药物的杂质检查(2)doc资料.ppt

药物的杂质检查(2)药物的杂质药物的杂质是指药物中存在于药物中的无治疗作用、或影响是指药物中存在于药物中的无治疗作用、或影响药物的稳定性和疗效、甚至对人体健康有害的物质。药物的稳定性和疗效、甚至对人体健康有害的物质。即：即：n1.有毒副作用的物质n2.本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质n3.本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影响药物的科学管理的物质。n药物中存在有害的杂质：如砷盐、铅盐等；影响药物稳定性的，如水分能促进青霉素钠盐、钾盐水解，降低疗效；有的对人体无害、对药物的稳定性也没有影响，如一般杂质检查中的氯化物。检查药物中杂质不仅是保障用药安全、有效，而且也可用来考核生产工艺和企业管理是否正常、借以全面保证和提高药物质量。药物的纯度药物的纯度即药物的纯净程度，是反应药品质量的一项重要指标。即药物的纯净程度，是反应药品质量的一项重要指标。药物的纯度主要由药品质量标准中的药物的纯度主要由药品质量标准中的“检查检查”项下的杂质检查来项下的杂质检查来控制，内容包括可能存在的杂质名称、相应的检查项目、检查方控制，内容包括可能存在的杂质名称、相应的检查项目、检查方法和允许限量。法和允许限量。药品纯是相对的，不纯是绝对的。在药品的纯度设定时有两个依据：药品纯是相对的，不纯是绝对的。在药品的纯度设定时有两个依据：A药品制造水平；药品制造水平；B杂质的性质（是否有毒性）。杂质的性质（是否有毒性）。优质药品优质药品的纯度高必须具备：的纯度高必须具备：A治疗效果好；治疗效果好；B安全性高；安全性高；C副作用、毒性低；副作用、毒性低；D药品制造成本不增加。药品制造成本不增加。假药假药：变质不能药用的；所含成分与标准不符（药典不符）；以彼药：变质不能药用的；所含成分与标准不符（药典不符）；以彼药品代替此药品的；以非药品代替药品的。品代替此药品的；以非药品代替药品的。劣药劣药：药品中所含成分的数量与标准不符；超过有效期，低限投料，：药品中所含成分的数量与标准不符；超过有效期，低限投料，一般合格为一般合格为95%105%。药品标准项下除了杂质检查外，还有有效性、安全性和制剂的检查。药品标准项下除了杂质检查外，还有有效性、安全性和制剂的检查。有效性的检查有效性的检查：指与药物疗效有关，但在鉴别、纯度检查和：指与药物疗效有关，但在鉴别、纯度检查和 含量测含量测定中不能控制的项目。如氢氧化铝的制酸力，诺氟沙星的含氟检查定中不能控制的项目。如氢氧化铝的制酸力，诺氟沙星的含氟检查等。等。安全性检查安全性检查：有异常毒性、热原、降压物质、无菌检查等。在药物：有异常毒性、热原、降压物质、无菌检查等。在药物制剂质量标准中，还需要检查是否达到了制剂学方面的有关要求，制剂质量标准中，还需要检查是否达到了制剂学方面的有关要求，如重量差异，崩解时限，融变时限，含量均匀度等。如重量差异，崩解时限，融变时限，含量均匀度等。二、杂质的来源与种类(一一)杂质的来源杂质的来源 1.生产过程引入的杂质；生产过程引入的杂质；A、合成药生产过程中未反应的原料、反应中间体、副产物，在精制过程中、合成药生产过程中未反应的原料、反应中间体、副产物，在精制过程中未能完全除去，就会成为产品中的杂质；未能完全除去，就会成为产品中的杂质；B、残留的有机溶剂、试剂以及器具引入的无机杂质；、残留的有机溶剂、试剂以及器具引入的无机杂质；C、有的药物是从植物中提取的，由于植物中常含有与药物结构、性质相近、有的药物是从植物中提取的，由于植物中常含有与药物结构、性质相近的物质，在提取过程中，分离不完全，这些物质可能会因引入药物中；的物质，在提取过程中，分离不完全，这些物质可能会因引入药物中；D、药物在制成制剂的过程中，也可能产生新的杂质，如盐酸普鲁卡因。、药物在制成制剂的过程中，也可能产生新的杂质，如盐酸普鲁卡因。2.贮藏过程引入的杂质：受外界条件的影响，可能发生水解、分解、贮藏过程引入的杂质：受外界条件的影响，可能发生水解、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解、发霉等变化，使药物中产生新异构化、晶型转变、聚合、潮解、发霉等变化，使药物中产生新的杂质。的杂质。A、氧化反应：具有酚羟基、烯醇、亚硝酸基以及醚、醛、共轭双键、氧化反应：具有酚羟基、烯醇、亚硝酸基以及醚、醛、共轭双键等结构药物在空气、日光作用下易氧化分解而产生杂质，药效损等结构药物在空气、日光作用下易氧化分解而产生杂质，药效损失，而且可能产生颜色或沉淀，有些药物即使被氧化少量，但色失，而且可能产生颜色或沉淀，有些药物即使被氧化少量，但色泽变深或产生不良气味，严重影响药物的质量，甚至变为废品。