药典-计数培养基适用性检查.docx

计数培养基适用性检查计数培养基适用性检查1、一般要求2010 版2015 版范围固体培养基微生物计数用的成品培养基、由脱水培养墓 或按照处方配制的培养基均应进行培养基紊 用性检查，包括液体及固体培养基.试验菌大、金、枯、白、黑金、绿、枯、白、黑加菌量50-lOOcfu不大于lOOcfu培养温度营养琼脂：30-35C玫瑰红钠：23-28C胰酪大豆腺琼脂：30-35C培养 胰酪大豆膝液体：30-35C培养沙氏葡萄糖琼脂：20-25c培养°培养时间细菌：4h;真菌：72h细菌不大干3天,真菌不大于5天接受标准70%固体培养墓：0. 5-2(50% 200%) 液体蜡养基：生长良好2、胰酪大豆陈琼脂(TSA)无菌性检查：取已灭菌TSA注皿，于30-35C培养3天，应无菌落生长。试验用菌种：金葡、铜绿、枯草、白念、黑曲接种方法：涂布法：分别接种不大于lOOcfu试验用菌悬液于TSA平板外表；倾注法：分别接种不大于lOOcfu试验用菌悬液于无菌平皿中，倾注约15ml该培养基，轻轻 摇匀。适用性检查：枯草芽抱杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌于30-35培养不超过3天;白色念珠菌、黑曲霉于30-35C培养不超过5天。判断标准：与对照培养基比拟，菌落平均数比值在0.5-2 (50%-200%)范围内，且菌落形态 大小一致。3、胰酪大豆陈液体(TSB)无菌性检查：取已灭菌的TSB,于30-35培养不少于3天，培养基应澄清。试验用菌种：金锚、铜绿、枯草接种方法：涂布法：分别接种试验用菌悬液于该培养基中，接种量不大于lOOcfu,摇匀，培养。适用性检查：30-35培养不超过3天。判断标准：金锦、铜绿、枯草接种后，与对照培养基比拟，试验菌生长良好。备注：该培养基同时用于稀糕液的制备和控制菌检查时，需考虑同时满足计数和控制菌检查 培养基适用性检查控制要求。4、沙氏福萄糖琼脂(SDA)无菌性检查：取已灭菌的SDA注皿，于20-25C培养5天,应无菌落生长。试验用菌种：白色念珠菌、黑曲霉接种方法：涂布法:分别接种不大于lOOcfu允试验用菌悬液于该平板外表倾注法:接种大于lefu试验用菌悬液于无菌平皿中，倾注约15ml该培养基,轻轻摇匀。适用性检查：白色念珠菌、黑曲霉于20-25培养不大于5天判断标准：与对照培养基比拟菌落平均数比值在0.5-2(50% 200盼范围且菌落大小、形态 一致。备注:如该培养基用于控制菌白色念珠菌的检查时，同时需要满足捌菌项下培养基适用性检查要求。5、沙氏葡萄糖琼脂+抗生素无菌性检查：取已灭菌的SDA注皿,于20-25培养5天,应无菌落生长。试验用菌种：抑菌性检查：枯草芽饱杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌促生长能力：白色念珠菌、黑曲霉。常用抗生素：1、庆大霉素：广谱。对GrG+菌有较好的抗菌作用。2、氯霉素：广谱。对G-菌作用强；对G+菌作用不及青霉素与四环素。接种方法：抑菌性：接种枯草、金葡、铜绿菌悬液不少于WOcfuo促生长能力：接种白色念珠菌、黑曲霉菌悬液不大于lOOcfu。适用性检查：白色念珠菌、黑曲霉于20-25C培养不大于5天。与对照培养基比拟，菌落平均数比值在0. 5-2范围内。判断标准：枯草芽抱杆菌、金黄色菊萄球菌、铜绿假单胞菌不得生长。