蛹虫草中核苷化合物的化学研究及药理学研hlbr.docx

虫草属真真菌中核核苷类化化合物的的化学研究究及药理理学研究究概况杨淑芳11靳向东东1王丽香香2 王王晶3(1吉林林省蚕业业科学研研究所22永吉县县牧业管管理局 33永吉县县科学技技术馆)虫草属(Corrdyccepss)真菌菌为子囊囊菌纲麦麦角菌科科的一类类药用真真菌。此此属真菌种种类有3350余余种。在在我国作作为药用用的有冬冬虫夏草草(C.sinnenssis)、蛹虫草草(C.millitaariss)、亚香棒棒虫草(C.hhawkksiii)及蝉蝉花菌(C.ssoboolifferaa)等。此此外，四四川凉山山虫草（CC.liianggshaanennsiss Zaang Linn ett Huu）、山山西香棒棒虫草(C.bbarnnesiii)、古尼虫虫草(CC.guunniii)等等也有少少量分布布。1 虫草草属真菌菌中核苷苷类化合合物的化化学研究究概况1.1虫虫草属真真菌中核核苷类化化学成分分关于虫草草属真菌菌中核苷苷类化学学成分的的研究报报道较多多，主要要集中在在冬虫夏夏草、蛹蛹虫草及及其发酵酵菌丝体体。其中中核苷类类化合物物包括虫虫草素、腺腺苷、鸟鸟苷、尿尿苷、腺腺嘌呤、尿尿嘌呤、次次黄嘌呤呤、次黄黄嘌呤核苷苷等，它它们的化化学结构构如下:图1虫草草属真菌菌中核苷苷类化合合物的结结构Cunnningghamm和Frredeerikksenn等于550年代代首次报报道了从从蛹虫草草的培养养液中分分离出核核苷类抗抗菌素虫草草素并发发现其显显著的抗抗癌活性性，引起起了人们们对虫草草属真菌菌中核苷苷类化合合物的广广泛重视视，新的的核苷类类物质不不断被发发现。徐徐文豪等等利用强强酸性离离子交换换树脂、大大孔吸附附树脂和和硅胶柱柱层析从从西藏产产冬虫夏夏草的子子座中分分离得次黄黄嘌呤核核苷、胸胸腺嘧啶啶、尿嘧嘧啶和杂杂有鸟嘌嘌呤的次次黄嘌呤呤;从虫体体中得到到微量次次黄嘌呤呤、鸟嘌呤呤、腺嘌呤呤和腺苷苷。刘静静明等利利用Doowexx- II氯型树脂柱柱从蛹虫虫草菌丝丝中分离离得到腺腺嘌呤、腺腺苷及虫虫草素。刘刘柯等利利用硅胶胶柱色谱谱、制备备液相、制制备薄层层等方法法从人工工培养的的蛹虫草草子实体体的乙醇醇提取物物中分离离得到虫虫草素、腺腺苷、NN"一甲甲基腺苷苷、05一乙酰酰基虫草草素、NN"- 一(乙酰酰胺甲酰)氧乙基基腺苷苷等5个核核苷类化化合物。1.2虫虫草属真真菌中核核苷类化化合物的的含量测测定目前，对对虫草属属真菌中中核苷类化合合物的含含量测定定主要采采用高效效液相法法(HPPLC)法和薄层色色谱法。 20000年版版中国药药典采用用HPLLC法测测定冬虫虫夏草中中腺苷的的含量。目前采用HPLC法对蛹虫草中核苷类化合物含量进行测定的报道主要有：蒋宁等采用正交实验对虫草素和腺苷的提取方法作了考查；周洪英等对蛹虫草九个菌株虫草素含量进行了测定；陈安徽等对古尼拟青霉小孢变种核苷类成分进行了分析。自20世世纪600年代薄薄层色谱谱扫描法法(TLLCS)问世以以来,其其发展更更为迅速速,在化化学及药药学等领领域都得得到了广广泛应用用。TLLCS已已成为定定性定量量分析的的有效手手段。如如刘静明明等将蛹蛹虫草菌菌丝和冬冬虫夏草草样品各各2.00g(440目)置500mL圆圆底烧瓶瓶中,加加20%乙醇溶溶液400mL回回流提取取5h,趁热抽抽滤,220%乙乙醇洗33次,合合并滤液液,浓缩缩至2mmL,拌拌以硅胶胶H1.5g,室温干干燥,干干法装柱柱,900%乙醇醇洗至880mLL,减压压浓缩,然后用用50%乙醇定定容至22.0mmL作为为样品溶溶液。