泽变深或产生不良气味，严重影响药物的质量，甚至变为废品。B、水解反应是药物最容易发生的变质反应；、水解反应是药物最容易发生的变质反应；C、一些药物存在异构体或多晶型，它们多数的生物、一些药物存在异构体或多晶型，它们多数的生物活性有很大差异，如氯霉素；活性有很大差异，如氯霉素；D、微生物引起的：注射液中存在热原质，滴眼液中、微生物引起的：注射液中存在热原质，滴眼液中存在绿脓杆菌；另外糖类、蛋白质类、脂类、有存在绿脓杆菌；另外糖类、蛋白质类、脂类、有机聚合物易被微生物作用，以及一些化学合成的机聚合物易被微生物作用，以及一些化学合成的有机药物能降解。有机药物能降解。易发生水解反应的结构：易发生水解反应的结构：酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等易发生氧化反应的结构：易发生氧化反应的结构：醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键等醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键等醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键等醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键等(二二)杂质的种类杂质的种类n药物中的杂质按来源分为n1.一般杂质：广泛存在于多种药物的生产或贮藏一般杂质：广泛存在于多种药物的生产或贮藏过程中，引入的杂质如氯化物、硫酸盐、铁盐、过程中，引入的杂质如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、碱、水分、易炭化物、炽灼重金属、砷盐、酸、碱、水分、易炭化物、炽灼残渣、干燥失重、有机溶剂残留量等。一般杂质残渣、干燥失重、有机溶剂残留量等。一般杂质其检查方法收载在中国药典的附录中。其检查方法收载在中国药典的附录中。2.特殊杂质：指某一个或某一类药物的生产或贮藏特殊杂质：指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引入的杂质，如阿司匹林中的游离水杨酸、过程中引入的杂质，如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、甾体激素中的其他甾体。特异烟肼中的游离肼、甾体激素中的其他甾体。特殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药品的质殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药品的质量标准中。量标准中。（三）药物的纯度与化学试剂的纯度（三）药物的纯度与化学试剂的纯度 药物的纯度考虑杂质的生理作用，药品只有两个等级：药物的纯度考虑杂质的生理作用，药品只有两个等级：合格或不合格。合格或不合格。化学试剂有很多等级，如基准试剂、优级纯（化学试剂有很多等级，如基准试剂、优级纯（GR）、）、分析纯（分析纯（AR）、化学纯（）、化学纯（CP）、超纯试剂、超净高纯试剂、）、超纯试剂、超净高纯试剂、色谱纯、光谱纯；按其用途可分为通用试剂、基准试剂、色谱纯、光谱纯；按其用途可分为通用试剂、基准试剂、分析试剂、仪器分析试剂（色谱纯、光谱纯）、有机合成分析试剂、仪器分析试剂（色谱纯、光谱纯）、有机合成试剂、临床诊断试剂和特种试剂等。试剂、临床诊断试剂和特种试剂等。例.临床所用药物的纯度与化学品及试剂纯度的主要区别A.所含杂质的生理效应不同B.所含有效成分的量不同 C.所含杂质的绝对量不同D.化学性质及化学反应速度不同E.所含有效成分的生理效应不同三、杂质的限量检查n杂质的限量（L）：在不影响药物的疗效和不发生毒性的前提下，允许药物中存在有一定量的杂质。这一允许量被称为杂质限量。n根据定义，药物中杂质的限量可按照下式来计算：当供试品(S)中所含杂质的限量（L）是通过与一定量的杂质标准溶液进行比较来确定时,杂质的最大允许量可由杂质标准溶液的浓度(C)与体积(V)的乘积获得,上式可以表达为:100%100%杂质量杂质量 杂质限量杂质限量 杂质量杂质量药品合格药品合格药品不合格药品不合格(一）药物的杂质检查法药物的杂质检查法 1.对照法对照法 限量检查法限量检查法（Limit Test）特点：不需知道杂质的准确含量特点：不需知道杂质的准确含量2.2.灵敏度法灵敏度法 系指在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，系指在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，不得有正反应出现。