DBS37∕ 001-2022 食品安全地方标准 金银花（开放花）.pdf

DBS 37注DDBS 37/001-20222022-7-14 发布2022-8-14 实施山东省卫生健康委员会山东省卫生健康委员会发布山 东 省 食 品 安 全 地 方 标 准食品安全地方标准金银花（开放花）DBS 37/001-20222前言本标准由山东省卫生健康委员会提出并归口。本标准起草单位：山东中医药大学。本标准主要起草人：张永清，张喆，李静，刘谦，张龙霏。DBS 37/001-20223食品安全地方标准金银花（开放花）1范围本标准适用于用作食品原料的干燥金银花（开放花）。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1 金银花（开放花）为忍冬科植物忍冬 Lonicera japonica Thunb.的开放花。3技术要求3.1 感官要求应符合表1规定。表 1 感官要求项目要求检验方法外观开放花朵，可见少量花蕾、叶状苞片。无霉变，无虫蛀。取适量样品平摊于白色瓷盘内，在自然光下观察外观、色泽，嗅其气味，尝其味道，检查杂质。气味、滋味气清香，无异味。味淡，微苦。色泽浅黄色、黄褐色至褐色。杂质无正常视力可见外来杂质。3.2 理化指标应符合表 2 规定。表 2 理化指标项目指标检验方法水分，g/100g12.0GB 5009.3总灰分，g/100g9.0GB 5009.4绿原酸，g/100g1.2附录 A木犀草苷，g/100g0.03附录 BDBS 37/001-202243.3 污染物限量应符合表 3 规定。表 3 污染物限量项目指标检验方法铅（以 Pb 计），mg/kg5.0GB 5009.12 或 GB 5009.268总砷（以As计），mg/kg2.0GB 5009.11 或 GB 5009.268镉（以Cd计），mg/kg1.0GB 5009.15 或 GB 5009.268总汞（以Hg计），mg/kg0.2GB 5009.17 或 GB 5009.2683.4 农药残留限量应符合 GB 2763 的规定。DBS 37/001-20225附录 A绿原酸含量测定方法A.1 范围本标准规定了金银花（开放花）中绿原酸的测定方法。方法的检出限（LOD）为 2.710-3g/kg，方法的定量限（LOQ）为 8.910-3g/kg，方法的线性范围为 50 g/mL500 g/mL。A.2 原理根据绿原酸易溶于甲醇、乙醇等极性有机溶剂的理化特性，样品中的绿原酸用 75%甲醇提取。提取液定容。过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，由紫外检测器检测，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。A.3 试剂和材料A.3.1 磷酸(H3PO4)：色谱纯。A.3.2 乙腈(CH3CN)：色谱纯。A.3.3 甲醇(CH3OH)：色谱纯。A.3.4 水(H2O)：GB 6682 一级水。A.3.5 绿原酸标准品：纯度98%。A.3.6 绿原酸标准品溶液(1.0 mg/mL)：精密称取绿原酸标准品 10.00 mg 于 10.0 mL 容量瓶中，加入75%甲醇溶解并定容至刻度，混匀。A.4 仪器和设备A.4.1 高效液相色谱仪：附紫外检测器。A.4.2 超声波清洗器。A.4.3 离心机。A.4.4 小型粉碎机。A.4.5 国家标准 R40/3 系列四号筛。A.5 分析步骤A.5.1 样品粉碎取样品用粉碎机粉碎，过四号筛，置干燥器中备用。A.5.2 样品溶液制备取样品粉末约 0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 75%甲醇 50 mL，称定重量，超声处理（功率 500 W，频率 40 kHz）30 min，放冷，再称定重量，用 75%甲醇补足减失的重量，摇匀，过0.22 m 滤膜，取续滤液进行液相色谱分析。A.5.2 标准曲线的制备分别精密吸取绿原酸标准品溶液（A.3.7）适量，用 75%甲醇稀释并定容至浓度分别为 50、100、200、400、500 g/mL 标准系列，依照色谱条件分别进样。A.5.3 液相色谱参考条件A.5.3.1 色谱柱：C18柱，4.6 mm250 mm，5 m。A.5.3.2 流动相：以乙腈为流动相 A，0.1%磷酸溶液为流动相 B，按下表中的规定进行梯度洗脱。DBS 37/001-20226时间（min）流动相 A（%）流动相 B（%）0814198681814198114341931816934353190691035409010A.5.3.3 流速：0.7 mL/min。