用用日本岛岛津CSS-9110双波波长薄层层扫描仪仪,以氯氯仿乙乙酸己酯酯异丙丙醇水水=82660.5为展展开剂,经反射射法锯齿齿扫描得得到蛹虫虫草菌丝丝和冬虫虫夏草虫虫草菌素素的含量量分别为为0.0007%0.0222%和00.0007%。近来，高高效毛细细管电泳泳法也被被用于冬冬虫夏草草的质量量控制。李李绍平等等用此方方法测定定了天然然和人工工冬虫夏夏草中腺腺苷、尿尿苷和鸟鸟苷的含量量，并考考察其变变化。吕吕鹏等探探讨了不不同提取取方法对对蛹虫草草提取液液质量的的影响。研究表明，超声波处理有利于提高提取液中多种物质的含量，考虑到操作的简便性，在实际应用中（尤其是样品量较大时）可以考虑采用超微粉碎的方法制备蛹虫草提取液。汪宇等比比较了天天然蛹虫虫草及其其培养物物中核苷苷类化合合物的含含量。在在HV-3011高效毛毛细管电电泳仪上上进行定定量分析析,采用用石英毛毛细管柱柱，以pHH9.00的400mmool·LL-1硼硼砂溶液液作为电电极缓冲冲液；分离电电压为116KVV；检测波波长为2254nnm。结结果，天然蛹蛹虫草中中核苷类类化合物物主要集集中在子子座部分分。人工工培养蛹蛹虫草子子座和菌菌丝中虫虫草素的的含量分分别是天天然蛹虫虫草子座座中的55.044倍和110.885倍;液体培培养蛹虫虫草菌丝丝中腺嘌嘌呤、腺腺苷、尿尿苷、鸟鸟苷含量量均高于于固体培培养蛹虫虫草子座座。结论论：天然蛹蛹虫草及及其培养养物中核核苷类化化合物的的种类和和含量具具有较大大的差异异，高效毛毛细管电电泳法可可以用于于蛹虫草草的定量量分析，具有分分离度高高、简便便、准确确,样品品消耗少少等特点点。对比研究究显示：人工培培养的虫虫草菌丝丝及子座座中核苷苷类化合合物的含含量多数数接近、有有的甚至至超过了了天然虫虫草。尤尤其是人人工培养养的蛹虫虫草菌丝丝及子座座中虫草草素的含含量明显显高于天天然虫草草,这就就为把人人工培养养虫草作作为天然然虫草的的代用品品提供了了理论依依据.2 虫草草属真菌菌中核苷苷类化合合物的药药理学研研究概况况2.1虫虫草素的的药理作作用2.1.1抑菌菌作用Cuniinghham等等第一个个报道虫虫草菌素素对455株枯草草杆菌BBaciilluus ssubttiliis(EEhreenbeerg)Cohhn中中的433株有抑抑制作用用。对不不同细菌菌的有效效抑菌浓浓度有一一定差异异,如对对一株枯枯草杆菌菌NCTTC67752的的最低抑抑制浓度度为100g/mL;对鸟结结核杆菌菌(Myycobbactteriium aviiumCChessterr和牛型型结核分分枝杆菌菌的最低低抑制浓浓度则分分别为1100g/mmL和117gg/mLL。19952年年,郑藻藻杰等还还观察到到,虫草草菌素能能抑制链链球菌、鼻疽杆菌、炭疽杆菌、猪出血性败血症杆菌及葡萄球菌等病原菌的生长。此外,虫草菌素对石膏样小芽孢癣菌、羊毛状小芽孢癣菌及须疮癣菌等皮肤致病性真菌亦有抑制作用。2.1.2抗肿肿瘤作用用现已报道道,虫草草菌素对对鼠艾氏氏腹水癌癌、人鼻鼻咽癌KKB细胞胞、人表表皮样疣疣和人宫宫颈癌HHelaa细胞等等皆具有有明显的的拮抗抑抑制作用用。对KKB细胞胞的最低低致毒浓浓度为110225gg/mLL。有文文献报道道,虫草草菌素对对Lewwis肺肺癌也有有抑制作作用,且且其副作作用小。2.1.3抑制制病毒虫草菌素素可抑制制一种脑脑炎病毒毒(李廷廷宝等,19776),对人体体免疫缺缺陷型病病毒HIIVI型型的侵染染及其反反转录酶酶的活性性亦有抑抑制作用用。