不得有正反应出现。特点：不需对照品特点：不需对照品 3.3.比较法比较法 含量测定法：测定杂质的绝对含量，如测定吸收度、含量测定法：测定杂质的绝对含量，如测定吸收度、pHpH值等。值等。特点：准确测定杂质的量，不需对照品。特点：准确测定杂质的量，不需对照品。4、仪器：纳氏比色管；、仪器：纳氏比色管；5、反应的灵敏度：反应条件；不应该发生的反应；、反应的灵敏度：反应条件；不应该发生的反应；6、注意事项：、注意事项：A供试品与标准液的单位统一；供试品与标准液的单位统一；B供试品是否稀释，稀释倍数是多少？供试品是否稀释，稀释倍数是多少？C限量表示方法：限量表示方法：%；ppm D求限量的目的。求限量的目的。示例一：对乙酰氨基酚中氯化物检查：取对乙酰氨基酚2.0g，加水100ml时，加热溶解后冷却，滤过，取滤液25ml，依法检查氯化物（ChP附录），所发生的浑浊与标准氯化钠5.0ml（每1ml相当于10g的Cl-）制成的对照液比较，不得更浓。问氯化物的限量是多少？示例二：磷酸可待因中吗啡检查：取本品0.10g，加盐酸溶液（91000）使溶解成5ml，加亚硝酸钠试液2ml，放置15min，加氨试液3ml，所显颜色与吗啡取无水吗啡2.0mg，加盐酸溶液（91000）使溶解成100ml 5.0ml用同一方法制成的对照液比较，不得更深。问限量为多少？n检查某药物中的砷盐，取标准砷溶液检查某药物中的砷盐，取标准砷溶液2ml（每（每1ml相当相当于于1g的的As）制备标准砷斑，砷盐限量为）制备标准砷斑，砷盐限量为0.0001，应取供试品的量为应取供试品的量为n检查维生素检查维生素C中的重金属时，若取样量为中的重金属时，若取样量为1.0g，要求，要求含重金属不得过百万分之十，问应吸取标准铅溶液含重金属不得过百万分之十，问应吸取标准铅溶液（每（每1ml0.01mg的的Pb）多少）多少ml？注：注：1、药典中药品对于其规定的各种杂质检查项目，系指该药品在、药典中药品对于其规定的各种杂质检查项目，系指该药品在按既定工艺进行和按既定工艺进行和 正常贮藏中可能含有或产生并需要控制的正常贮藏中可能含有或产生并需要控制的杂质，而杂质，而ChP中未规定检查的杂质，主要是因为在正常生产和中未规定检查的杂质，主要是因为在正常生产和贮藏过程中不可能引入，或虽有引入但含量甚微，对人体无不贮藏过程中不可能引入，或虽有引入但含量甚微，对人体无不良影响也不影响药物质量，故不予检查。良影响也不影响药物质量，故不予检查。2、凡、凡ChP未规定检查的杂质，一般不需要检查，但遇特殊情况，未规定检查的杂质，一般不需要检查，但遇特殊情况，如发现外观性状不正常；药厂在生产上改变了原料或方法工艺如发现外观性状不正常；药厂在生产上改变了原料或方法工艺时；工艺出现故障，投料出错等都根据实际情况检查可能引入时；工艺出现故障，投料出错等都根据实际情况检查可能引入的杂质。的杂质。n一、般杂质检查规则一、般杂质检查规则n药品检验操作标准规定：药品检验操作标准规定：1.遵循平行操作原则遵循平行操作原则n（1）仪器的配对性）仪器的配对性 如纳氏比色管应配对，刻度如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过线高低相差不超过2mm，砷盐检查时导气管长度，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致及孔的大小要一致n（2）对照品与供试品的同步操作）对照品与供试品的同步操作第二节 一般杂质的检查方法 2.正确的取样及供试品的称量范围正确的取样及供试品的称量范围 1g不超过不超过2%，1g不超过不超过1%3.正确的比色、比浊方法正确的比色、比浊方法4.检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份管和对照管各复查二份 一、氯化物检查法一、氯化物检查法原理：中国药典对氯化物的检查是利用氯化物在硝酸酸性溶液中原理：中国药典对氯化物的检查是利用氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银白色浑浊液，与一定量标准氯与硝酸银试液作用，生成氯化银白色浑浊液，与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银浑浊液比较，浊度不得更化钠溶液在相同条件下生成的氯化银浑浊液比较，浊度不得更大。大。