A.5.3.4 柱温：不高于 25。A.5.3.5 检测波长：327 nm。A.5.3.6 进样量：2 L。A.5.3.7 色谱分析：取标准品溶液和样品溶液注入高效液相色谱仪中，以保留时间定性，以样品峰面积与标准比较定量。A.6 结果计算样品中绿原酸的含量按式（1）进行计算：1式中：X样品中的含量，单位为克每 100 克（g/100g）；c由标准曲线求得进样液中绿原酸的浓度，单位为微克每毫升（g/mL）；V样品定容体积，单位为毫升（mL）；m样品质量，单位为克（g）。两份平行样品的平均值作为最终测定结果，结果保留两位有效数字。A.7 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 10%。A.8 色谱图在上述色谱条件下的色谱图见图 1图 2。图 1 绿原酸标准色谱图DBS 37/001-20227图 2 金银花（开放花）样品色谱图DBS 37/001-20228附录 B木犀草苷含量测定方法B.1 范围本标准规定了金银花（开放花）中木犀草苷的测定方法。方法的检出限（LOD）为 5.010-3g/kg，方法的定量限（LOQ）为 1.710-2g/kg，方法的线性范围为 10 g/mL100 g/mL。B.2 原理根据木犀草苷易溶于甲醇、乙醇等极性有机溶剂的理化特性，样品中的木犀草苷用 70%乙醇提取。提取液定容。过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，由紫外检测器检测，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。B.3 试剂和材料B.3.1 冰醋酸(CH3COOH)：色谱纯。B.3.2 乙腈(CH3CN)：色谱纯。B.3.3 乙醇(CH3CH2OH)：色谱纯。B.3.4 水(H2O)：GB 6682 一级水。B.3.5 木犀草苷标准品：纯度98%。B.3.6 木犀草苷标准品溶液(0.2 mg/mL)：精密称取木犀草苷酸标准品 10.00 mg 于 50.0 mL 容量瓶中，加入 70%乙醇溶解并定容至刻度，混匀。B.4 仪器和设备B.4.1 高效液相色谱仪：附紫外检测器。B.4.2 超声波清洗器。B.4.3 离心机。B.4.4 小型粉碎机。B.4.5 国家标准 R40/3 系列四号筛。B.5 分析步骤B.5.1 样品粉碎取样品用粉碎机粉碎，过四号筛，置干燥器中备用。B.5.2 样品溶液制备取样品粉末约 2.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 70%乙醇 50 mL，称定重量，超声处理（功率 250 W，频率 35 kHz）60 min，放冷，再称定重量，用 70%乙醇补足减失的重量，摇匀，过0.22 m 滤膜，精密量取续滤液 10 mL，回收溶剂至干，残渣用 70%乙醇溶解，转移至 5 mL 量瓶中，加 70%乙醇至刻度，即可进行液相色谱分析。B.5.2 标准曲线的制备DBS 37/001-20229分别精密吸取木犀草苷标准品溶液（B.3.7）适量，用 70%乙醇稀释并定容至浓度分别为 10、20、40、80、100 g/mL 标准系列，依照色谱条件分别进样。B.5.3 液相色谱参考条件B.5.3.1 色谱柱：C18柱，4.6 mm250 mm，5 m。B.5.3.2 流动相：以乙腈为流动相 A，0.5%冰醋酸溶液为流动相 B，按下表中的规定进行梯度洗脱。时间（min）流动相 A（%）流动相 B（%）0151020908015302080304020308070B.5.3.3 流速：1.0 mL/min。B.5.3.4 柱温：不高于 25。B.5.3.5 检测波长：350 nm。B.5.3.6 进样量：10 L。B.5.3.7 色谱分析：取标准品溶液和样品溶液注入高效液相色谱仪中，以保留时间定性，以样品峰面积与标准比较定量。B.6 结果计算样品中木犀草苷的含量按式（1）进行计算：1式中：X样品中的含量，单位为克每 100 克（g/100g）；c由标准曲线求得进样液中木犀草苷的浓度，单位为微克每毫升（g/mL）；V样品定容体积，单位为毫升（mL）；m样品质量，单位为克（g）。两份平行样品的平均值作为最终测定结果，结果保留两位有效数字。B.7 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 10%。B.8 色谱图在上述色谱条件下的色谱图见图 1图 2。DBS 37/001-202210图 1 木犀草苷标准色谱图图 2 金银花（开放花）样品色谱图