验需需进进行行培培养养的的材材科科，应应标标明明自自己己的的组组别别及及处处理理方方法法，放放于于教教师师指指定定的的地地点点进进行行培培养养。实实验验室室中中的的菌菌种种和和物物品品等等，未未经经教教师师许许可可，不不得得携携出出室室外。外。9 9、每每次次实实验验的的结结果果,应应以以实实事事求求是是的的科科学学态态度度填填入入报报告告表表格格中中，力力求求简简明明准准确确，并并连连同同思思考考题题及及时时汇汇交交教师批阅。教师批阅。1010、离离实实验验室室前前应应将将手手洗洗净净，注注意意关关闭闭门门窗窗、灯灯、火火、煤气等。煤气等。教学内容和教学安排 实验实验一、一、微生物学实验基本操作技术微生物学实验基本操作技术实验实验二、二、培养基的制备、培养基的制备、消消毒与灭菌毒与灭菌 实验实验三、三、细菌简单染色法细菌简单染色法 实验实验四、四、细菌革兰氏染色法细菌革兰氏染色法 实验实验五、五、细菌芽孢染色法细菌芽孢染色法实验实验六六：细菌荚膜染色法：细菌荚膜染色法实验实验七、七、放线菌形态观察放线菌形态观察实验实验八、八、酵母菌形态观察及死活细胞的鉴别酵母菌形态观察及死活细胞的鉴别实验实验九、九、酵母菌子囊孢子的观察酵母菌子囊孢子的观察实验实验十、十、霉菌形态观察霉菌形态观察 实验实验十一、十一、微生物大小的测定微生物大小的测定实验十二、微生物的分离、纯化与接种培养实验十二、微生物的分离、纯化与接种培养实验十三、显微镜直接计数实验十三、显微镜直接计数实验十四、光电比浊计数法实验十四、光电比浊计数法实验十五、化学因素对微生物的影响实验十五、化学因素对微生物的影响实验十六、糖发酵试验实验十六、糖发酵试验实验十七、抗药性微生物的分离实验十七、抗药性微生物的分离实验十八、水中细菌总数的测定实验十八、水中细菌总数的测定成绩考核方面的说明及要求 v平时成绩平时成绩40%40%；包括：；包括：考勤及课堂纪律考勤及课堂纪律 实验预习实验预习 实验操作实验操作 实验报告及思考题实验报告及思考题v实验操作考试实验操作考试30%30%；包括：；包括：实验操作规范程度实验操作规范程度 实验操作熟练程度实验操作熟练程度 实验结果实验结果v抽签答题抽签答题30%30%。实验预习v实验课教材内容：实验课教材内容：原理原理 操作步骤操作步骤 注意事项注意事项 可能出现的问题及解决方法可能出现的问题及解决方法v理论课教材相关内容理论课教材相关内容v参考书相关内容参考书相关内容实验报告 v目的、意义和原理目的、意义和原理v材料与方法材料与方法v结果结果v讨论讨论采用科研论文格式，分成以下几个部分：采用科研论文格式，分成以下几个部分：实验一、微生物学实验基本操作技术v微生物学实验常用仪器及用途微生物学实验常用仪器及用途v微生物学实验常用器皿及准备微生物学实验常用器皿及准备v基本无菌操作技术基本无菌操作技术 微生物学实验常用仪器洁净工作台（超净工作台、无菌台）洁净工作台（超净工作台、无菌台）微生物学实验常用仪器生物安全柜生物安全柜微生物学实验常用仪器高高压压灭灭菌菌锅锅微生物学实验常用仪器烘箱烘箱微生物学实验常用仪器CO2培养箱培养箱微生物学实验常用仪器发酵罐发酵罐微生物学实验常用仪器水浴锅水浴锅微生物学实验常用仪器普通光学显微镜普通光学显微镜荧荧光光显显微微镜镜倒倒置置显显微微镜镜微生物学实验常用仪器分光光度计分光光度计微生物学实验常用仪器pHpH计计微生物学实验常用仪器离心机离心机微生物学实验常用仪器纯纯水水机机微生物学实验常用仪器制冰机制冰机微生物学实验常用仪器紫外交联仪紫外交联仪杂交炉杂交炉微生物学实验常用仪器酶标仪酶标仪洗板机洗板机微生物学实验常用仪器PCRPCR仪仪微生物学实验常用仪器电泳仪电泳仪（垂直板，水平板）（垂直板，水平板）微生物学实验常用仪器凝胶成像系统凝胶成像系统紫外检测仪紫外检测仪微生物学实验常用仪器冰箱冰箱/超低温冰箱超低温冰箱微生物学实验常用仪器液氮罐液氮罐微生物学实验常用仪器振荡器振荡器微生物学实验常用仪器真空泵真空泵微生物学实验常用仪器移液枪移液枪电动加样器电动加样器微生物学实验常用仪器滤器滤器微生物学实验常用的器皿(P258)v器皿的种类、要求与应用器皿的种类、要求与应用v玻璃器皿的清洗方法玻璃器皿的清洗方法v空玻璃器皿的包装空玻璃器皿的包装 器皿的种类、要求与应用v试管试管v德汉氏小管德汉氏小管v小塑料离心管（小塑料离心管（Eppendorf 管管)v吸管吸管v培养皿（平皿）培养皿（平皿）v三角形烧瓶与烧杯三角形烧瓶与烧杯v注射器和针头注射器和针头v载玻片与盖玻片载玻片与盖玻片v滴瓶滴瓶v接种工具接种工具玻璃器皿的清洗方法1.1.新玻璃器皿的洗涤方法新玻璃器皿的洗涤方法 含游离碱较多含游离碱较多 在酸溶液内浸泡后洗涤在酸溶液内浸泡后洗涤2.2.使用过的玻璃器皿的洗涤方法使用过的玻璃器皿的洗涤方法v试管、培养皿、三角烧瓶、烧杯试管、培养皿、三角烧瓶、烧杯v玻璃吸管玻璃吸管v载玻片与盖玻片载玻片与盖玻片空玻璃器皿的包装v包平皿包平皿v包吸管包吸管v包试管包试管v包三角锥瓶口包三角锥瓶口基本无菌操作技术基本无菌操作技术(P9)v接种环转接菌种操作接种环转接菌种操作v吸管转接菌液操作吸管转接菌液操作作业预习：预习：实验实验3 3 培养基的配制（附录培养基的配制（附录IIII）实验实验4 4 消毒与灭菌消毒与灭菌