样品管：样品管：Ag+Cl-AgCl（白色浑浊）（白色浑浊）标准管：标准管：Ag+Cl-AgCl（白色浑浊）（白色浑浊）样品管浊度标准管浊度，样品不合格样品管浊度标准管浊度，样品不合格 样品管浊度样品管浊度 标准管浊度，样品合格标准管浊度，样品合格方法：方法：取两支取两支50ml纳氏比色管纳氏比色管：样品管样品管用水溶解，使呈中性用水溶解，使呈中性 稀硝酸稀硝酸10ml 水水40ml 硝酸银硝酸银1.0ml 水水 50ml标准管标准管 10ug/mlCl-稀硝酸稀硝酸10ml 水水40ml 硝酸银硝酸银1.0ml 水水 50ml摇匀，暗处放置摇匀，暗处放置5min在黑色背景下，从上向下观察，进行比较。在黑色背景下，从上向下观察，进行比较。比色：白色背景，由上向下（透射光的强弱）比色：白色背景，由上向下（透射光的强弱）比浊：黑色背景，由上向下（散射光的比浊：黑色背景，由上向下（散射光的 强弱）强弱）例：例：ChP中：无水葡萄糖中氯化物检查：中：无水葡萄糖中氯化物检查：S=0.60g，V=6.0ml，C=10ug/ml，求限量，求限量L L=（VC/S）100%=0.010%讨论：讨论：1AgCl易感光，变成灰紫色，所以放置时避免直射日光，比较时易感光，变成灰紫色，所以放置时避免直射日光，比较时背景为黑色。背景为黑色。2温度温度3040时比浊度最大，实际检查时不控制温度，室温，时比浊度最大，实际检查时不控制温度，室温，平行操作。平行操作。3最适检出浓度为：最适检出浓度为：0.050.08mg/50ml，标准标准NaCl为为10ug/ml。4干扰物排除干扰物排除：供试品不澄清，用含硝酸的蒸馏水洗涤滤纸后再过：供试品不澄清，用含硝酸的蒸馏水洗涤滤纸后再过滤。滤。5硝酸环境的目的：硝酸环境的目的：加速加速AgCl浑浊的生成，产生较好的浊度；浑浊的生成，产生较好的浊度；加硝酸阻止加硝酸阻止CO32-、PO43-与与Ag+反应，产生干扰。反应，产生干扰。6若供试品有颜色，排除干扰方法有：若供试品有颜色，排除干扰方法有：外消色法（加入外消色法（加入一定浓度稀焦糖溶液调色）；一定浓度稀焦糖溶液调色）；内消色法：方法如下：内消色法：方法如下：供试品两等份：一等份加入供试品两等份：一等份加入AgNO3后反复过滤除后反复过滤除Cl-后加后加水水40ml，加入标准，加入标准NaCl液，和硝酸银试液后，补水至液，和硝酸银试液后，补水至50ml标准管。标准管。一等份加水一等份加水40ml后，硝酸银试液后，补水至后，硝酸银试液后，补水至50ml供试管。供试管。如：枸橼酸铁铵中氯化物的检查。如：枸橼酸铁铵中氯化物的检查。（2）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。醇适量，使其还原褪色后再依法检查。7 加入试剂顺序应按规定进行，速度易慢，做成加入试剂顺序应按规定进行，速度易慢，做成40ml后加硝酸银的原因：如样品中氯离子浓度大时，会产后加硝酸银的原因：如样品中氯离子浓度大时，会产生大量生大量AgCl，而不是以浑浊形式存在于溶液中，到，而不是以浑浊形式存在于溶液中，到40ml时，生成浑浊。时，生成浑浊。8 浓硝酸对人体有害，多先稀释后再用，（浓硝酸对人体有害，多先稀释后再用，（15）。）。9 有有Br-、I-存在时，与存在时，与Ag+反应，预处理反应，预处理 加入酸和加入酸和H2O2，加热煮沸，除去，加热煮沸，除去Br-、I-。10 如为有机氯杂质结构，在碱性溶液中加热水解，形如为有机氯杂质结构，在碱性溶液中加热水解，形成成NaCl，再依法检查。，再依法检查。n（1）加水振摇，过滤，取滤液进行检查。）加水振摇，过滤，取滤液进行检查。n（2）加热，放冷，过滤，取滤液进行检查。）加热，放冷，过滤，取滤液进行检查。n（3）溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇）溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后进行检查。或丙酮溶解后进行检查。11.不溶于水的有机药物不溶于水的有机药物 二、硫酸盐检查法n原理原理:药物中存在的微量硫酸盐与氯化钡在盐酸酸性介质中生成药物中存在的微量硫酸盐与氯化钡在盐酸酸性介质中生成硫酸白色浑浊硫酸白色浑浊,与一定两标准硫酸钾溶液在相同条件下生成的浑浊与一定两标准硫酸钾溶液在相同条件下生成的浑浊比较比较,浊度不得更大浊度不得更大.n方法方法:供试品供试品-水溶解成约水溶解成约40ml(溶液碱性可加盐酸使成中溶液碱性可加盐酸使成中性性,溶液不澄清溶液不澄清,滤过滤过)-置置50ml纳氏比色管中纳氏比色管中-加盐酸加盐酸2ml,摇匀摇匀-得供试品溶液得供试品溶液.标准硫酸钾溶液标准硫酸钾溶液-置置50ml纳氏比色管中纳氏比色管中-加水使成约加水使成约40ml-加稀盐酸加稀盐酸2ml,摇匀摇匀-得对照品溶液得对照品溶液.