无菌操作与细胞培养.docx

1 .实验进行前，超净工作台以紫外灯照射1520分钟灭菌，以70 %ethanol擦拭无菌操作抬面， 并开启无菌操作台风扇运转10分钟后，才开始实验操作。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70%e thanol擦拭无菌操作台面，紫外灯照射15-20分钟。2 .无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如移液器、试管架、吸管吸取器或吸头盒等可 以放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流流通。实验用品以70 % ethanol擦拭后才带入无菌操 作台内。实验操作应在台面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。3 .小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器 正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45。角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放 置桌面。4 .工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细 胞株应特别小心操作，并选择适当等级的生物安全柜操作（至少Class ll）o注意事项：1 . 一次将所有的所需要试剂、工具放入工作台。不要做到一半，又出工作间拿东西，这样增加了污 染的机会。2 .整个操作要快、动作要轻、而且不要干其他的事情。比如手机响了，最好不要接。3 .培养的试剂一定要用自己的。既不要借别人的，也不要借给别人。由于每个人的操作行为、用途 是不一样的，相互之间串用，很容易造成交叉污染。4 .定期检查C02钢瓶的压力、C02培养箱C02浓度、温度、及水盘是否有水？（水盘的水用无菌 水，每周更换）5 .超净工作台应定期更换紫外线灯管及HEPA过滤膜。