2.1.4杀蚊蚊虫作用用Belllomccik等等研究报报道,虫虫草菌素素对尖音音库蚊(Cullex pippienns)、埃埃及伊蚊蚊(Aeedess aeegyppti)和另一一种伊蚊蚊(A.atrropaalpuus)的的幼虫有有明显致致死作用用。对白白纹伊蚊蚊(Aeedess allboppicttus)进行组组织培养养的结果果表明,虫草菌菌素的作作用机理理是引起起核变性性和细胞胞质崩解解。2.1.5其他他作用虫草菌素素能抑制制蛋白质质激酶活活性,抗抗核苷磷磷酸化酶酶对糖基基的裂解解。对体体液免疫疫有调节节作用,能增加加脾脏重重量、加加速肝脏脏核酸和和蛋白质质更新速速度,具具有抗缺缺氧、增增加心肌肌营养血血流量及及降低血血清胆固固醇和酯蛋白白的作用用,能明明显增加加犬冠脉脉血流量量,降低低冠脉、脑脑及外围围血管阻阻力,且对核核酸的甲甲基化有有抑制作作用。Guarrinoo等认为为,虫草草菌素作作为腺苷苷的结构构类似物物作用于于腺苷参参与的各各种反应应,尤其其对嘌呤呤和嘧啶啶核苷酸酸生物合合成系统统中的第第一步反反应PRRPP(5-磷磷酸核糖糖-1-焦磷酸酸)的合合成抑制制作用最最强,这这主要是是因为55-三三磷酸虫虫草菌素素强烈地地抑制了了PRPPP合成成的关键键酶磷酸酸核糖焦焦磷酸激激酶的活活性。2.2腺腺苷的药药理作用用现代药理理研究表表明，腺腺苷作为为虫草的的主要活活性成分分，具有有广泛的的生理活活性，主主要包括括调节冠冠脉血流流量和镇镇静。可可舒张血血管平滑滑肌，抑抑制心肌肌收缩力力，抑制制血小板板凝聚，增增加冠脉脉和脑血血流量，降降低脑耗耗氧量，改改善冠脉脉和脑循循环；减慢心心率，防防止心律律失常。冯鸣国等等对人工工菌丝体体对血管管的扩张张作用进进行了研研究，证证实菌丝丝的乙醇醇提取物物能明显显增加犬犬的冠脉脉血流量量，降低低冠脉、脑脑及外围围血管阻阻力的作作用。虫虫草醇提提取物能能明显对对抗乌头头碱和氯氯化钡引引起的麻麻醉大鼠鼠的心率率失常，能能提高豚豚鼠心脏脏哇巴因因中毒引引起的耐耐受量，能能使麻醉醉大鼠和和豚鼠心心率减慢慢，并能能降低离离体豚鼠鼠心肌收收缩力，但但对右心心房的自自动节律律性和左左心房的的功能不不应期均均无明显显影响。 中国医医学科学学院药物物研究所所对从天天然青海海产冬虫虫夏草得得到的CC5-44菌的人人工发酵酵菌丝体体提取物物与天然然青海产产冬虫夏夏草做了了大量的的药理研研究工作作，结果果显示腺腺苷对神经经系统有有明显的的抑制性性影响，注注射剂量量在255mg/kg时时能很快快使动物物活动减减少，处处于朦胧胧状态，但但一般不不引起睡睡眠，对对外界刺刺激仍有有反应，同同时降低低体温。可可抑制毛毛果芸香香碱引起起的流涎涎。虫草草制剂能能延长戊戊巴比妥妥睡眠时时间，增增加阈下下量戊巴巴比妥的的入睡率率，可增增强氯丙丙嗪等镇镇静剂的的效果，拮拮抗苯丙丙胺、咖咖啡因等等的兴奋奋作用，可可明显减减轻烟碱碱引起的的强直性性痉挛和和降低小小鼠死亡亡率，有有明显的的抗缺氧氧、促脑脑组织摄摄取866Rb作用用，有较较弱的降降胆固醇醇、促心心肌摄取取86Rb作作用。2.3其其它从虫草属属真菌中中提取得得到的其其它核苷苷类化合合物也具具有一定定的药理理活性:腺嘌呤呤(又称称维生素素B4)，可可刺激白白细胞增增生，使使其均衡衡，主要要用于防防治各种种原因引引起的白白细胞减减少症，特特别是由由于肿瘤瘤化疗、放放疗引起起的白细细胞减少少症；次次黄嘌呤呤核苷可可进入细细胞内，参参与糖代代谢和蛋蛋白质合合成,提提高酶的的活性,促进受受损肝脏脏的恢复复,刺激激体内产产生抗体体,可用用于治疗疗各种原原因引起起的白细细胞减少少、血小小板减少少、心力力衰竭、心心绞痛、肝肝炎等。参考文献献略7