于供试品与对照品溶液中于供试品与对照品溶液中,分别加如分别加如25%氯化钡溶液氯化钡溶液5ml,用水用水稀释至稀释至50ml,充分摇匀充分摇匀,放置放置10min,置黑色背景下置黑色背景下,从比色管上方从比色管上方向下观察向下观察,比较比较.讨论：讨论：1、HCl的作用：防止的作用：防止BaCO3、Ba3（PO4）2沉淀的生成，沉淀的生成，所用所用HCl浓度小于浓度小于10M，过强酸则灵敏度降低，过强酸则灵敏度降低，pH=1时为宜。时为宜。2、供试品有色：处理方法同、供试品有色：处理方法同Cl-检查。内消色法和外消检查。内消色法和外消色法，先用色法，先用HCl呈酸性的水洗净滤纸中硫酸根。呈酸性的水洗净滤纸中硫酸根。三、铁盐检查法(一一)硫氰酸盐法硫氰酸盐法n原理原理:铁盐在盐酸酸性溶液中月硫氰酸铵生成红色可溶性硫铁盐在盐酸酸性溶液中月硫氰酸铵生成红色可溶性硫氰酸铁配位离子氰酸铁配位离子,再与一定量标准铁溶液用同法处理后所呈的颜再与一定量标准铁溶液用同法处理后所呈的颜色进行比较色进行比较,颜色不得更深颜色不得更深.n方法方法:供试品供试品-加水溶解使成加水溶解使成25ml-置于置于50ml纳氏比色纳氏比色管中管中-加稀盐酸加稀盐酸4ml与过硫酸铵与过硫酸铵50mg-加水稀释至加水稀释至35ml-加加30%硫氰酸铵溶液硫氰酸铵溶液3ml-加水成加水成50ml-如显色如显色,立即立即与标准铁溶液一定量按相同方法制成的对照品比较与标准铁溶液一定量按相同方法制成的对照品比较.n注意事项注意事项:实验前供试品处理某些药物实验前供试品处理某些药物(如葡萄糖、糊精和硫如葡萄糖、糊精和硫酸镁）在检查过程中需加硝酸处理，则不再加过量硫酸铵，但酸镁）在检查过程中需加硝酸处理，则不再加过量硫酸铵，但必须加热煮沸除去氧化氮必须加热煮沸除去氧化氮.讨论：讨论：1、加稀、加稀HCl的目的：防止铁盐水解，避免弱酸盐的干扰，如醋的目的：防止铁盐水解，避免弱酸盐的干扰，如醋酸根，磷酸根，砷酸盐等；酸根，磷酸根，砷酸盐等；2、加入过硫酸铵的目的：氧化供试品中亚铁离子成为铁离子。、加入过硫酸铵的目的：氧化供试品中亚铁离子成为铁离子。同时防止光线作用使铁氰酸根分解或还原；某些药物如葡萄同时防止光线作用使铁氰酸根分解或还原；某些药物如葡萄糖、糊精、糖、糊精、MgSO4、NaHCO3中铁检查时加入浓硝酸加热煮中铁检查时加入浓硝酸加热煮沸，氧化亚铁离子。沸，氧化亚铁离子。3、最适检出浓度：、最适检出浓度：10-50 g Fe/50ml；4、干扰物的排除：样品管与标准管颜色不一致，颜色很浅时、干扰物的排除：样品管与标准管颜色不一致，颜色很浅时用用20ml正丁醇提取后观察正丁醇层颜色的深浅；具有环状正丁醇提取后观察正丁醇层颜色的深浅；具有环状结构的有机药物，如盐酸普鲁卡因中结构的有机药物，如盐酸普鲁卡因中Fe检查时，需要灼烧破检查时，需要灼烧破坏后加坏后加HCl溶解检查。溶解检查。(二二)巯基醋酸法巯基醋酸法n原理原理:巯基醋酸还原三价铁离子为二价铁离子巯基醋酸还原三价铁离子为二价铁离子,在在氨碱性溶液中进一与二价铁离子作用生成红色配位离氨碱性溶液中进一与二价铁离子作用生成红色配位离子子,与一定量标准溶液经同法处理后产生的颜色进行与一定量标准溶液经同法处理后产生的颜色进行比较比较,以限制铁的量以限制铁的量.n注意事项注意事项:在加巯基醋酸试液前在加巯基醋酸试液前,先加入先加入20%枸橼枸橼酸溶液酸溶液2ml,使枸橼酸与铁离子形成配位离子使枸橼酸与铁离子形成配位离子,以免在以免在氨碱性溶液中产生氢氧化铁沉淀氨碱性溶液中产生氢氧化铁沉淀.（二）巯基醋酸法（二）巯基醋酸法 BP（1998）对照法对照法本法灵敏度较高，但试剂较贵本法灵敏度较高，但试剂较贵 四、重金属检查法重金属重金属系指在实验条件下能与系指在实验条件下能与S2-作用显色的金属杂质，作用显色的金属杂质，如如Ag、Hg、Pb、Cu、Cr、Sn、Sb、Bi等，等，Pb在生在生产中遇到机会多，以及体内易蓄积原因，故检查时以产中遇到机会多，以及体内易蓄积原因，故检查时以Pb为代表。为代表。显色剂显色剂：H2S、硫代乙酰胺、硫代乙酰胺、Na2S。H2S的缺点：有毒、恶臭、环境污染、易分解。的缺点：有毒、恶臭、环境污染、易分解。重金属检查在重金属检查在ChP中有四法。中有四法。（一）第一法 硫代乙酰胺法1.原理 对照法 适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物。适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物。适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物。2.测定条件测定条件（1）用硝酸铅配制标准铅贮备液（加硝酸防止）用硝酸铅配制标准铅贮备液（加硝酸防止Pb2+水解）水解），标准铅溶液临用前稀释而成，标准硝酸铅溶液，标准铅溶液临用前稀释而成，标准硝酸铅溶液10 g Pb2+/ml，适宜比色范围为，适宜比色范围为27ml溶液中含溶液中含1020 g的的Pb2+。（2）本法用）本法用2ml pH3.5的醋酸盐缓冲液控制溶液的醋酸盐缓冲液控制溶液pH值值为为33.5，偏强酸呈色变浅；太强酸不显色。，偏强酸呈色变浅；太强酸不显色。（3）显色剂：从）显色剂：从ChP（1990）开始改用硫代乙酰胺做）开始改用硫代乙酰胺做显色剂，无恶臭、浓度易控制、与显色剂，无恶臭、浓度易控制、与H2S同效；同效；3.干扰及排除干扰及排除（1）供试品如有色，需经处理后方可检查。）供试品如有色，需经处理后方可检查。A.外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液。色溶液。B.内消色法：加入其他无干扰的有色物质内消色法：加入其他无干扰的有色物质 C.改用第四法，微孔滤膜过滤法改用第四法，微孔滤膜过滤法（2）若若供供试试品品中中有有微微量量Fe3+存存在在，会会氧氧化化硫硫化化氢氢生生成成单单质质硫硫，干干扰扰比比色色，加加入入抗抗坏坏血血酸酸或或盐盐酸酸羟羟胺胺（0.51.0g）还还原原Fe3+为为Fe2+，可消除干扰。，可消除干扰。（3）若供试品为铁盐，）若供试品为铁盐，Fe3+在盐酸中生成在盐酸中生成HFeCl ，用乙，用乙醚提取除去，剩余微量铁在氨碱性溶液中，加醚提取除去，剩余微量铁在氨碱性溶液中，加KCN掩蔽，然掩蔽，然后用第三法检查。后用第三法检查。（4）若若药药物物本本身身能能生生成成不不溶溶性性硫硫化化物物时时，可可加加入入掩掩蔽蔽剂剂消消除除干干扰扰。如如ZnSO4中中重重金金属属的的检检查查，要要在碱性下加在碱性下加KCN掩蔽掩蔽Zn2+后，依第三法检查。后，依第三法检查。（二）第二法（二）第二法 炽灼残渣法炽灼残渣法 适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸、乙醇及碱的有机药物。500600炽灼后的残渣，经处理后，依一法检查。炽灼后的残渣，经处理后，依一法检查。1.原理原理 对照法对照法2.操作方法操作方法 含含钠钠及及氟氟的的有有机机药药物物应应用用铂铂坩坩埚埚、石石英英坩坩埚埚或或硬硬质质玻玻璃璃蒸蒸发发皿皿（因因可可腐腐蚀蚀瓷瓷坩坩埚埚，带带入大量重金属）入大量重金属）（三）第三法 硫化钠法 适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类。1.原理 对照法 2.测定条件（1）NaOH碱性条件下（2）显色剂：硫化钠（四）第四法 微孔滤膜法：适用于重金属限量低的药物。适用于重金属限量低的药物。适用于含25g重金属杂质及有色供试液的检查。依一法检查，结果微孔滤膜过滤后比较色斑。因重金属限量低时，用纳氏比色管难以观察比较，改用微孔滤膜法。遇HgBr2试纸生成黄色棕色的砷斑，与2ml标准砷溶液在相同条件下生成的砷斑比较。1.原理 对照法 五、砷盐检查法古蔡法检砷装置古蔡法检砷装置A 为100ml标准磨口锥形瓶，B 为中空的标准磨口塞，上连导气管C(外径 8.0mm，内径6.0mm)，全长约180mm。D 为具孔的有机玻璃旋塞，其上部为圆形平面，中央有一圆孔，孔径与导气管C的内径一致，其下部孔径与导气管C的外径相适应。将导气管C的顶端导入旋塞下部孔内，并使管壁与旋塞的圆孔恰相吻合，粘合固定，E 为中央具有圆孔(孔径6.0mm)的有机玻璃旋塞盖，与D紧密吻合。测试时，于导气管测试时，于导气管C中装入醋酸铅棉花中装入醋酸铅棉花60mg(装管高度约装管高度约6080mm)，再于旋，再于旋塞塞D的顶端平面上放一片溴化汞试纸的顶端平面上放一片溴化汞试纸(试纸大小以能覆盖孔径而不露出平面试纸大小以能覆盖孔径而不露出平面外为宜外为宜)，盖上旋塞，盖上旋塞E并旋紧，即得。并旋紧，即得。标准砷斑的制备：标准砷斑的制备：精密量取标准砷溶液2ml，置A瓶中，加盐酸5ml与水21ml，再加碘化钾试液5ml与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10分钟后，加锌粒2g，立即照上法装妥的导气管C密塞于A瓶上，并将A瓶置2540水浴中，反应45分钟后，取出溴化汞试纸，即得。供试砷斑的制备：供试砷斑的制备：取本品5.0g，置检砷瓶中，加水23ml溶解后，加盐酸5ml，照标准砷斑的制备，自“加碘化钾试液5ml”起，依法操作，将生成的砷斑与标准砷斑比较，不得更深。反应中试剂及样品：反应中试剂及样品：药物、药物、KI、酸性、酸性SnCl2、HCl、Zn；醋酸铅棉花、溴化汞试纸醋酸铅棉花、溴化汞试纸试剂作用：试剂作用：醋酸铅棉花：醋酸铅棉花：排除排除H2S的干扰；的干扰；SnCl2：使：使As5+As3+；使；使I2 I-；生成锌锡齐；生成锌锡齐；KI：使：使As5+As3+；络合；络合Zn2+溴化汞试纸遇溴化汞试纸遇AsH3显黄、棕色砷斑。显黄、棕色砷斑。反应灵敏度：反应灵敏度：1 g/ml就可检出。就可检出。试剂的作用：试剂的作用：合格合格 KI KI、SnClSnCl2 2的作用：交替还原作用；首先将的作用：交替还原作用；首先将AsO43-还还 原成原成AsO33-，生成的碘再被还原成碘离子。，生成的碘再被还原成碘离子。AsO43-+2I-+2H+AsO33-+I2 +H2O AsO43-+Sn2+2H+AsO33-+Sn4+H2O I2 +Sn2+2I-+Sn4+4I-+Zn2+ZnI42-Zn Zn粒与氯化亚锡作用，在其面上形成粒与氯化亚锡作用，在其面上形成Zn-SnZn-Sn齐，起齐，起 去极化作用。去极化作用。Pb(AC)Pb(AC)2 2棉的作用是消除供试品可能含有的少量的硫棉的作用是消除供试品可能含有的少量的硫 化物。化物。S S2-2-+2H+2H+H H2 2S S H H2 2S+HgBrS+HgBr2 2 2HBr +HgS 2HBr +HgS（汞斑）（汞斑）H H2 2S +Pb(AC)S +Pb(AC)2 2 PbS +2HAC PbS +2HAC 干扰物的排除：干扰物的排除：1、硫化物的排除：加入浓硝酸；、硫化物的排除：加入浓硝酸；2、药物中如有、药物中如有Fe3+，先加入，先加入SnCl2，生成，生成Fe2+后再加入其他试剂；后再加入其他试剂；3、共价键结合有机药物：先碱破坏或先酸破坏后再检查；、共价键结合有机药物：先碱破坏或先酸破坏后再检查；4、Sb（锑干扰）：改用白田道夫法：如葡萄糖锑钠中砷盐检查；（锑干扰）：改用白田道夫法：如葡萄糖锑钠中砷盐检查；古蔡氏法中注意事项：检砷管的口径一样大小；拿检砷瓶的下端；加古蔡氏法中注意事项：检砷管的口径一样大小；拿检砷瓶的下端；加Zn粒前，要把管中棉花和粒前，要把管中棉花和HgBr2试纸准备好，棉花松紧适宜。试纸准备好，棉花松紧适宜。（1）供试品为）供试品为S2-,SO32-,S2O32-等等:因在酸中生成因在酸中生成H2S,SO2,与与HgBr作用生成作用生成HgS或或Hg，干扰砷斑检查。用硝酸氧化成硫酸盐可消除。，干扰砷斑检查。用硝酸氧化成硫酸盐可消除。（2）供试品为）供试品为Fe3+能消耗能消耗KI，SnCl2 应测定条件，先可加足量应测定条件，先可加足量KI。(二二)二乙基二硫代氨基甲酸银法二乙基二硫代氨基甲酸银法(Ag(DDC)法法)n原理原理:金属锌与酸作用金属锌与酸作用,产生新生态的氢产生新生态的氢,与微量砷盐与微量砷盐反应反应,生成具有挥发性的砷化氢生成具有挥发性的砷化氢;遇二乙基二硫代氨基甲遇二乙基二硫代氨基甲酸银酸银,使其还原产生红色的胶态银使其还原产生红色的胶态银,用目视比色法或在用目视比色法或在510nm处波长出测定吸收度处波长出测定吸收度,再与一定量标准砷溶液用再与一定量标准砷溶液用同法处理后得到的有色溶液进行比较同法处理后得到的有色溶液进行比较.n优点：灵敏度高，优点：灵敏度高，0.5 g/ml就可检出；重现性好；能就可检出；重现性好；能消除锑干扰；消除锑干扰；n缺点：吡啶恶臭。缺点：吡啶恶臭。六、溶液颜色检查法n(一一)目视比色法目视比色法 方法方法:规定量药品规定量药品,加水溶解加水溶解,置于纳氏比色管中置于纳氏比色管中,加水稀释加水稀释至至10ml.另取规定色调和色号的比色液另取规定色调和色号的比色液10ml,置于纳氏比色管置于纳氏比色管中中,两管同置白色背景上两管同置白色背景上,自上向下透视或平视观察自上向下透视或平视观察,供试品管供试品管呈现颜色与对照管比较呈现颜色与对照管比较,不得更深不得更深.标准比色液配制：标准比色液配制：K2Cr2O7（0.8mg/ml），），CuSO4（62.40mg/ml），），CoCl2（59.50mg/ml）。配制成黄绿、）。配制成黄绿、黄、橙黄、橙红、棕红五种贮备液，各可稀释成黄、橙黄、橙红、棕红五种贮备液，各可稀释成10个色号。个色号。标准比色液的配制标准比色液的配制(二二)分光光度法分光光度法(三三)色差计法色差计法 本法是通过色差计直接测定溶液的本法是通过色差计直接测定溶液的透视三刺激值透视三刺激值，对其，对其颜色进行定量表述和分析的方法。颜色进行定量表述和分析的方法。七、易炭化物检查法n易炭化物检查法是检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化易炭化物检查法是检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化的微量有机杂质。的微量有机杂质。n方法：方法：取内径一致的比色管两支：甲管中加各项下取内径一致的比色管两支：甲管中加各项下规定对照液规定对照液5ml；乙管中加硫酸；乙管中加硫酸5ml后，分次缓缓加后，分次缓缓加入规定量的供试品，振摇使溶解。除另有规定外，静入规定量的供试品，振摇使溶解。除另有规定外，静置置15min后，将甲乙两管同置白色背景前，平视观后，将甲乙两管同置白色背景前，平视观察，乙管中所显颜色不得较甲管更深察，乙管中所显颜色不得较甲管更深.对照液对照液：（1）“溶液颜色检查溶液颜色检查”项下的标准比色液；项下的标准比色液；（2）由由比比色色用用氯氯化化钴钴液液，比比色色用用重重铬铬酸酸钾钾液液，比比色用硫酸铜液按规定方法配成的对照液；色用硫酸铜液按规定方法配成的对照液；比色：同置白色背景前，平视观察比较。比色：同置白色背景前，平视观察比较。八、溶液澄清度检查法n澄清度可反映药物溶液中的微量不溶性杂质的存在情况。澄清度可反映药物溶液中的微量不溶性杂质的存在情况。n原理原理:10%乌洛托品在偏酸性条件下水解产生甲醛，甲醛与乌洛托品在偏酸性条件下水解产生甲醛，甲醛与1.00%硫酸肼缩合生成不溶于水的甲醛腙白色混浊。硫酸肼缩合生成不溶于水的甲醛腙白色混浊。n方法方法:在室温条件下，将用水稀释至一定浓度的供试品溶液与等在室温条件下，将用水稀释至一定浓度的供试品溶液与等量的浊度标准液分别置于配对的比浊用玻璃管中，在浊度标准量的浊度标准液分别置于配对的比浊用玻璃管中，在浊度标准液制备后，在暗室内垂直同置于伞棚灯下，从水平方向观察、液制备后，在暗室内垂直同置于伞棚灯下，从水平方向观察、比较，检查溶液的澄清度或其混浊程度。比较，检查溶液的澄清度或其混浊程度。n注意事项注意事项:多数药物的澄清度检查以水为溶剂，但也有用酸、碱多数药物的澄清度检查以水为溶剂，但也有用酸、碱或有机溶剂作溶剂的。供制备注射用的原料药要检查澄清度和或有机溶剂作溶剂的。供制备注射用的原料药要检查澄清度和溶液颜色。溶液颜色。九、溶液澄清度检查法九、溶液澄清度检查法 检查药物中的微量不溶性杂质，用作注射剂的原料药一般应作此项检查。1.检查方法 对照法 2.浊度标准液的配制浊度标准液的配制 中国药典规定用浊度标准液作为澄清度检查的标准。中国药典规定用浊度标准液作为澄清度检查的标准。反应原理：乌洛托品在偏酸性条件下水解产生甲醛，甲反应原理：乌洛托品在偏酸性条件下水解产生甲醛，甲醛与肼缩合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色浑浊。醛与肼缩合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色浑浊。1.00硫酸肼溶液与硫酸肼溶液与10乌洛托品溶液等量混合配制乌洛托品溶液等量混合配制浊度标准贮备液浊度标准贮备液 浊度标准原液浊度标准原液 浊度标准液浊度标准液（5个级号）个级号）3.判断判断 药典中规定的药典中规定的“澄清澄清”，系指供试品溶液的系指供试品溶液的澄清度相同于所用溶剂，或未超过澄清度相同于所用溶剂，或未超过0.5号浊度标准液。号浊度标准液。4.溶剂：水、酸、碱、有机溶剂溶剂：水、酸、碱、有机溶剂 有机酸的碱金属盐类药物强调用有机酸的碱金属盐类药物强调用“新沸过的冷新沸过的冷水水”。检检查查不不含含金金属属的的有有机机药药物物或或挥挥发发性性无无机机药药物物中中混混入入的的无机杂质无机杂质(金属氧化物或无机盐类金属氧化物或无机盐类)。1.原理原理 样样品品炭炭化化后后+H2SO4湿湿润润700800炽炽灼灼至至恒恒重重炽炽灼残渣（硫酸灰分）灼残渣（硫酸灰分）限量一般为限量一般为0.1%0.2%十十、炽灼残渣检查法、炽灼残渣检查法2.操作方法 3.注意事项注意事项 1）供试品的取样量应根据炽灼残渣限量和称量误差决定。）供试品的取样量应根据炽灼残渣限量和称量误差决定。2）含氟的药物对瓷坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚。）含氟的药物对瓷坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚。3）若残渣需留作重金属检查，则）若残渣需留作重金属检查，则500600炽灼至恒重。炽灼至恒重。4）加加硫硫酸酸处处理理是是使使杂杂质质转转化化为为稳稳定定的的硫硫酸酸盐盐，并并帮帮助助有有机机物物炭化。炭化。注意事项注意事项:供试品的取用量应根据炽灼残渣限供试品的取用量应根据炽灼残渣限量和称重量和称重n误差决定。一般应使炽灼残渣量为误差决定。一般应使炽灼残渣量为1mg2mg,残渣限量为残渣限量为0.1%-0.2%。限量为。限量为 0.1%、0.05%、1%以上者，取样量分别以上者，取样量